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文檔簡介
1、單細胞分辨率下細胞生物化學、物理特性的研究與表征,能夠有效揭示個體細胞在結(jié)構(gòu)功能與狀態(tài)上的差異性,對理解不同細胞新陳代謝、細胞性疾病的病理特征、細胞間的相互作用、細胞與介質(zhì)環(huán)境的相互作用等具有十分重要的意義。作為研究單細胞的重要手段,基于微流控芯片的單細胞排列與控制技術受到了愈來愈多的關注,然而目前大多數(shù)的單細胞排列與控制技術不僅成本高昂、而且效率很低,嚴重影響了單細胞排列與控制技術的推廣與應用。本文結(jié)合介電泳的非侵入、免標記、易控制與
2、流體動力學的高效率、低成本,通過仿真優(yōu)化和實驗測試,設計制作了三明治式流體增強介電泳單細胞排列與控制芯片,實現(xiàn)了高通量陣列化的單細胞排列與控制,主要內(nèi)容如下:
首先,對介電泳、絕緣介電泳和流體動力學的基本理論做了分析,得出了介電泳力的公式及影響其大小與方向的因素、絕緣微墻對空間非均勻電場分布的影響及微墻對層流的影響;然后建立了等效細胞多層球殼模型,對細胞進行受力分析得到流體增強介電泳捕獲與釋放細胞的原理;最后對OCI細胞的頻響
3、特性進行計算得出了不同電導率、不同介電常數(shù)溶液對細胞介電響應的影響,為單細胞排列與控制奠定了理論基礎。
其次,根據(jù)介電泳與流體動力學的基本理論,利用計算機輔助軟件AutoCAD、Solidworks建立了三明治式流體增強介電泳單細胞排列與控制芯片的結(jié)構(gòu)并提出了其兩種工作模式,之后使用有限元軟件COMSOL Multiphysics仿真分析了芯片內(nèi)部電場和流場的分布,并通過仿真不同尺寸結(jié)構(gòu)對電場和流場的影響,得出了最佳的結(jié)構(gòu)尺寸
4、。
再次,根據(jù)微流控芯片選材原則,選定了各部分的加工材料與工藝,并根據(jù)加工方案,采用光刻法制作了上下層ITO微電極及SU-8微墻陣列,使用旋涂法制作了PDMS流體通道與導管接頭,最后使用氧等離子鍵合技術對芯片進行了封裝。
最后,搭建了微流控芯片實驗測試平臺,制作了用于連接芯片與外部信號源的PCB轉(zhuǎn)接板。培養(yǎng)人類急性髓細胞性白血病細胞(OCI-AML3),并用叉指電極優(yōu)化使OCI細胞發(fā)生介電泳行為的頻率與幅值后,通過熒
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