花菁染料在熒光分析中的應(yīng)用研究.pdf

1、花菁染料具有摩爾吸收系數(shù)大和熒光量子產(chǎn)率高的優(yōu)點(diǎn),采用紅區(qū)測(cè)量可有效地排除背景干擾，獲得更為理想的分析靈敏度和選擇性.花菁的光譜對(duì)外界微環(huán)境的變化極為敏感，非常適合生物及環(huán)境樣品的分析研究.事實(shí)上，花菁目前已成為熒光分析領(lǐng)域最重要的幾類探針之一.本文在前人工作的基礎(chǔ)上，繼續(xù)拓展花菁在環(huán)境和生物分析方面的應(yīng)用.本論文共分五章.
　　第一章：為緒論，首先綜述了花菁的分類、合成方法、各種性質(zhì)和應(yīng)用，著重介紹了花菁的聚集性質(zhì)、以及它在表面

2、活性劑膠束體系和生物體系中的應(yīng)用研究進(jìn)展.然后提出了論文設(shè)想.
　　第二章：研究了花菁Ⅰ在表面活性劑溶液中的光譜行為,并對(duì)其作了理論探討.首先考察了花菁Ⅰ在陰離子表面活性劑介質(zhì)中的吸收光譜特征.花菁Ⅰ在近紅區(qū)770nm處有一個(gè)強(qiáng)的吸收峰.加入一定量的陰離子表面活性劑十二烷基苯磺酸鈉（SDBS）能使花菁Ⅰ的紅區(qū)吸收強(qiáng)度降低，根據(jù)吸光度的降低值與SDBS的濃度間呈現(xiàn)的線性關(guān)系，建立了一種無(wú)萃取測(cè)定陰離子表面活性劑的分光光度法新方法;其

3、次，研究了花菁Ⅰ在陰離子表面活性劑SDBS中的熒光性質(zhì).實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，花菁Ⅰ有兩個(gè)熒光發(fā)射峰，分別在短波583nm(激發(fā)為265nm，弱熒光)和近紅區(qū)800nm(激發(fā)為765nm，強(qiáng)熒光).SDBS的存在可導(dǎo)致花菁Ⅰ短波熒光的增強(qiáng)和長(zhǎng)波熒光的猝滅.有無(wú)SDBS存在情況下，熒光強(qiáng)度的變化值與SDBS濃度間均有良好的線性關(guān)系.據(jù)此，分別建立了無(wú)萃取直接測(cè)定SDBS含量的新型熒光增強(qiáng)和熒光猝滅方法，并用于環(huán)境水樣中陰離子表面活性劑的測(cè)定.機(jī)理研究

4、表明，花菁Ⅰ的上述光譜變化源自于花菁在低濃度SDBS體系中的聚集.與溶劑萃取-分光光度法相比，所建立的三種方法不僅靈敏度高、重現(xiàn)性好，而且分析過程簡(jiǎn)單、避免了毒性有機(jī)溶劑的使用.其中的兩種近紅區(qū)測(cè)定方法，還具有光譜干擾少的優(yōu)勢(shì).
　　第三章：研究了陽(yáng)離子花菁Ⅱ與核酸的相互作用.實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，核酸對(duì)花菁Ⅱ的熒光具有明顯的猝滅作用.針對(duì)花菁Ⅱ在水溶液中穩(wěn)定性較差的缺點(diǎn)，考察了幾種表面活性劑膠束對(duì)花菁的增穩(wěn)、增敏作用，并最終選用了合適濃度的

5、表面活性劑TritonX-100，建立了靈敏度高、重現(xiàn)性好的測(cè)定核酸的紅區(qū)熒光猝滅方法，探討了熒光猝滅機(jī)理.
　　第四章：研究了花菁Ⅱ-聚谷氨酸-蛋白質(zhì)三元離子締合平衡體系.研究發(fā)現(xiàn)，陽(yáng)離子花菁Ⅱ與蛋白質(zhì)間缺乏強(qiáng)烈的相互作用，不能導(dǎo)致直接的光譜變化.但花菁Ⅱ能和帶負(fù)電荷的聚谷氨酸發(fā)生作用形成離子締合物，并因此導(dǎo)致花菁Ⅱ的熒光猝滅.吸收光譜的藍(lán)移（從696nm到628nm）和熒光的猝滅表明疏水花菁Ⅱ在水溶液和聚谷氨酸表面分別形成了兩