試劑的配制

1、附錄1生物實(shí)驗(yàn)室常用試劑的配制一、檢驗(yàn)酸堿性的試劑1.酚酞試液取0.1g酚酞，溶解在100mL60～90%的乙醇溶液里，裝在試劑瓶內(nèi)密閉保存。酚酞試液在堿性溶液中呈紅色。2.甲基橙試液甲基橙是橙黃色粉末或晶狀鱗片。取0.1g甲基橙溶解在100mL蒸餾水里制成。當(dāng)pH值由3.1～4.4時(shí)，顏色為紅至黃色。3.甲基紅試液甲基紅是紅紫色晶體或紅色粉末。把0.1g甲基紅溶在100mL60%乙醇里制得。當(dāng)pH值由4.4～6.2時(shí)，顏色由紅色至黃色

2、。4.麝香草酚酞（百里酚酞）試液把0.1g白色的麝香草酚酞溶解在100mL90%乙醇里制得。當(dāng)pH值由9.4～10.6時(shí)，顏色為無色至藍(lán)色。5.溴甲酚紫指示劑將0.1g溴甲酚溶于9.25mL的0.02molL氫氧化鈉溶液中，加蒸餾水稀釋至250mL制得。當(dāng)pH值由6.2～6.8時(shí)，顏色由淡黃色變?yōu)榈仙?，變色點(diǎn)在pH6.7。6.溴甲酚綠試液溴甲酚綠是黃色晶體或紅棕色粉末。把0.1g溴甲酚綠溶于100mL20%乙醇中，或把0.1g溴甲酚綠

3、與2.9mL0.05molL氫氧化鈉溶液研勻，用水稀釋到100mL制得。當(dāng)pH值由3.8～5.4時(shí)，顏色由黃至藍(lán)色。7.甲基紫（結(jié)晶紫）試液把0.1g深綠紫色的甲基紫溶解在100mL的水里制得。當(dāng)pH值由0.13～0.5時(shí)，顏色由黃至綠；pH值由1.0～1.5時(shí)，顏色由綠至藍(lán)；pH值由2.0～3.0時(shí)，顏色由藍(lán)至紫。8.甲酚紅指示劑把0.1g深紅色的甲酚紅溶解于100mL50%的乙醇中，或?qū)?.1g甲酚紅與5.3mL0.05molL氫氧

4、化鈉研勻，用水稀釋到100mL制得。當(dāng)pH值由0.2～1.8時(shí)顏色由紅至黃；pH值由7.0～8.8時(shí)，顏色由亮黃至紫紅。甲酚紅指示劑遇少量二氧化碳，能快速變色，反應(yīng)靈敏，效果明顯。9.剛果紅試紙（紅色）把0.5g峋果紅溶解于1L水中，加入5滴乙酸，濾紙用溫?zé)崛芙庖航负?，取出晾干。遇酸性溶液變藍(lán)色。當(dāng)pH值變化范圍為3.0～5.2時(shí)，顏色由藍(lán)至紅。二、反應(yīng)試劑1.鑒定葡萄糖的試劑（1）班氏（Benedict）試劑①在600mL蒸餾水中溶

5、解173g檸檬酸鈉和100g無水碳酸鈉，冷卻后稀釋到850mL。②在100mL熱蒸餾水中溶解17.4g無水硫酸銅。冷卻后稀釋到150mL。把硫酸銅溶液緩緩倒入上述檸檬酸鈉一碳酸鈉溶中，邊加邊攪拌，如產(chǎn)生沉淀。要過濾，班氏試劑配制后能長期使用。如存放較久而產(chǎn)生沉淀時(shí)，可取上層清液使用，不必重配。（2）斐林氏（Fehling’sSolution）試劑①取35g硫酸銅，溶解在400mL蒸餾水里，加蒸餾水到500mL。②取85g氫氧化鉀（或70

6、g氫氧鈉）和175g酒石酸鉀鈉，溶解在400mL蒸餾水里，加水餾水到500mL。上述兩種溶液要分別保存，使用時(shí)再等量地混和并攪拌。如溶液里有葡萄糖，加等量斐林試劑，煮沸，會(huì)產(chǎn)生紅色的氧化亞銅沉淀。2.鑒定淀粉用的碘液取2g碘化鉀，溶解在10mL蒸餾水中，再加1g碘，待溶解后用蒸餾水稀釋到300mL，即成碘液。溶液在光亮處容易變成氫碘90mL水里，密閉保存。6.用于分離植物木質(zhì)部細(xì)胞的試劑—硝酸鉻酸溶液取1%硝酸和10%鉻酸各1份配成。7

7、.用于細(xì)胞質(zhì)壁分離的試劑（1）30%蔗糖液（2）5%氯化鈉溶液（3）5%硝酸鉀溶液。8.用于分離上皮細(xì)胞的試劑（1）甲醛一生理鹽水溶液（配方同前述）；（2）水合氯醛溶液取5g水合氯醛，用蒸餾水溶解，再稀釋到100mL制得。上皮組織浸泡時(shí)間為一二天。9.用于分離植物細(xì)胞中綠體的試劑0.3molL蔗糖0.01molL3氯化鉀0.05molL磷酸鹽緩沖液（PH=7.2）。0.05molL磷酸鹽緩沖液的配制法是：A液：取0.05molL的Na2

8、HPO412H2O(1.79g)溶解在100mL蒸餾水里。B液：取0.05molL的KH2PO4（0.58g）溶解在100mL蒸餾水里。取A液80mL和B液20mL混和后調(diào)整PH=7.2即可。四、染色劑有些動(dòng)植物組織和大多數(shù)細(xì)胞及細(xì)胞器是無色透明的，必須經(jīng)染色劑染色，才能在顯微鏡下觀察清楚，常用染色劑的制法和適用范圍如下表。名稱制法適用范圍洋紅溶液取5g明礬溶解在95mL蒸餾水里，再加0.5克洋紅，煮沸，冷卻，過濾，可加少許石炭酸防霉細(xì)

9、胞核、整體標(biāo)本、如水螅、血吸蟲乙酸洋紅溶液取100mL45%乙酸，煮沸30秒，加入1克洋紅，攪拌，再煮2－5min，冷卻，過濾染色體、洋蔥表皮細(xì)胞、口腔上皮細(xì)胞硼砂洋紅溶液取4g硼砂溶解在96mL蒸餾水里，再加3g洋紅，加熱到溶解，復(fù)用100mL70%乙醇沖淡。經(jīng)24h過濾細(xì)胞核、淀粉粒、整體標(biāo)本銨明礬洋紅溶液取5g硫酸鋁銨（銨明礬）溶解在95mL蒸餾水里，再加0.5g洋紅，煮沸，冷卻，過濾?？杉由僭S防腐劑整體標(biāo)本、蕨類原葉體、植物表皮

10、中性紅溶液取0.1g中性紅溶解在500mL的蒸餾水里原生動(dòng)物食物泡、動(dòng)植物組織活細(xì)胞內(nèi)含物石炭酸品紅（苯酚品紅）溶液取10g石炭酸溶解在190mL蒸餾水里，成甲液。另取0.3g堿性品紅（品紅）溶解在10mL95%乙醇里，成乙液。把甲液倒入乙液，以蒸餾水稀釋5倍現(xiàn)用細(xì)菌、放線菌、原球藻，膠原纖維、彈性纖維。中樞神經(jīng)組織核質(zhì)酸性品紅溶液取1g酸性品紅（品紅）溶解在99mL蒸餾水里細(xì)胞中白質(zhì)體，動(dòng)物細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)，植物皮層、髓部的薄壁細(xì)胞和纖維素