三葉半夏(pinelliaternata(thunb.)breit.)組培標(biāo)準(zhǔn)化研究及生物反應(yīng)器擴(kuò)繁

1、浙江理工大學(xué)碩士學(xué)位論文三葉半夏（Pinellia ternata（Thunb.）Breit.）組培標(biāo)準(zhǔn)化研究及生物反應(yīng)器擴(kuò)繁姓名：賈明良申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：陳集雙20100301浙江理工大學(xué)碩一{ ：學(xué)位論文S t u d y O l ls t a n d a r d i z a t i o n o f t i s s u ec u l t u r es y s t e ma n dm i c r o

2、 p r o p a g a t i o ni nb i o r e a c t o r o f P i n e l l i at e r n a t a ( T h u n b ．) B r e i t ．A b s t r a c tP in e I I i AP i n e l l i at e r n a t a ( T h u n b ．) B r e i t ．，w h i c hh a s b e e nu s e da

3、sa m e d i d n a l p l a n tf o rm o r e t h a n2 0 0 0y e a r s ，i s o n e o ft h e t r a d i t i o n a l C h i n e s e r n e d i d n a l p l a n ts p e d e s ，b e l o n g i n gt of a m i I yA r a c e a e ．I nt h i sp 堿

4、w e h a v es e tu pa s t a n d a r d i z e dt i s s u ec u l t u r es y s t e mt h r o u g ha r t i f i d a ld i v i s i o no ft h e g r o w t hp e r i o d s a n d o p t i m i z e dp r o c e s sA n o v e lt e m p o r a r

5、 yi m m E r s i o nb i o r e a c t o rw a sd e s i g n e dt o o v e r c o m et h ed i s a d v a n t a g e sf o rt r a d i t i o n a lt i s s u ec u l t u r e , w h i c hC O S T Sl o t so fh u m a np o w e r a n dr n a t

6、e d a l r e s o u r c e sT h e na n e ww a y f o rl a r g e - s c a l ea u t o m a t e dp r o d u c t i o no f p i n e l l i aw a s t e s t e dw i t hs o m e p r e l i m i n a r y 以p e r i m e n t s f o r m i c r o p r o

7、 p a g a t i o ni nt h i s b i o r e a c t o r ．1 ．E s t a b l i s h m e n t o f s t a n d a r d i z a t i o n o f t i s s u e c u l t u r e s y s t e m ．T h e e s t a b l is h e dp r o c e d u r e s o ft h e s t a n d a

8、 r d i z a t i o n o ft i s s u ec u l t u r e s y s t e ma r ea sf o l l o w s ．Ap e t i o l e w a s p u ti n t oM s + 6 - B A 1 ．0m g ／L + N A A 0 。0 5m g ／L + s u c r o s e 3 ％+ a g a r 5 ．0g ，L m e d i u m t o in d u

9、 c e c a l lu s a n dm u l t i p l es h o o td u m p s a f t e rt r e a t e db y7 5 ％a l c o h o l 2 0 ＆t h e ni n m e r c u r i cc h l o r i d ef o r8 m i n ．W h e n t h eS h o o t sg r o wt o “p e t i o l ee l o n g a

10、t i o ns t a g e “ ，t h e d u m p s w a s c u ti n t oa s i n g l eb u d t os n i t c h i n gin t oM s + 6 - B A1 ．0 m g ／L + N A A0 ．0 2 r a g ／L + s u c r o s e3 ％+ a g a r5 ．0 9 ，L m e d i u m f o rp r o l i f e r a t

11、 i o n ．T h e “L e a “ m a t u r i t ys t a g e “ b u d s w e r e c u ti n t oI ／2 M s + I B A 0 ．0 3r n g ／L + N A A0 _ 0 1m g ／L + s u c r o s e 3 ％+ a g a r5 ．0g ／L + A C0 ．3g ，L m e d i u m t oi n d u o er o o tg r o

12、 w t ha n d t r a n s p l a n tt h ep l a n t l e ti n t o f 笛ma f t e r 3 0d a y s g r o w t h 。w h e n t h e s e e d l i n g sa r e n e e d e df o r ad i r e c tc u l t i v a t i o ni ng r e e n h o u s e ．W h e nt h e

13、 s e e d l in g s a r e n o tr e q u i r e df o rd ir e c tp l a n t i n g ，t h e 。L e a v e s p r o l i f e r a t i n gs t a g e “ b u d s w e r e c u t in t oI ／2 M s + I B A 0 ．0 3m g ／L + N A A 0 ．0 1r n g ／L + s u c

14、 r o s e 5 ％- I - a g a r 5 ．0 g ／L+ A C 0 ．3g ／L m e d i u m t oi n d u c er o o tg r o w t h ．A s t h ep l a n t l e tg r o w i n gl e a v e s w i t h e r e da n dI nv i t r o t u b e r sm a t u r e d ．I n v i t r o t

15、u b e r s c a nb e s t o r e di na c u l t u r e b o t t l eal o n g t i m e ．I nv i t r o t u b e r sc a n b e c l e a n e d a n dp l a n t e d w h e n t h e w e a t h e r i ss u i t a b l e f o r c u l t i v a t i o n

16、．2 ．D e v e l o p m e n t o f t e m p o r a r y i m m e r s i o n b i o r e a c t o r a n d i t s u t i l i z a t i o n f o rm i c r o p r o p a g a t i o n ．、／＼／h 朗t h et e m p o r a r yi m m e r s i o n b i o r e a c t

17、 o rw a s d e s i g n e da n da s s e m b l e d ．i tW a s f o u n dt ow o r ks t e a d i l y ，a n d t h e u t i l i z a t i o n0 1 1 m i c r o p r o p a g a t i o no fp i n e i l i aW a s t e s t e d ．O nt h eo n eh a n