雙光子DNA納米復(fù)合探針的構(gòu)建及生物分析應(yīng)用研究.pdf

1、雙光子顯微成像技術(shù)是利用近紅外的光子作為激發(fā)光源，長(zhǎng)波長(zhǎng)激發(fā)短波長(zhǎng)發(fā)射。其吸收過(guò)程能夠有效的降低生物體組織內(nèi)的自發(fā)熒光和自吸收，有效地避免生物樣品的光漂白及紫外可見(jiàn)光損傷現(xiàn)象，這些特點(diǎn)不僅能夠提高組織和活體的穿透深度(＞500μm)，同時(shí)也可延長(zhǎng)觀測(cè)的時(shí)間。由于它的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，雙光子顯微成像已經(jīng)廣泛應(yīng)用于細(xì)胞以及組織的微觀成像。
　　納米材料由于其具有獨(dú)特的小尺寸效應(yīng)因而具有一些特殊的光、熱、電、力學(xué)等性能。由于其較小的納米尺寸以及

2、較好的生物相容性，一些納米材料可作為進(jìn)入細(xì)胞的優(yōu)良載體，在生物傳感等方面得到廣泛應(yīng)用。基于納米材料的獨(dú)特性質(zhì)，結(jié)合雙光子顯微成像的特殊優(yōu)勢(shì)，本論文的研究工作主要包括以下兩個(gè)方面:
　　(1)基于雙光子染料標(biāo)記核酸適配體(Aptamer-TPdye)/氧化石墨烯(GO)自組裝及熒光共振能量轉(zhuǎn)移的特性，設(shè)計(jì)了一種新型的雙光子納米復(fù)合探針，并用于檢測(cè)體外及活體內(nèi)三磷酸腺苷(ATP)。Aptamer-TPdye由于π-π共軛作用可與GO自

3、組裝，吸附在GO表面即形成GO/Aptamer-TPdye納米復(fù)合物，由于雙光子熒光團(tuán)靠近GO表面而導(dǎo)致其熒光被淬滅。Aptamer-TPdye與ATP的結(jié)合力強(qiáng)于其與GO的結(jié)合力，將Aptamer-TPdye從GO表面競(jìng)爭(zhēng)下來(lái)，伴隨Aptamer-TPdye構(gòu)型的變化，熒光團(tuán)遠(yuǎn)離GO，熒光恢復(fù)。利用雙光子顯微成像的優(yōu)勢(shì)，從而實(shí)現(xiàn)復(fù)雜生物樣品中ATP的靈敏檢測(cè)，并成功應(yīng)用于細(xì)胞及活體成像的研究。
　　(2)基于以雙光子染料標(biāo)記的核