木質(zhì)纖維素降解菌的篩選及對(duì)秸稈降解的研究.pdf

1、本課題從提高秸稈降解率的目的出發(fā)，進(jìn)行了纖維素、木質(zhì)素降解菌的篩選，初步探討了其生長(zhǎng)特性和產(chǎn)酶特性，并研究了菌株混合培養(yǎng)及對(duì)秸稈降解的應(yīng)用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： (1)一共篩選出一株纖維素降解菌XJ-1，一株木質(zhì)素降解菌ZHJ-1，經(jīng)初步鑒定XJ-1為纖維單胞菌屬，ZHJ-1為原毛平革菌屬。 (2)對(duì)XJ-1的生長(zhǎng)特性試驗(yàn)研究表明：XJ-1生長(zhǎng)高峰出現(xiàn)在2-8小時(shí)，最佳PH值為7.00，最適溫度為35℃。 (3)

2、對(duì)ZHJ-1木質(zhì)素降解試驗(yàn)研究表明：ZHJ-1接種30d對(duì)稻草木質(zhì)素降解率為16.60％，綜纖維素降解率為30.47％，SF值為0.77。 (4)對(duì)ZHJ-1產(chǎn)LiP酶發(fā)酵條件優(yōu)化研究表明：接種孢子濃度、碳源種類(lèi)、氮源種類(lèi)、碳氮比、藜蘆醇、Tween 80等添加物、起始pH值、溫度、裝液量都對(duì)ZHJ-1產(chǎn)LiP酶有較大的影響。靜置培養(yǎng)下最佳產(chǎn)酶條件為：采用限碳培養(yǎng)基，葡萄糖2g/L，酒石酸銨24mmol/L，藜蘆醇3.0mmo

3、l/L，Tween 80 0.5g/L，起始pH值4.5，250mL三角瓶中裝液量30mL，每瓶接種量2×106個(gè)孢子，培養(yǎng)溫度35℃；振蕩培養(yǎng)下最佳產(chǎn)酶條件為：采用限氮培養(yǎng)基，葡萄糖為10g/L，酒石酸銨2mmol/L，藜蘆醇3.0mmol/L，Tween 800.5g/L，起始.pH值4.5，250mL三角瓶中裝液量50mL，每瓶接種量3×106個(gè)孢子。ZHJ-1在最佳發(fā)酵條件下靜置培養(yǎng)和振蕩培養(yǎng)均在第6d得到最高LiP酶活，分別為

4、102.7 U·L-1、99.8U·L-1。 (5)實(shí)驗(yàn)初步確定了ZHJ-1、XJ-1之間無(wú)拮抗關(guān)系。 (6)將兩株菌通過(guò)混合發(fā)酵發(fā)現(xiàn)比純發(fā)酵效果更好，再由正交實(shí)驗(yàn)得到混合菌的最佳稻草發(fā)酵條件為：接種量2mL，接種比例2:1(ZHJ-1：XJ-1)，溫度35℃，含水率80％。最佳條件下稻草發(fā)酵30d后木質(zhì)素降解率、綜纖維素降解率分別達(dá)到23.06％、35.23％，LiP酶活最高為95.3U·L-1，MnP酶活為最高7