項目二藥物分析

1、,項目二 藥物的鑒別,項目二 藥物的鑒別,【學習目的】通過藥物鑒別的學習，能夠明確藥物鑒別的內(nèi)容、熟知常用物理常數(shù)測定方法和藥物鑒別的方法，為完成藥物及其制劑的外觀觀察、常用物理常數(shù)測定、已知藥物鑒別等檢測技術，奠定基礎知識與基本技能。,,,【知識要求】掌握藥物鑒別的概、目的和主要內(nèi)容。掌握藥物鑒別的常用方法。掌握藥物性狀、鑒別項下描述的指標的含義；藥物性狀的內(nèi)容,（外觀、溶解度和物理常數(shù)）；常見化學鑒別法的原理與技術；分光光度

2、法及色譜法鑒別藥物的原理、方法和應用。,【技能要求】,,,能夠正確理解《中國藥典》（2010年版）、其他國家標準和行業(yè)標準對藥物鑒別的要求；,熟練應用藥物鑒別的常用方法對藥物進行鑒別，學會藥物物理常數(shù)的測定方法；并依據(jù)標準和測定結果判斷藥物的真?zhèn)巍?項目二 藥物的鑒別,,任務1,,藥物鑒別概述,一、藥物鑒別的概念及目的 藥物的鑒別（identification）是根據(jù)藥品質(zhì)量標準中規(guī)定的技術指標，依據(jù)藥物的組成、結構與性質(zhì)，

3、采用化學、物理化學或生物學等方法來判斷已知藥物真?zhèn)蔚姆椒?。在進行藥物分析時，首先應對藥品進行鑒別，以判斷藥物的真?zhèn)?。只有在鑒別無誤的前提下，方可進行雜質(zhì)檢查和含量測定，所以它是藥物分析工作中的首項任務。 藥品質(zhì)量標準中藥品項下的鑒別方法，僅適用于貯藏在有標簽容器中的藥物的鑒別，用以證實是否為其所標示的藥物。這些試驗方法一般不能鑒別未知物。,,,任務1,藥物鑒別概述,二、藥物鑒別的特點（1）藥品質(zhì)量標準中，鑒別試驗包括性狀和鑒別

4、兩大項目，性狀項下記載藥品的外觀、臭、味、一般穩(wěn)定性、溶解度以及物理常數(shù)等。（2）鑒別項下規(guī)定的試驗方法，系根據(jù)反映該藥品某些物理、化學或生物學等特性所進行的藥物鑒別試驗，不完全代表對該藥品化學結構的確證。（3）根據(jù)藥物的結構與性質(zhì)，一個藥品理論上可有多種鑒別方法（4）原料藥與制劑的鑒別，在方法的選擇上基本相同。一般制劑需經(jīng)一定方法處理后，再按原料藥鑒別方法進行。,,,任務1,藥物鑒別概述,三、鑒別試驗的條件 鑒別試驗

5、所采用的方法，必須有一定的專屬性，結果易于觀察，有明顯的的特征變化， 需要在規(guī)定條件下進行，注意影響因素。影響鑒別的因素主要有溶液的濃度、反應溫度、溶液的酸堿度、反應時間、干擾成分等,,任務1,藥物鑒別概述,（一）溶液的濃度（二）反應的溫度（三）溶液的酸堿度（四）反應時間（五）干擾成分（六）反應介質(zhì),三、鑒別試驗的條件,藥物鑒別的內(nèi)容,任務2,,,藥物鑒別的內(nèi)容一般分藥物的性狀、一般鑒別試驗、專屬鑒別試驗三個方面，

6、鑒別方法有化學反應鑒別法、光譜鑒別法、色譜鑒別法和生物學鑒別法等。一般來說，無機藥物采用陰、陽離子的特殊反應進行鑒別；有機藥物大都采用官能團反應鑒別。,藥物鑒別的內(nèi)容,任務2,,一、藥物的性狀 藥物的性狀是控制藥物質(zhì)量的指標之一，它反映藥物特有的物理性質(zhì)，對于其真?zhèn)蔚?鑒別有一定的意義。性狀觀測是藥品檢驗工作的第一步，也是不可省略的極其重要的一步。若藥物的外觀性狀（色、臭、味）、溶解度、物理常數(shù)與藥品質(zhì)量標準中“性狀”項

7、下不相符時，不需進行鑒別、檢查和含量測定，就可判定為藥品外觀性狀不符合規(guī)定。（一）外觀性狀（二）溶解度,藥物鑒別的內(nèi)容,任務2,,二、一般鑒別試驗 一般鑒別試驗（general identification test）是根據(jù)某一類藥物化學結構及其理化性質(zhì)，通過化學反應來鑒別其真?zhèn)蔚姆椒ā＿x擇一般鑒別試驗方法的原則是：專屬性強，重現(xiàn)性好，靈敏度高，操作簡便、快速。無機藥物主要根據(jù)其組成中的陰離子和陽離子的進行鑒別；有機藥物則大

8、都采用官能團反應來鑒別。《中國藥典》（2010年版）將正文中含有同一離子或具有某一基團的藥物共有的化學反應，歸納于藥典附錄中，作為各藥品正文鑒別項下的組成部分。,藥物鑒別的內(nèi)容,任務2,（一）鈉鹽 （二）鉀鹽 （三）氯化物 （四）溴化物 （五）碘化物 （六）硫酸鹽（七）硝酸鹽（八）磷酸鹽（九）醋酸鹽（十）有機氟化物,二、一般鑒別試驗,藥物鑒別的內(nèi)容,任務2,,三、專屬鑒別試驗 專屬鑒別試驗（spec

9、ific identification test）是根據(jù)藥物化學結構中的特殊官能團所具有的特有化學性質(zhì)，選擇靈敏的定性反應，來鑒別藥物真?zhèn)蔚姆椒??！吨袊幍洹罚?010年版）對藥物進行鑒別時，既有一般鑒別試驗，又有專屬鑒別試驗：如苯巴比妥，結構中有丙二酰脲母核，是巴比妥類共有的基團，藥典規(guī)定用銀鹽反應和銅鹽反應鑒別丙二酰脲基團，此為一般鑒別試驗，是巴比妥類共有的反應；苯巴比妥C5有苯環(huán)取代，藥典采用亞硝酸鈉-硫酸試液和甲醛-硫酸試液檢視

10、其苯環(huán)，此為專屬鑒別反應，未有苯環(huán)取代的巴比妥類無此反應。,物理常數(shù)是藥物性質(zhì)的重要特征常數(shù)，不同藥物因分子結構及聚集狀態(tài)不同，物理常數(shù)也不同，但一定條件下是定值。是評價藥品質(zhì)量的主要指標之一。測定物理常數(shù)既可判斷藥物的真?zhèn)危挚煞从吃撍幤返募兌?，還可用于某些藥物的含量測定?！吨袊幍洹罚?010年版）附錄收載的物理常數(shù)包括相對密度、餾程、熔點、凝點、比旋度、折光率、黏度、吸收系數(shù)、pH值碘值、皂化值、羥值和酸值等。,,任務3,物理常數(shù)

11、測定,,任務3,物理常數(shù)測定,,一、相對密度測定法 相對密度系指在相同的溫度、壓力條件下，某物質(zhì)的密度與參考物質(zhì)（水）的密度之比。組成一定的藥品相對密度是一定值，當其組分或純度變更，相對密度亦隨之改變；因此，測定相對密度，可以鑒別或檢查藥品的純雜程度?！吨袊幍洹罚?010年版）附錄Ⅵ A收載的相對密度測定方法有二：比重瓶法和韋氏比重秤法，液體藥物相對密度一般用比重瓶測定，易揮發(fā)液體的相對密度可用韋氏比重秤。（一）比重瓶法

12、（二）韋氏比重秤法,,任務3,物理常數(shù)測定,,二、餾程測定法 當液體蒸氣壓隨溫度升高而增大到與外界大氣壓相等時，液體沸騰，此時的溫度稱為沸點。純物質(zhì)一般具有固定的沸點，不純的物質(zhì)其沸點往往為一個區(qū)間，稱為沸點范圍或餾程，是物質(zhì)的重要物理常數(shù)之一。《中國藥典》（2010年版）二部附錄Ⅵ B的餾程系指某種液體依照藥典方法蒸餾，校正到標準壓力[101.3kPa（760mmHg）]下，自開始餾出第5滴算起，至供試品僅剩3～4

13、mL或一定比例的容積餾出時的溫度范圍。某些液體藥品在一定壓力下有一定的餾程，可以用來鑒別和純度檢查。,,任務3,物理常數(shù)測定,,三、熔點測定法 熔點系指一種物質(zhì)按照規(guī)定的方法測定由固相熔化成液相時的溫度,是物質(zhì)的一項物理常數(shù)。依法測定熔點，可以鑒別或檢查藥品的純雜程度。特別是當一個藥物有多種晶型時更有意義，因為熔點在一定程度上反映了物質(zhì)固態(tài)時的格子力，而格子力的大小與分子間的作用力、分子結構、晶型有關，結晶型固體藥物化學結構相

14、同，晶型不同，療效也不同，通過熔點測定判斷晶型，具有臨床意義。,,任務3,物理常數(shù)測定,,四、旋光度測定法相關知識 當平面偏振光通過含有光學活性物質(zhì)（如具有不對稱碳原子的化合物）的溶液時，偏振光的平面發(fā)生旋轉(zhuǎn)，偏振光旋轉(zhuǎn)的度數(shù)，稱為旋光度（α）。該現(xiàn)象稱為旋光現(xiàn)象。右旋用“+”，左旋“-”。,,任務3,物理常數(shù)測定,,五、折光率測定法 折光率是藥物的物理常數(shù)，可用于液體藥品，尤其是植物油的鑒別、純度檢查和含量測定。相關知

15、識 光線自一種透明介質(zhì)進入另一種透明介質(zhì)時，由于兩種介質(zhì)的密度不同，光的進行速度發(fā)生變化，即發(fā)生光的折射現(xiàn)象。一般折光率系指光線在空氣中進行的速度與在供試品中進行速度的比值。根據(jù)折射定律，光線入射角的正弦值與光線折射角的正弦值的比值即為折光率。,第一介質(zhì),第二介質(zhì),折射線,,,任務3,物理常數(shù)測定,六、pH值測定法 由于待測物的電離常數(shù)、介質(zhì)的介電常數(shù)和液接界電位等諸多因素均可影響pH值的準確測量，所以測得的數(shù)值

16、只是溶液的表觀pH值，不能作為溶液氫離子活度的嚴格表征。但只要待測溶液與標準溶液的組成足夠接近，測得的pH值與溶液的真實pH值頗為接近。,藥物的鑒別方法,任務4,,藥物的鑒別方法要求專屬性強，重現(xiàn)性好，靈敏度高，以及操作簡便、快速等。常用鑒別方法有化學鑒別法，分光光度法以及色譜法等。,藥物的鑒別方法,任務4,,一、化學鑒別法 化學鑒別法是根據(jù)藥物與化學試劑在一定條件下發(fā)生反應而產(chǎn)生不同的顏色，或生成不同沉淀，或產(chǎn)生不同熒光，或放

17、出不同的氣體，從而做出定性分析結論的方法。如果供試品的反應現(xiàn)象和藥品質(zhì)量標準中相應的鑒別項目的反應現(xiàn)象相同,則認定為同一種藥物?；瘜W鑒別法的反應迅速、現(xiàn)象明顯、實驗成本較低且應用廣泛，但其專屬性較差。（一）常用的化學鑒別法（二）注意事項,藥物的鑒別方法,任務4,,二、分光光度鑒別法 分光光度法是通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)的吸光度或發(fā)光強度，對該物質(zhì)進行定性和定量分析的方法。《中國藥典》中常用來進行鑒別的分光

18、光度法有紫外-可見分光光度法、紅外分光光度法。（一）紫外—可見分光光度法 （二）紅外分光光度法,藥物的鑒別方法,任務4,,三、色譜鑒別法色譜鑒別法是利用不同物質(zhì)在不同色譜條件下，產(chǎn)生各自的特征色譜行為（比移值或保留時間）進行的鑒別實驗。在相同的條件下，試樣與對照品（或經(jīng)確證的已知藥品）的色譜行為時一致的。據(jù)此，可對藥物進行鑒別。但此法操作費時，藥物在檢查或含量測定項下已經(jīng)采用色譜法時，常用該法鑒別藥物的真?zhèn)?。常用的方法有薄?/p>

19、色譜鑒別法、氣相色譜和高效液相色譜鑒別法等。（一）薄層色譜鑒別法（二）氣相色譜和高效液相色譜鑒別法,實訓1 異煙肼的熔點測定,【實訓要求】1.掌握藥物鑒別試驗的常用方法。2.掌握藥物鑒別試驗原理與藥物結構特點及理化性質(zhì)之間的關系。,實訓1 異煙肼的熔點測定,【實訓內(nèi)容】 藥物的鑒別是根據(jù)藥物的組成、結構與性質(zhì)，采用化學物理化學或生物學等方法來判斷藥物的真?zhèn)蔚姆椒?。主要包括藥物的性狀、一般鑒別試驗和專屬鑒別試驗。其

20、中一般鑒別試驗是根據(jù)某一類藥物化學結構的特征,實訓1 異煙肼的熔點測定,【實訓思考題】1.加熱的快慢為什么會影響熔點？加熱在什么情況下可以快一些，什么情況下需要慢一些？2.兩個樣品的熔點相同，能否確定它們是同一種物質(zhì)？3.測定熔點時，下列情況對實驗結果有何影響？4.能否使用第一次測定熔點時已經(jīng)熔化了的有機化合物做第二次測定？為什么？,【實訓要求】1．掌握藥物鑒別試驗的常用方法。2．掌握藥物鑒別試驗的原理與藥物結構特點及理

21、化性質(zhì)之間的關系。,,實訓2 典型藥物的一般鑒別試驗,實訓2 典型藥物的一般鑒別試驗,,【實訓內(nèi)容】藥物的鑒別是根據(jù)藥物的組成、結構與性質(zhì)，采用化學、物理化學或生物學等方法來判斷藥物的真?zhèn)蔚姆椒?。它是藥物分析工作中的首項任務。藥物的鑒別，在藥品質(zhì)量標準中主要包括性狀、一般鑒別試驗和專屬鑒別試驗。常用的方法有化學鑒別法、光譜鑒別法、色譜鑒別法和生物學方法等。,實訓2 典型藥物的一般鑒別試驗,,【實訓思考題】1．為什么鈉鹽的焰色反

22、應只有當強烈的黃色火焰持續(xù)數(shù)秒不退才能確認是正反應？2．寫出硫酸阿托品與硝酸的反應式，其反應產(chǎn)物與氫氧化鉀的反應式。3．寫出苯巴比妥與硝酸的反應式。,實訓3 紫外-可見分光光度法鑒別布洛芬,【實訓要求】,1．了解布洛芬的紫外-可見分光光度法鑒別的原理,2．掌握布洛芬的紫外-可見分光光度法鑒別方法。,實訓3 紫外-可見分光光度法鑒別布洛芬,【實訓內(nèi)容】,根據(jù)布洛芬的化學結構特點及其理化性質(zhì)，利用光譜特征對其進行鑒別。,供試品溶

23、液的配置；吸收光譜譜圖的繪制；通過對比吸收光譜特征數(shù)值的一致性鑒別布洛芬,實訓3 紫外-可見分光光度法鑒別布洛芬,【實訓思考題】,1．本實驗中為什么要用0.4%氫氧化鈉溶液溶解布洛芬供試品？2．計算本實驗中布洛芬在264 nm和273 nm處的 各為多少？,3. 采用紫外-可見分光光度法對藥物進行鑒別時，還有那些常用的方法？試舉例說明。,實訓4 薄層色譜法鑒別鹽酸環(huán)丙沙星,【實訓要求】,1.了解鹽酸環(huán)丙沙星的薄層色譜法鑒別的原理。

24、,2.掌握鹽酸環(huán)丙沙星的薄層色譜法,實訓4 薄層色譜法鑒別鹽酸環(huán)丙沙星,【實訓內(nèi)容】,根據(jù)鹽酸環(huán)丙沙星的化學結構特點及其理化性質(zhì)，利用其特征色譜行為對鹽酸環(huán)丙沙星進行鑒別。,（1）檢驗的同時及時做好各項原始記錄，對檢驗數(shù)據(jù)進行相關計算和結果分析。（2）按照企業(yè)實際要求開具檢驗報告單。,實訓4 薄層色譜法鑒別鹽酸環(huán)丙沙星,【實訓思考題】,1．薄層板在使用前為什么要活化？2．點樣時怎樣做才可以保證樣點直徑為2 ~4 mm？,3．預飽