羅伊氏乳桿菌LT018高密度培養(yǎng)及其凍干技術(shù)的研究.pdf

1、羅伊氏乳桿菌LT018是經(jīng)過(guò)篩選的源自巴馬百歲老人的益生菌株，是一株來(lái)源明晰、特性鮮明，且具有多種潛在益生功能的菌株，具有較強(qiáng)的耐受模擬胃腸液、粘附繁殖及抑菌能力，為了挖掘出其價(jià)值，以期為安全、優(yōu)質(zhì)、高效的食品用乳酸桿菌發(fā)酵劑及活菌制劑的研制與開(kāi)發(fā)提供高品位素材，將其大量生產(chǎn)轉(zhuǎn)化成產(chǎn)品，做了以下幾個(gè)方面的研究:
　　1.為優(yōu)化出適合羅伊氏乳桿菌LT018高密度生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，本研究以TPY為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，采用單因素方法確定增值培養(yǎng)基的

2、成分為胰蛋白胨、酵母粉、麥芽糖、檸檬酸、檸檬酸鈉、西紅柿汁和L-半胱氨酸。采用Plackett-Burman實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法得出胰蛋白胨、檸檬酸和L-半胱氨酸對(duì)菌株LT018的生長(zhǎng)促進(jìn)作用顯著，繼而進(jìn)行最陡爬坡實(shí)驗(yàn)快速接近較優(yōu)區(qū)域，通過(guò)RSM確定顯著因子的最優(yōu)組合為:胰蛋白胨含量:12.13g·L-1，檸檬酸0.4g·L-1，L-半胱氨酸0.6g·L-1。在上述培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，利用單因素方法確定培養(yǎng)最佳條件為:接種量為4.0％，溫度為37℃

3、，初始pH為6.7，靜置培養(yǎng)。此時(shí)該菌株的活菌數(shù)可達(dá)到7.13×1010cfu·mL-1，是未優(yōu)化前的10.7倍。通過(guò)本研究，培養(yǎng)基得到優(yōu)化，最終的活菌數(shù)與優(yōu)化倍數(shù)與相關(guān)報(bào)道相比都有了很大提高。
　　2.對(duì)羅伊氏乳桿菌LT018進(jìn)行真空冷凍干燥研究，以脫脂乳為基礎(chǔ)保護(hù)劑，通過(guò)對(duì)糖類、氨基酸類、醇類進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)面設(shè)計(jì)優(yōu)化復(fù)合保護(hù)劑，單因素實(shí)驗(yàn)篩選得到抗凍因子為:蔗糖、甘油、甘氨酸，然后采用響應(yīng)面法對(duì)羅伊氏乳桿菌凍干保護(hù)劑進(jìn)行

4、了優(yōu)化。最終得到羅伊乳桿菌保護(hù)劑的最佳配比為脫脂乳粉10.00％、蔗糖5.73％、甘油2.97％、甘氨酸0.69％，凍干后菌體存活率達(dá)到80.98％。與相關(guān)報(bào)道相比，本研究降低了保護(hù)劑成本，提高菌體凍干存活率。
　　3.對(duì)羅伊氏乳桿菌LT018菌粉進(jìn)行模擬胃腸道耐受性實(shí)驗(yàn)，測(cè)定其活菌數(shù)，結(jié)果表明，羅伊氏乳桿菌LT018菌粉在模擬胃液處理后的存活率為97.67％，模擬腸道液處理后的存活率為89.79％，羅伊氏乳桿菌LT018菌粉具有