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1、中文 中文 2700 字出處: 出處: Biologia plantarum, 2004, 48(1): 129-132八種野生郁金物種的體外植株再生和遺傳保護(hù) 八種野生郁金物種的體外植株再生和遺傳保護(hù)In vitro plant regeneration and genotype conservation of eight wild species of Curcuma組織培養(yǎng)和凍存組,國(guó)家局植物遺傳資源,新德里- 110012,印
2、度Albert Katz Center for Desert Agrobiology, Ben-Gurion University of the Negev, Sede Boquer Campus, Israel**摘要 摘要:對(duì)八種郁金野生物種的體外植株再生和中期基因保存方法進(jìn)行了優(yōu)化。這兩種現(xiàn)象都存在基因型依賴性,所使用細(xì)胞分裂素的種類(lèi)和濃度對(duì)其有著顯著的影響。在一般情況下,發(fā)現(xiàn)芐基腺嘌呤(BA)比測(cè)試的其他細(xì)胞分裂素有利于植株再
3、生和異戊烯基腺嘌呤(2iP)則有利于基因型保護(hù)。每個(gè)發(fā)芽數(shù)介于 1.3 至 7.2 和貯存期由 264 至 379 天。在 30 天的培養(yǎng)后,C malabarica 在 MS +11.4 µM zeatin(7.2 個(gè)芽)中芽的再生頻率最高。郁金(未知的野生種)在MS +24.6μM 的 2iP 中可能存儲(chǔ)期最長(zhǎng),最長(zhǎng)期限(379 天) 。其次是 C. aromatica 在MS+22.8µM zeatin
4、中(363 天) 。組織培養(yǎng)的植株同他們的母本形態(tài)相似。在體外培養(yǎng)保存的植物的組織可以快速繁殖及轉(zhuǎn)移到溫室土壤中產(chǎn)生正常的根莖。關(guān)鍵詞 關(guān)鍵詞:種質(zhì)資源,遺傳資源,微體繁殖,組織培養(yǎng)姜黃屬植物(姜科)由 80 余種根莖型多年生草本植物組成,廣泛分布于亞洲熱帶地區(qū),亦分布于非洲和澳洲。體外技術(shù)可用于郁金種質(zhì)資源保護(hù),馬鈴薯,木薯和山藥種質(zhì)資源的情況可以證明。在我們的實(shí)驗(yàn)室組織培養(yǎng)已成為無(wú)性繁殖和各種作物品種保護(hù)的有效方法。直接組織培養(yǎng)再生
5、植株(不通過(guò)愈傷組織)是體外保存計(jì)劃成功的先決條件因?yàn)橥ㄟ^(guò)愈傷組織誘導(dǎo)再生植株可能導(dǎo)致體細(xì)胞無(wú)性系變異。Nadgauda 等(1978)和 Balachandran 等(1990 年)報(bào)道了以 C.longa根莖上的芽作為外植體進(jìn)行體外增殖和通過(guò)葉片誘導(dǎo)的愈傷組織進(jìn)行增殖。然而,除了 C. aeruginosa,C.caesia(Balachandran1990 年)和 C.aromatica (Nayak 2000),這些關(guān)于野生物種
6、的快繁報(bào)告是無(wú)法現(xiàn)成利用的。.迄今用于野生郁金物種的保護(hù)的體外技術(shù)還沒(méi)有系統(tǒng)工作的報(bào)告。目前的研究對(duì)野生郁金的直接植株再生和有效保護(hù)的體外方法進(jìn)行了優(yōu)化。根莖的芽采自八種野生郁金物種的根狀莖的新芽,分別為 C. aeruginosa Roxb表 2 四種細(xì)胞分裂素(在兩個(gè)濃度)對(duì)體外保存郁金野生物種(天數(shù))的影響。在所有的物種測(cè)試中所有細(xì)胞分裂素都使用兩個(gè)濃度,外植體 100%來(lái)自于莖基部。然而,芽的形成量在各種不同的物種是不同的(表
7、1) 。培養(yǎng) 3 周后,新芽形成小芽(1-2cm) 。在 4- 5 個(gè)星期的培養(yǎng)中觀察芽數(shù),沒(méi)有進(jìn)一步增加。芽的再生遵照每個(gè)物種的獨(dú)特模式。測(cè)試物種種類(lèi)和細(xì)胞分裂素對(duì)芽的再生有著顯著的差異。所有的物種合計(jì),每個(gè)培養(yǎng)管芽數(shù)平均為 1.3 至 7.2(見(jiàn)表 1) 。C. malabarica在 MS+11.4µMzeatin 中產(chǎn)生最多數(shù)目的芽(每個(gè) 7.2 個(gè)芽) 。C. aromatica,C. brog,C.caesia,
8、C.raktakanta 和 C.sp 在 MS + 11.1 µM BA 中能產(chǎn)生較多芽。BA 有利于 C.longa 和 C. aromatica(Nayak2000 年)快速繁殖已經(jīng)有文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)。2iP 對(duì) C. longa 再生芽作用見(jiàn)于 Salvi 等的報(bào)道中,但在我們的研究中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)野生物種芽數(shù)在 2iP 培養(yǎng)基中高于其他細(xì)胞分裂素的培養(yǎng)基。沒(méi)有數(shù)據(jù)表明在有各種分裂素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)物發(fā)現(xiàn)較長(zhǎng)的芽。然而, C.brog
9、 在 MS +11.6μMkinetin 中有最高長(zhǎng)度的芽(5.6 厘米) ,其次是 C. aromatica 在 MS + 11.1 µM BA 中的芽(4.8 cm)。生根不影響芽發(fā)育成植株。觀察發(fā)現(xiàn)培養(yǎng) 4 周后在所有培養(yǎng)基上生根。不用嘗試去收集每個(gè)芽的根的確切個(gè)數(shù),根是否來(lái)源于單獨(dú)的芽在培養(yǎng)中難以區(qū)別。然而,觀察轉(zhuǎn)移到土壤中的植物,每個(gè)芽有 2 -4 個(gè)主根。 。每個(gè)物種移植到泥土中存活的強(qiáng)壯的植物高達(dá) 96- 100
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