川西高海拔地區(qū)黃芪astragalus.spp根瘤菌多樣性研究

1、四川農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文川西高海拔地區(qū)黃芪（Astragalus.spp）根瘤菌多樣性研究姓名：鄒凌申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：微生物指導(dǎo)教師：張小平20070501A b s t r a c t3 3 r h i z o b i as t r a i n s W e r e i s o l a t e df r o m t h e n o d u l e s o f A s t r a g a l u s # t v i f l o r

2、u s a n d A s t r a g a t u ss t i i C O m b i n t h e p l a t e a u o f t w o d i f f e r e n t a l t i t u d e s 撖t h e w e s t o f S i c h u a n p r o v i n c e ．A f t e r t b en o d u 蜥o n t e a , t l e p h e n o t y

3、 p i cc h a r a c t e r i z e s a n d g e n e a i e d i v e r s i t y o f t h e s e3 3 s t r a i n sa n d1 8r e f e r c a w 冶s t r a i n s , t o t a n y5 1 s t r a i n s ，黼r e v e a l e db y 堍n u m e r i c a lt a x o n o

4、 m ya n dA F L P ：B O X - P C R ；1 6 S r D N A - R F L E “ I I 瓣r e s u l t s i n d i e a m d t h a tA c c o r d i n g t o f i l e 裁皤羲曩蟊越t a x o n o m y a n a l y s i s , t h e s e 3 3 s t r a i n s 赫麟d i v e r s ep h e

5、n o t y p i c a U y , 卸【試a l lo f t h e m w ∽f a s t - g r o w e r s ．M o r e o v e 罵t h e d e n d r o g r a m s h o w e d t h a t5 1 s t r a i n s c o u l d b e s e p a r a t e d i n t o 2g r o u p s 越t h e s i m i l a

6、r i t y o f6 5 ％。t n t h ep h y s i o l o g i e a l a n db i o c h e m i c a l t e s t s , 3 3 A s t r a g a l u sr h i z o b i a s t r a i n s s h o w e d 伽e i rb e i n g v u l n e r a b l ei nt h em e d i a w h i c h c

7、 o n t a i n a n t i b i o t i c s ，a n ds i m i l a r l yi nt h ee x t r e m eP H c o n d i t i o n s ，w h e n c o m p a r e d w i t h r e f e r e n c e s t r a i n s ．B a s e dO nt h ed e n d r e g r a m sg e n e r a t

8、 e d 齡A 戳a n dB O X - P e R , a l l t h es t r a i n sw e r er e p e e t i v e l yd i v i d e di n t o9 a n d5g r o u p sa tt h es i m i l a r i t yo f7 0 ％a n d 6 8 ％．N o t a b l y ,m o s to f A s t r a g a l u s 穗泣麟s t

9、 r a i n sa n dt h ef o l l o w i n gr e f e r e n c es 趕- a i n s ：l 蚤2 } 2 8 }U S D A l 0 0 2 ，U S D A l 0 3 7 ，U S D A 2 0 5 ，1 6 6 ，N Z P 2 2 3 4 ．U 蝴1 3 1 2 9 ' a l l o f w h i e h b e l o n g s拯R h i z o b i a

10、c e a e 翻| i n t o t h e s a l n eg r o u p 蘸c e r t a i n s i m i l a r i t i e s ．A n db e i n g i d e n t i c a l 如t h er e s u l t s t o t h en u m e r i c a l t a x o n o m y , t h es t r a i n s o b t a i n e d i n

11、t h e t w od i f f e r e n ta l t i t u d e s 寫理黜n o ts e p a r a t e d r e s p e c t i v e l y ．T h e 9 g e n o t y p e s 。f a n t h e s h a m s o t n a i n e db y1 6 S r D N A - R F L P a n a l y s i ss h o w e dt h a

12、tm O S to f t 醞g e n o l y p e s A s t r a g 囂／u sr h i z o b i as t r a i n sw 2 a ' ev e r ys i m i l a r 船t h e 懿孫娩罄g e n e r a ：R h i z o b i Ⅺn , S i n o r h i z o b i u m , A g r o b a c t e r i u m , a n d t h

13、 eg e n o t y p c so fp r oo f t h eA s t r a g a l u ad l i z o b i as t r a i n s 嘲o c a - a p l 撇t yi d e n t i c a l t o t h e f o l l o w i n g s w a i n s ：．U S D A 2 3 7 0 囂U S D A l 0 0 2 ，1 0 2 F 2 8 , U S D A 4

14、 1 0 2 ，s t r o n g l ys u g g e s a n g a m t A s t r a g a l u st h i z o b i as t r a i n s鍋?zhàn)靋 l o s e l y r e l a t e d t o R ／跑o b ／a c e a e f r o m t h e s m d p o i n t o f p h y l o g e n y ．H o w e v e r , al o

15、 t o fp r e v i o u s s t u d i e s d e m o n s t r a t e d t h a t 1 6 S r D N Ac a ne x i s t 攮m u l t i - c o p i e s 洫t h es a m ec e l l ，w h i c hi s d i f f e r e n t , a n d1 6 S r D N Aa l s oc a ns p o n t a n

16、e o u s l y茬E 建蹴a n d r e c o m b i n e ．H e n c e , t o g e t t h e a u t h e n t i c p h y l o g e n e t i e i n f o r m a t i o n ,s e q u e n c i n g s o m eo r t h o l o g o u s g e n e s w o u l d b ei n d i s p e