人造海水的配方

1、人造海水的配方（引自ChemicalOceanographySecondEditionMilleroFJ1996）：水＆化合物的總重量為1kg.《海洋微生物及其代謝產(chǎn)物》林永成主編2003細菌的分離：細菌的分離：牛肉膏蛋白胨瓊脂、營養(yǎng)瓊脂等是分離細菌的常用培養(yǎng)基，前蘇聯(lián)細菌學(xué)家設(shè)計的ZOBELL2216E培養(yǎng)基是培養(yǎng)好氣性異養(yǎng)細菌較好的培養(yǎng)基，可培養(yǎng)多種細菌，SIU培養(yǎng)基也常用于海洋好氣性異養(yǎng)細菌的分離，PFENNIGS培養(yǎng)基適用于海洋

2、光合細菌的分離，分離海洋弧菌可采用TCBS培養(yǎng)基，培養(yǎng)基PH一般為7.27.6鹽度為28到30培養(yǎng)溫度28到37，培養(yǎng)時間1到7天，注意觀察平板菌落變化，1到2天先挑取大菌落，5到7天后再挑取小菌落，為防止真菌的污染，常在培養(yǎng)基中添加一定的抗真菌抗生素，如制霉菌素、兩性霉素、放線菌酮等。放線菌因生長緩慢且菌落不大，一般不會對細菌的分離產(chǎn)生影響。放線菌的分離：放線菌的分離：1放線菌是數(shù)量最多、最常分離到的G，JENSEN的研究表明，離海岸

3、越近，在0到1米水深的底泥樣本中，鏈霉菌占分離的放線菌總數(shù)的86%，小單孢菌占12%，其他占2%。2分離培養(yǎng)基多采用合成培養(yǎng)基（高氏合成一號、精氨酸、天門冬素培養(yǎng)基）和有機培養(yǎng)基名稱質(zhì)量（103kg）氯化鈉氯化鎂硫酸鈉氯化鈣氯化鉀重碳酸鈉溴化鉀硼酸氯化鍶氟化鈉23.985.0294.011.140.6990.1720.1000.02540.01430.0029DNADNA雜交率是否大于70%才能確定是否為新種。由于對同種內(nèi)的不同菌株分辨

4、力較差，更適合研究屬及屬以上的菌株。18SrDNA普遍用于真菌物種的鑒定分析。植物內(nèi)生真菌的分離植物內(nèi)生真菌的分離葉、葉脈、莖、樹皮(韌皮部)等樣品用自來水沖洗掉泥土，然后進行嚴格的表面消毒程序：依次浸泡在75％酒精lmin，3％一5％有效氯的次氯酸鈉溶液3min。75％的酒精O5min，然后再用無菌水沖洗3遍。晾干后，在超靜臺將其剪成約O5cm05cm左右小片。將處理好后剪成的小片鋪于PDA平板上，加入氯霉素與鏈霉素各50斗g／mL抑

5、制細菌的生長，在26℃培養(yǎng)培養(yǎng)2—3周分離內(nèi)生真菌。這些平板在第1周要每天檢查1次，然后可以3、4d檢查1次。一旦發(fā)現(xiàn)有菌絲從組織小塊長出，應(yīng)馬上將其轉(zhuǎn)接到另一新的平板上，經(jīng)幾次純化保存于PDA斜面。植物組織樣品處理:將采集的紅樹林植物樣品先用流動的清水沖洗干凈再超聲清洗徹底去除植物組織表面的雜質(zhì)把植物樣品剪切成15cm左右長度的節(jié)段進行表面消毒。樣品依次用次氯酸鈉(含5%有效氯量)浸泡5min無菌水清洗3次75%酒精浸泡3min無菌水