三基訓(xùn)練檢驗(yàn)分冊(cè)

1、《醫(yī)學(xué)臨床“三基”訓(xùn)練》 檢驗(yàn)分冊(cè)(第四版）基礎(chǔ)理論、知識(shí)問(wèn)答（281-315）,§5.2基礎(chǔ)理論和基本知識(shí)問(wèn)答 281.簡(jiǎn)述乳酸脫氫酶測(cè)定原理及注意事項(xiàng)。乳酸脫氫酶(I.DH)在輔酶I的遞氫作用下,使乳酸脫氫而生成丙酮酸。 L一乳酸+NAD+#j丙酮酸+NADH+H+ NAD十還原成NADH,引起340nm處吸光度的改變,其吸光度的增加速率與標(biāo)本中LDt{濃度成正比。此法適應(yīng)全自動(dòng)生化儀連續(xù)監(jiān)

2、測(cè)。,若無(wú)條件連續(xù)監(jiān)測(cè),可在反應(yīng)后加入2,4一二硝基苯肼,與丙酮酸反應(yīng)生成丙酮酸二硝基苯腙,在堿性環(huán)境中顯棕紅色。根據(jù)顏色深淺計(jì)算酶活力大小。 注意事項(xiàng):①草酸、乙二胺四乙酸對(duì)本酶有抑制作用,故不宜使用。②紅細(xì)胞中乳酸脫氫酶含量較血清中約高100倍,故應(yīng)避免溶血,并及時(shí)分離血清。,282.乳酸脫氫酶的順向反應(yīng)和逆向反應(yīng)各有什么優(yōu)點(diǎn)? 以乳酸為底物的反應(yīng)稱為順向反應(yīng),以丙酮酸為底物的反應(yīng)稱為逆向反應(yīng)。 (1)順向反

3、應(yīng)的優(yōu)點(diǎn):①此法所需的氧化型輔酶I(NAD+)較逆向反應(yīng)需用的還原性輔酶I(NlADH)穩(wěn)定,易得純品,含抑制I+DH的雜質(zhì)少,價(jià)格也較低。②乳酸鈉(或乳酸鋰).底物比丙酮酸底物穩(wěn)定。③過(guò)量乳酸對(duì)I.DH的抑制低于過(guò)量丙酮酸對(duì)LDH的抑制。,(2)逆向反應(yīng)的優(yōu)點(diǎn):①NADI-{用量少,只是正向反應(yīng)所用NAD+的3％。②酶反應(yīng)速率也比乳酸鹽法快,單位時(shí)間內(nèi)吸光度的變化較大,能使用比較少的樣品在較短的時(shí)間內(nèi)進(jìn)行測(cè)定。③酶活力隨時(shí)間的線性關(guān)系

4、較長(zhǎng)。④用NADI-{或丙酮酸鹽啟動(dòng)反應(yīng),其反應(yīng)速度相同,而由乳酸鹽到丙酮酸鹽的反應(yīng)中,I。DH活力取決于使用的啟動(dòng)劑。,283.用lyr一谷氨酰一a一萘胺作基質(zhì)測(cè)定|Ir—GT是根據(jù)什么原理?常用的顯色劑有哪幾種? y—GT‘作用于底物L(fēng)一7氨酰一Q一萘胺,此底物既作為7一谷氨酰的供體,又作為受體,生成L一7一谷氨酰一L—y一谷氨酰一Q一萘胺和游離的Q一萘胺,后者與重氮化的對(duì)氨基苯磺酸反應(yīng),生成紅色的偶氮化合物,色澤的深淺與酶

5、活力成比例,與Q一萘胺標(biāo)準(zhǔn)液所顯的顏色進(jìn)行比較,可以求得樣品中-),一GT的活力。,酶促反應(yīng)生成的Q一萘胺,除用重氮化對(duì)氨基苯磺酸顯色外,還可用固藍(lán)B顯色,或?qū)一萘胺重氮化后用N一萘基二氨基乙烯顯色。,284.試述血清淀粉酶碘一淀粉比色法測(cè)定原理及注意事項(xiàng)。 血清(或血漿)中Q一淀粉酶催化淀粉分子中Q一1,4葡萄糖苷鍵水解,產(chǎn)生葡萄糖、麥芽糖及含有Q一1,6糖苷鍵支鏈的糊精。在有足夠量基質(zhì)的條件下,反應(yīng)后加入的碘液與未被水解的

6、淀粉結(jié)合成藍(lán)色復(fù)合物,其藍(lán)色的深淺與未經(jīng)酶促反應(yīng)的空白管比較其吸光度,從而推算出淀粉酶的活力單位。,注意事項(xiàng):①草酸鹽、枸櫞酸鹽、EDTA.一Na2及氟化鈉對(duì)淀粉酶活性有抑制,肝素?zé)o抑制作用。②酶活性在400U以下時(shí)與底物的水解量成線性,如測(cè)定管吸光度小于空白管吸光度一半時(shí),應(yīng)將血清量加大稀釋倍數(shù)或減少血清加人量,測(cè)定結(jié)果乘稀釋倍數(shù)。③本法亦適用于其他體液淀粉酶的測(cè)定。④唾液含高濃度淀粉酶,須防止混人。⑤淀粉溶液若出現(xiàn)混濁或絮狀物,不能

7、再使用。,285.試述血清淀粉酶酶法的測(cè)定原理。 葡萄脊6一磷酸+NADP-]一j墮塑奠生墮墮墮塑6一磷酸葡萄糖酸一NAD-.PH+H+ 在340nm處測(cè)定吸光度值的變化即可推算出AMS的濃度。,286.何謂同工酶? 同工酶指在同種屬生物、同一生物體、同一組織或器官,甚至同一細(xì)胞內(nèi)具有相同催化活性,并以多種分子形式存在的酶。 ..,287.反映肝細(xì)胞損傷的酶類有哪些7 . 反映肝細(xì)胞

8、損傷的酶包括:轉(zhuǎn)氨酶(包括AI。T和AST)、異檸檬酸脫氫酶(ICD)、谷氨酸脫氫酶(G【.DH)、醇脫氫酶(ADH)、山梨醇脫氫酶(SDH)、鳥(niǎo)氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(()CT)、鳥(niǎo)嘌呤脫氨酶(GDA)、精氨酸代琥珀酸裂合酶(ASAI.,)、·血清膽堿酯酶(CH E),卵磷脂一膽固醇轉(zhuǎn)酰基酶(I.CAT)等。,288.反映膽道梗阻的酶類有哪些? 反映膽道梗阻的酶類有堿性磷酸酶(AI。P)、氨肽酶、5’一核苷酸酶(5’NT

9、)、.),一谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(.),一GT)等。,289.用于診斷心肌梗死的主要血清酶有幾種? 主要有3種:AST、I.DH和CK以及它們的同工酶。 290.診斷胰腺疾病的主要血清酶有哪些? 主要有Q一淀粉酶和脂肪酶。Q一淀粉酶是診斷急性胰腺炎最常用的指標(biāo),一般在發(fā)病后2～12小時(shí)血清Q一淀粉酶活力開(kāi)始上升,12～72小時(shí)達(dá)高峰,4天左右恢復(fù)正常。血清Q一淀粉酶升高常伴有尿淀粉酶增高,而且尿淀粉酶陽(yáng)性率和升高程度都可

10、高于血清淀粉酶,維持時(shí)間也較長(zhǎng)。急性胰腺炎時(shí),血清脂肪酶活力升高,其增高程度可大于淀粉酶,可高于正常上限1 O倍以上,且持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng),特異性較高。,291.診斷骨骼肌疾病時(shí)常測(cè)定的血清酶有哪些? 有CK、AI。D(醛縮酶)、AST、和I,DH。 292.常用的腫瘤標(biāo)志酶有哪些? 常用的腫瘤標(biāo)志酶有堿性磷酸酶(ALP)及其同工酶、酸性磷酸酶(ACP)及同工酶、5’一核苷酸酶(5’一NT)、|),一谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(7一

11、GT)及同工酶、醛縮酶(AI。D)、磷酸己糖異構(gòu)酶(PHI)、乳酸脫氫酶(I.,DH)及同工酶、芳香烴羥化酶(AHH)、Q一1,4葡萄糖苷酶及組胺酶等。,293.試述尿中17一酮類固醇測(cè)定原理及臨床意義。 尿中1 7一酮類固醇(17一KS)指尿中出現(xiàn)的所有C一1 7為酮基的類固醇類物質(zhì)。尿中排出的內(nèi)源性1 7一KS包括雄酮、異雄酮、脫氫異雄酮及其代謝產(chǎn)物等。17一KS是腎上腺皮質(zhì)激素及雄性激素的代謝產(chǎn)物,大部分為水溶性的葡萄糖醛

12、酸酯或硫酸酯,必須經(jīng)過(guò)酸的作用才能使其水解成游離的類固醇,再用有機(jī)溶劑提取,經(jīng)過(guò)洗滌除去酸類與酚類物質(zhì)。,17一酮類固醇分子結(jié)構(gòu)中的酮一亞甲基(一CO—CH2一)能與堿性溶液中的間二硝基苯作用,生成紅色化合物。 尿17一酮類固醇增高見(jiàn)于腎上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn)、肢端肥大癥和睪丸間質(zhì)細(xì)胞腫瘤等,減低見(jiàn)于腎上腺功能減退、性功能減退以及某些慢性病如結(jié)核、肝病和糖尿病等。,294.試述尿中17一羥皮質(zhì)類固醇測(cè)定原理及臨床意義o 1 7

13、一羥皮質(zhì)類固醇(1 7-OHCS)為腎上腺皮質(zhì)所分泌的激素,主要為皮質(zhì)素及氫皮質(zhì)素。測(cè)定尿中17一OI-tCS是指對(duì)尿中C-17上有羥基的所有類固醇類物質(zhì)的測(cè)定。待測(cè)物在酸性條件下,用正丁醇抽提后再用稀堿處理,除去色素雜質(zhì),然后將正丁醇蒸干,用無(wú)水乙醇溶解抽提物,再與鹽酸苯肼的硫酸溶液作用而產(chǎn)生黃色,稱為Porter-Silber顏色反應(yīng)。用同樣呈色的氫化可的松作標(biāo)準(zhǔn)液,以分光光度汁比色,而求得其含量。,17一()HCS增高見(jiàn)于腎上腺皮

14、質(zhì)功能亢進(jìn),如庫(kù)欣綜合征、腎上腺皮質(zhì)瘤及雙側(cè)增生、肥胖癥和甲狀腺功能亢進(jìn)等,尤以腎上腺皮質(zhì)腫瘤增生最為顯著。減少見(jiàn)于腎上腺皮質(zhì)功能不全,如艾迪生病和西門(mén)癥。,295.用滴定法測(cè)定血漿(清)二氧化碳結(jié)合力(CQCP)應(yīng)注意什么? (1)應(yīng)立即分離血漿(清),并避免與空氣接觸。 (2)0.01mol／L氫氧化鈉不宜用鈉玻璃瓶?jī)?chǔ)存,且應(yīng)密封,以避免從空氣中吸收C02。因0.01tool／I.,鹽酸較穩(wěn)定,故應(yīng)每天作校正滴定,用

15、酚紅作指示劑,以出現(xiàn)紅色且10秒鐘不褪色為準(zhǔn)進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)測(cè)。,(3)所用器材及生理鹽水均應(yīng)為中性。 (4)每次均應(yīng)以生理鹽水加酚紅指示劑作為對(duì)照,觀察顏色變化。 296.血漿(清)二氧化碳結(jié)合力(∞lCP)與總二氧化碳(Tool2)有什么區(qū)別? T002是指血漿中以各種形式存在的C02的總含量,包括HC~雋的COz(95％)與溶解狀態(tài)的CO2等。C02 CP是指血漿中以HO蹶形式存在的COz含量,即100mI,血漿

16、中有多少毫升C02來(lái)自HC0。TC02參考值:動(dòng)脈血為23～2 7mmol／L,靜脈血為24～29mmol／L。COz CP靜脈血為23～27mmol／L。,297.滴定法測(cè)定∞生CP的臨床意義如何? COzCP在反映代謝性酸堿平衡失調(diào)時(shí),能較及時(shí)地反映體內(nèi)堿儲(chǔ)量的增減變化。對(duì)呼吸性酸堿平衡失調(diào)時(shí),不能及時(shí)反映血中C02的急劇變化。伴隨通氣障礙而發(fā)生的酸堿平衡失調(diào)的判斷,意義有限。目前血?dú)夥治鰞x已廣泛使用,滴定法C02CP測(cè)定將

17、被取代。,298.血?dú)夥治鰧?duì)血液樣品有什么要求?為什么? (1)因靜脈血來(lái)自身體的不同部位,而動(dòng)脈血可反映全身情況,故血?dú)夥治鲆詣?dòng)脈血為宜。 (2)采得的血液樣品必須嚴(yán)格隔絕空氣。因?yàn)榭諝庵械难醴謮焊哂趧?dòng)脈血,二氧化碳分壓低于動(dòng)脈血,一旦接觸空氣可使血液中P02及PC()2都有改變而無(wú)測(cè)定價(jià)值。,3)血液樣品采集后必須立即檢測(cè)。如因故不能及時(shí)檢測(cè),樣品必須置冰水浴中或冰箱內(nèi),但最長(zhǎng)不能超過(guò)1個(gè)小時(shí),因?yàn)檠?xì)胞在體外仍有糖

18、酵解作用,不斷消耗02產(chǎn)生C02和乳酸,使P0z和pH值下降而PC02上升。在冰箱中僅使其反應(yīng)延緩而已。 (4)血液必須抗凝,以防止血?dú)夥治鰞x中毛細(xì)管道被阻塞。抗凝劑應(yīng)選用肝素(濃度為1000U／mL或10mg／mL,溶于生理鹽水)。將肝素0.2m1.,抽人針筒內(nèi)反復(fù)抽動(dòng),使針管全部濕潤(rùn),將多余肝素全部排出,注射器內(nèi)殘留肝素即可抗凝。,299.血?dú)夥治鰞x直接測(cè)得的參數(shù)有哪幾個(gè)?還可運(yùn)算出哪些參數(shù)?直接測(cè)得的參數(shù)有3個(gè):pH值、

19、二氧化碳分壓(P(弛)、氧分壓(P(_)2)。 其他參數(shù):根據(jù)儀器性能不同,一般可測(cè)出氧飽和度(Sat02)、二氧化碳總量(TOD2)、實(shí)際碳酸氫根(AB)、標(biāo)準(zhǔn)碳酸氫根(SB)、緩沖堿(BB)、剩余堿(BE)、肺泡一動(dòng)脈氧分壓差(A—aI]02)等。,300.試述離子選擇電極【lSE)法測(cè)K、Na、CI的原理o . 離手選擇電極分析法是以測(cè)量電池電動(dòng)勢(shì)變化為基礎(chǔ)的定量分析法。將離子選擇電極和一個(gè)參比電極連接即構(gòu)成

20、一個(gè)測(cè)量電池。將測(cè)量電池置于待測(cè)的電解質(zhì)溶液中,由于離子活度不同而產(chǎn)生不同的電動(dòng)勢(shì)變化,這種變化與溶液中的離子濃度成正比,通過(guò)能斯特(Nernst)方程即可求出離子濃度。,301.簡(jiǎn)述血清總鈣和離子鈣測(cè)定原理o (1)血清總鈣測(cè)定原理:是利用血清中的鈣離子在堿性溶液中可與染料結(jié)合生成有色物質(zhì)來(lái)測(cè)定。常用染料有甲基麝香草酚藍(lán)(MTB)和鄰甲酚酞絡(luò)合酮(OCPC)。同時(shí)在試劑中加人8一羥基喹啉,可以消除鎂離子的干擾。而偶氮砷Ⅲ法則是

21、利用在中等酸度(pH值約為6)時(shí)偶氮砷Ⅲ與鈣離子的親和性遠(yuǎn)大于鎂離子的特性來(lái)測(cè)定。,(2)離子鈣測(cè)定原理:采用離子選擇電極法測(cè)定。鈣離子選擇電極包括一層含有內(nèi)置參考電極的鈣離子選擇膜和氯化鈣內(nèi)部參考溶液。該內(nèi)部參考溶液常常含有飽和氯化銀和生理濃度的氯化鈉和氯化鉀。外置參考電極與樣品通過(guò)液體一液體或氯化鉀／甲酸鈉鹽橋連接組成化學(xué)電池。根據(jù)能斯特(Nernst)方程,電池兩側(cè)的電位差與離子鈣濃度的對(duì)數(shù)成正比。,302.簡(jiǎn)述體內(nèi)鈣離子的生理功

22、能。 體內(nèi)鈣離子的生理功能包括:①血漿鈣離子可降低毛細(xì)血管和細(xì)胞膜的通透性和降低神經(jīng)肌肉的興奮性;②作為血漿凝血因子Ⅵ參與凝血過(guò)程并有對(duì)多種凝血因子的激活;③在骨骼肌中的鈣離子可引起肌肉收縮;④起重要調(diào)節(jié)作用包括作用于質(zhì)膜影響其通透性及膜的轉(zhuǎn)運(yùn);⑤在細(xì)胞內(nèi)作為第二信使起著重要的代謝調(diào)節(jié)作用。,303.簡(jiǎn)述速率法測(cè)尿素(1嘞)的測(cè)定原理。 尿素在脲酶的作用下,水解生成氨和二氧化碳。氨在a一酮戊二酸和還原型輔酶I存在下,經(jīng)谷

23、氨酸脫羥酶(GI.DI-{)催化生成谷氨酸。同時(shí),還原型輔酶I被氧化成氧化型輔酶I。還原型輔酶I在340nm波長(zhǎng)處有吸收峰,其吸光度下降的速率與待測(cè)樣品中尿素含量成正比。,304.簡(jiǎn)述苦昧酸和酶法測(cè)肌酐的原理。 血清中的肌酐與堿性苦味酸反應(yīng),生成黃紅色的苦味酸肌酐復(fù)合物,在510nm波長(zhǎng)處進(jìn)行比色測(cè)定。吸光度的升高與肌酐含量成正比。 酶法測(cè)肌酐是利用特異性的肌酐水解酶將肌酐水解,再檢測(cè)其水解產(chǎn)物(NH3、肌酸等),以求得

24、肌酐含量。酶法測(cè)肌酐的特異性要比苦味酸法高,結(jié)果也準(zhǔn)確,缺點(diǎn)是酶法試劑價(jià)格昂貴。,305.血糖的利用途徑有哪些? 血糖的利用途徑有:①有氧氧化或無(wú)氧酵解功能。②在肝和肌肉細(xì)胞內(nèi)合成糖原。③轉(zhuǎn)化為甘油脂肪酸合成脂肪。④轉(zhuǎn)化為氨基酸合成蛋白質(zhì)。⑤轉(zhuǎn)化為其他糖類或衍生物。,306.胰高血糖素的作用有哪些? 胰高血糖素的作用有:①促進(jìn)葡萄糖通過(guò)肌肉和細(xì)胞的轉(zhuǎn)運(yùn)率加快,使組織攝取葡萄糖增多。②促進(jìn)葡萄糖磷酸化和氧化分解。③抑制糖異生關(guān)鍵酶

25、而使異生減少。④促進(jìn)葡萄糖合成糖原、蛋白質(zhì)和脂肪。,307.糖尿病性糖耐量降低有哪些表現(xiàn)? 糖尿病性糖耐量降低的表現(xiàn)有:①空腹葡萄糖濃度>8.Ommol／L。②葡萄糖峰值>10.Ommol／L并出現(xiàn)糖尿。③延遲(2小時(shí)后)才回復(fù)到空腹水平。,308.有哪些原因可導(dǎo)致低蛋白血癥? 下列原因可導(dǎo)致低蛋白血癥:①蛋白質(zhì)合成減少。②營(yíng)養(yǎng)不良或吸收不良。③遺傳缺陷。④蛋白質(zhì)異常丟失。⑤組織損傷或炎癥。⑥清蛋白分布異常。

26、,309.載脂蛋白的作用有哪些? 載脂蛋白的作用有:①參與組織或細(xì)胞間脂類的運(yùn)輸和分配。②維持脂蛋白顆粒的結(jié)構(gòu)。③能與細(xì)胞膜上特異的受體結(jié)合影響脂類的攝取。,310.引起繼發(fā)性高脂血癥和高脂蛋白血癥的原因有哪些? 引起繼發(fā)性高脂血癥和高脂蛋白血癥的原因有:肥胖、嗜酒、腎病、肝病、糖尿病、藥物及內(nèi)分泌功能紊亂。,311.尿酸生成過(guò)多的因素有哪些? 尿酸生成過(guò)多的因素有:①來(lái)源過(guò)多。食物嘌呤來(lái)自有核蛋白,經(jīng)小腸一系列

27、酶的作用,降解為嘌呤堿而吸收。②嘌呤代謝紊亂。③罕見(jiàn)的遺傳性疾病,多由于單一酶缺陷所致。,312.寫(xiě)出均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差、標(biāo)準(zhǔn)誤及變異系數(shù)的符號(hào)、公式及意義o (1)均數(shù):符號(hào)為又。均數(shù)代表一組觀察值的集中趨勢(shì)。 (2)標(biāo)準(zhǔn)差:符號(hào)為s。標(biāo)準(zhǔn)差代表一組觀察值的離散程度。 (3)標(biāo)準(zhǔn)誤:符號(hào)為&或SE。標(biāo)準(zhǔn)誤是樣本均數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)差,即樣本均數(shù)與總體均數(shù)的接近程度。,(4)變異系數(shù):又稱離散系數(shù),符號(hào)為CV。變異

28、系數(shù)是相對(duì)數(shù),沒(méi)有單位,因此更便于資料之間的分析比較。CV常用于比較均數(shù)相差懸殊的幾組資料的變異度,或比較度量衡單位不同的幾組資料的變異度。 CV一號(hào)×100％,313.如何計(jì)算抗體的平均滴度?采用幾何均數(shù)法:314.如何進(jìn)行兩均數(shù)的顯著性檢驗(yàn)? 進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)可用￡檢驗(yàn)法,不同類型的資料可用不同的方法。常用樣本均數(shù)與總體(理論)均數(shù)的比較、配對(duì)資料的比較、兩個(gè)樣本均數(shù)的比較及兩樣本含量較大時(shí)的比較。兩個(gè)樣