泌乳相關(guān)激素對(duì)奶牛泌乳性能的影響及調(diào)控機(jī)制研究.pdf

1、我國(guó)乳品業(yè)發(fā)展迅猛，成績(jī)斐然，尤其通過(guò)優(yōu)化飼養(yǎng)管理等方法，奶牛產(chǎn)奶量顯著提高。然而，如何延長(zhǎng)奶牛的泌乳周期、提高乳品品質(zhì)以及降低乳房炎發(fā)生率，成為我國(guó)奶業(yè)可持續(xù)健康發(fā)展亟待解決的問(wèn)題。先前的研究主要集中在如何提高產(chǎn)奶量或單一改善乳品質(zhì)等方面，而泌乳相關(guān)激素、擠奶頻率以及乳汁積滯對(duì)奶牛泌乳周期中催乳素分泌的影響及其調(diào)控機(jī)制的研究較少。本研究以泌乳中期荷斯坦奶牛為研究對(duì)象，通過(guò)注射多潘立酮、雌激素、生長(zhǎng)激素和喹高利特四種激素及改變擠奶頻率、

2、乳汁積滯的方法，采用放射免疫技術(shù)法、酶標(biāo)免疫吸附試驗(yàn)法、實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Quantitative Real Time PCR，qRT-PCR)和Western blotting技術(shù)手段，檢測(cè)奶牛產(chǎn)奶量、乳汁成分和泌乳相關(guān)激素分泌及基因表達(dá)的變化，研究奶牛體內(nèi)催乳素的變化及其與泌乳相關(guān)信號(hào)通路的關(guān)系，揭示奶牛泌乳及維持泌乳的機(jī)制，為提高奶牛泌乳性能，保證奶牛的健康，提高奶牛的產(chǎn)奶量和牛奶質(zhì)量奠定理論基礎(chǔ)。其結(jié)果如下:
　　研究多

3、潘立酮聯(lián)合不同擠奶頻率對(duì)產(chǎn)奶量、乳汁成分和泌乳相關(guān)激素及基因的影響，結(jié)果表明，擠奶頻率為1次/天時(shí)奶牛產(chǎn)奶量顯著下降(P＜0.05)，而在擠奶頻率為3次/天時(shí)，乳脂率(P＜0.05)和乳蛋白(P＜0.05)的含量顯著降低。注射多潘立酮(300 mg/10mL)后對(duì)奶牛產(chǎn)奶量無(wú)顯著影響(P＞0.10)，但可導(dǎo)致血清中催乳素(PRL)含量極顯著升高(P＜0.01)，而擠奶頻率為1次/天時(shí)，乳汁中PRL含量極顯著高于擠奶頻率為3次/天(P＜0

4、.01)。與擠奶頻率為3次/天的奶牛相比，擠奶頻率為1次/天的奶牛乳脂中催乳素受體基因PRLRL(P＜0.05)和PRLRS(P＜0.05)、乳蛋白關(guān)鍵基因CSN2(P＜0.05) mRNA表達(dá)量均顯著降低。
　　當(dāng)注射17β-雌二醇(2.5 mg/d)時(shí)，與對(duì)照組相比，奶牛產(chǎn)奶量極顯著降低(P＜0.01)，乳汁中乳脂率呈升高的趨勢(shì)(P=0.08)，乳蛋白和乳糖的含量極顯著升高(P＜0.01)，血清中PRL的含量顯著升高(P＜0.

5、05)，乳汁中PRL的含量具有升高的趨勢(shì)(P=0.10)。同時(shí)，處理組血漿中的IGF-1濃度極顯著升高(P＜0.01)。血清中Cortisol濃度具有升高的趨勢(shì)(P=0.07)。與對(duì)照組相比，雌激素注射組乳腺組織中Bcl-2基因的表達(dá)量顯著下降(P＜0.05)，BAX/Bcl-2比率顯著升高(P＜0.05);乳脂中PRLRS基因的表達(dá)量呈下降趨勢(shì)(P=0.07)。Western blotting法檢測(cè)乳腺組織催乳素受體蛋白的表達(dá)，與對(duì)照

6、組相比，注射雌激素對(duì)PRLRL和PRLRS蛋白的表達(dá)水平無(wú)顯著差異(P＞0.10)。
　　生長(zhǎng)激素對(duì)產(chǎn)奶量具有明顯的促進(jìn)作用(P＜0.01)。乳汁中的乳脂率顯著升高(P＜0.05)，乳蛋白質(zhì)的含量呈降低的趨勢(shì)(P=0.09)。在注射生長(zhǎng)激素(25 mg/d)的第8天，與對(duì)照組相比，注射生長(zhǎng)激素顯著提高基礎(chǔ)PRL的含量(P＜0.05)，催乳素釋放量之和呈降低的趨勢(shì)(P=0.08)。而在第14天，生長(zhǎng)激素組的基礎(chǔ)PRL含量呈降低的趨勢(shì)

7、(P=0.06)。生長(zhǎng)激素注射組血漿中的IGF-1和GH濃度極顯著升高(P＜0.01)，而血清中Cortisol濃度無(wú)顯著差異(P＞0.10)。生長(zhǎng)激素可促進(jìn)乳蛋白相關(guān)基因的表達(dá)，LALBA和CSN2的mRNA表達(dá)顯著升高(P＜0.05)，PRLRL mRNA的表達(dá)量升高(P＜0.05)。
　　當(dāng)注射喹高利特(1 mg/d，D1～D14)后，與對(duì)照組相比，產(chǎn)奶量極顯著下降(P＜0.01)，乳蛋白含量顯著升高(P＜0.05)，血清中

8、的PRL含量隨著時(shí)間的變化極顯著降低(P＜0.01)。注射多潘立酮階段(300 mg/10mL，D15～D35)和試驗(yàn)后階段(D36～D49)，血清和乳汁中的PRL極顯著升高(P＜0.01)，而與對(duì)照組相比，血清中PRL含量在注射多潘立酮階段(P＞0.10)和試驗(yàn)后階段(P＞0.10)差異不顯著。在試驗(yàn)后階段(D36～D49)，注射喹高利特組奶牛的產(chǎn)奶量顯著升高(P＜0.05)，乳脂產(chǎn)量極顯著升高(P＜0.01)，乳蛋白的產(chǎn)量(P=0.

9、09)以及乳糖的產(chǎn)量(P=0.06)均呈升高的趨勢(shì)。喹高利特注射組的能量校正乳(ECM)顯著升高(P＜0.05)。注射喹高利特后，與對(duì)照組相比，注射組乳脂中Bcl-2基因的表達(dá)量顯著下降(P＜0.05)，BAX/Bcl-2比率顯著升高(P＜0.05);乳脂中PRLRS基因的表達(dá)量顯著下降(P＜0.05)，其他泌乳相關(guān)基因的表達(dá)含量無(wú)顯著差異(P＞0.10)。
　　乳汁積滯24 h后，乳脂率極顯著升高(P＜0.01)。在乳汁積滯的試

10、驗(yàn)后期(48 h～60 h)，乳脂率(P＜0.05)和乳蛋白(P＜0.05)仍顯著升高，乳糖的含量顯著下降(P＜0.05)。乳汁積滯對(duì)乳汁中催乳素的含量無(wú)顯著差異(P＞0.10)。與對(duì)照組相比，在第48 h到60 h乳汁積滯一側(cè)的乳腺乳汁中催乳素含量呈上升趨勢(shì)(P=0.10)。與對(duì)照組相比，CSN2的mRNA表達(dá)量顯著升高(P＜0.05)，PRLRL mRNA的表達(dá)量顯著上調(diào)(P＜0.05)，而LALBA的mRNA表達(dá)量顯著下降(P＜0

11、.05)。
　　通過(guò)試驗(yàn)結(jié)果，得出以下結(jié)論:
　　1)注射多潘立酮可顯著提升血清催乳素含量，進(jìn)而提高產(chǎn)奶量;注射多潘立酮聯(lián)合不同擠奶頻率，使乳脂中催乳素受體表達(dá)量上升，進(jìn)而增強(qiáng)乳腺泌乳反應(yīng)，提高奶牛產(chǎn)奶量和乳脂率。
　　2)注射雌激素后，乳脂中催乳素受體表達(dá)量下降，進(jìn)而導(dǎo)致奶牛奶產(chǎn)量下降。
　　3)注射生長(zhǎng)激素可提高奶牛產(chǎn)奶量，并促進(jìn)催乳素受體、CSN2和LALBA基因的表達(dá)。
　　4)注射喹高利特能降低血