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1、第1頁共5頁姓名:報(bào)考專業(yè):準(zhǔn)考證號(hào)碼:密封線內(nèi)不要寫題20172017年全國碩士研究生招生考試初試自命題試題年全國碩士研究生招生考試初試自命題試題科目名稱:分子細(xì)胞生物學(xué)(□A卷B卷)科目代碼:850□√考試時(shí)間:3小時(shí)滿分150分可使用的常用工具:無□計(jì)算器□直尺□圓規(guī)(請(qǐng)?jiān)谑褂霉ぞ咔按颉蹋酢套⒁猓核写痤}內(nèi)容必須寫在答題紙上,寫在試題或草稿紙上的一律無效;考完后試題隨答題紙交回。一、名詞解釋(共5題,每小題4分,共20分)1.1
2、.轉(zhuǎn)錄因子轉(zhuǎn)錄因子:指真核細(xì)胞中,能夠結(jié)合在某基因上游特異核苷酸序列上的蛋白質(zhì)(2分),這些蛋白質(zhì)能直接或間接結(jié)合RNA聚合酶進(jìn)而調(diào)控該基因的轉(zhuǎn)錄(2分)。2.2.細(xì)胞凋亡:細(xì)胞凋亡:又叫程序性細(xì)胞死亡。細(xì)胞為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,由基因控制的自主的有序的死亡(2分)。與細(xì)胞壞死不同,細(xì)胞凋亡不是一件被動(dòng)的過程,而是主動(dòng)過程,它涉及一系列基因的激活、表達(dá)以及調(diào)控等的作用,它并不是病理?xiàng)l件下,自體損傷的一種現(xiàn)象,而是為更好地適應(yīng)生存環(huán)境而主動(dòng)爭(zhēng)
3、取的一種死亡過程(2分)。3.3.分子伴侶:分子伴侶:指一類在序列上沒有相關(guān)性但有共同功能的蛋白質(zhì)(1分),它們?cè)诩?xì)胞內(nèi)幫助其他含多肽的結(jié)構(gòu)完成正確的組裝(1分),而且在組裝完畢后與之分離,不構(gòu)成這些蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)執(zhí)行功能時(shí)的組份(2分)。4.4.主動(dòng)運(yùn)輸:主動(dòng)運(yùn)輸:主動(dòng)運(yùn)輸是指物質(zhì)逆濃度梯度,在載體的協(xié)助下,在能量的作用下運(yùn)進(jìn)或運(yùn)出細(xì)胞膜的過程(2分)。Na、K和Ca2等離子,都不能自由地通過磷脂雙分子層,它們從低濃度一側(cè)運(yùn)輸?shù)礁邼舛纫粋?cè)
4、,需要載體蛋白的協(xié)助,同時(shí)還需要消耗細(xì)胞內(nèi)化學(xué)反應(yīng)所釋放的能量(2分)。5.5.操縱子:操縱子:是阻遏蛋白識(shí)別與結(jié)合的一小段DNA序列,轉(zhuǎn)錄過程存在阻遏調(diào)控機(jī)制的基因中均含有這樣的序列(2分)。操縱子緊接在啟動(dòng)子下游,通常與啟動(dòng)子有部分重疊(2分)。二.簡(jiǎn)答(共5題,每小題20分,共100分)1.1.試比較原核和真核細(xì)胞的試比較原核和真核細(xì)胞的mRNAmRNA的異同的異同.答:1).真核生物5‘端有帽子結(jié)構(gòu)大部分成熟沒mRNA還同時(shí)具有
5、3’多聚A尾巴,原核一般沒有;(4分)第3頁共5頁2).基因載體(克隆載體)的選擇與構(gòu)建;(2分)3).限制性酶切:將疾病基因切成不同大小的片段;(2分)4).連接到另一個(gè)DNA分子上(克隆載體);(2分)5).轉(zhuǎn)化:將這個(gè)重組DNA分子轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞;(2分)6).篩選和鑒定:對(duì)吸收了重組DNA的受體細(xì)胞進(jìn)行篩選和鑒定;(3分)7).基因表達(dá):對(duì)含有重組DNA的細(xì)胞進(jìn)行大量培養(yǎng),檢測(cè)外源基因是否表達(dá)。(3分)4.4.PCRPCR的原理和
6、引物設(shè)計(jì)原則。的原理和引物設(shè)計(jì)原則。答:PCR的基本原理:PCR的原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相似,但反應(yīng)體系較簡(jiǎn)單。是根據(jù)DNA半保留復(fù)制原理,DNA在不同溫度下變性、復(fù)性的特性,以待擴(kuò)增的目的DNA分子為模板,以一對(duì)分別與模板5’末端和3’末端互補(bǔ)配對(duì)的寡核苷酸片段為引物,在4種dNTP和耐熱的TaqDNA聚合酶及合適的緩沖體系中,通過人為控制溫度(高溫變性、低溫退火、中溫延伸)發(fā)生依賴DNA聚合酶的酶促合成反應(yīng),循環(huán)多次后可使模板上介于
7、兩個(gè)引物之間的目的DNA片段得到擴(kuò)增。其特異性取決于引物與模板結(jié)合的特異性。(8分)PCR引物設(shè)計(jì)原則:1).引物長度一般為15~30個(gè)核苷酸。(2分)2).引物中的堿基盡可能隨機(jī)分布,避免出現(xiàn)GC堆積現(xiàn)象。。引物中GC的含量在45~55%左右。設(shè)計(jì)引物時(shí)要考慮3和5端引物具有相似的Tm值。引物長度要確保解鏈溫度不低于54℃。(2分)3)引物自身內(nèi)部不應(yīng)存在互補(bǔ)序列以避免折疊成發(fā)夾結(jié)構(gòu)。(2分)4)兩個(gè)引物之間不應(yīng)存在互補(bǔ)序列,尤其應(yīng)避
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