萌發(fā)小麥種子中淀粉酶的提取

1、萌發(fā)小麥種子中淀粉酶的提取、酶活性的測定及萌發(fā)小麥種子中淀粉酶的提取、酶活性的測定及PH、溫度、激活劑、抑制劑對酶活性的、溫度、激活劑、抑制劑對酶活性的影響影響(東北農業(yè)大學生命科學學院哈爾濱:150030)摘要：摘要：從萌發(fā)的小麥種子中通過離心方法提取淀粉酶，采用分光光度計法繪制麥芽糖標準曲線，并在此基礎上測定萌發(fā)小麥種子中淀粉酶的活性。溫度、PH值、激活劑、抑制劑是影響酶活性的幾個重要因素。本實驗結果表明，在PH=5.6，T=40℃

2、的條件下，小麥種子中淀粉酶總活性為2325.71mgg5min，而α淀粉酶的活性為246.33mgg5min；40℃左右時，酶的活性最高，室溫下活性較高，0℃時淀粉酶活性明顯下降，100℃時淀粉酶幾乎已失活；PH為5.6時，酶的活性最大，PH=3.6時和PH=8.0時淀粉酶活性降至最低；Cl使酶的活性增強，Cu2使酶活性減弱。關鍵詞：關鍵詞：淀粉酶酶活性溫度PH激活劑抑制劑前言：前言：生物體內的新陳代謝是一切生命活動的基礎。新陳代謝是由

3、許多復雜而有規(guī)律的化學反應組成，酶是生物體系中的催化劑，生物體內的各種化學反應包括物質轉化和能量轉化，都是在特定的酶催化下反應的，由于自然界中生物長期進化和組織功能分化的結果，酶在機體中受到嚴格的調控，使錯綜復雜的代謝過程有序進行。可以說，沒有酶的參與，生命活動即告終止，所以酶學的深入研究在探討生命現(xiàn)象的本質上使至關重要的[1]。大多數(shù)酶的本質是蛋白質。酶的特性決定了其研究內容的特殊性。隨著生物化學、分子生物學、基因工程、化學工程等相關

4、學科的發(fā)展，酶學研究早已進入一個嶄新的階段?，F(xiàn)代酶學的研究主要包括酶學理論、酶工程和酶應用3部分[2]。它們是現(xiàn)代生物技術的重要組成部分，應用范圍包括醫(yī)藥，食品，化學工業(yè)，診斷分析和生物傳感器，涉及的品種不少，如淀粉酶，其市場需求生產規(guī)模和產值均很樂觀，并已產生巨大經濟效益[3]。生物體內的各種代謝變化都是由酶驅動的酶有兩種功能:其一，催化各種生化反應是生物催化劑；其二，調節(jié)和控制代謝的速度、方向和途徑，是新陳代謝的調節(jié)元件。酶對細胞代

5、謝的調節(jié)主要有兩種方式:一是通過激活或抑制以改變細胞內已有酶分子的催化活性；另一種是通過影響酶分子的合成和降解，以改變酶分子的含量。這種酶水平的調節(jié)機制是代謝的最關鍵的調節(jié)[4]。按照淀粉酶水解淀粉的作用方式，可以分為α淀粉酶、β淀粉酶、異淀粉酶和麥芽糖酶四種類型。實驗證明，當谷類種子萌發(fā)時，兩類淀粉酶（α，β型）都存在，淀粉酶總酶活性隨種子萌發(fā)將升高，有利于淀粉被降解為植物生長發(fā)育所需的葡萄糖。許多微生物包括細菌、真菌和酵母都能生產淀

6、粉酶，這些廉價的淀粉酶來源，已廣泛應用于食品、醫(yī)藥、飼料和環(huán)保等生產實踐中[5]。在醫(yī)學上測定淀粉酶活性的方法有：簡易快速紙片測定法[6]；蘇木杰氏快速計時法[7]；單一穩(wěn)定液體試劑直接測定法[8]等。池永煥，黃菱紅等探究了溫度對淀粉酶活性的影響[9]；沈文英胡洪國潘雅娟研究了溫度和PH值對南美白對蝦(Penaeusvannmei)消化酶活性的影響[10]；司紅起馬傳喜董召榮吳大鵬高俊進行了小麥多酚氧化酶抑制和激活效應的研究[11]。本

7、實驗僅限于酶學研究圖1麥芽糖標準曲線1.2.2酶液的提取酶液的提取稱取2.0克萌發(fā)的小麥種子于研缽中加2mL蒸餾水和少量硼砂，研磨成勻漿，倒入50ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度線處，混勻后在室溫下靜置，每隔數(shù)分鐘震蕩一次，放置20分鐘后，開始離心（4000rmin）10分鐘，取上清液備用。1.2.3α淀粉酶活性的測定淀粉酶活性的測定用1.2.2中的上清液作酶液，取25mL具塞刻度試管5只，按表1處理。表1α淀粉酶活性的測定空白對照處理