中藥鑒定學(xué)中藥安全性評(píng)價(jià)

1、中藥的安全性評(píng)價(jià),,中藥的安全性評(píng)價(jià)（safety evalulation）就是利用毒理學(xué)和理化分析等方法，檢測(cè)中藥的毒性和有害物質(zhì)、評(píng)價(jià)其在臨床使用過(guò)程中的安全性。中藥的安全性評(píng)價(jià)是中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中不可缺少的組成部分，也是保證臨床用藥安全可靠的重要措施。,據(jù)統(tǒng)計(jì)，自1915~1994年間的110種醫(yī)藥學(xué)期刊上關(guān)于中藥不良反應(yīng)的報(bào)道累計(jì)達(dá)6061例。這些不良反應(yīng)主要集中在肝、腎、肺、心以及內(nèi)分泌系統(tǒng)、造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、生殖

2、系統(tǒng)等諸多方面。近期在國(guó)外發(fā)生的中藥不良反應(yīng)，如日本的小柴胡事件、歐洲的馬兜鈴事件、新加坡、馬來(lái)西亞的黃連事件等，更加深了人們對(duì)中藥安全性的擔(dān)憂。,然而，中醫(yī)藥體系具有自身的特殊性，影響中藥安全性的因素也較為復(fù)雜，除劑量問(wèn)題外，還涉及到品種、炮制、配伍、煎服方法等諸多因素，而且可變因素多，檢測(cè)難度大。因此，如何科學(xué)正確地評(píng)價(jià)中藥的安全性給中藥研究者提出了更高的要求。因?yàn)樗汝P(guān)系到臨床的用藥安全，又關(guān)系到中醫(yī)藥事業(yè)的順利發(fā)展，是一項(xiàng)具有

3、戰(zhàn)略意義的重大研究課題。,第一節(jié) 影響中藥安全性的物質(zhì)分類,第一節(jié) 影響中藥安全性的物質(zhì)分類,一、內(nèi)源性具有毒副作用的物質(zhì)這些化學(xué)成分大多是生物體的次生代謝產(chǎn)物（secondary metabolites），包括生物堿、萜類、揮發(fā)油類、酚類、醌類、內(nèi)酯類、苷類等。這些成分很早就作為藥物在臨床應(yīng)用，但隨著研究的不斷深入，逐漸地發(fā)現(xiàn)這些產(chǎn)生藥效的物質(zhì)也常伴有不同程度的毒副作用。通常按其毒害的部位分類。,1．具有消化系統(tǒng)毒性的中藥

4、 常表現(xiàn)為胃腸道反應(yīng)，如惡心、嘔吐、上腹不適、腹痛、腹瀉等。同時(shí)，還有可能引起肝臟毒性反應(yīng)，如黃疸、肝腫大、肝炎、膽汁淤積、肝硬化、肝細(xì)胞壞死等。 根據(jù)臨床報(bào)道和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，常引起胃腸道反應(yīng)的中藥有：鴉膽子Brucea javanica （L.）Merr.、了哥王Wikstroemia indica（L.）C. A. Mey.、常山Dichroa febrifuga Lour.、苦楝子M

5、elia azedarach L.、巴豆Croton tiglium L.等。具有肝臟毒性的中藥有：姜半夏Pinellia ternate（Thunb.）Breit.、桑寄生Taxillus chinensis（DC.）Danser、蒲黃Typha angustifolia L.等。天花粉Trichosanthes kirilowii Maxim.或其注射劑可引起肝功能異常；千里光Senecio argunensis Tu

6、rcz.可造成肝內(nèi)血管閉塞；野百合Crotalaria sessiliflora L.提取物可引起急性肝炎。川楝子Melia toosendan Sieb. et Zucc.、蒼耳子X(jué)anthium sibiricum Patr.、草烏Aconitum kusnezoffii Reichb.、蓖麻子Ricinus communis L.、雷公藤Tripterygium wilfordii Hook. f.等中藥的煎劑可導(dǎo)致肝

7、損害；大黃Rheum palmatum L.、澤瀉Alisma orientalis（Sam.）Juzep.或其靜脈注射液會(huì)引起膽紅素代謝障礙導(dǎo)致黃疸。,2．具有泌尿系統(tǒng)毒性的中藥 毒性癥狀有尿少、尿閉、尿頻、尿急、浮腫、血尿、蛋白尿、尿毒癥、腎功能衰竭等。關(guān)木通Aristolochia manshuriensis Kom.、廣防己Aristolochia fangchi Y. C. Wu ex L. D. chou et

8、S. M. Hwang。另?yè)?jù)報(bào)道，具有腎臟毒性的常用中藥還有草烏Aconitum kusnezoffii Reichb.、巴豆Croton tiglium L.、天花粉Trichosanthes kirilowii Maxim.、蜈蚣Scolopendra subspinipes mutilans L. Koch、斑蝥Mylabris phalerata Pallas、光慈菇Tulipa edulis（Miq.）Baker

9、、益母草Leonurus heterophyllus Sweet、厚樸Magnolia officinalis Rehd. et Wils.等。,3．具有中樞神經(jīng)系統(tǒng)毒性的中藥 癥狀為口唇麻木、嗜睡、抽搐、驚厥、牙關(guān)緊閉、眩暈、意識(shí)模糊、煩躁不安、昏迷、瞳孔縮小或放大、嚴(yán)重者死亡。 臨床常用的中藥: 馬錢子Strychnos nux-vomica L.所含士的寧（strychnine）；

10、顛茄屬Hyoscyamus植物含有的阿托品（atropine）、天仙子胺（hyoscyamine）；西紅花Crocus sativus L.所含的藏紅花素（crocetin）；罌粟Papaver somniferum L.所含的嗎啡（morphine）都被動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)具有不同程度的中樞神經(jīng)毒性。,4．具有造血系統(tǒng)毒性的中藥 癥狀是溶血性貧血、缺血性貧血、白細(xì)胞減少、粒細(xì)胞缺乏、再生障礙性貧血、嚴(yán)重者導(dǎo)致死亡?？梢鹪煅到y(tǒng)

11、毒性反應(yīng)的中藥有:雷公藤Tripterygium wilfordii Hook. f.、光慈菇Tulipa edulis（Miq.）Baker、八角蓮Dysosma versipellis（Hance）M. Cheng、青風(fēng)藤Sinomenium acutum（Thumb.）Rehd. et Wils.以及正清風(fēng)痛寧、蝮蛇抗栓酶、穿琥寧注射液、小檗堿（berberine）、枯痔寧、感冒清、感冒通等中成藥制劑。,5．具有心血管系

12、統(tǒng)毒性的中藥 常見(jiàn)的心血管毒性的癥狀是心律失常、心悸、胸悶、循環(huán)衰竭、嚴(yán)重者死亡。烏頭Aconitium carmichaeli Debx.、附子及其炮制品均為臨床常用中藥，具有鎮(zhèn)靜、強(qiáng)心、抗腫瘤等作用，常用于多種痛癥的治療。其主要藥效成分烏頭堿（aconitine）、中烏頭堿（mesaconitine）、次烏頭堿（hypaconitine）等可引起心血管毒性，并可損害外周脊髓。其它具有心血管毒性反應(yīng)的中藥還有蟾酥Venenum

13、 Bufonis、藜蘆Veratum nigrum L.、黃花夾竹桃Thevetia peruviana（Pers.）. K. Schum.等。,6．具有呼吸系統(tǒng)毒性的中藥 癥狀有咳嗽、呼吸困難、肺水腫、呼吸麻痹、呼吸衰竭、甚至窒息死亡。 常見(jiàn)產(chǎn)生呼吸系統(tǒng)毒性的中藥有： 苦杏仁Semen Armeniacae Amarum和桃仁Semen Persicae所含苦杏仁苷（amygdalin）、 鬧羊花Rhod

14、odendron molle G. Don所含毒性成分八厘麻毒素（andromedotoxin）、 烏頭Aconitium carmichaeli Debx.和附子中所含成分烏頭堿（aconitine）、 細(xì)辛Asarum heterotropoides Fr. Schmidt var. mandshuricum（Maxim.）Kitag.所含成分甲基丁香酚（methyleugenol）等，這些成分主要是通過(guò)影響延髓呼吸中樞

15、引起呼吸困難乃至呼吸衰竭。,7．具有免疫系統(tǒng)毒性的中藥 最常見(jiàn)的免疫系統(tǒng)的毒性就是過(guò)敏反應(yīng)。通常表現(xiàn)為皮疹、蕁麻疹、哮喘、發(fā)熱、黏膜水腫等癥狀，有時(shí)甚至?xí)?dǎo)致過(guò)敏性休克等嚴(yán)重后果。 常引起過(guò)敏反應(yīng)的大多是中藥注射劑。造成這種毒性作用的原因之一就是中藥注射劑中所含的大分子動(dòng)、植物蛋白，以及具有抗原或半抗原性質(zhì)的物質(zhì)，如綠原酸、酶、皂苷和角質(zhì)蛋白等。有些中藥如雷公藤Tripterygium wilfordii Hook.

16、f.、防己Stephania tetrandra S. Moore等，還存在不同程度的免疫抑制作用。,8．具有致畸胎、致突變及致癌作用的中藥 有些中藥可干擾胚胎的正常發(fā)育而引起畸胎。具有這種生殖毒性的中藥有雷公藤Tripterygium wilfordii Hook. f.、棉酚（gossypol）、昆明山海棠Tripterygium hypoglaucum（Lévl.）Hutch.、苦瓜Momordica charant

17、ia L.、 川楝子Melia toosendan Sieb.et Zucc.、天花粉蛋白（trichosanthin，TCS）有些中藥可引起基因突變和癌變，如檳榔Areca catechu L.、款冬花Tussilago farfara L.、千里光Senecio argunensis Turcz.、廣防己Aristolochia fangchi Y. C. Wu ex L. D. chou et S. M. Hwang、

18、關(guān)木通Aristolochia manshuriensis Kom.、細(xì)辛Asarum heterotropoides Fr. Schmidt var. mandshuricum（Maxim.）Kitag.、土荊芥Chenopodium ambrosioides L.、雄黃(Realgar)、砒霜(Arsenouse oxide)、土貝母Bolbostemma paniculatum(Maxim.)Franq.、野百合Crotalari

19、a sessiliflora L.等。如果長(zhǎng)期過(guò)量使用這類中藥，可增加基因突變和引發(fā)癌癥的概率。此外，石菖蒲Acorus tatarinowii Schott、花椒Zanthoxylum bungeanum Maxim.、八角茴香Illicium verum Hook. f.等植物所含的黃樟醚（safrole）和青木香Aristolochia debilis Sieb. et Zucc.等所含的N-硝基化合物等，現(xiàn)已證實(shí)可誘發(fā)動(dòng)物產(chǎn)生

20、肝癌。,9．具有內(nèi)分泌系統(tǒng)毒性的中藥 中藥引起內(nèi)分泌毒性的研究報(bào)道不多，但較為明確地是含重金屬中藥對(duì)內(nèi)分泌具有較大的毒性，例如砒霜和朱砂。砷元素破壞人和動(dòng)物的內(nèi)分泌系統(tǒng)，通常是以阻斷或模仿激素的方式來(lái)干擾正常激素的作用。,二、外源性具有毒害作用的物質(zhì)外源性具有毒害作用的物質(zhì)主要來(lái)自中藥材的栽培或養(yǎng)殖、采收加工、包裝、運(yùn)輸和貯藏等環(huán)節(jié)。此外，中藥制劑生產(chǎn)中所涉及到的輔料、提取溶劑、工藝設(shè)備、接觸器皿等也都是外源性有毒副作用物質(zhì)污染的

21、重要途徑。,1．農(nóng)藥類有害物質(zhì) 目前我國(guó)生產(chǎn)和使用的農(nóng)藥主要分為5類：第一類為有機(jī)磷農(nóng)藥，屬磷酸酯類或硫代磷酸酯類化合物，是應(yīng)用最廣泛的農(nóng)藥。長(zhǎng)期少量接觸有機(jī)磷農(nóng)藥會(huì)出現(xiàn)慢性中毒癥狀，表現(xiàn)為神經(jīng)衰弱綜合征——頭痛、頭昏、乏力、惡心、食欲不振、視物模糊。第二類為氨基甲酸酯類農(nóng)藥，屬中低毒性農(nóng)藥?？山?jīng)呼吸道、消化道侵入人體，也可經(jīng)皮膚、黏膜緩慢吸收，中毒癥狀與輕度有機(jī)磷農(nóng)藥中毒相似。第三類為殺蟲脒，皮膚吸收或消化道侵入

22、人體，可直接對(duì)心肌和血管平滑肌引起損害以及嚴(yán)重的高鐵血紅蛋白癥造成缺氧，最終導(dǎo)致組織或器官的損害。第四類為溴氰菊酯（凱嗪靈），毒癥狀主要表現(xiàn)為皮膚刺激，有燒灼感、紅斑、丘疹；神經(jīng)系統(tǒng)癥狀表現(xiàn)為：惡心、嘔吐、腹痛、頭痛、頭昏、乏力、肌肉跳動(dòng)、流涎、視物模糊。第五類為百草枯，毒性非常強(qiáng)，不但損害腎小管，導(dǎo)致蛋白尿、血尿，引起腎功能損害，而且極易引起進(jìn)行性呼吸困難，最終導(dǎo)致呼吸衰竭而死亡，還會(huì)造成心、肝、腎上腺中毒，引起相應(yīng)癥狀和體征。

23、由于中藥的需求量日漸增多，藥農(nóng)們不得不頻繁地使用各種農(nóng)藥，預(yù)防病蟲害，以達(dá)到提高中藥栽培品的產(chǎn)量的目的。因此，造成了中藥中農(nóng)藥的污染嚴(yán)重。,目前，中藥常見(jiàn)的農(nóng)藥殘留（pesticide residues）種類主要有三大類：①有機(jī)氯農(nóng)藥，如六六六（BHC）、滴滴涕（DDT）、及五氯硝基苯（PCNB）等。②有機(jī)磷農(nóng)藥，如敵敵畏、對(duì)硫磷、甲基對(duì)硫磷、樂(lè)果、氧化樂(lè)果、甲胺磷、久效磷、二嗪農(nóng)、乙硫磷、馬拉硫磷、殺撲磷、乙酰甲胺磷等。③擬除蟲

24、菊酯類農(nóng)藥，如氯氰菊酯、氰戊菊酯及溴氰菊酯等。,2．重金屬類有害物質(zhì) 在常見(jiàn)的重金屬元素中，鉛（Pb）、鎘（Cd）、汞（Hg）、砷（As）是目前被公認(rèn)的對(duì)人體最有害的4種元素。這些物質(zhì)的毒性作用主要是通過(guò)與體內(nèi)一系列蛋白質(zhì)、酶和氨基酸內(nèi)的官能團(tuán)上的巰基（-SH）和雙硫鍵（-S-S-）牢固地結(jié)合在一起，從而使蛋白質(zhì)變性，酶失去活性，組織細(xì)胞出現(xiàn)結(jié)構(gòu)和功能上的改變。鉛主要損害造血、消化、神經(jīng)、血液、心血管和泌尿系統(tǒng)。鎘可抑制各種氨基

25、酸脫羧酶、組氨酸酶、淀粉酶、過(guò)氧化物酶的活性，從而使肝、腎等組織中的酶系統(tǒng)正常功能受損。此外，鎘還有致癌、致畸、導(dǎo)致基因突變的作用。汞主要是損害腎臟，造成腎功能衰竭。汞中毒還嚴(yán)重影響人的中樞神經(jīng)系統(tǒng)、使聽(tīng)力減弱、語(yǔ)言失控、四肢麻痹甚至造成癡呆。砷主要是擴(kuò)張毛細(xì)血管，麻痹血管舒張中樞，使腹腔臟器嚴(yán)重充血，引起肝、腎、心等實(shí)質(zhì)臟器的損害。長(zhǎng)期吸收砷化合物會(huì)誘發(fā)肺癌和呼吸道腫瘤。,3．黃曲霉毒素 黃曲霉菌（aspergillus fl

26、avus）含多種黃曲霉毒素（aflatoxins），有強(qiáng)烈的致肝損害和致癌作用。,4．其它外來(lái)雜質(zhì) 中藥在采收、加工和貯藏等過(guò)程中有可能混入其它有毒有害物質(zhì)，如某些中藥在產(chǎn)地加工時(shí)，為了使藥材色澤潔白，防止霉?fàn)€，常在干燥前后用硫黃熏制，造成藥材中二氧化硫（SO2）殘留。除此之外，砂石、泥塊、塵土、明礬、鹽等無(wú)機(jī)化合物以及其它非藥用部位的雜質(zhì)都直接影響著中藥的安全性。因此，中藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中常設(shè)置有專項(xiàng)檢查。,第二節(jié) 中藥安全性評(píng)價(jià)方

27、法,中藥安全性評(píng)價(jià)方法也分為二大類：一類是屬于中藥毒理學(xué)方面的實(shí)驗(yàn)方法。主要分為三個(gè)階段：臨床前的中藥毒理學(xué)研究、臨床中藥毒理學(xué)以及中藥上市后的不良反應(yīng)監(jiān)測(cè)。另一類是物理和化學(xué)分析實(shí)驗(yàn)方法。此類方法主要是利用經(jīng)典的或現(xiàn)代的物理和化學(xué)手段，針對(duì)產(chǎn)生毒副作用的中藥成分和有害物質(zhì)進(jìn)行定性和定量的分析和測(cè)定。,一、農(nóng)藥殘留量的檢查方法及限量指標(biāo)（一）農(nóng)藥殘留量檢測(cè)樣品的處理 1．取樣原則 2．樣品的前處理 常規(guī)的提

28、取純化方法 先進(jìn)的提取方法：固相萃取、固相微萃取、超臨界流體萃取、微波輔助萃取、凝膠滲透色譜和免疫親和色譜等先進(jìn)方法,（二）農(nóng)藥殘留量的測(cè)定方法1．毛細(xì)管氣相色譜測(cè)定法 采用高效能的毛細(xì)管氣相色譜柱（CGC）和火焰光度檢測(cè)器或高靈敏度的電子捕獲器（ECD）分離和檢測(cè)常見(jiàn)的農(nóng)藥的殘留量。具有靈敏度高、選擇性強(qiáng)等特點(diǎn) 。應(yīng)用于中藥中的有機(jī)磷、有機(jī)氯和擬蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量的測(cè)定。,2．氣相-紅外光譜測(cè)定

29、法 可將多種微量的混合農(nóng)藥成分分離又可給出明確的結(jié)構(gòu)信息 。 缺點(diǎn)：①靈敏度較低，檢測(cè)限每組約100ng。②光管的溫度不能高于30℃，否則會(huì)影響色譜柱的溫度，使信號(hào)強(qiáng)度降低，噪聲急劇增長(zhǎng)，造成聯(lián)機(jī)檢測(cè)困難。③譜庫(kù)檢索是GC-FTIR定性的主要方法，而農(nóng)藥的氣相紅外光譜庫(kù)存量很小，嚴(yán)重地影響了檢測(cè)結(jié)果的分析。,（三）農(nóng)藥殘留量的其他測(cè)定方法填充柱氣相色譜法、高效液相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、液

30、相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、超臨界流體色譜法、薄層色譜法、毛細(xì)管電泳色譜法、酶聯(lián)免疫吸附法、流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法、共振光散射比濁法以及基于酶抑制原理的分光光度法等。,（四）限量指標(biāo),《中國(guó)藥典》（2005年版）在甘草和黃芪項(xiàng)下規(guī)定了每2克藥材所含有機(jī)氯類農(nóng)藥限量為：六六六（總BHC）不得過(guò)千萬(wàn)分之二；滴滴涕（總DDT）不得過(guò)千萬(wàn)分之二；五氯硝基苯（PCNB）不得過(guò)千萬(wàn)分之一。,二、重金屬及有害元素的檢查方法及限量指標(biāo) （一）重

31、金屬及有害元素檢測(cè)樣品的前處理 傳統(tǒng)的方法：濕法消化 干法灰化 先進(jìn)的方法：微波消解技術(shù) 梯度升壓微波消解技術(shù),（二）重金屬及有害元素檢測(cè)方法,1．比色法 目前《中國(guó)藥典》（2005年版）中收載的重金屬總量的測(cè)定是比色法。2．原子熒光光度法 砷、銻、硒、鍺

32、、錫、鉛、鋅、汞3．原子吸收分光光度法 分為冷原子吸收法、石墨爐原子吸收法和火焰原子吸收法,（1）冷原子吸收法：冷原子吸收法較適合測(cè)定汞的含量。其主要原理是利用汞在常溫下蒸氣壓較高和在空氣中不易氧化的特點(diǎn)，用還原劑將高價(jià)汞還原成汞蒸氣，汞蒸氣對(duì)其特征譜線（253.7nm）具有強(qiáng)烈吸收作用，用載氣將汞蒸氣吹出，通過(guò)石英吸收池，汞蒸氣對(duì)汞空心陰極燈的輻射產(chǎn)生吸收，從而達(dá)到定量分析的目的。,（2）石墨爐原子吸收法：

33、 較適合于鉛、鎘等重金屬元素。其主要原理是利用電能加熱盛放試樣的石墨容器，使之達(dá)到高溫，以實(shí)現(xiàn)試樣的蒸發(fā)和原子化，達(dá)到原子化的樣品通過(guò)爐內(nèi)光路產(chǎn)生吸收的目的。（3）火焰原子吸收法：銅?；鹧嬖游辗ǖ脑硎抢没瘜W(xué)火焰實(shí)現(xiàn)原子化，使被測(cè)元素由試樣中轉(zhuǎn)入氣相，并解離為基態(tài)原子。原子化器由霧化器、霧化室和燃燒器三分部分組成，霧化器將試液霧滴均勻化，然后再噴入火焰中，使進(jìn)入火焰的微粒原子化。通過(guò)測(cè)定被測(cè)元素的吸收度，計(jì)算出被測(cè)元素的含量。

34、,4．電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（ICP-MS）,原理：將樣品經(jīng)由高頻等離子炬激發(fā)電離后，在電磁場(chǎng)中離子按照質(zhì)荷比進(jìn)行定性和定量，具有譜線簡(jiǎn)單，干擾少、檢出限極低，適應(yīng)范圍寬達(dá)8個(gè)數(shù)量級(jí)和同時(shí)多元素測(cè)定等優(yōu)點(diǎn)。電感耦合等離子體質(zhì)譜配備有溶液進(jìn)樣、電熱蒸發(fā)、激光燒蝕進(jìn)樣系統(tǒng) 。,5．電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜ICP-AES,高頻感應(yīng)電流產(chǎn)生的高溫將反應(yīng)氣加熱、電離、利用元素發(fā)出的特征譜線進(jìn)行測(cè)定，譜線強(qiáng)度與重金屬量成正比。 ICP

35、-AES具有靈敏度高，干擾小，線性寬，可同時(shí)或順序測(cè)定多種元素，特別是對(duì)高溫金屬元素可以進(jìn)行快速分析，但靈敏度較ICP-MS略差，可用于除鎘、汞以外的大多數(shù)重金屬元素的測(cè)定。,6．高效液相色譜法,利用痕量金屬離子與有機(jī)試劑形成穩(wěn)定的有色絡(luò)合物，然后利用HPLC分離，紫外-可見(jiàn)檢測(cè)器檢測(cè)，可實(shí)現(xiàn)多元素的同時(shí)測(cè)定。卟啉類試劑能和多種金屬元素生成穩(wěn)定的絡(luò)合物，且靈敏度較高，因而常用來(lái)作為金屬離子的衍生試劑，但絡(luò)合試劑的選擇有限，使HPLC的

36、廣泛應(yīng)用受到限制。,7．酶抑制法,利用重金屬離子與形成酶活性中心的巰基或甲巰基結(jié)合后，改變了酶活性中心的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)，引起酶活力下降，從而使底物-酶系統(tǒng)中的顯色劑顏色、pH值、電導(dǎo)率和吸光度等發(fā)生變化，這些變化可直接通過(guò)肉眼或借助于電信號(hào)、光信號(hào)等加以區(qū)別。與傳統(tǒng)的重金屬分析方法相比，酶抑制法具有快速、簡(jiǎn)便、對(duì)所分析的樣品需要量少等優(yōu)點(diǎn)，特別適合于重金屬的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。目前由于脲酶廉價(jià)易得，故使用最廣泛。,8．免疫分析法,選用合適的絡(luò)合

37、物或其他化合物與金屬離子結(jié)合，使其獲得一定空間結(jié)構(gòu)，從而產(chǎn)生反應(yīng)原性，然后，將結(jié)合了金屬離子的化合物連接到載體蛋白上，產(chǎn)生免疫原性，再通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附反應(yīng)（ELISA）進(jìn)行檢測(cè)。由于重金屬抗體的制備要求特異性較高，因此在很大程度上限制了重金屬離子免疫分析方法的發(fā)展。,（三）限量指標(biāo),《中國(guó)藥典》（2005年版）在白芍、甘草、黃芪、西洋參、丹參、金銀花等大宗、常用中藥材中首次規(guī)定了：鉛不得過(guò)百萬(wàn)分之五鎘不得過(guò)千萬(wàn)分之三砷不得過(guò)百萬(wàn)分

38、之二汞不得過(guò)千萬(wàn)分之二銅不得過(guò)百萬(wàn)分之二十,三、黃曲霉毒素的檢查方法及限量指標(biāo),（一）檢測(cè)方法 1．薄層色譜法 2．高效液相色譜法 3．其他方法溴化熒光分光光度法（SFB）、競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）、放射免疫測(cè)定法、質(zhì)譜法、熒光偏振免疫測(cè)定法、微柱篩選法,（二）限量指標(biāo),根據(jù)中華人民共和國(guó)對(duì)外貿(mào)易經(jīng)濟(jì)合作部發(fā)布《藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》中的規(guī)定，藥用植物原料、飲片、提取物及其制劑中黃曲霉毒素的限量要求暫定為

39、黃曲霉毒素B1≤5mg/kg。其他相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)黃曲霉毒素的限量要求一般為2~4μg/kg?！吨袊?guó)藥典》（2005年版）暫未作相關(guān)規(guī)定。,第三節(jié) 中藥安全性評(píng)價(jià)的現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢(shì),一、現(xiàn)狀分析及存在問(wèn)題1．對(duì)中藥不良反應(yīng)的相關(guān)研究較為缺乏 。2．現(xiàn)行的安全性評(píng)價(jià)模式不適合評(píng)價(jià)中藥的安全性 3．中藥安全性控制力度不夠,思考題：,你認(rèn)為如何能更好地進(jìn)行中藥的安全性評(píng)價(jià)？,二、未來(lái)發(fā)展趨勢(shì)1．?dāng)U大中藥安全性研究的范圍 2．完善中