3491421.pdf&ampamp;filename=iga腎病和紫癜性腎炎患者白細(xì)胞介素—1受體拮抗劑基因多態(tài)性？…

1、77J)中華腎臟病雜志1999年4月第15卷第2期ChinJNepkro1A0fil1999，Vol7一7IgA腎病和繼發(fā)性腎小球疾病專題論著紫癜性腎炎患者白細(xì)胞介素一1受體拮抗劑基因多態(tài)性的功能研究燮塹絲芷劉紅陳朝紅黎磊石【摘要】目的闡明白細(xì)胞介索一1受體拮抗劑(IL—lra)基因多態(tài)性對其功能的影響，論證IL廣1ra基因型與IrA腎病(1gAN)及紫癜性腎炎(HSPN)臨床袁型之間聯(lián)系的機理。方法用PCR方法對lg~3q和HSPN患

2、者ILira基因型進(jìn)行分析從If：Ira不同基因型患者獲取外周血單核細(xì)胞，觀察單核細(xì)胞經(jīng)單核巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM—CSF)刺激后，IL—ira、IL—la和ILI~的產(chǎn)生能力。結(jié)果無論是IgAN，還是HSPN患者，攜帶If：Ira基因IL1RN★2等位基因者其單核細(xì)胞II：l~的產(chǎn)生能力明顯低于不攜帶該等位基因的十體，而II，1a和IL1B的產(chǎn)生能力與是否攜帶IL1RN★2等位基因無關(guān)。結(jié)論ILlra基因多態(tài)性能對其功能產(chǎn)生影響。

3、攜帶IL1RN★2等位基因者其體內(nèi)lLlra的產(chǎn)生能力存在缺陷。談結(jié)果為臨床上根據(jù)IL—ira基因型有針對地采取干預(yù)治療奠定了基礎(chǔ)。【關(guān)鍵詞】II，1受體拮抗荊基因多態(tài)性IgA腎病紫癜性腎炎Ftmctimlalsi~tkanoeofⅡ，lreceptorantagonistgenepolymorph~minleAnephropathyandItenochSeahonleinnephritisLfUZMhong，YANGJurrwei，L

4、fUHong，etalResearchInstituteofNej~rology，Jlntings砷，Na扎jing210002【Abstract】O~eeUveTo[urtherexp[oretheunderlyingmechanismoftheassociationbetweenIL1receptorantagornst(ILlra)gellepo]ymorphismanddiseasephenotype，thefunctional

5、significanceofILlragenepotymomhi~nⅢstudiedMethodsgenotypeofILImdetectedbyPCRPeripheralmcaocytesobtainedfrcmpatientswithIgAnephrciaathy[IL1RN2(一)，=13；IuRN2()，=13]，Henoch—Schonlelnnephritis[IL1RN2(一)，=6；IuRN2()，lz=6]andnor

6、malcontrols[ILlRN2(一)，n=4；IL1RN2()，11=4~wereculturedandstimulatedbyGM—csF(10nglm1)IL廣lra，II，1dandII，lB∞nt日lb|nthesupema1tw廿℃medbyELLS&methodResultsGMCSFwasfoundtobeabletostimulatetheproductionofILlra，II，ldandILI~bymonocy

7、te~jngeneral，buttheamotmtofpmductic~ofII，lravailedinindividualsofdifferentg~otypesThe02T~OUntoflI，lraproductionwassignificantly10w啊inindividualswiththeILlRN2alLeleas0那口tothosewitboutthisaUelebothinIgAnephropathyandHoncch

8、~LelnnephritiswtfilethemwerenodiferencesintheproductionofIL1aandIL—1日inpatientwith。rwith~uttheILlRN2alineConclusionTheindividualscarryingtheIL1RN2allelehavealowercirculatingI即dofILlrainrestojnflammationtherebyinducingani

9、ncreasedactivityofII，1whichcouldberesponsiblefortfiggmgthede~e[opmentofclinicalmanifesrationinleanephropathyandHenoch~SchonleinnephritisAdministrationofrhlLlmmightat—tenuatethecytokinrI~XIDNeandimprovetheclinicalmani[est

10、ationinthesepatients，particularlytothc6ewjththelLlR2al1de【Keyword】lLlreceptorantagonistGenet：otymorphlsmIrAnephropathy由nephritisIL—lra不僅是一個急性期反應(yīng)蛋白，而且在ILl功能調(diào)節(jié)方面起重要作用。IL—lra能競爭性地與IL_l受體結(jié)合，進(jìn)而抑制ILl的活性[12]，因此，體內(nèi)IL—l活性在很大程度上取決

11、于ILlm對其的調(diào)控。ILlra基因第2號內(nèi)含子中存在數(shù)目可變串聯(lián)車課題璺軍礬醫(yī)藥衛(wèi)生杰出中青年科研基金項目資助(96JIXlN)作者單位：2100132南京軍區(qū)南京總醫(yī)院解放軍腎臟病研究所重復(fù)(VNTR)多態(tài)性，鑒于ILl在腎小球腎炎發(fā)病中的作用口1，我們曾對IL—lra基因多態(tài)性在IgAN和HSPN患者中的分布進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)IgAN表現(xiàn)為反復(fù)發(fā)作性肉眼血尿者，ILlrat~因IL1RN★2等位基因的攜帶率明顯高于其它臨床表現(xiàn)的Ig

12、AN患者，而與HSPN非常相似，并由此對反復(fù)發(fā)作性IgAN和HSPN的發(fā)病機理提出了新的觀點4jJ。為了進(jìn)一步揭示ILlra基因多態(tài)性與其表△維普資訊中華腎一莊扁雜志l999年4月第15卷第2期ChinJNe~hrol，Ap1999?！癈ol15—N—o2●詈莖。t二’墨#r1I廠廣JIrJI廠l廠田1IL~lra不同基因型個體單棱細(xì)胞在(M—csF朝澈后II，1ra增加程度的比較二、IL_lra不同基因型個體外周血單核細(xì)胞IL_h和I

13、L一10的產(chǎn)生能力觀察ILlra不同基因型個體外周血單核細(xì)胞經(jīng)GMCSF刺激后ILla和ILI~的產(chǎn)生能力，發(fā)現(xiàn)無論是正常人，還是kAN及HSPN患者單核細(xì)胞IL1a和ILI~的產(chǎn)生能力在IL—Ira不同基因型個體問沒有明顯的差異見表2。表2Ilra不同基因型個體單核細(xì)胞lLh和ILlO的產(chǎn)生能力(ng／m1)討論IL_1在IgAN血尿發(fā)生中的作用已被體內(nèi)、外實驗所證實_8J。動物實驗發(fā)現(xiàn)給IgAN模型小鼠注射外源性IL1能夠誘發(fā)血尿的

14、發(fā)生。有趣的是，若給正常小鼠注射IL_1則不能誘發(fā)血尿j。該現(xiàn)象表明IgAN血尿的發(fā)生除了要有腎臟病變的基礎(chǔ)外腎外細(xì)胞因子是其重要的觸發(fā)因素。作為一個重要的前炎癥介質(zhì)，機體的感染及應(yīng)激反應(yīng)均能觸發(fā)II，1的迅速產(chǎn)生及釋放。這也許是kAN患者肉眼血尿往往是在感染后很短的時間內(nèi)發(fā)作的原因之一。最近，有報道【J注射外源性ILlra能明顯改善自發(fā)性IgAN大鼠腎臟病變以及病程的進(jìn)展。此外，IL_1還與HSPN一些特征性病變的發(fā)生有關(guān)。Sato等

15、在對一組Kawasaki病患者皮膚活檢標(biāo)本進(jìn)行研究時發(fā)現(xiàn)，在患者皮膚血管病變周圍有大量IL1和_rf一n的存在，并認(rèn)為IL1和TNFa與一些血管炎患者的皮膚小血管病變以及皮疹的發(fā)生有關(guān)。動物實驗也表明應(yīng)用ILlra能有效地拮抗腎小球炎性病變及新月體的形成【1213』。因此，我們選擇了ILlra做為研究基因多態(tài)性與IgAN及HSPN臨床表型聯(lián)系的候選基因，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在HSPN和I—gAN表現(xiàn)為反復(fù)發(fā)作性肉眼血尿者其ILlra基因IL1RN★

16、2等位基因的攜帶率明顯高于正常人及其它IgAN患者_(dá)4J。IL_1ra基因多態(tài)性與臨床表型之間的這種聯(lián)系提示攜帶不同IL1m等位基因者其體內(nèi)IL一1ra的產(chǎn)生能力可能存在著差異，正是這種差異導(dǎo)致了同一種疾病不同個體在臨床癥侯表現(xiàn)上的多樣性。Blackemore等_】發(fā)現(xiàn)攜帶IL1RNk2等位基因者易患多種炎癥疾患，并推測這種現(xiàn)象的產(chǎn)生原因可能是因為攜帶ILlRN★2等位基因的個體在炎癥情況下，體內(nèi)IL_1ra的產(chǎn)生量較低，不能有效地拮抗

17、IL1的致炎作用，有關(guān)這一點迄今尚未被證實。ILlra基因多態(tài)性表現(xiàn)為數(shù)目可變串聯(lián)重復(fù)，其重復(fù)序列長86bp，在人群中不同個體該重復(fù)序列出現(xiàn)的次數(shù)從2次到6次不等。由于在ILlra基因這段重復(fù)序列中含有三個蛋白結(jié)合位點_1，這種結(jié)構(gòu)特點提示該基因多態(tài)性有可能對其編碼的蛋白質(zhì)產(chǎn)物有所影響。我們對正常人、IgAN和HSPN患者IL一1ra不同基因型個體外周血單核細(xì)胞IL_1ra的產(chǎn)生能力進(jìn)行了觀察比較，發(fā)現(xiàn)不同個體外周血單核細(xì)胞ILlra的

18、產(chǎn)生能力確實存在著差異，而這種差異與ILlra基因IL1RN／~2等位基因密切相關(guān)。無論是正常人，還是IgAN及HSPN患者攜帶IL1RN2等位基因(兩個重復(fù)體)者其單核細(xì)胞在GMCSF刺激后，ILlra的產(chǎn)生能力明顯低于與之相配對的不攜帶該等位基因者。表明攜帶IuRN★2等位基因者與不攜帶該等位基因者相比，其體內(nèi)IL1ra的產(chǎn)生存在缺陷，反復(fù)發(fā)作性肉眼血尿I—gab／和HSPN患者ILlRN★2等位基因的高攜帶率可能是導(dǎo)致上述疾病某些