新生兒遺傳性耳聾基因篩查項(xiàng)目

1、新生兒遺傳性耳聾基因篩查項(xiàng)目,博奧生物集團(tuán)有限公司生物芯片北京國(guó)家工程研究中心北京博奧晶典生物技術(shù)有限公司,Contents,目錄,,目 錄,,,Contents,我國(guó)殘疾人群：8502萬(wàn) 聽(tīng)力殘疾人群：2054萬(wàn)數(shù)據(jù)來(lái)自：《關(guān)于使用2010年末全國(guó)殘疾人總數(shù)及各類(lèi)、不同殘疾等級(jí)人數(shù)的通知》，2012.3.5,4,2010年末各類(lèi)殘疾人比例,聽(tīng)力殘疾比例高,,1.中國(guó)出生缺陷防治報(bào)告（2012）2.中國(guó)聽(tīng)力論壇（2

2、013）,80%的聾兒出生在聽(tīng)力正常的家庭,5,每年新增3.5萬(wàn)先天性聾兒【1】每年新增3-4萬(wàn)遲發(fā)性聾兒【2】,我國(guó)耳聾出生缺陷現(xiàn)狀,,6,耳 聾,非綜合征型（70%）,遺傳因素 （約60%）,常染色體隱性（80%）,環(huán)境因素（約20%）,綜合征型（30%）,Alport 綜合征Pendred綜合征Waardenburg綜合征BOR綜合征Usher綜合征……等,細(xì)菌感染病毒感染耳毒性藥物外傷磕碰聲損傷

3、……,,常染色體顯性（15%-20%）,性連鎖（< 1%）,線(xiàn)粒體 （< 1%）,不明原因（約20%）,,很可能是遺傳因素,,,,,,,,,,,Journal of Audiology and Speech Pathology. 2011,19(1):73-77,遺傳是耳聾最大病因,,7,流調(diào)單位：301醫(yī)院聾病分子診斷中心流調(diào)范圍：全國(guó) 28 個(gè)省市樣品規(guī)模：10880 例,正常人群中攜帶耳聾基因突變比例約為5%,

4、四大致聾基因,,8,GJB2基因：——先天性重度以上感音神經(jīng)性耳聾；當(dāng)GJB2基因發(fā)生純合突變時(shí)，患者出生即表現(xiàn)出耳聾癥狀；進(jìn)行人工耳蝸移植效果良好SLC26A4基因（PDS基因）：——大前庭水管綜合征（EVAS），當(dāng)患者患感冒、頭部受打擊時(shí)，聽(tīng)力急劇下降；避免顱壓增大，使用改善微循環(huán)藥物和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)藥治療線(xiàn)粒體基因突變：——氨基糖甙類(lèi)藥物敏感性耳聾；患者使用氨基糖甙類(lèi)藥物會(huì)導(dǎo)致重度耳聾的發(fā)生；母系家族成員應(yīng)杜絕使用氨基糖甙類(lèi)抗

5、生素藥物GJB3基因：——后天高頻感音神經(jīng)性耳聾；表現(xiàn)為后天突發(fā)性耳聾；進(jìn)行人工耳蝸移植效果良好,基因型與致病關(guān)系,新生兒篩查耳聾基因意義,及早確診先天性耳聾，避免由聾致啞及早發(fā)現(xiàn)遲發(fā)性耳聾，通過(guò)生活指導(dǎo)，避免或延緩耳聾發(fā)生及早發(fā)現(xiàn)藥物性耳聾，終身禁用耳毒性藥物，并預(yù)防家族成員發(fā)生藥物性耳聾遺傳咨詢(xún),9,,,先天性聾兒,及早安裝助聽(tīng)器或人工耳蝸植入避免孩子由聾致啞,,,遲發(fā)性聾兒,,通過(guò)生活指導(dǎo)避免或延緩耳聾發(fā)生,,,,,

6、終身禁用耳毒性藥物并預(yù)防家族成員發(fā)生藥物性耳聾,藥物性聾兒,10,高危新生兒的干預(yù)措施,,,目前，新篩項(xiàng)目已經(jīng)在北京、成都、長(zhǎng)治、南通、固始、鄭州等地方開(kāi)展,開(kāi)展地區(qū),11,全國(guó)新篩項(xiàng)目開(kāi)展情況,12,全國(guó)受益新生兒達(dá)到100萬(wàn)例！,全國(guó)新篩項(xiàng)目開(kāi)展情況,目 錄,,,Contents,晶芯®九項(xiàng)遺傳性耳聾基因檢測(cè)試劑盒,四個(gè)基因的9個(gè)突變位點(diǎn)：GJB2 35 del G、176 del 16、235 del C和2

7、99 del AT； SLC26A4 IVS7-2 A>G、2168 A>G；線(xiàn)粒體12s rRNA 1555 A>G、1494 C>T，GJB3 538 C>T針對(duì)中國(guó)人設(shè)計(jì)，指標(biāo)覆蓋了國(guó)人中98%GJB2, 50%PDS, 90%藥物性耳聾患者。,快 速：8小時(shí)靈 敏：2-20 ng/μL 高通量：同時(shí)檢9個(gè)位點(diǎn)準(zhǔn) 確：與測(cè)序驗(yàn)證相符率100%,14,檢測(cè)流程,

8、15,血片接收及血斑提取,2.5 h,核酸擴(kuò)增,3.5 h,芯片雜交及清洗,2h,芯片掃描及結(jié)果判讀,,5 min,,,16,芯片及質(zhì)控,,QC：表面化學(xué)質(zhì)控探針 BC：空白對(duì)照探針PC：雜交陽(yáng)性對(duì)照探針 MC：磁珠質(zhì)控探針I(yè)C：基因擴(kuò)增內(nèi)對(duì)照探針 NC：陰性對(duì)照探針,野生型探針,突變型探針,,,質(zhì)量控制,17,通過(guò)芯片內(nèi)質(zhì)控與室內(nèi)、室間質(zhì)量控制，完全能夠滿(mǎn)足臨床對(duì)準(zhǔn)確性、一致性的需求！,檢測(cè)結(jié)果展示,18,先天性

9、聾,235 純合,1555均質(zhì),299 雜合,攜帶者,藥物聾敏感,2168/IVS7-2復(fù)合雜合,先天性聾,,,,,結(jié)果發(fā)放,19,,,,結(jié)果上傳,短信發(fā)送,上網(wǎng)查結(jié)果,醫(yī)院就診,報(bào)告打印,,醫(yī)院就診,,電話(huà)回訪(fǎng),,北京,鄭州,目 錄,,,Contents,采血所需物品,21,同代謝病篩查采集血片要求！,采血流程,22,,,分娩機(jī)構(gòu),信息登記,采血,晾干標(biāo)本,血片遞送,市婦幼保健院,,,,,,簽署知情同意書(shū),,采血實(shí)施,23,（一）

10、簽署知情同意書(shū)采血前將本次篩查的項(xiàng)目、條件、方式、費(fèi)用等情況如實(shí)告知新生兒的監(jiān)護(hù)人、遵循知情選擇的原則。,采血實(shí)施,24,（二）信息登記 同代謝性疾病篩查： 認(rèn)真填寫(xiě)采血卡片，做到字跡清楚、登記完整。并注意在填寫(xiě)過(guò)程中不要污染濾紙片?？ㄆ瑑?nèi)容包括：公/自費(fèi)、采血單位、母親姓名、住院號(hào)、新生兒性別、出生日期、采血日期、居住地址、聯(lián)系電話(huà)和采血人等信息。,采血實(shí)施,25,（三）規(guī)范采血采血時(shí)間：與代謝性疾病同時(shí)采血方式：同

11、代謝性疾病合格要求：不少于2個(gè)血斑 直徑大于8mm 血斑自然滲透，濾紙正反面血斑一致血斑無(wú)污染,不合格血片展示,26,酒精污染的血斑，出現(xiàn)滲血環(huán),組織液污染,樣本過(guò)少，滲透不良,樣本過(guò)多,采血實(shí)施,27,（四）血片遞送與保存1、采血單位 采血完成后制成干血片，完成初級(jí)質(zhì)控，集中放入自封袋，封好封口，以防霉變，放入專(zhuān)用運(yùn)輸包，與代謝性疾病篩查血片同時(shí)送區(qū)縣婦幼，并

12、做好交接登記。2、市婦幼保健院 完成血片二級(jí)質(zhì)控后，干燥密封保存，放入專(zhuān)用運(yùn)輸包，遞送到篩查單位，并做好交接登記。3、篩查單位 完成交接，對(duì)血片進(jìn)行三級(jí)質(zhì)控后，進(jìn)行檢測(cè)并長(zhǎng)期保存血片（2-8℃）。 因特殊情況未按期采血或不合格標(biāo)本退回需要重新采血者，應(yīng)當(dāng)及時(shí)預(yù)約或追蹤采集血片。,目 錄,,,Contents,耳聾遺傳咨詢(xún)意義,29,減輕患者身體和精神上的痛苦；減輕患者及其親屬的心

13、理壓力；幫助他們正確對(duì)待遺傳性耳聾、了解發(fā)病概率；采取正確的預(yù)防、治療措施，從而最終降低人群遺傳性耳聾的發(fā)病率；,意義：,耳聾遺傳咨詢(xún)對(duì)象,30,1. 已生育聾兒的正常夫婦詢(xún)問(wèn)再發(fā)風(fēng)險(xiǎn)者；2. 有耳聾家族史的正常夫婦，擔(dān)心后代會(huì)遺傳此病者；3. 未婚或已婚的男女雙方均為聾啞人或其中一人為聾啞人，需要給予婚前婚配指導(dǎo)或婚后生育指導(dǎo)者；4. 新生兒耳聾患者，指導(dǎo)用藥及生活指導(dǎo)； 此外，由于耳聾基因在正常

14、人群中也有一定的攜帶率，因此有婚配或生育要求但無(wú)耳聾家族遺傳史的正常人也在耳聾遺傳咨詢(xún)服務(wù)對(duì)象范圍內(nèi)。,遺傳咨詢(xún)工作流程,31,第一步：樣本芯片檢測(cè)結(jié)果報(bào)告發(fā)送郵寄或者短信發(fā)送 第二步：整理需要電話(huà)追訪(fǎng)的名單新生兒耳聾基因?qū)嶒?yàn)室檢測(cè)及報(bào)告發(fā)送完成后，整理并打印GJB2、SLC26A4、12S rRNA、GJB3基因突變攜帶者列表清單 第三步：電話(huà)追訪(fǎng)并記錄追訪(fǎng)結(jié)果確認(rèn)新生兒家長(zhǎng)收到報(bào)告并告知查看篩查結(jié)果對(duì)于需要和希望進(jìn)行門(mén)診

15、復(fù)診的新生兒及家長(zhǎng)，追訪(fǎng)中告知其來(lái)診的預(yù)約方式及就診時(shí)間、流程等初次追訪(fǎng)失敗的，記錄追訪(fǎng)時(shí)間及失敗原因，需進(jìn)行隨后的第二次電話(huà)追訪(fǎng)，若第三次追訪(fǎng)失敗，送約定部門(mén),遺傳咨詢(xún)工作流程,32,第四步：電話(huà)遺傳咨詢(xún)工作身份確認(rèn)：篩查編號(hào)、母親姓名、出生醫(yī)院聽(tīng)力檢測(cè)是否通過(guò)？是否有耳聾家族史？聽(tīng)力未通過(guò)者來(lái)門(mén)診復(fù)診聽(tīng)力通過(guò)者定期（每3月-半年）測(cè)查聽(tīng)力至3歲或到門(mén)診進(jìn)行聽(tīng)力復(fù)診和遺傳咨詢(xún)繪制藥物相關(guān)耳聾基因攜帶者母系家族譜，記錄家族中

16、已有聽(tīng)障者的發(fā)病年齡、原因、聽(tīng)力狀況，并通知其領(lǐng)取致聾藥物卡片等,遺傳咨詢(xún)工作流程,33,第五步：門(mén)診復(fù)診新生兒遺傳咨詢(xún)工作登記復(fù)診新生兒耳聾基因篩查結(jié)果、編號(hào)、聽(tīng)力篩查是否通過(guò)，詢(xún)問(wèn)有無(wú)聽(tīng)力障礙家族史有家族史者繪制家系圖；繪制藥物相關(guān)耳聾基因攜帶者母系家系圖，記錄家族中已有聽(tīng)障者的發(fā)病年齡、原因、聽(tīng)力狀況，并通知其領(lǐng)取致聾藥物卡片等OAE聽(tīng)力測(cè)試聽(tīng)力檢測(cè)結(jié)果及基因篩查結(jié)果聯(lián)合分析定期復(fù)查聽(tīng)力、診斷性聽(tīng)力學(xué)檢查或分子診斷分子

17、診斷程序：GJB2、SLC26A4全基因測(cè)序檢測(cè),遺傳咨詢(xún)工作流程—小結(jié),34,門(mén)診復(fù)診新生兒遺傳咨詢(xún)工作,,,,,,,,,,,,,,,目 錄,,,Contents,耳聾檢測(cè)應(yīng)用案例1,36,在鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院聽(tīng)力篩查中心，孩子進(jìn)行聽(tīng)力篩查但未通過(guò)，抽血檢查耳聾基因，結(jié)果孩子是235純合突變，父親是235純合突變，母親是235雜合突變，爺爺和姑姑分別是235雜合突變和野生型，奶奶不在了，因父母均是聾啞人，對(duì)母親進(jìn)行GJB2基因測(cè)序

18、，查出是257C>G雜合突變。,結(jié)果展示,GJB2 235 雜合,GJB2 235 純合,,,,耳聾檢測(cè)應(yīng)用案例2,37,山東聊城岳姓家庭，大女兒5歲半，先天性聾，小兒子2歲半，出生時(shí)聽(tīng)篩已過(guò)，由于一次意外跌倒，聽(tīng)力喪失；兩個(gè)孩子已做耳部CT檢查，顯示大前庭和內(nèi)耳畸形。經(jīng)耳聾芯片檢測(cè)，兩個(gè)孩子均為IVS7-2純合突變，父母均為IVS7-2雜合突變。,,,,,,,博奧生物集團(tuán)有限公司生物芯片北京國(guó)家工程研究中心北京博奧晶典生