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1、磁性高分子微球是指內(nèi)部含有磁性金屬或金屬氧化物(如鐵、鈷、鎳及其氧化物)的超細(xì)粉末且具有磁響應(yīng)性的高分子微球。生物磁性高分子微球作為一種新型的功能材料,因生物磁性高分子微球兼具磁性粒子和聚合物粒子的特性,既可方便地從介質(zhì)中分離,又可對(duì)其表面進(jìn)行修飾從而賦予其表面多種官能團(tuán),近年來被廣泛研究,特別是在生物醫(yī)學(xué)、生物工程等領(lǐng)域的應(yīng)用引起了各國研究者的高度重視,成為生物醫(yī)藥研究領(lǐng)域中的一個(gè)研究重點(diǎn)。為了充分顯示磁性聚合物微粒迅速、簡(jiǎn)便的分離特
2、點(diǎn),微粒本身應(yīng)具有較高的磁響應(yīng)性和比表面積。本文以磁性Fe3O4為微球核體制備一系列磁性高分子微球,然后將磁性高分子微球用于對(duì)生物蛋白或核酸進(jìn)行吸附,考察了影響吸附過程的各種因素。 一、聚丙烯酰胺磁性復(fù)合微球的合成及對(duì)蛋白質(zhì)的吸附機(jī)理研究 用反相微乳液方法合成聚丙烯酰胺磁性微球,用紅外吸收光譜、電子衍射譜、透射電鏡、差動(dòng)熱分析、X-射線粉末衍射等方法對(duì)微球進(jìn)行表征。結(jié)果表明微球內(nèi)部Fe3O4晶型保持完好,微球呈球形,微球
3、粒徑20nm左右。 將微球用于對(duì)蛋白質(zhì)的磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖溶液中的蛋白質(zhì)進(jìn)行吸附,再加入交聯(lián)劑戊二醛,使得蛋白質(zhì)特異性吸附在Fe3O4/PAM微球上。用考馬斯亮藍(lán)G-250法檢測(cè)未反應(yīng)的蛋白質(zhì)。并討論了小牛白蛋白(BSA)的初始質(zhì)量濃度、反應(yīng)體系溫度、溶液離子強(qiáng)度、pH以及吸附保溫時(shí)間對(duì)Fe3O4/PAM微球吸附蛋白質(zhì)的影響規(guī)律。 二、殼聚糖磁性微球的合成及對(duì)蛋白質(zhì)的吸附機(jī)理研究 本文用環(huán)氧氯丙烷作為交聯(lián)劑,
4、將殼聚糖交聯(lián)包覆在由二價(jià)和三價(jià)的鐵離子共沉淀制得的Fe3O4磁子表面上,制成磁性殼聚糖微球(MC)。然后用于吸附蛋白質(zhì)-磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖溶液中的小牛白蛋白,利用紅外吸收光譜、透射電鏡、差動(dòng)熱分析、X-射線粉末衍射等方法對(duì)微球進(jìn)行表征。分析微球的形貌、組成及熱性能,結(jié)果表明微球內(nèi)部Fe3O4晶型保持完好,微球呈球形,微球粒徑20nm左右。 用紫外分光光度計(jì)檢測(cè)蛋白的吸附量,并討論了小牛白蛋白(BSA)的初始質(zhì)量濃度、反應(yīng)體系
5、溫度、溶液離子強(qiáng)度、溶液pH以及吸附保溫時(shí)間對(duì)Fe3O4/MC微球吸附蛋白質(zhì)的影響規(guī)律。 三、殼聚糖磁性微球?qū)怂岬奈綑C(jī)理研究 報(bào)道了用戊二醛將氨基修飾的寡核苷酸探針固定于氨基磁珠表面制成核酸傳感器,然后進(jìn)行預(yù)雜交、雜交,將傳感器與生物素標(biāo)記的DNA雜交,再利用親和素-生物素偶合系統(tǒng),偶聯(lián)上親和素標(biāo)記的過氧化物磷酸酶,用鄰苯二胺顯色系統(tǒng)顯色,最后用酶標(biāo)儀檢測(cè)磁珠吸附的核酸。同時(shí)用紫外分光光度計(jì)檢測(cè)分析了未反應(yīng)溶液的吸光
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