氧樂果降解菌的分離選育、生長和降解特性研究.pdf

1、氧樂果是目前我國廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中防治病蟲害的有機(jī)磷農(nóng)藥。然而由于氧樂果用量大、毒性強(qiáng)，造成了環(huán)境污染，影響了生態(tài)平衡并危害人類健康。因此研究氧樂果污染的治理具有重要的意義。微生物降解具有操作簡單，成本低于物理化學(xué)方法，效果好，對污染物氧化比較完全等優(yōu)點(diǎn)，成為降解有機(jī)磷農(nóng)藥的重要途徑。本研究從農(nóng)藥廠廢水處理站的活性污泥和受氧樂果污染的土壤中，通過富集培養(yǎng)、分離和純化，獲得了18株具有氧樂果降解能力的菌株，其中細(xì)菌12株，真菌6株。通過

2、氧樂果降解率的測定，篩選出具有較強(qiáng)降解能力的真菌菌株YF-3和細(xì)菌菌株YB-10。菌株YF-3能以氧樂果為唯一碳源和能源生長，菌株YB-10不能以氧樂果為唯一碳源和能源生長，通過共代謝方式降解氧樂果，5d降解率分別為68.34％和73.81％。經(jīng)鑒定，菌株YF-3歸類為曲霉屬，菌株YB-10歸類為芽孢桿菌屬。主要研究內(nèi)容包括：
　?、盘接懥搜鯓饭跏紳舛?200 mg·L-1-5000 mg·L-1)和葡萄糖濃度(200mg·L-

3、1-10000 mg·L-1)對降解菌生長的影響。結(jié)果表明，菌株YF-3最適生長的氧樂果初始濃度為1000 mg·L-1，低于1000 mg·L-1，隨著提供碳源的氧樂果濃度的增大，生長量增加，而高濃度時，抑制菌體的生長。菌株YB-10生長停滯期隨氧樂果濃度的增大而延長，氧樂果相對低濃度(200 mg·L-1-1000 mg·L-1)時，隨著濃度增大，對菌株YB-10的生長影響不大，菌體的生長趨于穩(wěn)定，高濃度時毒性增大，抑制菌體的生長。

4、菌株YF-3和菌株YB-10的生長量隨葡萄糖濃度的增加而增大。
　?、蒲芯苛藴囟取H值、裝液量對降解菌生長的影響。結(jié)果表明，菌株YF-3在含氧樂果1000 mg·L-1的培養(yǎng)基中，最適生長條件為溫度35℃，pH6.5，250 mL三角瓶裝液量100 mL，最佳條件下，72h菌體干重最大為3.984 mg·mL-1。菌株YB-10在葡萄糖1500 mg·L-1、氧樂果1000 mg·L-1的培養(yǎng)基中，最適生長條件為溫度30℃，pH

5、7.0，250 mL三角瓶裝液量100 mL，最佳條件下，36h菌體OD600值最大為1.097。
　?、茄芯苛搜鯓饭跏紳舛?200 mg·L-1-5000 mg·L-1)、葡萄糖濃度(200 mg·L-1-10000mg·L-1)、溫度、pH值、裝液量對菌株YF-3降解氧樂果的影響。結(jié)果表明，隨著氧樂果濃度的增大，降解率減小。添加低濃度的葡萄糖，能促進(jìn)菌株YF-3對氧樂果的降解。最適降解條件為pH7.0、溫度35℃、250 m

6、L三角瓶裝液量100 mL。在最佳降解條件下，5d氧樂果由1000 mg·L-1降到297 mg·L-1，降解率達(dá)到70.34％，添加300 mg·L-1的葡萄糖，能促進(jìn)菌株YF-3對氧樂果的降解，降解率提高到72.16％。
　?、葘闥B-10培養(yǎng)基的碳源、氮源、磷源種類和濃度進(jìn)行了單因素試驗(yàn)研究。結(jié)果表明，培養(yǎng)基的最適碳源、氮源、磷源分別為葡萄糖、NH4N03、KH2P04。在各自一定的濃度范圍內(nèi)，氧樂果降解率隨葡萄糖、NH

7、4N03、KH2P04濃度的增加而增大，但當(dāng)超過某一濃度時，降解率降低。并在此基礎(chǔ)上，確定了響應(yīng)面分析法優(yōu)化培養(yǎng)基的中心試驗(yàn)點(diǎn):葡萄糖1.5g·L-1、NH4NO30.5g·L-1、KH2PO41.0 g·L-1。結(jié)果通過二次回歸正交旋轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)確定培養(yǎng)基中碳源、氮源和磷源的最佳濃度為葡萄糖1.455g·L-1, NH4NO30.535 g·Lq, KH2PO40.965 g·L-1。
　　⑸研究了氧樂果初始濃度(200 mg·L-1