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1、廈門大學(xué)博士學(xué)位論文Ⅰ.酞菁化合物作為紅區(qū)熒光試劑的應(yīng)用研究Ⅱ.快速熒光免疫分析法研究姓名:李東輝申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):分析化學(xué)指導(dǎo)教師:許金鉤2000.2.1確 整訊p U 學(xué)的I :作F ,,分為曲部分。首先對(duì)自行制備的四氨基鋁酞菁( t e t r a .s u b s t i t u t e d a m i n oa l u m i n u mp h t h a l o c y a n i n e ,.T A A I P c
2、) 作為強(qiáng)酸測(cè)定的紅區(qū)熒光探針的可行性進(jìn)行了考察,并探討了其機(jī)理。T A A I P c 在p H < 2 .0 時(shí)不發(fā)熒光,咖佧性酸性介質(zhì)中可發(fā)射紅色熒光( k e r n = 6 7 8 n m ) ,且其相對(duì)熒光強(qiáng)度隨體系t l l 強(qiáng)酸含量的增加而呈對(duì)數(shù)增長(zhǎng)關(guān)系。掘此原理,建立了以T A A I P c 為紅區(qū)熒光探針的強(qiáng)酸測(cè)定方法,并應(yīng)刖j 二H C I 、H B r 、H N O ,和H ,S O ,的測(cè)定,結(jié)果令人滿
3、:謄。其次,我們對(duì)T A A I P c 作為紅區(qū)熒光探針應(yīng)用于膽紅素測(cè)定的可行性進(jìn)行了} /J 步探討。T A A I P c 經(jīng)鶯氯化后,可與膽紅素反應(yīng)形成熒光產(chǎn)物。且其相對(duì)熒光強(qiáng)度與膽紅素量呈對(duì)數(shù)相關(guān)關(guān)系。第t i 章對(duì)均相熒光免疫分析的原理、技術(shù)和新進(jìn)展進(jìn)行了綜述。第六章的工作可分為兩部分。第一部分將熒光各向異性的原理應(yīng)用于熒光標(biāo)記物對(duì)蛋白質(zhì)標(biāo)記比的測(cè)定。1 j 傳統(tǒng)方法相比,本法具有簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確的特點(diǎn)。另外,由于模型體系中
4、的蛋白質(zhì)和熒光標(biāo)記物是任意選定的。因此,本法具有通用性。其對(duì)其它蛋白( 乃至核酸) 一熒光標(biāo)記物體系也應(yīng)是適用的。第:部分的工作是將紅區(qū)熒光標(biāo)記物四羧基鋁酞菁、熱敏相分離技術(shù)和自行設(shè)汁的新型熒光液池( 及池架) 相結(jié)合,建立了一種快速熒光免疫分析新方法。該法儀需‘步離心分離即可實(shí)現(xiàn)對(duì)分析對(duì)象( 如抗原) 的帶管直接檢測(cè)。操作簡(jiǎn)便、快速,是一種很接近均相檢測(cè)的熒光免疫分析新方法??7ㄒ殉晒Φ貞?yīng)用f 乙型肝炎表面抗原的測(cè)定。第七章對(duì)本論文所
5、設(shè)計(jì)制作的、用于熒光分光光度計(jì)和分光光度計(jì)的新型液池架作了介紹。這三種液池架可容納生命科學(xué)研究中常用的塑料離心管,解決了塑料離心管與普通熒光分光計(jì)和分光光度計(jì)的兼容問題,具有廣泛的應(yīng)用前景。I 型和I I 型熒光液池架已成功地應(yīng)用于細(xì)胞核酸片段化率的測(cè)算及快速熒光免疫分析法。對(duì)A I S 。P c 的分光光度測(cè)定也表明了新型分光光度計(jì)液池架的實(shí)用性。本論文的主要貢獻(xiàn)在于:1 .制備了具有各種取代基團(tuán)的酞菁化合物( 及中f - 白J 體)
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