兔子膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白（cetp）酶聯(lián)免疫分析（elisa）

1、1兔子膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白兔子膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)(CETP)酶聯(lián)免疫分析（酶聯(lián)免疫分析（ELISAELISA）試劑盒使用說明書試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測兔子血清，血漿及相關液體樣本中膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)的含量。實驗原理：實驗原理：本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中兔子膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)水平。用純化的兔子膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入

2、膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)，再與HRP標記的膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)抗體結合，形成抗體抗原酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中兔子膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)濃度。試劑盒組成試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書

3、1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標包被板14819628℃保存標準品：2700ngL0.5ml1瓶0.5ml1瓶28℃保存標準品稀釋液1.5ml1瓶1.5ml1瓶28℃保存酶標試劑3ml1瓶6ml1瓶28℃保存樣品稀釋液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑A液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑B液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存終止液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存濃縮洗滌液（20ml20倍）1瓶（20ml30倍）1

4、瓶28℃保存注意事項：注意事項：1試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡1530分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4請每次測定的同時做標準曲線，最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔第一孔的O

5、D值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)（n5）。3分鐘左右（20003000轉(zhuǎn)分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。5.組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（20003000轉(zhuǎn)分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其

6、余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于20℃保存，但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。計算：計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算