檢定菌保存、傳代、使用、銷毀標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1、檢定菌保存、傳代、使用、銷毀標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程檢定菌保存、傳代、使用、銷毀標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1目的：目的：規(guī)范藥品微生物學(xué)檢定用菌的管理，最大限度降低變異率，確保菌種的溯源性與穩(wěn)定性，從而確保微生物學(xué)檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。2依據(jù)：依據(jù)：ChP2010版（一部）、《中國藥品檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范》（2010年版）。3范圍：范圍：本規(guī)程適用于檢定用菌種的管理，包括菌種的申購、保存、傳代、使用及銷毀等。4責(zé)任：責(zé)任：4.1.QC主管負(fù)責(zé)菌種的申購、接受、保存、分

2、發(fā)。4.2.微生物檢驗員負(fù)責(zé)菌種的確認(rèn)、傳代、使用及銷毀。5.5.相關(guān)文件及術(shù)語：相關(guān)文件及術(shù)語：5.1術(shù)語標(biāo)準(zhǔn)菌種是指由中國藥品生物制品檢定所醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏管理中心提供的冷凍干燥菌。傳代用菌種是指用標(biāo)準(zhǔn)菌種制備的采用特定保存方法長期固定保存的菌種，用于傳代及制備工作用菌種。工作用菌種是指用標(biāo)準(zhǔn)菌種或傳代用菌種接種至普通瓊脂斜面培養(yǎng)后，作為日常工作使用的菌種。菌種的代是指將其接種至一新鮮培養(yǎng)基上或培養(yǎng)基內(nèi)，每萌發(fā)一次即稱為一代，從菌

3、種保藏中心獲得的冷凍干燥菌種為第0代。6.6.標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)準(zhǔn)：用無菌接種環(huán)輕輕刮取經(jīng)冷凍復(fù)溶增菌后并接種至平板或瓊脂斜面的菌苔，并通過接種環(huán)與試管壁之間的輕輕摩擦而使細(xì)菌充分?jǐn)U散到預(yù)先裝入試管中的無菌純化水中，調(diào)整菌液濃度，使其等同于10號比濁管，向已制備好的菌懸液中加入等體積的無菌甘油（濃度20%），即為10%甘油菌懸液，輕輕振搖，使內(nèi)容物充分混合，分裝于無菌小試管，在30℃冷凍條件下保存。此甘油冷凍管為第2代（G2）?？梢悦扛?年轉(zhuǎn)種一

4、代。使用時，取出一支放至室溫，轉(zhuǎn)種增菌培養(yǎng)或接種至瓊脂斜面復(fù)蘇，挑取純菌落傳代或工作用。此種方法主要適用于需氧細(xì)菌和酵母菌的保藏（如大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、乙型副傷寒沙門菌）。6.3.2.2液體石蠟保存法6.3.2.2.1無菌液體石蠟的制備：選用優(yōu)質(zhì)化學(xué)純液體石蠟，將液體石蠟分裝加塞，用牛皮紙包好，在121℃滅菌30分鐘置40℃恒溫箱中蒸發(fā)水分，經(jīng)無菌檢查后備用。6.3.2.2.2液體石蠟管的制備：將菌種穿刺接種于半固體高層培養(yǎng)基中