實(shí)驗(yàn)室生物安全講座二

1、實(shí)驗(yàn)室生物安全,,,2,第四章 實(shí)驗(yàn)室生物安全的主要設(shè)備與儀器,3,,4,常用可防護(hù)生物危害的儀器裝備,移液器,生物安全柜,高壓滅菌鍋,滅菌器,一次性接種環(huán),護(hù)目鏡,防護(hù)服,,目的：隔離操作者和感染性樣本，防止操作人員被感 染安全設(shè)備 --- 生物安全柜 個(gè)體防護(hù)裝備 --- 防護(hù)服；安全眼睛；手套鞋套；呼吸防護(hù)裝置；緊急沖洗裝置等。,華盛頓大學(xué)中學(xué)生游戲 －防護(hù),5,第一節(jié) 生物安全柜,6,一、生物安全柜概述,

2、（一）概念： 生物安全柜（biological safety cabinet,BSC） 是操作有感染性的材料時(shí)，用來(lái)保護(hù)操作者本人、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境及實(shí)驗(yàn)材料，使其避免暴露于操作過(guò)程中產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設(shè)計(jì)的負(fù)壓排氣柜。,7,生物安全柜的基本設(shè)計(jì)已經(jīng)歷了多次改進(jìn)。主要的變化是在排風(fēng)系統(tǒng)增加了HEPA（High Effieiency Particulate Air Filter）過(guò)濾器。對(duì)于直徑0.3μm

3、 的顆粒，HEPA 過(guò)濾器可以截留99.97%，而對(duì)于更大或更小的顆粒則可以截留99.99%。HEPA 過(guò)濾器能夠有效地截留所有已知傳染因子，并確保從安全柜中排出的是完全不含微生物的空氣。生物安全柜設(shè)計(jì)中的第二個(gè)改進(jìn)是將經(jīng)HEPA 過(guò)濾的空氣輸送到工作臺(tái)面上，從而保護(hù)工作臺(tái)面上的物品不受污染。,8,生物安全柜的選擇,9,,1. I級(jí)生物安全柜,I 級(jí)生物安全柜能夠?yàn)槿藛T和環(huán)境提供保護(hù)，但不提供產(chǎn)品保護(hù)。用途：I級(jí)生物安全柜被用作特殊

4、的密封設(shè)備（例如離心、收獲設(shè)備或小的發(fā)酵設(shè)備）或可能產(chǎn)生氣溶膠的操作過(guò)程（例如倒籠子的垃圾，通氣培養(yǎng)或組織攪拌）。也可用來(lái)操作放射性核素和揮發(fā)性有毒化學(xué)物品 。,10,B型,,2. II級(jí)生物安全柜,II 級(jí)生物安全柜能夠?yàn)槿藛T、環(huán)境和產(chǎn)品提供保護(hù)。 用途：進(jìn)行生物安全水平1、2、3級(jí)相關(guān)的操作。,A型,11,II級(jí)生物安全柜的種類,,12,II級(jí)A2型生物安全柜,13,3. III級(jí)生物安全柜,14,生物安全柜的選擇,15,二

5、、生物安全柜的使用,（一）個(gè)人防護(hù)要求：①使用生物安全柜時(shí)必須穿個(gè)人防護(hù)服，戴手套（手套應(yīng)套在隔離衣的外面）②最好帶口罩和帽子，根據(jù)需要帶防護(hù)眼罩或者面罩。③工作之前，操作者應(yīng)調(diào)節(jié)凳子高度確保自己的臉在開(kāi)口之上。,,16,（二）生物安全柜內(nèi)物品擺放原則：①按照從潔凈區(qū)到污染區(qū)的方向擺放。②所有物品盡可能放在遠(yuǎn)離前格柵，靠近操作臺(tái)后緣的位置。③將廢棄物袋、盛放廢棄吸管的托盤(pán)以及吸濾瓶等體積較大的物品放在柜內(nèi)某一側(cè)。④前格柵不

6、能被實(shí)驗(yàn)記錄本、儀器設(shè)備或者其他物品阻擋。,,17,,（三）生物安全柜的操作流程:,18,（四）生物安全柜的使用注意事項(xiàng),①安全柜只有在工作正常時(shí)才能使用。②雙臂垂直緩慢進(jìn)入前面的開(kāi)口，在生物安全柜中等待大約一分鐘，以使安全柜調(diào)整完畢后才可對(duì)物品進(jìn)行處理。③廢棄物應(yīng)丟棄在生物安全柜內(nèi)的處理容器中，避免胳膊在前開(kāi)口處快速移動(dòng)和頻繁進(jìn)出,以免干擾氣流。④盡量避免污染的物品進(jìn)入潔凈區(qū)。⑤在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行操作時(shí)，不能進(jìn)行文字工作。⑥

7、柜內(nèi)所有的工作要在工作面的中部或后部進(jìn)行，并能從觀察面板中看到。 ⑦前送風(fēng)格柵不得被便簽、滴管、或其他材料堵住，否則會(huì)干擾氣流從而可能使材料受到污染，使人員處在暴露狀態(tài)。⑧清潔和消毒:應(yīng)在每次工作完成后及一天結(jié)束時(shí)，使用合適的消毒劑清潔安全柜的表面。 ⑨柜子的風(fēng)扇在工作開(kāi)始前和工作完成后要再各運(yùn)行5分鐘。,19,20,,21,三、超凈工作臺(tái),超凈工作臺(tái)是為保護(hù)試驗(yàn)樣品而設(shè)計(jì)，通過(guò)吹過(guò)工作區(qū)域的層流空氣防止試驗(yàn)樣品受粉塵或細(xì)菌的污染

8、。,22,水平層流的潔凈臺(tái)原理圖,垂直層流潔凈臺(tái)原理圖,超凈工作臺(tái)中不能操作感染性的材料，因其氣體是正壓直接排放。一旦感染性樣品放置于工作區(qū)域，層流空氣將把帶有微生物介質(zhì)的空氣吹向前臺(tái)正在操作的工作人員而產(chǎn)生危險(xiǎn)。,23,生物安全柜與超凈工作臺(tái)的區(qū)別,24,除了了解安全柜各項(xiàng)性能指標(biāo)，最好最快最方便鑒別安全柜安全性能的方法是了解您購(gòu)買(mǎi)的安全柜是否獲得過(guò)以下幾項(xiàng)主要的國(guó)際安全柜認(rèn)證： EN12469 (歐洲生物安全柜統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)) NSF

9、49 (美國(guó)生物安全柜標(biāo)準(zhǔn)-二級(jí)生物安全柜) AS2252.2 (澳洲生物安全柜標(biāo)準(zhǔn)-二級(jí)生物安全柜) JIS K3800 (日本生物安全柜標(biāo)準(zhǔn)),25,,第二節(jié) 滅菌器,26,,一、概念： 泛指能達(dá)到滅菌要求的一切設(shè)備，即能在一定時(shí)間內(nèi)殺滅一切活的微生物（包括細(xì)菌芽胞）的設(shè)備，滅菌的保證水平為10－6 （即一件物品經(jīng)滅菌處理后仍然有微生物存活的概率為10－6）。 二、滅菌器的種類： 1. 高壓蒸

10、汽滅菌器―最常用 2. 干熱滅菌器 3. 環(huán)氧乙烷滅菌器和過(guò)氧化氫等離子體滅菌器。,27,三、使用高壓蒸汽滅菌器的注意事項(xiàng) 1.需要滅菌的各種包裹不應(yīng)過(guò)大過(guò)緊。 2.放入滅菌器內(nèi)的包裹‘不能排得太緊。 3.定期做好滅菌效果檢測(cè)。 4.易燃易爆物品禁用高壓蒸汽滅菌法。 5.瓶裝液體滅菌時(shí)，所盛液體不超過(guò)瓶體積的3/4 。 6.每次滅菌前，應(yīng)檢查安全閥的性能是否良好，使用

11、中也 應(yīng)密切觀察運(yùn)行是否正常，及時(shí)發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，以免發(fā)生意 外。 7.在使用高壓蒸汽滅菌過(guò)程中，應(yīng)注意排盡滅菌器內(nèi)冷空 氣。 8.達(dá)到滅菌時(shí)間后，關(guān)閉電源，使壓力自然下降，壓力指針 到“0”后，方可打開(kāi)鍋蓋。,28,第 五 章 病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理,29,原核生物型微生物： 包括兩個(gè)菌（細(xì)菌、放線菌），四個(gè)體（衣原體、支原體、立克次體、螺旋體）.,第 五 章

12、 病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理 ---- 病原微生物的種類及特點(diǎn),30,第 五 章 病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理 ---- 病原微生物的種類及特點(diǎn),原核生物型微生物的特點(diǎn)： 1. 大部分細(xì)菌可在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖。 2. 構(gòu)成細(xì)菌毒力的物質(zhì)基礎(chǔ)主要包括細(xì)菌的侵襲力(invasiveness) 毒素（toxin）. 細(xì)菌致病性的強(qiáng)

13、弱與細(xì)菌的毒力、侵入機(jī)體的數(shù)量、入侵途徑及機(jī)體的免疫狀態(tài)密切相關(guān)。 3. 細(xì)菌感染可采用抗生素來(lái)治療。,31,第 五 章 病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理---- 病原微生物的種類及特點(diǎn),真核生物型微生物： 真菌（單細(xì)胞真菌和多細(xì)胞真菌）特點(diǎn)： 1. 真菌的致病： 淺表真菌感染--如:皮膚癬菌。真菌機(jī)會(huì)性感染---如：白色念珠菌，新型隱球菌。真菌毒素的致病作用---真菌中毒和引起腫瘤（黃曲霉毒素）。真菌性超敏反應(yīng)。

14、 2. 治療： 對(duì)細(xì)菌抗生素不敏感，必須采用抗真菌藥物治療。,32,第 五 章 病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理 ---- 病原微生物的種類及特點(diǎn),非細(xì)胞型微生物： 病毒病毒結(jié)構(gòu)：核酸（DNA / RNA）,蛋白衣殼，包膜（某些病毒有）；病毒特點(diǎn)：1. 在易感的活細(xì)胞中寄生。病毒的致病作用主要通過(guò)侵入易感細(xì)胞、損傷細(xì)胞或改變細(xì)胞功能而引發(fā)。2. 病毒感染用抗生素治療無(wú)效，

15、目前理想的抗病毒藥物不多。,33,34,第 五 章 病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理 --- 病原微生物的種類及特點(diǎn),非細(xì)胞型微生物： 朊粒（prion）： 朊粒的特點(diǎn)： 1. 一種特殊的致病因子，只含蛋白質(zhì)，不含核酸。 2. 朊粒： 是一種由正常宿主細(xì)胞基因編碼的、構(gòu)象異常的朊蛋白，是人和動(dòng)物的傳染性海綿狀腦?。═SEs）的病原體。TSE 可通過(guò)多種途徑傳播

16、（消化道、血液、神經(jīng)及醫(yī)源性）。 3. 抵抗力很強(qiáng)，一般高壓滅菌條件不能破壞。 對(duì)患者的血液、體液，手術(shù)器械等必須用 1mol / L NaOH 處理 1小時(shí), 再高壓滅菌 134 C, 2小時(shí)。,35,一、病原微生物的風(fēng)險(xiǎn)等級(jí),36,二、病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù),37,（一） 病原微生物樣本的采集,病原微生物菌（毒）種、樣本及已知或疑含病原體的物質(zhì)均稱為感染性物質(zhì)?；疽螅?.采集設(shè)備與器材：

17、 必須有相應(yīng)的生物安全防護(hù)設(shè)備與器材。如個(gè)人防護(hù)用品（隔離衣、帽、口罩、鞋套、手套、防護(hù)眼鏡等）、防 護(hù)器材、生物安全防護(hù)設(shè)施和實(shí)驗(yàn)條件等。2. 采集人員與操作規(guī)范： 必須由掌握相關(guān)專業(yè)知識(shí)和操作技能的工作人員進(jìn)行采集 遵循生物安全操作規(guī)范 具有保證病原微生物樣本質(zhì)量的技術(shù)方法和手段 具有詳細(xì)的樣本采集記錄 具有應(yīng)急措施與預(yù)案3. 樣本的分類

18、、包裝與運(yùn)輸： 必須按規(guī)定要求對(duì)感染性物質(zhì)行分類、包裝與運(yùn)輸。疑似高致病性病原微生物樣本，應(yīng)該采取特殊明確的標(biāo)示.,38,（二）病原微生物菌（毒）種的保藏與管理,1. 菌（毒）種的供應(yīng)： 第一類、第二類菌（毒）種： 由衛(wèi)生部指定的保藏管理機(jī)構(gòu)統(tǒng)一供 應(yīng)，其他任何單位或個(gè)人不得對(duì)國(guó)內(nèi)、外辦理。 第三類、第四類菌（毒）種：專業(yè)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)供應(yīng)所管理的菌（毒）

19、 種，其他菌（毒）種均由各有關(guān)保藏管理中心供應(yīng)。 2.菌（毒）種的使用: 使用單位需符合生物安全要求的條件和設(shè)備。菌（毒）種應(yīng)有專人負(fù)責(zé)管理，建立必要的制度。 *使用第一類菌（毒）種的單位，必須經(jīng)國(guó)務(wù)院衛(wèi)生行政部門(mén)批準(zhǔn)； *使用第二類菌（毒）種的單位必須經(jīng)省、自治區(qū)、直轄市衛(wèi)生行政部門(mén)批準(zhǔn)； *使用第三類菌（毒）種的單位，應(yīng)當(dāng)經(jīng)縣級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)批準(zhǔn)。,39,（三）實(shí)驗(yàn)廢棄物的處理,處理方式如下：,國(guó)外

20、嚴(yán)格規(guī)定,40,,41,第六章 臨床實(shí)驗(yàn)室生物安全管理,42,一、臨床實(shí)驗(yàn)室的生物安全隱患 最大隱患： 存在大量未知因素帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn)。 臨床實(shí)驗(yàn)室接收的標(biāo)本很多是來(lái)源于未知疾病的個(gè)體，其中是否含有致病因子及其危害性大小、傳染途徑均不明。 二、臨床實(shí)驗(yàn)室的生物安全準(zhǔn)則 防護(hù)原則：假設(shè)所有來(lái)自病人的血液、體液和 組織都具有傳染性！ 要求臨床

21、實(shí)驗(yàn)室人員嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室安全操作規(guī)程操作，重要是降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生。,43,臨床檢驗(yàn)相關(guān)生物危險(xiǎn)等級(jí)分布,44,,醫(yī)務(wù)人員職業(yè)防護(hù)認(rèn)定病人的血液、體液、分泌物、排泄物均具有傳染性，接觸上述物質(zhì)者．必須采取防護(hù)。雙向防護(hù)，既防止疾病從病人傳至醫(yī)務(wù)人員，又防止疾病從醫(yī)務(wù)人員傳至病人,45,,防護(hù)措施（問(wèn)題：意識(shí)薄弱 措施不到位） l 洗手：接觸病人的污染物時(shí)，不論是否戴手套，都必須洗手。 2 戴手套： 3 有可能發(fā)

22、生噴濺時(shí)，應(yīng)戴眼罩和口罩，并穿防護(hù)衣。 4 被污染的醫(yī)療用品和儀器設(shè)備應(yīng)及時(shí)處理! 5 銳利器具和針頭應(yīng)小心處理，以防被刺傷。 6 接種疫苗 （乙肝疫苗 ）,46,,三、臨床實(shí)驗(yàn)室安全操作的基本要求一般臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按BSL-2的要求。安全防護(hù)措施包括安全操作規(guī)范程序﹑安全防范制度和廢棄物處理制度等。 （1）所有處理血液、體液或其他可能具有傳染性的物質(zhì)（包括接觸病人 的黏膜或有損傷的皮膚、或在處理污染

23、的物品或表面時(shí)）的工作人 員都應(yīng)戴手套，如果有可能發(fā)生血液或體液的噴濺，或必須在生物 安全柜外處理微生物時(shí)，則應(yīng)使用面部防護(hù)裝備。如果手套破損、 刺破、或失去其屏障功能，則應(yīng)盡快更換。一次性手套不得重復(fù)使 用，在接觸病員后應(yīng)更換手套。不能戴著手套離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室或接觸 “潔凈”設(shè)施表面（如鍵盤(pán)、電話、門(mén)柄等）。（2）工作臺(tái)面應(yīng)鋪墊一塊具有吸收性能的材料，以防止液體滴落或?yàn)R 落造成的感

24、染性物質(zhì)擴(kuò)散，使用后按感染性廢棄物處理。（3）所有可能產(chǎn)生氣溶膠或飛沫的操作都應(yīng)在生物安全柜中進(jìn)行。,47,（4）實(shí)驗(yàn)室應(yīng)使用機(jī)械移液裝置，絕對(duì)禁止用口吸移液。 （5）禁止用手直接處置注射器及其他銳器，以防止損傷； 使用后或廢棄的銳利物品都應(yīng)放入專用容器內(nèi)，并及 時(shí)運(yùn)走處理。 （6）實(shí)驗(yàn)中用過(guò)的污染物品在重復(fù)使用或裝入容器中按傳 染性廢棄物進(jìn)行處理前，應(yīng)先進(jìn)行去污處理。 （7）被血液或其他

25、體液污染的設(shè)備在進(jìn)行維修之前應(yīng)先進(jìn) 行清潔和消毒，無(wú)法徹底消毒的設(shè)備必須貼上生物危 害警告標(biāo)簽。 （8）手或其他部位的皮膚在接觸血液或其他體液后必須立 即徹底清洗，在實(shí)驗(yàn)工作結(jié)束后或取下手套后應(yīng)立即 洗手;在離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室之前應(yīng)脫下所有的個(gè)人防護(hù)裝備。 （9）血液或其他體液發(fā)生泄漏或工作結(jié)束后，要及時(shí)用合 適的化學(xué)殺菌劑對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)進(jìn)行表面消毒。,48,臨床實(shí)驗(yàn)室安全操作的

26、基本要求,（2）工作臺(tái)面應(yīng)鋪墊一塊具有吸收性能的材料，以防止液體滴落或?yàn)R落造成的感染性物質(zhì)擴(kuò)散，使用后按感染性廢棄物處理。 （3）所有可能產(chǎn)生氣溶膠或飛沫的操作都應(yīng)在生物安全柜中進(jìn)行。,49,臨床實(shí)驗(yàn)室安全操作的基本要求,（4）實(shí)驗(yàn)室應(yīng)使用機(jī)械移液裝置，絕對(duì)禁止用口吸移液。 （5）禁止用手直接處置注射器及其他銳器，以防止損傷；使用后或廢棄的銳利物品都應(yīng)放入專用容器內(nèi)，并及時(shí)運(yùn)走處理。 （6）實(shí)驗(yàn)中用過(guò)的污染物品在重復(fù)使用或

27、裝入容器中按傳染性廢棄物進(jìn)行處理前，應(yīng)先進(jìn)行去污處理。,50,,（7）被血液或其他體液污染的設(shè)備在進(jìn)行維修之前應(yīng)先進(jìn)行清潔和消毒。 （8）手或其他部位的皮膚在接觸血液或其他體液后必須立即徹底清洗，在實(shí)驗(yàn)工作結(jié)束后或取下手套后應(yīng)立即洗手；在離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室之前應(yīng)脫下所有的個(gè)人防護(hù)裝備。 （9）血液或其他體液發(fā)生泄漏或工作結(jié)束后，要及時(shí)用合適的化學(xué)殺菌劑對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)進(jìn)行表面消毒。,51,動(dòng)物尸體解剖毒液滴到物品表面打開(kāi)容器的螺旋蓋

28、摔碎有培養(yǎng)物的瓶、平皿注射器從安瓿抽取毒液離心時(shí)離心管破裂打開(kāi)、打碎干燥菌種安瓿管注射器針尖滴出的毒液拍打、刷衣服攪拌小白鼠鼻內(nèi)接種,可造成中重度氣溶膠的操作,52,血液成分制備人員:,據(jù)文獻(xiàn)顯示: 無(wú)償獻(xiàn)血者HBsAg 、 抗-HCV 、 抗-HIV的感染率分別為6.1%、2.2%和0.03%;未明原因的血液傳播性疾病不斷地增加;采集、制備血液標(biāo)本，難免面臨很多危險(xiǎn)因素和意外暴露。,53,,危險(xiǎn)因素：1&

29、#160; 物理因素  包括針刺損傷和操作擦傷。針頭刺傷為采集成分血樣標(biāo)本后針頭誤投垃圾桶，撿回時(shí)碰傷手指；據(jù)統(tǒng)計(jì)，血站職工職業(yè)暴露中針刺占77.78%，皮損污染占15.7%，黏膜污染占6.52%［2］。 2  生物因素  主要包括乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、艾滋病病毒、結(jié)核桿菌、流感病毒等。據(jù)研究含病毒高的血液和體液依次為：血液、血液成分、傷口分泌物、精液、陰道分泌物、羊水等。,54,,,Is

30、 it a sharps hazard?,Examples:needlessyringesscalpelsall biologically contaminated objects that can easily penetrate skin (Pasteur pipettes,razor blades, etc.),Place sharps in approved sharps container for disposal!

31、,55,,3.  隱患因素：  醫(yī)療廢棄物（基本上屬于感染性廢物）；， 損傷性廢物；， 主要包括： 成分血轉(zhuǎn)移袋；一次性耗材；一次性生理鹽水和廢抗凝劑；注射器及針頭； 滲漏血袋；一次性工作服、帽子、口罩、手套等。,56,,發(fā)現(xiàn)損傷后的護(hù)理  :發(fā)生針頭刺傷，操作中擦傷、割傷等時(shí)：(1)暫時(shí)停止接觸血液工作；(2)立即脫去乳膠手套，用生理鹽水沖洗查看傷情；(3)在傷口近心端向

32、遠(yuǎn)心端擠壓傷口，盡可能擠出損傷處的血液，再用流水進(jìn)行沖洗完成后用0.5%碘伏消毒，并包扎傷口；(4)已污染的工作服先消毒后清洗；(5)查看制備的血袋條碼，以便檢查結(jié)果(6)登記受傷情況及處理方法；(7)傷情嚴(yán)重者實(shí)施生物安全應(yīng)急預(yù)案并接受醫(yī)學(xué)觀察。,57,急診科,急診患者特點(diǎn)： 在潛伏期的患者和未明確診斷的傳染病患者較多。必須樹(shù)立的觀念：把任何患者的血液及污染物；呼吸道排泄物等；都認(rèn)為具有潛在感染性，加強(qiáng)自我防護(hù)。防護(hù)措施

33、：戴帽子 口罩 手套，隔離衣等，在特殊情況下可考慮戴雙層手套（在工作服的口袋內(nèi)備 2 雙手套，便于在緊急情況下使用）；重視洗手 ！實(shí)施預(yù)防接種：如甲肝 乙肝 流感疫苗等，,58,抗腫瘤藥和其他危險(xiǎn)藥物的生物防護(hù),危險(xiǎn)藥物： 指具有致癌性、 致畸性、 生殖毒性、 遺傳毒性及低劑量致器官毒性的藥物。包括： 抗腫瘤藥、 抗病毒藥、 激素、 免疫抑制劑等。,59,,職業(yè)暴露風(fēng)險(xiǎn)：研究

34、表明：醫(yī)務(wù)人員在診療、配制和使用危險(xiǎn)藥物等過(guò)程中可直接或間接暴露于危險(xiǎn)藥物,產(chǎn)生不良反應(yīng)。暴露的途徑：呼吸道吸入、 皮膚接觸吸收、 消化道攝入等。危害： 職業(yè)暴露危險(xiǎn)藥物可導(dǎo)致機(jī)體免疫力 降低、 發(fā)生腫瘤的危險(xiǎn)性增加和潛在的生殖損害。,60,,安全防護(hù)措施: 1，制定安全操作規(guī)程; 對(duì)可能接觸危險(xiǎn)藥物的 醫(yī)務(wù)人員加強(qiáng)安全教育和培訓(xùn); 2，設(shè)置專用配藥場(chǎng)所; 使用生物安全柜; 3，個(gè)人防護(hù)：裝備包括手套、 隔離衣、 護(hù)目鏡

35、、 面罩等;4，加強(qiáng)對(duì)廢棄物處理的管理;,61,,正確使用個(gè)人防護(hù)設(shè)備 ： 如防護(hù)服、手套、目鏡、一次性帽子、口罩及鞋套。防護(hù)服： 宜穿一次性低穿透性隔離衣 ,有條件可選用正壓連身工作服； 隔離衣應(yīng)具有低穿透性、 開(kāi)口向后、長(zhǎng)袖緊袖口;,62,,手套：研究證明戴手套是預(yù)防抗腫瘤藥物皮膚暴露的最有效手段, 值得注意的是手套的厚度比質(zhì)地更為重要,應(yīng)使用無(wú)粉、 厚、 長(zhǎng)的乳膠手套,長(zhǎng)度能覆蓋住隔離衣袖口為宜 ；

36、Slevin 等的研究指出 ,乳膠手套防滲透功能差 ,而聚乙烯手套具有防滲透功能 ,但由于聚乙烯手套比較薄 ,使用過(guò)程中容易破損且不易于精細(xì)操作 ,因此建議戴雙層手套 ,在聚乙烯手套外加戴一層乳膠手套 ,注意手套須蓋住袖口。 戴手套前及脫手套之后應(yīng)認(rèn)真洗手。切忌因怕麻煩而簡(jiǎn)化防護(hù)程序。,63,,配藥注意事項(xiàng) 在進(jìn)行藥物配制操作時(shí), 打開(kāi)安瓿時(shí)應(yīng)墊以紗布,以防劃破手套;打開(kāi)粉劑安瓿時(shí),應(yīng)用無(wú)菌紗布包裹; 溶解藥物時(shí), 溶媒應(yīng)沿

37、安瓿壁緩慢注入瓶底, 以防粉沫溢出。抽取藥液選用一次性注射器,以不超過(guò)容器的 3 /4容積為宜,排氣時(shí)應(yīng)排到密閉容器中。,64,,有害污物的管理： 接觸化療藥物的用具、 污物應(yīng)放入專用袋內(nèi)集中封閉處理,收集容器應(yīng)堅(jiān)固、防漏和帶蓋,有明確標(biāo)識(shí)。勿在放置抗腫瘤藥物的冰箱中存放食品;勿在操作室內(nèi)飲水和進(jìn)食。,65,,發(fā)生急性危險(xiǎn)藥物暴露后的緊急處理： 如不慎將藥液濺到皮膚上或眼睛內(nèi), 可用大量清水或氯化鈉注射液反復(fù)沖洗接觸

38、部位的皮膚,記錄接觸情況,必要時(shí)按化療藥外漏處理。,66,第七章 基因工程實(shí)驗(yàn)室的生物安全管理,67,,基因工程： 包括 1. 利用載體系統(tǒng)的重組體DNA 技術(shù) 2. 利用物理或者化學(xué)方法把異源DNA 直接導(dǎo)入有機(jī)體的技術(shù) 基因工程: 具有巨大應(yīng)用前景基因工程安全性問(wèn)題也受到廣泛關(guān)注重組DNA技術(shù)可能制造出具有潛在危險(xiǎn)的新型微生物，對(duì)人類、動(dòng)物和環(huán)境造成

39、威脅 涉及 “生物安全性”問(wèn)題,68,,69,一、基因工程實(shí)驗(yàn)室的危險(xiǎn)因素,1.材料危害,70,2.儀器使用的危險(xiǎn)因素 高壓滅菌鍋 離心機(jī) 凝膠成像系統(tǒng) 電泳系統(tǒng) 超聲破碎儀電穿孔儀雜交爐 ……3.有害化學(xué)試劑溴化乙錠焦碳酸二乙酯（DEPC）Trizol秋水仙素氯仿 ……,71,二、安全防護(hù)原則,基本原則： 1

40、. 確保實(shí)驗(yàn)操作人員的安全。 2. 確保實(shí)驗(yàn)操作場(chǎng)所及周邊環(huán)境的安全。 3. 確保實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備正常運(yùn)作的安全。 4. 確保實(shí)驗(yàn)操作對(duì)象的安全。 一級(jí)屏障： 生物安全柜、通風(fēng)櫥柜、高壓滅菌鍋等。 二級(jí)屏障： 實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建造、設(shè)備配置等。,72,三、生物安全評(píng)估,安全性評(píng)估考察的依據(jù)主要建立于: 1.生物表達(dá)系統(tǒng)的生物安全性 2.轉(zhuǎn)基因動(dòng)物和基因敲除動(dòng)物的安全性。 3.轉(zhuǎn)基因植物

41、的生物安全性。 4.遺傳修飾的生物安全性。,73,三、基因工程的安全控制,（一）相關(guān)法規(guī) 我國(guó)相繼頒布了《基因工程安全管理辦法》（1993年）和《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全管理?xiàng)l例》（2001年），以及其他相關(guān)的微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全管理等規(guī)章，為基因工程在我國(guó)的安全管理提供了法律保障。,74,,（二）基因工程工作安全等級(jí) 按照潛在危險(xiǎn)程度，分為四個(gè)安全等級(jí): 安全等級(jí)Ⅰ:

42、 該類基因工程工作對(duì)人類健康和生態(tài)環(huán)境尚不存在危險(xiǎn)； 安全等級(jí)Ⅱ: 該類基因工程工作對(duì)人婁健康和生態(tài)環(huán)境具有低度危險(xiǎn)； 安全等級(jí)Ⅲ: 該類基因工程工作對(duì)人類健康和生態(tài)環(huán)境具有中度危險(xiǎn)； 安全等級(jí)Ⅳ: 該類基因工程工作對(duì)人類健康和生態(tài)環(huán)境具有高度危險(xiǎn)。,75,目前各國(guó)實(shí)驗(yàn)室中使用的宿主—載體系統(tǒng)遵從于美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院

43、制定的生物控制系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)。確立以原核生物和低等真核生物作為宿主，相關(guān)改造的系列質(zhì)粒為載體的生物控制系統(tǒng)。,76,（三）基因工程的安全控制,安全等級(jí)的標(biāo)準(zhǔn)，由國(guó)務(wù)院主管部門(mén)制定。 屬于安全等級(jí)Ⅰ和Ⅱ的工作，由本單 位行政 負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)。 屬于安全等級(jí)Ⅲ的工作， 報(bào)國(guó)務(wù)院主管部門(mén)批準(zhǔn)。 屬于安全等級(jí)Ⅳ的工作，經(jīng)國(guó)務(wù)院主管部門(mén) 審查，報(bào)全國(guó)基因工程安全委員會(huì)批準(zhǔn)。,77,（四）安全操作規(guī)范,1. 常規(guī)安全管理:

44、適用于其他類型實(shí)驗(yàn)室安全管理的日常規(guī)范，同樣適用于基因工程實(shí)驗(yàn)室。2.生物安全管理: 世界衛(wèi)生組織按實(shí)驗(yàn)室所從事研究工作的生物危害等級(jí)將實(shí)驗(yàn)室分為3個(gè)類別，并按照不同的類別制定了相應(yīng)的安全操作規(guī)范。,78,基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室安全操作規(guī)范 從事一、二級(jí)安全等級(jí)的研究工作場(chǎng)所，操作規(guī)范基本同一級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室。 特別強(qiáng)調(diào)： 1.降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生； 2.所有重

45、組DNA, 重組工程菌培養(yǎng)物、廢棄物必須 進(jìn)行滅活處理（物理方法; 如高壓滅菌等; 化學(xué) 方法:化學(xué)消毒劑 ）。 3.在進(jìn)行有可能產(chǎn)生氣溶膠和高濃度生物危害物 質(zhì)的實(shí)驗(yàn)操作時(shí)，使用生物安全柜。,79,一、名詞解釋 1.實(shí)驗(yàn)室生物安全 2.氣溶膠 二、簡(jiǎn)答題1.實(shí)驗(yàn)室感染的來(lái)源有哪些？ 2.第三類病原微生物的判定標(biāo)準(zhǔn)是什么？ 屬于此類的微