糞大腸菌群

1、第六章 微生物生態(tài)學原理,,第一節(jié) 微生物生態(tài)學的基本概念,生態(tài)學和生態(tài)系統(tǒng)的概念。P159微生物生態(tài)學的概念。 P160 是研究微生物和環(huán)境之間相互作用的科學。 微生物生態(tài)學的重要性。,第一節(jié) 微生物生態(tài)學的基本概念,3、種群關系和群落演替 P161 種群的概念,第一節(jié) 微生物生態(tài)學的基本概念,3、種群關系和群落演替 P161

2、 食品腐敗變質(zhì) 或 食品發(fā)酵過程種存在種群演替現(xiàn)象。,第一節(jié) 微生物生態(tài)學的基本概念,4、 環(huán)境梯度和耐受限度 P161 食品組成和結(jié)構(gòu)往往具有不均一性。,第一節(jié) 微生物生態(tài)學的基本概念,4、 環(huán)境梯度和耐受限度 P161,第二節(jié) 食品中形成的微生物生態(tài)系,食品作為特殊的微生物生態(tài)系的特點1、食品生境的不均一性。2、表面環(huán)境和生物膜。3、營養(yǎng)物的供給。

3、 食品中通常有豐富的營養(yǎng)，可以使微生物生長很迅速。,第二節(jié) 食品中形成的微生物生態(tài)系,食品中微生物污染來源：內(nèi)源性污染外源性污染 微生物進入食品的途徑。從土壤生境進入食品 從水生境進入食品 從大氣生境進入食品從人體微生態(tài)系進入食品其他,人體中的正常菌群,人體中的正常菌群,P165,人體中的微生物,皮膚表面的微生物菌群 總數(shù)1012個 在特定條件下一些體表微

4、生物會帶來疾病。 如痤瘡丙酸桿菌引起痤瘡。它在厭氧環(huán)境中發(fā)酵皮脂生成丙酸，從而刺激皮脂腺發(fā)炎。,9.4 人體中的微生物,口腔中的微生物菌群 齲齒的主要原因：變形鏈球菌。 利用葡萄糖等合成果聚糖，使其菌體附著在牙齒表面。 呼吸道中的微生物菌群,呼吸道中的微生物菌群,人體抵御微生物侵入機體組織的一般方式,巨噬細胞吞噬細菌菌落（掃描電鏡圖）,9.4 人體中的微生物,胃腸道中的微生物菌群 胃液的

5、pH很低，大約為pH2?？蓺⑺朗澄镏械慕^大部分微生物。 胃病（胃潰瘍）的主要原因：幽門螺旋桿菌,9.4 人體中的微生物,胃腸道中的微生物菌群 大腸中有數(shù)量龐大的微生物菌群。人體腸道系統(tǒng)寄生著大約30屬500多種細菌。 為專性厭氧和少數(shù)兼性厭氧的微生物； 大多有較強的耐膽鹽的能力大腸中的微生物菌群往往對人體健康有利（益生菌）。 合成維生素等 拮抗病原菌口服抗生素，可

6、以打亂大腸中微生物菌群平衡?？煽诜嫔苿浹a。,第二節(jié) 食品中形成的微生物生態(tài)系,食品中微生物污染來源：內(nèi)源性污染外源性污染從土壤生境進入食品 從水生境進入食品 從大氣生境進入食品從人體微生態(tài)系進入食品其他 設備、包裝材料、輔料等,第二節(jié) 食品中形成的微生物生態(tài)系,二、 食品中微生物的消長情況。 加工前 加工中 加工后,第二節(jié) 食品中形成的微生物生態(tài)系,三、種群

7、關系和群落演替 P166 表6－1 偏利 互生 拮抗或偏害 食品腐敗變質(zhì) 或 食品發(fā)酵過程種存在種群演替現(xiàn)象。,第二節(jié) 食品中形成的微生物生態(tài)系,三、種群關系和群落演替 P166 表6－1 偏利 互生 拮抗或偏害 食品腐敗變質(zhì) 或 食品發(fā)酵過程種存在種群演替現(xiàn)象。,第二節(jié) 食品中形成的微生物生態(tài)系,三、種群關系和群落演替 P1

8、67 表6－1 偏利 互生 拮抗或偏害,第二節(jié) 食品中形成的微生物生態(tài)系,三、種群關系和群落演替 P166 表6－1 偏利 互生 拮抗或偏害,第二節(jié) 食品中形成的微生物生態(tài)系,三、種群關系和群落演替 P168食品腐敗變質(zhì) 或 食品發(fā)酵過程種存在種群演替現(xiàn)象。,第三節(jié) 食品腐敗菌群及腐敗類型,食品腐敗變質(zhì)（food sp

9、oilage），是指食品受到各種內(nèi)外因素的影響，造成其原有化學性質(zhì)或物理性質(zhì)發(fā)生變化，降低或失去其營養(yǎng)價值和商品價值的過程。 如魚肉的腐臭、油脂的酸敗、水果蔬菜的腐爛和糧食的霉變等。,第三節(jié) 食品腐敗菌群及腐敗類型,一、罐藏食品的腐敗 1、平聽腐敗 P169 平酸腐敗 酸 硫化物腐敗 黑色硫化物 2、脹罐腐

10、敗,第三節(jié) 食品腐敗菌群及腐敗類型,二、果蔬及其制品的腐敗變質(zhì) 1、新鮮果蔬的腐敗變質(zhì) P170 微生物來源 基本過程 植物表面防護層的破壞 2、果汁的腐敗變質(zhì),第三節(jié) 食品腐敗菌群及腐敗類型,二、果蔬及其制品的腐敗變質(zhì) 1、新鮮果蔬的腐敗變質(zhì) 2、果汁的腐敗變質(zhì) P170 微生物來源 酵母菌、霉菌、乳酸菌 主要現(xiàn)象

11、 渾濁； 產(chǎn)酒精； 有機酸的變化； 粘稠、出現(xiàn)菌膜等,第三節(jié) 食品腐敗菌群及腐敗類型,三、乳及乳制品的腐敗變質(zhì)乳及乳制品的特點：營養(yǎng)豐富，微生物繁殖迅速。1、乳中微生物的來源及主要類群   動物乳房內(nèi)的微生物 乳房中的正常菌群，主要是小球菌屬和鏈球菌屬。動物體內(nèi)的致病微生物可通過乳房進入乳汁而引起人類的感染。常見的有：結(jié)核

12、分枝桿菌、布氏桿菌、炭疽桿菌、葡萄球菌、溶血性鏈球菌、沙門氏菌等。 環(huán)境中的微生物 牛體表面、牛舍的空氣、擠奶用具、容器，擠奶工人 等攜帶的微生物。,三、  乳及乳制品的腐敗變質(zhì) P171 2、鮮乳的變質(zhì)過程  通常新擠出的乳，迅速冷卻到0℃可保持48小時，5℃可保持36小時，10℃可保持24小時，25℃可保持6小時，30℃僅可保

13、持2小時。在這段時間內(nèi)，乳內(nèi)細菌是受到抑制的。 當乳的自身殺菌作用消失后，乳靜置于室溫下，可觀察到乳所特有的菌群交替現(xiàn)象。,第三節(jié) 食品腐敗菌群及腐敗類型,12.5  微生物引起食品腐敗的類型,三、   乳及乳制品的腐敗變質(zhì)2、鮮乳的變質(zhì)過程 P171   ① 抑制期（混合菌群期） ② 乳鏈球菌期 ③&#

14、160;乳桿菌期  ④ 真菌期 ⑤ 腐敗期（胨化期）,12.5  微生物引起食品腐敗的類型,三、   乳及乳制品的腐敗變質(zhì)2、鮮乳的變質(zhì)過程 P172,12.5  微生物引起食品腐敗的類型,2、鮮乳的變質(zhì)過程 P171 ① 抑制期（混合菌群期） 在新鮮的乳液中含有溶菌酶、乳素等抗菌物質(zhì)，對乳中存在的微

15、生物具有殺滅或抑制作用。 ② 乳鏈球菌期 乳鏈球菌、乳酸桿菌、大腸桿菌和一些蛋白質(zhì)分解菌等迅速繁殖，其中乳酸鏈球菌生長繁殖分解乳糖產(chǎn)生乳酸而居優(yōu)勢。由于酸度的增高，抑制了腐敗菌、產(chǎn)堿菌的生長。以后隨著產(chǎn)酸增多乳鏈球菌本身的生長也受到抑制，數(shù)量開始減少。 ③ 乳桿菌期 當乳鏈球菌在乳液中繁殖，乳液的pH值下降至4.5以下時，由于乳酸桿菌耐酸力較強，故繼續(xù)繁殖并產(chǎn)酸。在此時期，乳中出現(xiàn)大量乳凝

16、塊，并有大量乳清析出，這個時期約有2天。,12.5  微生物引起食品腐敗的類型,三、   乳及乳制品的腐敗變質(zhì) 2、鮮乳的變質(zhì)過程 P171  ④ 真菌期     當酸度繼續(xù)升高至pH值3.0～3.5時，絕大多數(shù)的細菌生長受到抑制或死亡。而霉菌和酵母菌尚能適應高酸環(huán)境，并利用乳酸作為營養(yǎng)來源而開始大量生長繁殖。由于酸被利用，乳液

17、的pH值回升，逐漸接近中性。 ⑤ 腐敗期（胨化期） 經(jīng)過上述階段，乳中的乳糖已基本消耗完，而蛋白質(zhì)和脂肪含量相對較高，因此，此時能分解蛋白質(zhì)和脂肪的細菌開始活躍，凝乳塊逐漸被消化，乳的pH值不斷上升，向堿性轉(zhuǎn)化，同時并伴隨有芽孢桿菌屬、假單孢桿菌屬、變形桿菌屬等腐敗細菌的生長繁殖，于是牛奶出現(xiàn)腐敗臭味。,第三節(jié) 食品腐敗菌群及腐敗類型,四、肉及肉制品的腐敗變質(zhì)1、肉及肉制品中微生物的來源及主要類群

18、  腐敗微生物 細菌： 主要是需氧的革蘭氏陽性菌，如蠟樣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌和巨大芽孢桿菌等；需氧的革蘭氏陰性菌有假單胞桿菌屬、無色桿菌屬、黃色桿菌屬、產(chǎn)堿桿菌屬、埃希氏桿菌屬、變形桿菌屬等；此外還有腐敗梭菌、溶組織梭菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌等厭氧梭狀芽孢桿菌。 酵母菌和霉菌: 主要有假絲酵母菌屬、絲孢酵母屬、交鏈孢酶屬、曲霉屬、芽枝霉屬、毛霉屬、根霉屬和青霉屬。病原微生物： 如沙門氏菌、金黃

19、色葡萄球菌、結(jié)核分枝桿菌、炭疽桿菌和布氏桿菌等。它們對肉的影響并不在于使肉腐敗變質(zhì)，而是造成食源性疾病。,3、鮮肉變質(zhì)現(xiàn)象和原因  P174     ①發(fā)粘 主要是由革蘭氏陰性細菌、乳酸菌和酵母菌所產(chǎn)生。當肉的表面有發(fā)粘、拉絲現(xiàn)象時，其表面含菌數(shù)一般為107cfu/平方厘米。     ②變色  最常見的是綠色，這是由于

20、蛋白質(zhì)分解產(chǎn)生的硫化氫與肉質(zhì)中的血紅蛋白結(jié)合后形成的硫化氫血紅蛋白（H2S-Hb）造成的，有些酵母菌能產(chǎn)生白色、粉紅色、灰色等斑點。     ③霉斑  肉體表面有霉菌生長時，往往形成霉斑。特別是一些干腌制肉制品，。     ④ 氣味   微生物分解蛋白質(zhì)產(chǎn)生惡臭味；乳酸菌和酵母菌的作用下產(chǎn)生揮發(fā)性有機酸的

21、酸味；霉菌生長繁殖產(chǎn)生的霉味等。,第三節(jié) 食品腐敗菌群及腐敗類型,第三節(jié) 食品腐敗菌群及腐敗類型,3、鮮肉變質(zhì)現(xiàn)象和原因  由于屠宰、運輸、保藏和加工過程中的污染，致使肉體表面污染了一定數(shù)量的微生物。這時，肉體若能及時通風干燥，使肉體表面的肌膜和漿液凝固形成一層薄膜時，可固定和阻止微生物浸入內(nèi)部，從而延緩肉的變質(zhì)。,第三節(jié) 食品腐敗菌群及腐敗類型,3、鮮肉變質(zhì)現(xiàn)象 

22、 通常鮮肉保藏在0℃左右的低溫環(huán)境中，可存放10天左右而不變質(zhì)。隨著變質(zhì)過程的發(fā)展，細菌由肉的表面逐漸向深部浸入，菌群交替現(xiàn)象一般分為三個時期:   ① 需氧菌繁殖期：細菌分解前3～4天，細菌主要在表層蔓延，最初見到各種球菌，繼而出現(xiàn)大腸桿菌、變形桿菌、枯草桿菌等。 ② 兼性厭氧菌期：腐敗分解3～4天后，細菌已在肉的中層出現(xiàn)，能見到產(chǎn)氣莢膜桿菌等。 ③ 厭氧

23、菌期： 約在腐敗分解的7～8天以后，深層肉中已有細菌生長，主要是腐敗桿菌。 較強臭味。,第三節(jié) 食品腐敗菌群及腐敗類型,三、魚肉的腐敗變質(zhì)1、魚類中的微生物 存在于魚類中的微生物主要有：假單孢菌屬、無色桿菌屬、黃桿菌屬、不動桿菌屬、拉氏桿菌屬和弧菌屬。淡水魚中還有產(chǎn)堿桿菌、氣單孢桿菌和短桿菌屬、芽孢桿菌、大腸桿菌、棒狀桿菌等。 2、魚類腐敗的特點 一般情況下，魚類比肉類更

24、易腐敗，因為 通常魚類在捕獲后，通常是帶著容易腐敗的內(nèi)臟和鰓進行運輸，故容易引起腐敗。 魚體含水量高（約70～80%），組織脆弱，細菌容易侵入組織內(nèi)部。,第三節(jié) 食品腐敗菌群及腐敗類型,四、肉制品 P1751、熟肉制品2、腌臘制品3、香腸及灌腸制品4、肉干,第三節(jié) 食品腐敗菌群及腐敗類型,五、禽蛋的腐敗變質(zhì) P1761、微生物來源2、變質(zhì)過程,食品衛(wèi)

25、生學細菌指標,目前，我國食品衛(wèi)生標準中的微生物指標一般是指細菌總數(shù)、大腸菌群、致病菌、霉菌和酵母菌五項。這些項目也都有國家標準檢驗方法。在不同的國家食品衛(wèi)生標準中的微生物指標含義、表示方法及檢測方法不盡相同，應區(qū)別對待，并按規(guī)定方法檢驗。,食品衛(wèi)生學細菌指標,細菌總數(shù)與食品衛(wèi)生質(zhì)量評定 食品可能被多種類群的微生物所污染。每種微生物都有它一定的生物學特性，培養(yǎng)時應選擇不同的營養(yǎng)條件及其生理條件 (如培養(yǎng)基、溫度、培養(yǎng)時間

26、、pH、需氧條件等)去滿足其要求。因此，在實際工作中對其中所有微生物都進行檢驗是不可能的，也沒有必要。一般只用一種常用的方法去培養(yǎng)，以判定食品被污染的程度。,食品衛(wèi)生學細菌指標,國家衛(wèi)生標準中的細菌總數(shù) (Bacteria count)是指在普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上在一定條件下(需氧情況下，36士1.0℃，48士2h)培養(yǎng)長出的菌落總數(shù) (Colony forming unit,簡稱cfu)，一般以l g食品或lmL食品或lcm2食品表面積

27、上所含的細菌數(shù)來表示菌濃度。 實際計出的細菌總數(shù)只是一些能在營養(yǎng)瓊脂上生長、好氧性的嗜中溫細菌的活菌總數(shù)，但它們作為細菌總數(shù)己得到公認.,食品衛(wèi)生學細菌指標,檢測食品中的細菌總數(shù)的食品衛(wèi)生學意義在于:第一，它可以作為食品被污染程度的標志。一般來講，食品中細菌總數(shù)越多，則表明該食品污染程度越重，腐敗變質(zhì)速度加快。第二，它可以用來預測食品存放的期限程度。許多實驗結(jié)果表明，食品中的細菌總數(shù)能夠反映出食品的新鮮程度、是否變

28、質(zhì)以及生產(chǎn)過程的一般衛(wèi)生狀況等。但細菌總數(shù)指標只有和其他一些指標配合起來，才能對食品衛(wèi)生質(zhì)量做出比較正確的判斷。例如，冰凍食品的細菌總數(shù)的多少，反映了食品在產(chǎn)、儲、銷過程中的衛(wèi)生質(zhì)量和管理情況，不能說明其變質(zhì)與否。,大腸菌群與食品衛(wèi)生質(zhì)量評定,大腸菌群 (coliform group)系指一群好氧及兼性厭氧、在37℃、24h能分解乳糖產(chǎn)酸、產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。它包括腸桿菌科的埃希氏菌屬、 檸檬酸桿菌屬、克雷伯氏菌屬、產(chǎn)氣腸桿

29、菌屬 。其中以埃希氏菌屬為主，稱為典型大腸桿菌。其他3屬習慣上稱為非典型大腸桿菌。目前，大腸菌群已被許多國家 (包括我國)用做食品衛(wèi)生質(zhì)量評價的指標菌。一般認友，大腸菌群都是直接或間接來自人與溫血動物的糞便。,,指標菌（指示菌）應滿足的條件：有致病菌存在的地方就要有它的存在。數(shù)量要比致病菌多得多。對各種環(huán)境因素和人為處理的抵抗能力比致病菌更強。,各種腸道菌的定義,(1)總腸道細菌(Total Enterobacteria)在有

30、膽鹽存在時，能分解葡萄糖生長并產(chǎn)酸(使用紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂)。(2)腸道產(chǎn)氣菌(Coli-aerogenes bacteria) 在有膽鹽或其他等效選擇因子存在時，在30℃培養(yǎng)條件下分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣。(3)大腸菌群(Coliform bacteria)在有膽鹽或其他等效選擇因子存在時，在35 ℃或37 ℃生長并分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣。(4)糞大腸菌群(Faecal coliform bacteria)在有膽鹽或其他等效選擇因

31、子存在時，在44 ～45℃生長并能分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣。注意:該實驗的關鍵是溫度。(5)大腸桿菌(Escherichia coli) 除上述特征外，該族細菌甲基紅試驗陽性；V-P試驗 陰性,不能利用檸檬酸鹽作基礎碳源。,大腸菌群與食品衛(wèi)生質(zhì)量評定,檢測大腸菌群的食品衛(wèi)生意義在于:第一，它可作為糞便污染食品的指標菌。大腸菌群數(shù)的高低，表明了食品被糞便污染的程度和對人體健康危害性的大小。如食品有典型大腸桿菌存在，即說明受到糞便近期污染。

32、第二，它可以作為腸道致病菌污染食品的指標菌;食品安全性的主要威脅是腸道致病菌，如沙門氏菌屬、志賀氏菌等。腸道病患者或帶菌者的糞便中，有一般細菌，也有腸道致病菌存在。若對食品逐批或經(jīng)常檢驗腸道致病菌有一定困難;而大腸菌群容易檢測，且與腸道致病菌有相同來源。一般條件下在外界環(huán)境中生存時間也與主要腸道致病菌相近，故常用其作為腸道致病菌污染食品的指示菌。 當食品中檢出大腸菌群數(shù)量多，腸道致病菌存在的可能性就愈大。當然，這兩者之間的存在并非一定

33、平行。,大腸菌群與食品衛(wèi)生質(zhì)量評定,大腸菌群檢驗方法：大腸菌群檢驗結(jié)果，在我國和許多其他國家均采用每100mL(g)樣品中大腸菌群最近似數(shù)來表示，簡稱為大腸菌群MPN(the most probable number)。大腸菌群的檢驗在我國是采用樣品3個稀釋度各3管的乳糖膽鹽發(fā)酵三步法（培養(yǎng)后產(chǎn)氣管判斷為陽性）。根據(jù)檢驗結(jié)果，從MPN檢索表 (通過幾率計算編制的相應MPN檢索表)中查出對應的大腸菌群MPN值。具體檢測方法見國家標準。

34、在一些國家也有以糞大腸菌群 (Faecal coliforms)或大腸桿菌 (E.coli)數(shù)量作為某些食品被糞便污染指示菌。糞大腸菌群檢測原理、方法與大腸菌群相似，只是培養(yǎng)采用44±1℃的溫度條件。,各種腸道菌的定義,(1)總腸道細菌(Total Enterobacteriaceae)在有膽鹽存在時，能分解葡萄糖生長并產(chǎn)酸(使用紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂)。(2)腸道產(chǎn)氣菌(Coli-aerogenes bacteria)

35、 在有膽鹽或其他等效選擇因子存在時，在30℃培養(yǎng)條件下分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣。(3)大腸菌群(Coliform bacteria)在有膽鹽或其他等效選擇因子存在時，在35 ℃或37 ℃生長并分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣。(4)糞大腸菌群(Faecal coliform bacteria)在有膽鹽或其他等效選擇因子存在時，在44 ～45℃生長并能分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣。注意:該實驗的關鍵是溫度。(5)大腸桿菌(Escherichia coli) 除

36、上述特征外，該族細菌甲基紅試驗陽性；V-P試驗 陰性,不能利用檸檬酸鹽作基礎碳源。,致病菌與食品衛(wèi)生質(zhì)量評定,食品中不允許有致病性病原菌存在。所以，在食品衛(wèi)生標準中規(guī)定，所有食品均不得檢出致病菌。病原菌種類繁多，在國家食品衛(wèi)生標準中要求檢驗的病原菌至少有 15種。因此，一般食品衛(wèi)生檢驗，只能根據(jù)不同食品可能污染情況針對性的重點檢查，并以此來判斷某種食品中有無致病菌的存在。例如禽、蛋、肉類食品必須做沙門氏菌的檢查;低酸性罐頭必須做肉毒梭菌

37、及其毒素的檢查;多種發(fā)酵食品等規(guī)定腸道致病菌和致病性球菌是檢測重點。發(fā)生食物中毒時要結(jié)合流行病學，對食品進行有關病原菌的檢查。如沙門氏菌、志賀氏菌、變形桿菌、腸道出血性大腸桿菌 （ O157：H7)、金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、副溶血性弧菌等。 另外，細菌毒素也是檢測致病菌的重要方面。,致病菌與食品衛(wèi)生質(zhì)量評定,食品中不允許有致病性病原菌存在。所以，在食品衛(wèi)生標準中規(guī)定，所有食品均不得檢出致病菌。另外，細菌毒素也是檢測

38、致病菌的重要方面。因為許多食品經(jīng)加熱、輻射等方法殺菌處理后，其中的致病菌被殺死，但細菌性外毒素、內(nèi)毒素等抗性較強，并末完全破壞，由此發(fā)生的食物中毒事件屢屢發(fā)生。,嗜冷菌和嗜熱菌計數(shù),嗜冷菌： 采用表面涂布法，常用培養(yǎng)條件：6.5℃,10d。嗜熱菌： 將試管或平板密封（如裝于塑料袋中），防治培養(yǎng)基水分蒸發(fā)。 常用培養(yǎng)條件： 55℃,3d。,食品中霉菌和酵母計數(shù),GB/T 4789.15-2003 食品衛(wèi)生微生物

39、學檢驗 霉菌和酵母計數(shù) 應選用相應的培養(yǎng)基。（如PDA,孟加拉紅培養(yǎng)基） 應選用相應的溫度。（25－28℃） 霉菌計數(shù)的特點。,食品微生物檢測的取樣方法,1、液體樣品 混勻2、固體樣品 魚、肉等表面和深層均需取樣，固態(tài)樣品需要經(jīng)過剪碎、均質(zhì)或研磨，制成10倍稀釋液。 樣品稀釋方法：10（樣品）＋90mL（如無菌蛋白胨水）

40、 25 ＋225 50 ＋4503、表面取樣4、設備、工作臺面的檢測（單位面積）5、空氣中微生物的檢測,食品微生物檢測的取樣方法,1、液體樣品 混勻2、固體樣品 3、表面取樣 表層切片法 用滅菌的解剖刀 淋洗法