彭齊榮-腫瘤標志物的生物化學檢驗

1、第十六章腫瘤標志物的生化檢查,,死亡率居人口總死亡率第二位。,無控制性異常增生為特性。,依腫瘤細胞增殖的速度、侵襲能力和播散等生物學行為而分類。,良性腫瘤生長比較緩慢、與正常組織分界明顯、手術時容易切除干凈、很少有復發(fā)；,腫瘤概況,腫瘤概況,死亡率居人口總死亡率第二位。無控制性異常增生為特性。依腫瘤細胞增殖的速度、侵襲能力和播散等生物學行為而分類。良性腫瘤生長比較緩慢、與正常組織分界明顯、手術時容易切除干凈、很少有復發(fā)；惡性腫

2、瘤常因破壞人體器官，原發(fā)和繼發(fā)損害人體重要生命器官系統(tǒng)結構和功能，進而導致患者死亡。,腫瘤的定義,隨著科學技術的發(fā)展，人類對腫瘤的認識不斷提高，對腫瘤的定義亦逐步完善。,腫瘤的定義,隨著科學技術的發(fā)展，人類對腫瘤的認識不斷提高，對腫瘤的定義亦逐步完善。,上個世紀40年代，人們認為腫瘤是一種自主過度生長的新生組織；,腫瘤的定義,隨著科學技術的發(fā)展，人類對腫瘤的認識不斷提高，對腫瘤的定義亦逐步完善。,上個世紀40年代，人們認為腫瘤是一種自主

3、過度生長的新生組織；,到80年代，腫瘤被定義為機體中成熟的或在發(fā)展中的正常細胞，在有關因素的作用下，呈現(xiàn)過度增生或異常分化而形成的新生物；,腫瘤的定義,上個世紀40年代，人們認為腫瘤是一種自主過度生長的新生組織； 到80年代，腫瘤被定義為機體中成熟的或在發(fā)展中的正常細胞，在有關因素的作用下，呈現(xiàn)過度增生或異常分化而形成的新生物；90年代中期，對腫瘤有定義是：腫瘤是機體在各種致瘤因素長期作用下，某一正常的組織細胞發(fā)生異常分化和過度無限

4、增殖的結果，這種現(xiàn)象一旦形成，具有向周圍組織乃至全身侵蝕和轉移的特性，其生長變化快慢與機體免疫功能有關。,腫瘤的發(fā)生,啟動階段,某些化學、物理或生物因子，直接改變細胞遺傳物質DNA的成分或結構，一般一次接觸即可完成，其作用似無明確的閾劑量，這一階段引起的細胞改變一般是不可逆的。,腫瘤的發(fā)生,啟動階段,促進階段,在啟動劑作用后再以促進劑反復作用，經多層次和多種癌基因的激活及抗癌基因的失活，方可促使腫瘤發(fā)生。,腫瘤的發(fā)生,啟動階段,促進階段

5、,演進階段,發(fā)生多次突變，需一定累積，腫瘤形成。,腫瘤的發(fā)生,啟動階段,促進階段,演進階段,三者各有本身的特點，又互相連續(xù)逐漸過渡，有一定程度的重疊，沒有很截然分明的界限。,致癌物,啟動劑：,某些化學、物理或生物因子，它們可以直接改變細胞遺傳物質DNA的成分或結構，一般一次接觸即可完成，其作用似無明確的閾劑量，啟動劑引起的細胞改變一般是不可逆的 。,致癌物,啟動劑：,促進劑：,促進劑本身不能誘發(fā)腫瘤，只有在啟動劑作用后再以促進劑反復作

6、用，經多層次和多種癌基因的激活及抗癌基因的失活，方可促使腫瘤發(fā)生。,致癌物,啟動劑：,促進劑：,完全致癌物：,是指致癌物的作用很強，兼具啟動和促進兩種作用，單獨作用即可致癌的一類物質 。,致癌物,啟動劑：,促進劑：,完全致癌物：,不完全致癌物：,作用較弱，只能起到啟動或促進作用的物質，稱為不完全致癌物。,致癌物,啟動劑：,促進劑：,完全致癌物：,不完全致癌物：,直接致癌物：,進入人體后可以直接誘發(fā)腫瘤的物質。,致癌物,啟動劑：,促進劑：

7、,完全致癌物：,不完全致癌物：,直接致癌物：,間接致癌物：,進入人體后，需要經過體內代謝活化或生物轉化，成為具有致癌活性的最終致癌物，方可引起腫瘤發(fā)生。,常見的致癌物,1 化學類致癌物,烷化劑：芥子氣、環(huán)氧乙烷、氯乙烯、苯；,多環(huán)芳香烴：苯丙芘、瀝青、煤焦油等；,芳香胺：聯(lián)苯胺、硝基聯(lián)苯等；,亞硝胺：二乙基亞硝胺、甲基辛基亞硝胺等；,金屬元素：鎳、鉻、砷等；,礦物類、藥物：某些激素、某些抗癌藥物等；,生活嗜好物：香煙、檳榔等；,環(huán)境中

8、致癌物質有：植物、人工合成致癌物等,化學類致癌物主要致瘤機理,1 經過氧化、還原、水解等化學反應，激活轉化成為最終致癌物（一種親電子性分子）。,2　引起DNA損傷或形成DNA加成物、染色體畸變，使細胞突變和癌變。,3 可能激活某些癌基因，引起細胞惡變。,,化學類致癌物主要致瘤機理,1 經過氧化、還原、水解等化學反應，激活轉化成為最終致癌物（一種親電子性分子）。2　引起DNA損傷或形成DNA加成物、染色體畸變，使細胞突變和癌變。

9、3　可能激活某些癌基因，引起細胞惡變。機體的各種酶的存在和活性高低都受到機體的基因表型的調控，所以化學致癌物的體內活化引起腫瘤發(fā)生的過程，既受環(huán)境因素的影響，又受到機體遺傳背景的控制。,常見的致癌物,化學類致癌物2 物理類,,電離輻射；,放射性輻射；,紫外線。,物理類致癌物主要致瘤機理,染色體或基因的突變；,基因表達改變；,放射線激活潛在致瘤因子。,常見的致癌物,化學類致癌物物理類3 生物類,1 病毒；,2 霉菌；,3 寄

10、生蟲。,其中以病毒與人體腫瘤的關系最為重要。,成人T細胞白血病腫瘤細胞的典型形態(tài),病毒的遺傳信息整合到宿主細胞的染色體中，成為細胞的組成部分，并通過性細胞由親代垂直傳遞到子代細胞，到化學致癌物、射線輻射等因素的作用后，可能被激活病毒表達而在體內誘發(fā)腫瘤；或激活癌基因而誘發(fā)腫瘤（啟動作用）。,生物類致癌物主要致瘤機理,生物類致癌物主要致瘤機理 病毒的遺傳信息整合到宿主細胞的染色體中，成為細胞的組成部分，并通過性細胞由親代垂直傳遞到子代細

11、胞，到化學致癌物、射線輻射等因素的作用后，可能被激活病毒表達而在體內誘發(fā)腫瘤；或激活癌基因而誘發(fā)腫瘤（啟動作用）。霉菌引起腫瘤可能與霉菌本身致炎，毒素代謝產生的亞硝胺等化學物質有關。,對腫瘤的認識,1．腫瘤是由機體細胞而來，是正常細胞在致瘤因素誘導下轉化而來。,對腫瘤的認識,1．腫瘤是由機體細胞而來，是正常細胞在致瘤因素誘導下轉化而來。2．腫瘤的形成是一個緩慢而漸進的過程，是一種由量變到質變的過程，內外因都很重要，是致瘤因子在機體抵

12、抗力低下的情況下，長期作用的結果，在癌前病變時期在一定程度上是可逆的。基因調控的失常和正常免疫功能的缺損是腫瘤發(fā)生發(fā)展的條件。轉化的物質基礎主要是DNA遺傳密碼的改變。,對腫瘤的認識,1．腫瘤是由機體細胞而來，是正常細胞在致瘤因素誘導下轉化而來。2．腫瘤的形成是一個緩慢而漸進的過程，是一種由量變到質變的過程，內外因都很重要，是致瘤因子在機體抵抗力低下的情況下，長期作用的結果，在癌前病變時期在一定程度上是可逆的?；蛘{控的失常和正常免疫

13、功能的缺損是腫瘤發(fā)生發(fā)展的條件。轉化的物質基礎主要是DNA遺傳密碼的改變。3．腫瘤是失去了受整體調控的細胞群體，細胞過度增殖是根本特征。腫瘤增生與正常細胞增生的不同在于，前者是不受機體調控的無限增殖過程，而后者為受控增殖。,對腫瘤的認識,1．腫瘤是由機體細胞而來，是正常細胞在致瘤因素誘導下轉化而來。2．腫瘤的形成是一個緩慢而漸進的過程，是一種由量變到質變的過程，內外因都很重要，是致瘤因子在機體抵抗力低下的情況下，長期作用的結果，在癌

14、前病變時期在一定程度上是可逆的?；蛘{控的失常和正常免疫功能的缺損是腫瘤發(fā)生發(fā)展的條件。轉化的物質基礎主要是DNA遺傳密碼的改變。3．腫瘤是失去了受整體調控的細胞群體，細胞過度增殖是根本特征。腫瘤增生與正常細胞增生的不同在于，前者是不受機體調控的無限增殖過程，而后者為受控增殖。4．腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與機體的免疫功能密切相關。腫瘤細胞只有逃避了免疫系統(tǒng)的監(jiān)視才能在機體內得以生存與發(fā)展，當機體免疫功能對腫瘤細胞的識別與清除功能增強時，腫瘤

15、細胞的增長將會受到限制乃至被消滅。,對腫瘤的認識,1．腫瘤是由機體細胞而來，是正常細胞在致瘤因素誘導下轉化而來。2．腫瘤的形成是一個緩慢而漸進的過程，是一種由量變到質變的過程，內外因都很重要，是致瘤因子在機體抵抗力低下的情況下，長期作用的結果，在癌前病變時期在一定程度上是可逆的?；蛘{控的失常和正常免疫功能的缺損是腫瘤發(fā)生發(fā)展的條件。轉化的物質基礎主要是DNA遺傳密碼的改變。3．腫瘤是失去了受整體調控的細胞群體，細胞過度增殖是根本特

16、征。腫瘤增生與正常細胞增生的不同在于，前者是不受機體調控的無限增殖過程，而后者為受控增殖。4．腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與機體的免疫功能密切相關。腫瘤細胞只有逃避了免疫系統(tǒng)的監(jiān)視才能在機體內得以生存與發(fā)展，當機體免疫功能對腫瘤細胞的識別與清除功能增強時，腫瘤細胞的增長將會受到限制乃至被消滅。5．從小做起，從日常飲食和居住環(huán)境入手進行腫瘤的防護。,癌基因,癌基因是指細胞或病毒中存在的、能誘導正常細胞轉化、并使其獲得一個或更多的新生物特性的基因,

17、細胞中存在的的癌基因稱細胞癌基因,由于癌基因在正常細胞中是以非激活狀態(tài)存在，故又稱原癌基因,原癌基因的激活,從原癌基因轉化為癌基因的過程被稱為原癌基因的激活,1 染色體的重排與基因易位,染色體是基因高度密集和有序排列的場所，原癌基因有時會從染色體上正常位置轉移到另一個染色體的某個位置上，使其調控環(huán)境改變，癌基因擺脫了原來所受的表達調控，處于新的轉錄控制之下，由相對靜止轉化為激活狀態(tài)，從而引起表達的改變。,原癌基因的激活,從原癌基因轉化為

18、癌基因的過程被稱為原癌基因的激活,1 染色體的重排與基因易位,2 染色體缺失,是特定位點染色體物質（基因）丟失，是不平衡易位，也可使基因激活，導致癌變。,原癌基因的激活,從原癌基因轉化為癌基因的過程被稱為原癌基因的激活,1 染色體的重排與基因易位,2 染色體缺失,3 基因突變,基因在編碼順序的特定位置上一個或幾個核苷酸發(fā)生順序改變稱之為點突變；復雜的核苷酸序列變化稱為基因突變。它包括插入突變，均可導致細胞癌基因的激活。,原癌基因的激活,

19、從原癌基因轉化為癌基因的過程被稱為原癌基因的激活,1 染色體的重排與基因易位,2 染色體缺失,3 基因突變,4 基因擴增和過度表達,是指細胞內一些基因通過不明機制復制成多個拷貝數(shù)。,抑癌基因,抑癌基因是指能抑制腫瘤形成的一類基因。也就是說：凡是由于它們的存在和表達，使機體不能形成腫瘤的基因均稱抑癌基因。,抑癌基因,,,抑癌基因是指能抑制腫瘤形成的一類基因。也就是說：凡是由于它們的存在和表達，使機體不能形成腫瘤的基因均稱抑癌基因。目前已

20、發(fā)現(xiàn)的癌基因有100多種，被確定的有12個，研究較多的是RB基因、P53抗癌基因、DCC抗癌基因、神經纖維瘤抗癌基因和多腫瘤抗癌基因等。,抑癌基因的作用,抑癌基因主要通過其表達產品（蛋白質）的作用來抑制腫瘤的生成,抑癌基因的作用,1 影響染色體的穩(wěn)定性,抗癌基因缺失時，可能由于DNA甲基化等原因，染色體粘度增加，穩(wěn)定性降低而發(fā)生畸變，可引起癌基因易位而激活。,抑癌基因的作用,1 影響染色體的穩(wěn)定性,2 影響細胞分化,一些抗癌基因與細胞分

21、化有關，缺失可能使細胞分化失控，從而產生癌變。,抑癌基因的作用,1 影響染色體的穩(wěn)定性,2 影響細胞分化,3 控制細胞增殖,腫瘤細胞是低分化、高增殖的細胞，而抗癌基因主要作用是抑制細胞無限增殖。,RB基因能編碼具有抑制細胞增殖和細胞轉化作用的核內磷蛋白，可能是一個具有DNA結合活性的細胞生長負調控因子，RB基因的失活造成其不能合成具有生物活性的蛋白質，失去對細胞增殖的抑制作用，從而導致細胞增殖和腫瘤。野生的P53基因不合成蛋白質，對一些

22、惡性腫瘤具有廣譜抑制作用，而突變的P53基因表達的核磷酸蛋白質與癌基因協(xié)助作用，并顯性抑制野生型P53基因，破壞其對細胞的負調控作用，使細胞生長增殖失控；DCC抗癌基因表達細胞信息轉導受體，其缺失使腫瘤細胞迅速增殖；神經纖維瘤抗癌基因編碼的蛋白能阻止ras基因在細胞分裂和增殖信號的調節(jié)作用；多腫瘤抗癌基因編碼P16蛋白，是細胞周期性蛋白依賴性激酶4的抑制劑，使細胞增殖停止于G0/S期。,腫瘤標志物,癌細胞在發(fā)生過程中，產生的一種或幾種正

23、常細胞所沒有的或含量很低的“特異性”物質，或者是宿主細胞對癌細胞入侵反應產生的正常細胞成分，但在量上和質上與正常時或良性疾病時相比有顯著差異。,腫瘤標志物,癌細胞在發(fā)生過程中，產生的一種或幾種正常細胞所沒有的或含量很低的“特異性”物質，或者是宿主細胞對癌細胞入侵反應產生的正常細胞成分，但在量上和質上與正常時或良性疾病時相比有顯著差異。腫瘤標志物存在于細胞、組織、血液或體液中，可用生物化學、免疫學或分子生物學方法進行定性或定量測定。,臨

24、床應用須具備的特征,1 是惡性腫瘤所特有的物質，或與良性疾病時比較在量上和質上有顯著差異的物質；,臨床應用須具備的特征,1 是惡性腫瘤所特有的物質，或與良性疾病時比較在量上和質上有顯著差異的物質；2 在血液、體液或瘤組織中有一定含量，能通過生物化學方法或免疫學方法檢測出來；,臨床應用須具備的特征,1 是惡性腫瘤所特有的物質，或與良性疾病時比較在量上和質上有顯著差異的物質；2 在血液、體液或瘤組織中有一定含量，能通過生物化學方法或免疫

25、學方法檢測出來；3 在一定程度上能反映腫瘤細胞負荷量，有助于評價療效，預測腫瘤的復發(fā)與轉移；,臨床應用須具備的特征,1 是惡性腫瘤所特有的物質，或與良性疾病時比較在量上和質上有顯著差異的物質；2 在血液、體液或瘤組織中有一定含量，能通過生物化學方法或免疫學方法檢測出來；3 在一定程度上能反映腫瘤細胞負荷量，有助于評價療效，預測腫瘤的復發(fā)與轉移；4 在疾病穩(wěn)定期，腫瘤標志物的濃度水平應較穩(wěn)定；,臨床應用須具備的特征,1 是惡性腫瘤

26、所特有的物質，或與良性疾病時比較在量上和質上有顯著差異的物質；2 在血液、體液或瘤組織中有一定含量，能通過生物化學方法或免疫學方法檢測出來；3 在一定程度上能反映腫瘤細胞負荷量，有助于評價療效，預測腫瘤的復發(fā)與轉移；4 在疾病穩(wěn)定期，腫瘤標志物的濃度水平應較穩(wěn)定；5 取樣容易，檢測方法簡便，特異性和靈敏度較高，費用合理。,腫瘤標志物發(fā)展簡史,第一時期: 1848年 本－周氏蛋白,1848年Henry Ben

27、ce Jones在多發(fā)性骨髓瘤患者尿中發(fā)現(xiàn)一種特殊蛋白，后來稱“本－周氏蛋白”，可作為多發(fā)性骨髓瘤診斷指標，這一階段被認為是第一時期；,腫瘤標志物發(fā)展簡史,第一時期: 1848年 本－周氏蛋白,第二時期: 1930- 1962 HCG ，同工酶譜,Zondek在1930年發(fā)現(xiàn)絨毛膜促性腺激素（HCG）除作為妊娠指標外，還可用于絨毛膜癌的輔助診斷；到1959年Markert通過研究發(fā)現(xiàn)，惡性腫瘤時，患者體液中可出

28、現(xiàn)某些酶和（或）同工酶譜發(fā)生變化，這是第二時期；,腫瘤標志物發(fā)展簡史,第一時期: 1848年 本－周氏蛋白,第二時期: 1930- 1962 HCG ，同工酶譜,第三時期的標志： 1963年甲胎蛋白,1963年Abelew等從肝癌患者血清中發(fā)現(xiàn)了甲胎蛋白（Alpha-fetoprotion，AFP），1965年Gold等從結腸癌組織中發(fā)現(xiàn)癌胚抗原（CEA），是第三時期的標志；,腫瘤標志物發(fā)展簡史,第一時期:

29、 1848年 本－周氏蛋白,第二時期: 1930- 1962 HCG ，同工酶譜,第三時期的標志： 1963年甲胎蛋白,第四階段： 1975年創(chuàng)建了淋巴細胞雜交瘤技術,1979年Koprowski用結腸癌細胞制備了能識別糖類抗原（CA19－9）的單克隆抗體，以后陸續(xù)建立了一系列特異性較強的腫瘤標志物,腫瘤標志物發(fā)展簡史,第一時期: 1848年 本－周氏蛋白,第二時期: 1930- 1962

30、 HCG ，同工酶譜,第三時期的標志： 1963年甲胎蛋白,第四階段： 1975年創(chuàng)建了淋巴細胞雜 交瘤技術,第五時期：癌基因、抑癌基因的發(fā)現(xiàn)和應用,腫瘤標志物的分類,腫瘤標志物的臨床應用,1 病情預后及療效觀察,由于腫瘤標志物的血清濃度與腫瘤的發(fā)展具有良好的相關性，作為病情觀察和手術跟蹤是其最重要的作用。,腫瘤標志物的臨床應用,2 輔助診斷作用,腫瘤標志物最初是要用于癌癥的早期診斷，但由于其

31、特異性不高和敏感性較低，結果并不理想。,1 病情預后及療效觀察,腫瘤標志物的臨床應用,3 篩選作用,一些標志物與特定的腫瘤有高度的特異性，可用于腫瘤篩選。如在我國的肝癌的防治中，用AFP作為肝癌高發(fā)區(qū)人群肝細胞性肝癌的篩選工具；在美國，對于老年男性，以PSA作為前列腺癌篩選工具。,2 診斷作用,1 病情預后及療效觀察,腫瘤標志物的臨床應用,3 篩選作用,但由于大部分的腫瘤標志物既無器官特異性，又無腫瘤特異性，在許多良性疾病情況下，也可出

32、現(xiàn)血清濃度異常，同時，一般腫瘤標志物在癌變初期敏感性低，故對大范圍的無癥狀人群的腫瘤篩選檢查意義不大。,2 診斷作用,1 病情預后及療效觀察,常見的腫瘤標志物及其應用評價,一、胚胎性抗原腫瘤標志物,這類標志物因與曾出現(xiàn)于正常人胚胎發(fā)育時期而得名，主要有甲胎蛋白、癌胚抗原等。常用的測定方法有ELISA法，放射免疫測定，化學發(fā)光法。前者不需特殊設備，簡便易行，但相對重復性差。放免法重復性好，操作簡單，但需放射線防護；目前一般都用電化學發(fā)光分

33、析儀，及其配套試劑測定，結果快速、正確。,1　甲胎蛋白（Alpha-fetoprotion，AFP）,生化特性,發(fā)現(xiàn): Bergstrandh和Czar于1956年.,是單一多聚體肽鍵糖蛋白，590個氨基酸，MW為70000D。含糖為4%，糖鏈在232位的天冬酰胺上，是N－糖鏈，其糖鏈主要由甘露糖、半乳糖、N－乙酰葡萄糖和唾液酸組成的寡糖。其等電點4.7～4.8，電泳時位于白蛋白與α－球蛋白之間。,1　甲胎蛋白（Alpha-fetopr

34、otion，AFP）,生化特性,發(fā)現(xiàn): Bergstrandh和Czar于1956年.,是單一多聚體肽鍵糖蛋白，590個氨基酸，MW為70000D。含糖為4%，糖鏈在232位的天冬酰胺上，是N－糖鏈，其糖鏈主要由甘露糖、半乳糖、N－乙酰葡萄糖和唾液酸組成的寡糖。其等電點4.7～4.8，電泳時位于白蛋白與α－球蛋白之間。,AFP的編碼基因位于第4對染色體的4q11～q22區(qū)域。與血清白蛋白、維生素結合蛋白屬同一基因家族。,1　甲胎蛋白（A

35、lpha-fetoprotion，AFP）,生化特性,AFP主要在胎肝合成，其次是卵黃囊、胃腸道粘膜，腎臟也少量合成。胎兒于6周開始合成，12～15周達到高峰。出生后1～2年降至成人水平。正常成人肝細胞不產生AFP。,發(fā)現(xiàn): Bergstrandh和Czar于1956年.,是單一多聚體肽鍵糖蛋白，590個氨基酸，MW為70000D。含糖為4%，糖鏈在232位的天冬酰胺上，是N－糖鏈，其糖鏈主要由甘露糖、半乳糖、N－乙酰葡萄糖和唾液酸組成

36、的寡糖。其等電點4.7～4.8，電泳時位于白蛋白與α－球蛋白之間。,AFP的編碼基因位于第4對染色體的4q11～q22區(qū)域。與血清白蛋白、維生素結合蛋白屬同一基因家族。,1　甲胎蛋白（Alpha-fetoprotion，AFP）,生化特性,標本保存,血液標本分離血清，-20℃或-70℃保存待測；體液標本直接冷凍，-20℃或-70℃保存待測。,1　甲胎蛋白（Alpha-fetoprotion，AFP）,生化特性,標本保存,參考范圍,＜3

37、0μg/L（化學發(fā)光法）,AFP臨床意義,（1）原發(fā)性肝癌,AFP增高為原發(fā)性肝癌重要指標之一，特異性強、靈敏度高，常用于PHC臨床檢查及普查。AFP>500μg/L，時間持續(xù)一個月以上，并能排除妊娠、活動性肝炎、幼兒的睪丸或卵巢畸胎瘤等即可確診。,AFP臨床意義,（1）原發(fā)性肝癌,PHC血清AFP水平與預后有關。PHC手術徹底切除后，血清中AFP濃度將迅速下降，1周內可降至正常水平。若增高則可能復發(fā)，這種增高比肝功能異常出現(xiàn)得更

38、早。,AFP臨床意義,（1）原發(fā)性肝癌,AFP陰性并不排除原發(fā)性肝癌，據統(tǒng)計18%～20%的PHC患者血清AFP正常。特別是老年人，由于AFP對PHC的診斷率隨患者年齡的增加而逐漸下降，對老年人AFP正?；蜉p微升高不能排除肝癌的可能性。此時需結合臨床及其他檢測指標來降低假陰性。,AFP臨床意義,（1）原發(fā)性肝癌,（2）其他腫瘤,胃癌、結腸癌等內胚層衍生的組織發(fā)生的癌，即使未發(fā)生肝轉移也合成AFP；而非內胚層衍生組織的癌，即使轉移到肝臟也

39、不合成AFP；與絨毛膜促性腺激素聯(lián)合檢測有助于生殖細胞腫瘤的分類與分期。,AFP臨床意義,（1）原發(fā)性肝癌,（2）其他腫瘤,（3）肝臟炎癥病變,多在300μg/L以下，且隨著受損細胞的修復，升高的AFP逐漸減少直至消失，為一過性增加。,AFP臨床意義,（1）原發(fā)性肝癌,（2）其他腫瘤,（3）肝臟炎癥病變,（4）孕婦胎兒狀態(tài),婦女妊娠3～4個月以后，AFP上升，7～8個月達高峰（﹤400μg/L），分娩后約3周恢復正常。,AFP臨床意義,

40、（1）原發(fā)性肝癌,（2）其他腫瘤,（3）肝臟炎癥病變,（4）孕婦胎兒狀態(tài),（5）其他,部分卵黃囊腫患者血清AFP上升；肝硬化活動期、先天性膽總管閉鎖、生殖腺胚胎性腫瘤等，血清AFP也增加。,癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA),生化特性,MW為150K～300KD的糖蛋白，含有巖藻糖、甘露糖、半乳糖以及唾液酸。CEA的編碼基因位于19號染色體。目前已知有29種成分。由胎兒胃腸道上皮組織、胰和肝的細胞所合成

41、，肝臟滅活，半衰期為14天，妊娠前6個月內CEA含量增高，出生后，正常成人血清中CEA含量極低。,癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA),生化特性,標本保存,可用血清或血漿，胸、腹水可直接測定。由于EDTA能絡合鈣離子，從而阻止纖維蛋白溶解酶對CEA的水解，推薦EDTA抗凝血漿。－20℃或～70℃保存待測，不要反復凍融，溶血、酯血影響本項目測定。,癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,

42、CEA),生化特性,標本保存,參考范圍,≤3.4mg/L。（化學發(fā)光法）,CEA臨床意義,(1)某些癌癥的輔助診斷,消化道腫瘤、肺癌、乳腺癌、子宮頸癌等CEA可明顯升高，一般大于60μg/L。,CEA臨床意義,(1)某些癌癥的輔助診斷,(2)病變程度和預后判斷,血清CEA增高程度與腫瘤病程、是否轉移有一定關系。肺癌、乳腺癌、膀胱癌和卵巢癌患者血清CEA量會明顯升高，大多顯示為腫瘤浸潤，其中約70％為轉移性癌；如腫瘤無轉移、疾病早期，則升

43、高幅度低，相反則明顯升高。,CEA臨床意義,(1)某些癌癥的輔助診斷,(2)病變程度和預后判斷,(3)治療監(jiān)測和復發(fā)預報,血清CEA濃度不斷下降直至正常說明治療正確、有效；若其濃度不下降甚至有繼續(xù)升高趨勢，預示治療無效。,CEA臨床意義,(1)某些癌癥的輔助診斷,(2)病變程度和預后判斷,(3)治療監(jiān)測和復發(fā)預報,(4)．其它,除血液之外，其它生物液體CEA定量可用于診斷,糖類抗原（carbohydrate antigen，CA）,是由

44、于細胞膜成分異常糖基化而形成的抗原。是指由腫瘤細胞表面的抗原物質或者是腫瘤細胞所分泌的物質，又稱為腫瘤標志物相關物質。常用的檢測方法有ELISA、化學發(fā)光，免疫放射分析等等，各自特點前已敘述，目前普遍使用化學發(fā)光法測定。,糖鏈抗原19-9（Carbohydrate antigen19-9，CA19-9）,生化特性,分子量大于5000kD，因由鼠單克隆抗體116NS19-9識別而命名，為細胞膜上的糖脂質，一般在分泌液含量較高，血清中含量較

45、低，是存在于血液循環(huán)的胃腸道腫瘤相關抗原。,糖鏈抗原19-9（Carbohydrate antigen19-9，CA19-9）,生化特性,標本保存,空腹靜脈抽血。血清以及胸腹水均可測定。CA19-9抗原性比較穩(wěn)定，短期（2-3天）可4℃保存，不能及時測定可于－20℃或－70℃保存待測。但有報道血漿標本結果將降低。,糖鏈抗原19-9（Carbohydrate antigen19-9，CA19-9）,生化特性,標本保存,參考范圍,≤ 37k

46、 U /L（化學發(fā)光法）,CA19-9臨床意義,（1）協(xié)助診斷消化道腫瘤,胰腺癌、肝膽系癌、胃癌、結直腸癌的CA 19-9水平大幅度升高，而陽性率以胰腺癌為最高，以37kU/L為臨界值，胰腺癌患者85％-95％為陽性。故CA19-9是胰腺癌較好的標志；,CA19-9臨床意義,（1）協(xié)助診斷消化道腫瘤,（2）腫瘤監(jiān)測和預后判斷,CA19-9水平與腫瘤的階段有關，可評估是否轉移，作出預后判斷。術前CA19-9水平對小于1000kU/L時，手

47、術才有一定的意義。,CA19-9臨床意義,（1）協(xié)助診斷消化道腫瘤,（2）腫瘤監(jiān)測和預后判斷,（3）監(jiān)測和療效觀察,手術2-4周不能降至臨界值提示手術失敗；CA19-9降低后再度升高，預示腫瘤復發(fā)，并且發(fā)生于影像學診斷之前。,CA19-9臨床意義,（1）協(xié)助診斷消化道腫瘤,（2）腫瘤監(jiān)測和預后判斷,（3）監(jiān)測和療效觀察,良性疾患時如胰腺炎和黃疸，CA19-9濃度也可增高，但往往呈“一過性”，而且其濃度多低于120kU/L，必須加以鑒別。

48、,癌抗原15-3（cancer antigen15-3，CA15-3）,生化特性,屬于糖蛋白類抗原，其抗原決定簇也有糖和多肽兩部分組成，分子量約400KD。1984年Hilkens等人從人乳脂肪球膜上糖蛋白MAM-6制成小鼠單克隆抗體（115-DB）；1984年，Kufu等從肝轉移乳癌細胞膜制成單克隆抗體（DF-3），由這些抗體識別出CA15-3。,癌抗原15-3（cancer antigen15-3，CA15-3）,生化特性,標本處理

49、,測定CA15-3的標本可以是血清、血漿、膽汁、胸腹水等。當天測定，不能及時測定置－20℃或－70℃保存待測。,癌抗原15-3（cancer antigen15-3，CA15-3）,生化特性,標本處理,參考范圍,<30kU/L（化學發(fā)光法）,CA15-3臨床意義,（1）乳腺癌的監(jiān)測,乳腺癌患者30%～50%增高，有轉移灶者增高可達80%，且升高早于臨床發(fā)現(xiàn)轉移；,CA15-3臨床意義,（1）乳腺癌的監(jiān)測,（2）用于對病人治療的監(jiān)測

50、,血清CA15-3水平增高，提示乳腺癌的局部或全身復發(fā)，且增高早于核素檢查和臨床檢查；,CA15-3臨床意義,（1）乳腺癌的監(jiān)測,（2）用于對病人治療的監(jiān)測,（3）聯(lián)合診斷,與CA125聯(lián)合檢查，用于卵巢癌復發(fā)的早期診斷；與CEA聯(lián)合檢測時，可提高乳腺癌早期診斷的敏感性和特異性；,CA15-3臨床意義,（1）乳腺癌的監(jiān)測,（2）用于對病人治療的監(jiān)測,（3）聯(lián)合診斷,（4） 其他,肺癌、卵巢癌、結腸癌、肝癌等惡性腫瘤，也可出現(xiàn)血清CA15

51、-3增高。而良性乳腺疾病、卵巢疾病等非惡性腫瘤疾病可引起CA15-3的水平增高。,3．癌抗原125（cancer antigen125，CA-125）,生化特性,MW 200-1000KD的糖蛋白，由單克隆抗體OC125識別而命名。CA125在癌變的卵巢上皮細胞膜上表達，并可釋放到細胞間質中。它是目前最重要的卵巢癌相關抗原，是最可靠的卵巢癌診斷指標。,3．癌抗原125（cancer antigen125，CA-125）,生化特性,參考范

52、圍,<35kU/L（化學發(fā)光法）,臨床意義,（1）上皮性卵巢癌診斷,以35U/ml為臨界值，診斷敏感度可達90%以上；,臨床意義,（1）上皮性卵巢癌診斷,（2）CA 125用于卵巢癌的患者監(jiān)測。,持續(xù)增高常與進行性惡性疾病或治療效果不佳有關，而水平下降則為預后良好和治療有效的標志；,臨床意義,（1）上皮性卵巢癌診斷,（2）CA 125用于卵巢癌的患者監(jiān)測。,卵巢癌治療后的1年中，應該每3個月檢測1次CA 125，1年之后每6個月測

53、定1次；卵巢腫瘤切除術后患者，應于術后第6天開始測定CA 125，然后依照其半衰期隨查，如果CA 125不能恢復到正常范圍，應考慮到有殘留腫瘤的可能性；,臨床意義,（1）上皮性卵巢癌診斷,（2）CA 125用于卵巢癌的患者監(jiān)測。,（3）與CA19-9聯(lián)合檢測,子宮內膜癌患者血清CA125和CA19-9的水平及陽性檢出率，又與病理類型、臨床分期及病灶轉移有關。隨著臨床期別的增高，CA125和CA19-9的水平和陽性率均增高,臨床意義,（1

54、）上皮性卵巢癌診斷,（2）CA 125用于卵巢癌的患者監(jiān)測。,（3）與CA19-9聯(lián)合檢測,（4）其它,乳腺癌、胰腺癌、肝癌、胃癌、膽道癌、肺癌、子宮內膜癌、直結腸癌等惡性腫瘤疾病，女性盆腔炎、子宮內膜異位癥、子宮肌瘤、慢性肝炎、慢性胰腺炎等非惡性腫瘤疾病亦會增高。,4．癌抗原549（cancer antigen 549，CA549）,生化特性,CA549是一高分子的酸性糖蛋白，由單克隆抗體BCAE549識別，用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳

55、測定其分子量可得兩條區(qū)帶，一條在400kD處，另一條為512kD。,4．癌抗原549（cancer antigen 549，CA549）,生化特性,標本處理,空腹靜脈抽血。血清、血漿以及胸腹水均可測定。4℃保存可穩(wěn)定3～5天，不能及時測定可于－20℃或－70℃保存待測。,4．癌抗原549（cancer antigen 549，CA549）,生化特性,標本處理,參考范圍,＜11U／ml（化學發(fā)光法）,4．癌抗原549（cancer ant

56、igen 549，CA549）,生化特性,標本處理,參考范圍,臨床意義,是乳腺癌的標志物，異常升高者可見于50％乳腺癌、卵巢癌、40%前列腺癌、33％肺癌患者。由此，作為乳腺癌的早期診斷，CA549還較欠缺，應聯(lián)合應用其它腫瘤標志物。,腫瘤相關糖蛋白72 (Tumor Associated Glycoprotein，TAG-72),生化特性,TAG-72是1981年Colcher等人用乳腺癌肝轉移的癌細胞膜成份免疫小鼠，所得IgG型單克

57、隆抗體B72－3所識別的腫瘤相關糖蛋白抗原，分子量為220～400KD。它是胃腸道和卵巢癌的腫瘤標志物。,腫瘤相關糖蛋白72 (Tumor Associated Glycoprotein，TAG-72),生化特性,標本處理,空腹靜脈抽血。血清、血漿以及胸腹水均可測定。4℃保存可穩(wěn)定5天，不能及時測定可于－20℃或－70℃保存待測。,腫瘤相關糖蛋白72 (Tumor Associated Glycoprotein，TAG-72),生化特性

58、,標本處理,參考范圍,<9.8kU/L（化學發(fā)光法）,TAG 72臨床意義,80%以上的人體腺癌可在其細胞膜上檢出TAG 72，而非上皮性的惡性腫瘤及良性增殖性病變均無該抗原表達。,TAG 72臨床意義,惡性腫瘤時增高,陽性率分別為：胃腸道癌40%，肺癌36%，卵巢癌24%；對原發(fā)性乳癌、胃癌、直結腸癌以及卵巢癌患者血漿TAG 72清除連續(xù)檢測表明，TAG 72在檢測殘余腫瘤時很有作用；TAG 72的檢測與CEA具有互補作用；,T

59、AG 72臨床意義,惡性腫瘤時增高,CA125聯(lián)合檢測,作為診斷原發(fā)性及復發(fā)性卵巢腫瘤的標志：兩者均陽性時特異性為100%，兩者均陰性時，說明無殘余腫瘤；,TAG 72臨床意義,惡性腫瘤時增高,CA125聯(lián)合檢測,CA19-9聯(lián)合應用于胃癌的檢測。,TAG 72，CA19-9的陽性率分別為42%～47%和46%，而聯(lián)合檢測時陽性率可達63%。,TAG 72臨床意義,惡性腫瘤時增高,CA125聯(lián)合檢測,CA19-9聯(lián)合應用于胃癌的檢測。,

60、胃癌術后監(jiān)測TAG 72水平還有助于早期發(fā)現(xiàn)胃癌復發(fā)；,TAG 72臨床意義,惡性腫瘤時增高,CA125聯(lián)合檢測,CA19-9聯(lián)合應用于胃癌的檢測。,正常人健康和良性胃腸道疾病的陽性率分別為3.5%和6.7%,鱗狀上皮細胞癌抗原（squanmous cell carcinoma antigen，Scc）,生化特性,Scc是一種分子量為48kD的糖蛋白，它是腫瘤相關抗原TA-4的14亞單位中的一種，在1997年首次由Kato 和Torig

61、oe從子宮頸的鱗狀細胞癌中分離出來。存在于子宮、子宮頸、頭頸等鱗狀上皮細胞的細胞漿中。特別是非角化型大細胞中含量豐富。,鱗狀上皮細胞癌抗原（squanmous cell carcinoma antigen，Scc）,生化特性,標本處理,血清、血漿標本均可，當天測定。若不能及時測定可于－20℃或－70℃保存待測。,鱗狀上皮細胞癌抗原（squanmous cell carcinoma antigen，Scc）,生化特性,標本處理,參考范圍,

62、＜1.5ng/ml（化學發(fā)光法）。,Scc臨床意義,Scc是一種特異性很好的鱗癌腫瘤標志物，但敏感性較低，可作為子宮頸癌，肺癌，頭頸部癌的輔助診斷指標和預后監(jiān)測指標。,Scc臨床意義,1．Scc是最早用于診斷鱗癌的腫瘤標志物,子宮頸癌,肺癌，頭頸部癌時，血清中Scc升高，其濃度隨病情的加重而增高，Ⅲ期頭頸部癌陽性率為40％，Ⅳ期時陽性率增至60％。子宮頸癌的陽性率較高，可達80％左右。肺鱗癌陽性率約為46．5％，食管癌約為31．3％。臨

63、床上還用于監(jiān)測這些腫瘤的療效，復發(fā)和轉移以及評價預后。,Scc臨床意義,1．Scc是最早用于診斷鱗癌的腫瘤標志物,2．肝炎，肝硬化，肺炎，腎功能衰竭，結核等疾病，Scc也有一定程度的升高。,神經元特異烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）,生化特性,NSE是一組烯醇化酶同工酶，在糖酵解中與ATP合成有關。它由兩條幾乎一樣的肽鏈組成，每條鏈的分子量約39kD。NSE僅存在于神經元里那些與胺前身物脫羧有關的細胞中

64、，它最早發(fā)現(xiàn)于神經內分泌細胞里，因而作為起源于神經內分泌細胞的腫瘤標志物。,神經元特異烯醇化酶,生化特性,正常值：,16.3 ng/ml（化學發(fā)光法）。,神經元特異烯醇化酶,生化特性,正常值：,NSE是神經母細胞瘤和小細胞肺癌的標記物。,臨床意義,常見酶及同工酶腫瘤的診斷作用,不同的腫瘤，由于其來源和影響器官的不同，引起體內一些酶發(fā)生量和質的變化，同工酶的測定作為腫瘤的輔助診斷，對于判斷腫瘤發(fā)生部位有重要意義,常見酶及同工酶腫瘤的診斷作

65、用,骨ALP:骨腫瘤、骨轉移腫瘤。,前列腺ALP、ACP: 前列腺癌。,CK－BB: 腦腫瘤、神經系統(tǒng)腫瘤。,LDH4、LDH5：肝癌、腸癌、白血病、惡性淋巴瘤。,GGT：肝癌、膽管癌。,淀粉酶：胰腺癌。,AFU、醛縮酶：肝癌。,激素類標志物,激素類標志物很多，有人絨毛膜促性腺激素、降鈣素、生長激素、胰高血糖素等等,激素類標志物,激素類標志物很多，有人絨毛膜促性腺激素、降鈣素、生長激素、胰高血糖素等等 常用作腫瘤標志物激素是β-HCG

66、，分子量為45000中的糖蛋白激素，懷孕時血與尿中上升，正常血中只含微量。由于60％以上的非精原細胞瘤患者體內上升，有些可在臨床體征出現(xiàn)前幾周或幾個月查出。聯(lián)合測定尿中β-core與血中CAl25可對臨床卵巢癌的診斷提供有意義的信息。,細胞角蛋白19片斷（cytokeratin 19 fragment，Cyfra 21-1）,生化特性,是從肺癌患者血清中提取的水溶性角蛋白19片段。單克隆抗體BM19-2和KS19-1能特異地識別。MW約

67、為30KD。覆蓋正常支氣管樹的單層上皮、肺泡表面及呼吸道上皮來源的腫瘤均有CK19表達，小細胞肺癌最弱、鱗癌最強、腺癌次之。當細胞出現(xiàn)癌變，血中含量升高。,細胞角蛋白19片斷（cytokeratin 19 fragment，Cyfra 21-1）,生化特性,測定與參考范圍,測定Cyfra 21-1用標本可為血清、血漿。一般當天測定，若不能及時測定可于－20℃或－70℃保存待測。正常參考范圍為＜3.3 μg/L。（化學發(fā)光法）。,臨床意義

68、,CYFRA21-1是非小細胞肺癌患者最有價值的血清腫瘤標記物，可能代表了患者體內腫瘤的負荷量，對非小細胞肺癌的診斷、病情監(jiān)視和療效判斷有較高的臨床應用價值。,臨床意義,（1）肺癌,Cyfra 21-1對肺癌的檢出率為53%左右，其中鱗癌的檢出率達60%左右；對非小細胞肺癌有較高特異性，達87%，而靈敏度達52%； 研究表明：肺癌患者從I期到IV期，Cyfra 21-1血清水平呈明顯上升趨勢； 術后患者血清Cyfra 21-1值明顯低于