增強(qiáng)光散射分辨率,促進(jìn)多維流式細(xì)胞分析

1、增強(qiáng)光散射分辨率，促進(jìn)多維流式細(xì)胞分析增強(qiáng)光散射分辨率，促進(jìn)多維流式細(xì)胞分析多維流式細(xì)胞儀可同時(shí)進(jìn)行多參數(shù)測(cè)量，在特定空間內(nèi)對(duì)細(xì)胞群進(jìn)行分析。若要實(shí)現(xiàn)該多維空間的合理使用，每個(gè)特定參數(shù)需提供額外信息來(lái)識(shí)別細(xì)胞群，并確保其動(dòng)態(tài)范圍能夠最大限度地加以利用。本研究就白細(xì)胞的光信號(hào)散射情況進(jìn)行了詳細(xì)說(shuō)明，從而促進(jìn)了多維流式細(xì)胞分析的開(kāi)展。細(xì)胞制備技術(shù)的提升對(duì)獲得高分辨率光散射信號(hào)至關(guān)重要，可以實(shí)現(xiàn)粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、顆粒狀和非顆粒狀淋巴球的完全分

2、離。對(duì)搜集前向散射光的角度進(jìn)行了改進(jìn)，以提升白細(xì)胞的區(qū)分度。盡管正交光散射信號(hào)能夠區(qū)分顆粒狀和非顆粒狀淋巴細(xì)胞，但仍無(wú)法利用線(xiàn)性或?qū)?shù)函數(shù)的形式將分辨率和動(dòng)態(tài)范圍顯示出來(lái)。而在正交光散射信號(hào)中應(yīng)用多項(xiàng)式函數(shù)，則可將白細(xì)胞全部以高分辨率顯示出來(lái)。關(guān)聯(lián)前向和正交光散射信號(hào)可實(shí)現(xiàn)高分辨率光散射與非線(xiàn)性顯示的結(jié)合，使細(xì)胞群呈現(xiàn)等距分布狀態(tài)。使用這種方式，可將外周血中性粒細(xì)胞、嗜酸細(xì)胞、嗜堿粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、顆粒狀和非顆粒狀淋巴細(xì)胞等都顯示出來(lái)，

3、占據(jù)與正交和前向光散射相關(guān)的不同位置。出人意料的是，嗜堿粒細(xì)胞是處在了顆粒狀淋巴和單核細(xì)胞附近而非中性和嗜酸性粒細(xì)胞。流式細(xì)胞術(shù)中的人體白細(xì)胞光散射特性主要應(yīng)用于區(qū)分淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和粒細(xì)胞。前向光散射信號(hào)與細(xì)胞的大小和折光率有關(guān)，而正交光散射信號(hào)則與細(xì)胞的粒度有關(guān)。一項(xiàng)對(duì)正交光散射信號(hào)更進(jìn)一步的分析顯示出了淋巴細(xì)胞成分的差異，即非顆粒狀淋巴細(xì)胞的信號(hào)比顆粒狀的要低。此外，該方法還顯示了白血球的正交光散射信號(hào)在不同疾病狀態(tài)下的變化情況

4、。高分辨率光散射要在最佳角度收集散射參數(shù)，并對(duì)散射光的收集光路進(jìn)行優(yōu)化。改進(jìn)細(xì)胞制備方法對(duì)最大限度地實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞群的分離至關(guān)重要。改變制備流程可能導(dǎo)致細(xì)胞群分辨率的提高或降低。通過(guò)光散射，可從測(cè)量中排除受損細(xì)胞和無(wú)核細(xì)胞的干擾，從而提高細(xì)胞群的分辨率。正交光散射信號(hào)的動(dòng)態(tài)范圍不允許在相同線(xiàn)性尺度上同時(shí)觀察淋巴細(xì)胞群和中性粒細(xì)胞。本研究提供了一種新方法，通過(guò)對(duì)正交光散射信號(hào)進(jìn)行數(shù)字信號(hào)處理轉(zhuǎn)換，實(shí)現(xiàn)了白細(xì)胞群在光散射顯示中更加均衡的分布。這