精密度評(píng)估指南

1、精密度評(píng)估指南,zhengjinlai@sina.com鄭金來(lái),前言,精密度是衡量體外診斷試劑批內(nèi)和批間變異的重要指標(biāo)，通常包括批內(nèi)和批間不精密度。精密度評(píng)估資料是評(píng)價(jià)擬上市產(chǎn)品有效性的重要依據(jù)，產(chǎn)品注冊(cè)所需的重要申報(bào)資料之一 。,定義,批內(nèi)精密度是眾多種類(lèi)精密度中最基本的一個(gè)，它是在嚴(yán)格的相似條件下，所得到的最佳的精密度。批間精密度指在同一實(shí)驗(yàn)室，由同一（組）操作員在同一儀器上，使用同一方法和同種、同一批號(hào)試劑，在一段時(shí)間

2、內(nèi)(一般為一個(gè)月或20個(gè)工作日)對(duì)同一測(cè)試樣品（常用質(zhì)控品）測(cè)量結(jié)果的精密度。？？？？？？,精密度評(píng)估的基本原則,操作者必須熟悉方法和/或儀器工作原理，了解并掌握儀器的操作步驟和各項(xiàng)注意事項(xiàng)，能在評(píng)估階段維持儀器的可靠和穩(wěn)定。用于評(píng)估試驗(yàn)的樣品一般常采用臨床實(shí)驗(yàn)室收集的穩(wěn)定和冷凍貯存的血清(漿)庫(kù)；當(dāng)實(shí)驗(yàn)室收集的樣品不穩(wěn)定或不易得到時(shí)，也可考慮使用穩(wěn)定的、以蛋白質(zhì)為基質(zhì)的商品物質(zhì)，如校準(zhǔn)品或質(zhì)控品,精密度評(píng)估的基本原則,評(píng)估精密度時(shí)

3、，應(yīng)至少評(píng)估二個(gè)濃度水平樣本的精密度。當(dāng)二個(gè)濃度的精密度有顯著差異時(shí)，建議增加為三個(gè)濃度。所選樣本濃度應(yīng)在測(cè)量范圍內(nèi)有醫(yī)學(xué)意義，即至少有一個(gè)濃度在醫(yī)學(xué)決定水平(medical decision levels)左右。不要為了得到較小的精密度，都選用較高值的樣品，甚至超出測(cè)量范圍。也不應(yīng)選用靠近最低檢出限的樣品，此時(shí)所得的精密度往往偏大。,精密度評(píng)估的基本原則,相當(dāng)多的檢驗(yàn)項(xiàng)目低值常無(wú)實(shí)際臨床意義，但有少數(shù)檢驗(yàn)項(xiàng)目，其低值也有臨床價(jià)

4、值，此時(shí)就需要評(píng)估有判斷價(jià)值的低值精密度，適用時(shí)，可進(jìn)行功能靈敏度的評(píng)估。如沒(méi)有醫(yī)學(xué)決定水平，可在參考區(qū)間上限左右選一個(gè)濃度。此外，再根據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)目的性質(zhì)在線(xiàn)性區(qū)間內(nèi)選擇另一個(gè)值。如與廠商或文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)的精密度進(jìn)行比較，所選濃度應(yīng)與被比較精密度的濃度相接近。否則，有可能得出不恰當(dāng)?shù)慕Y(jié)論。,只評(píng)估批內(nèi)不精密度,試劑和校準(zhǔn)品：應(yīng)使用同一種類(lèi)、同一批號(hào)的試劑和校準(zhǔn)物,如可能,只進(jìn)行一次校準(zhǔn)。使用不同批號(hào)試劑和多次校準(zhǔn)都會(huì)增加檢驗(yàn)結(jié)果的變異程度

5、,只評(píng)估批內(nèi)不精密度,評(píng)估方法：在以上條件滿(mǎn)足的情況下，在一批內(nèi)對(duì)樣本進(jìn)行重復(fù)測(cè)定，至少進(jìn)行20次重復(fù)測(cè)定,只評(píng)估批內(nèi)不精密度,質(zhì)量控制：檢驗(yàn)時(shí)應(yīng)同時(shí)至少測(cè)一個(gè)質(zhì)控品。當(dāng)質(zhì)控品結(jié)果超出規(guī)定的失控限，不論實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否滿(mǎn)意都應(yīng)棄去不用，重新進(jìn)行試驗(yàn)以取得20個(gè)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。要保存所有的質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)和失控處理記錄,只評(píng)估批內(nèi)不精密度,數(shù)據(jù)收集：在進(jìn)行數(shù)據(jù)分析前，檢查數(shù)據(jù)中有無(wú)由于偶然差錯(cuò)引起的離群值(outliers)，可用下述離群值的標(biāo)準(zhǔn)；

6、從已收集的20數(shù)據(jù)計(jì)算出總均值和標(biāo)準(zhǔn)差，任何結(jié)果和總均值的差值超過(guò)4個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差時(shí)，可認(rèn)為是離群值。為了能收集到至少20個(gè)有效數(shù)據(jù)。除補(bǔ)充由于質(zhì)控失控而增加的測(cè)試外，還應(yīng)再增加由于離群值不用于精密度的計(jì)算所需增加的檢驗(yàn)次數(shù)。,只評(píng)估批內(nèi)不精密度,數(shù)據(jù)收集：在進(jìn)行這種批內(nèi)精密度評(píng)估實(shí)驗(yàn)時(shí)，一次只能有一個(gè)離群值，當(dāng)離群值超過(guò)1個(gè)時(shí)，應(yīng)懷疑是否為方法不穩(wěn)定或操作者不熟悉所致。此時(shí)，應(yīng)不用此次試驗(yàn)數(shù)據(jù)。檢查問(wèn)題和解決問(wèn)題后重新開(kāi)始新的評(píng)估實(shí)驗(yàn)

7、,只評(píng)估批內(nèi)不精密度,數(shù)據(jù)的記錄：將所收集到的數(shù)據(jù)記錄在表中,只評(píng)估批內(nèi)不精密度,批內(nèi)精密度估計(jì)值的計(jì)算求出均值： =∑Xi/n使用下列公式計(jì)算出批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差估計(jì)值的標(biāo)準(zhǔn)差精密度？標(biāo)準(zhǔn)差與均值的關(guān)系,只評(píng)估批內(nèi)不精密度,批內(nèi)精密度估計(jì)值的計(jì)算批內(nèi)精密度估計(jì)值的95%可信限查統(tǒng)計(jì)表得出自由度20的上限公差因數(shù)為1.25，相應(yīng)下限公差因數(shù)為0.75，得出批內(nèi)精密度的95%可信區(qū)間為：（批內(nèi)精密度×0.75）-（批內(nèi)精密度&

8、#215;1.25）,同時(shí)評(píng)價(jià)批內(nèi)和批間不精密度,評(píng)估方法：每天做2個(gè)批次的測(cè)試，每批測(cè)試時(shí)，對(duì)同一樣品作雙份測(cè)量，共做20天。評(píng)估結(jié)束時(shí)共有40對(duì)，即80個(gè)測(cè)試結(jié)果。從40批次測(cè)量中雙份結(jié)果的差值求出批內(nèi)精密度。從所有80個(gè)數(shù)據(jù)計(jì)算出批間精密度,同時(shí)評(píng)價(jià)批內(nèi)和批間不精密度,評(píng)估方法：在實(shí)施此項(xiàng)評(píng)估工作時(shí)，必須由同一個(gè)或一組操作者在同一臺(tái)儀器上進(jìn)行，應(yīng)該使用相同的校準(zhǔn)品、相同種類(lèi)和批號(hào)的試劑。所用時(shí)間不得少于20個(gè)工作日，這樣

9、所測(cè)到的精密度能更好地反映出該臨床實(shí)驗(yàn)室定量測(cè)量方法在一段時(shí)間內(nèi)的理想或最適的穩(wěn)定性。 在每一批次測(cè)量中，必須同時(shí)測(cè)量質(zhì)控品，以保證結(jié)果是可靠的，數(shù)據(jù)能夠采用。,同時(shí)評(píng)價(jià)批內(nèi)和批間不精密度,評(píng)估方法：也可以一日進(jìn)行一個(gè)批次測(cè)量，一個(gè)批次中對(duì)同一樣品重復(fù)測(cè)量4次，共測(cè)20個(gè)工作日，由80個(gè)數(shù)據(jù)求出批內(nèi)和批間精密度；如果取得穩(wěn)定樣品有困難，也可改為測(cè)5日，每日2個(gè)批次，每個(gè)批次測(cè)一個(gè)樣本8次。仍有80個(gè)數(shù)據(jù)。從10個(gè)批次中每一樣品8次

10、差異算出批內(nèi)精密度。從所有80個(gè)結(jié)果計(jì)算出批間精密度。,同時(shí)評(píng)價(jià)批內(nèi)和批間不精密度,數(shù)據(jù)的收集要收集到足夠有效數(shù)據(jù)(至少為80個(gè)數(shù)據(jù))。除補(bǔ)充由于質(zhì)控失控而增加的測(cè)試外，應(yīng)在進(jìn)行數(shù)據(jù)分析前，檢查數(shù)據(jù)中有無(wú)由于偶然差錯(cuò)引起的離群值(outlier)，可用下述剔除值的標(biāo)準(zhǔn)。,同時(shí)評(píng)價(jià)批內(nèi)和批間不精密度,數(shù)據(jù)的收集從實(shí)施段已收集的40對(duì)均值的數(shù)據(jù)計(jì)算出總均值和標(biāo)準(zhǔn)差，出現(xiàn)下列任何一種情況都可認(rèn)為是離群值：任何一對(duì)均值和總均值的差超過(guò)4

11、倍標(biāo)準(zhǔn)差任何一對(duì)中二個(gè)結(jié)果的絕對(duì)差值超過(guò)4倍標(biāo)準(zhǔn)差離群值不用于精密度的計(jì)算。在剔除后應(yīng)再增加檢驗(yàn)次數(shù)，以保證至少有40批次，80個(gè)數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算。,同時(shí)評(píng)價(jià)批內(nèi)和批間不精密度,數(shù)據(jù)的收集從實(shí)施段已收集的40對(duì)均值的數(shù)據(jù)計(jì)算出總均值和標(biāo)準(zhǔn)差，出現(xiàn)下列任何一種情況都可認(rèn)為是離群值：任何一對(duì)均值和總均值的差超過(guò)4倍標(biāo)準(zhǔn)差任何一對(duì)中二個(gè)結(jié)果的絕對(duì)差值超過(guò)4倍標(biāo)準(zhǔn)差離群值不用于精密度的計(jì)算。在剔除后應(yīng)再增加檢驗(yàn)次數(shù)，以保證至少有40批次

12、，80個(gè)數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算,同時(shí)評(píng)價(jià)批內(nèi)和批間不精密度,數(shù)據(jù)的收集任何一次實(shí)驗(yàn)的剔除值不能超過(guò)總測(cè)量數(shù)的2.5%。當(dāng)超過(guò)時(shí)，應(yīng)懷疑是否為方法不穩(wěn)定或操作者不熟悉所致。此時(shí)應(yīng)不用此次試驗(yàn)數(shù)據(jù)，重新開(kāi)始新的試驗(yàn)。,同時(shí)評(píng)價(jià)批內(nèi)和批間不精密度,數(shù)據(jù)的記錄,同時(shí)評(píng)價(jià)批內(nèi)和批間不精密度,批內(nèi)精密度的計(jì)算批內(nèi)精密度Sr I=檢驗(yàn)日數(shù),同時(shí)評(píng)價(jià)批內(nèi)和批間不精密度,批間精密度的計(jì)算,同時(shí)評(píng)價(jià)批內(nèi)和批間不精密度,批間精密度的計(jì)算求均值：從上表得出

13、：批間精密度：從上表得出：n=檢驗(yàn)總數(shù),同時(shí)評(píng)價(jià)批內(nèi)和批間不精密度,批間精密度估計(jì)值的置信區(qū)間由于檢驗(yàn)次數(shù)不可能無(wú)限增加，當(dāng)按規(guī)定方案，多次重復(fù)測(cè)量，就是在很好控制條件下，也很難得到相同的值，換言之，通過(guò)這樣實(shí)驗(yàn)的數(shù)值只是精密度的估計(jì)值，圍繞“真值”而變動(dòng)。變動(dòng)的范圍大小和檢驗(yàn)次數(shù)密切相關(guān)。人們往往在給出精密度值外，還給出其95%的置信區(qū)間。,同時(shí)評(píng)價(jià)批內(nèi)和批間不精密度,批間精密度估計(jì)值的置信區(qū)間置信區(qū)間與所測(cè)次數(shù)相關(guān)，次數(shù)

14、愈多，可信限愈小可以查出與檢次數(shù)相關(guān)自由度的0.95因數(shù)，乘以標(biāo)準(zhǔn)差值就可得出95%可信限的上、下值。實(shí)際工作中，可查出95%可信限的上值的公差因數(shù)（tolerance factor），由此計(jì)算出95%可信限。實(shí)驗(yàn)室在報(bào)告精密度同時(shí)，可給出95%置信區(qū)間。,與其它來(lái)源的精密度的比較,臨床實(shí)驗(yàn)室在測(cè)定方法的精密度后，應(yīng)評(píng)價(jià)得到的精密度是否滿(mǎn)意，最簡(jiǎn)單辦法就是與生產(chǎn)企業(yè)（文獻(xiàn)）所提供的精密度進(jìn)行比較，判斷是否存在差異。如果臨床實(shí)驗(yàn)室所

15、測(cè)的精密度小于生產(chǎn)企業(yè)（文獻(xiàn)）的精密度，說(shuō)明臨床實(shí)驗(yàn)室所得到的精密度是合適的。如果臨床實(shí)驗(yàn)室測(cè)得的精密度大于生產(chǎn)企業(yè)（文獻(xiàn)）的值，可利用F-檢驗(yàn)法（F-test），即方差比值檢驗(yàn)（variance ratio test）對(duì)實(shí)驗(yàn)室測(cè)得的結(jié)果和生產(chǎn)企業(yè)提供的結(jié)果進(jìn)行比較計(jì)算 。,與其它來(lái)源的精密度的比較,與生產(chǎn)企業(yè)（文獻(xiàn)）聲明批間標(biāo)準(zhǔn)差的比較表,與其它來(lái)源的精密度的比較,標(biāo)準(zhǔn)差大小常與濃度有關(guān)，比較時(shí)，必須檢查二者濃度是否接近一致，如差異

16、較大不應(yīng)進(jìn)行比較。如接近一致，按下列公式計(jì)算出F值，以批間精密度為例。F=Srr2/σrr2計(jì)算出的F值和根據(jù)二組自由度從下表中查到的F值(p=0.05)進(jìn)行比較，如計(jì)算F值小于查表得出F值，雖然實(shí)驗(yàn)室得到的標(biāo)準(zhǔn)差大于聲稱(chēng)值，但在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)差異。反之，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)室得到的標(biāo)準(zhǔn)差沒(méi)有達(dá)到方法應(yīng)達(dá)到的水平,與其它來(lái)源的精密度的比較,精密度的報(bào)告形式,在報(bào)告測(cè)量精密度時(shí)，應(yīng)同時(shí)說(shuō)明下列各點(diǎn)批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差及其95%置信區(qū)間；批內(nèi)變異系數(shù);批間