功能熒光微球的制備及其對蛋白質(zhì)的固定化.pdf

1、蛋白質(zhì)的固定化,特別是高通量藥物篩選中受體蛋白的固定化是目前生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn).固定化的載體材料特別是微球型載體的研究則是其中一個(gè)關(guān)鍵性的內(nèi)容.采用改進(jìn)的無皂乳液聚合法,制備了亞微米級到微米級的表面清潔化聚甲基丙烯酸甲酯微球.其方法是在無皂乳液聚合體系里分別加入乙醇、NaCl和甲苯.結(jié)果表明,在不同的反應(yīng)條件下,體系表現(xiàn)出不同的聚合行為,同時(shí)加入乙醇、NaCl和甲苯,對反應(yīng)最有利,可以制備出接近微米級的單分散聚合物微球.首次從產(chǎn)品收

2、率與轉(zhuǎn)化率的關(guān)系出發(fā),考察了苯乙烯的分散聚合.結(jié)果表明,不同的分散介質(zhì)對聚合過程、反應(yīng)轉(zhuǎn)化率、產(chǎn)品實(shí)際收率以及微球的平均粒徑和粒徑分布均有不同的影響.在此基礎(chǔ)上,制備了1~10μm呈正態(tài)分布的聚合物微球.采用在苯乙烯分散聚合體系里加入功能單體的方法,制備了聚苯乙烯功能微球.采用吸附法,制備了聚苯乙烯功能化熒光微球.所制備的熒光微球的化學(xué)性能、物理性能、吸收及發(fā)射性能穩(wěn)定,適合用做標(biāo)記型蛋白質(zhì)載體材料.分別考察了不同條件下,聚苯乙烯功能熒

3、光微球?qū)ρ宓鞍滓约耙鹊鞍酌傅墓潭ɑ?對固定化胰蛋白酶的活性進(jìn)行了研究.結(jié)果表明,在一定條件下,功能微球?qū)ρ宓鞍准耙鹊鞍酌妇哂邢鄳?yīng)的穩(wěn)定吸附量.固定化酶在溫度穩(wěn)定性、pH值穩(wěn)定性、儲(chǔ)存穩(wěn)定性以及回收活性方面具有游離酶不可比擬的優(yōu)越性.從在載體表面位點(diǎn)占據(jù)度和蛋白質(zhì)吸附的協(xié)同性出發(fā),推導(dǎo)出蛋白質(zhì)固定化的等溫吸附公式,其結(jié)果為Y=K[P]<'φ>/K[P]<'φ>+1或lnK+φln[P]=ln(Y/1-Y).從熵變的原理出發(fā),解釋了蛋