不同分子量羧甲基殼聚糖對(duì)皮膚創(chuàng)傷修復(fù)作用的研究.pdf

1、皮膚創(chuàng)傷是指機(jī)械性致傷因子所造成的皮膚損傷。皮膚創(chuàng)傷后的組織修復(fù)，是醫(yī)學(xué)中最古老的課題之一。隨著交通、建筑等行業(yè)的快速發(fā)展，皮膚的外傷性創(chuàng)傷越來(lái)越多見(jiàn)，并且傷情越來(lái)越復(fù)雜，治療起來(lái)更加困難，尤其是患者本身患有糖尿病、靜脈曲張等疾病，其創(chuàng)面治療更加棘手。一些抗生素、維生素、微量元素等制劑雖然被廣泛應(yīng)用，但基本停留在等待傷口自然愈合階段，促進(jìn)創(chuàng)面愈合十分有限。一些生長(zhǎng)因子雖然有較強(qiáng)的促進(jìn)創(chuàng)面愈合作用，但因種類繁多，配伍復(fù)雜，可能引起增生性瘢

2、痕，甚至引起癌變，尚處于實(shí)驗(yàn)研究階段。因此研究具有促進(jìn)創(chuàng)面愈合作用的藥物意義重大。 甲殼素是自然界可再生的一種聚乙酰氨基葡萄糖高分子多糖。殼聚糖是甲殼素脫乙?；漠a(chǎn)物，由于其資源豐富、天然無(wú)毒、無(wú)抗原性、生物相容性好、可生物降解且具有特殊的生物活性，近20多年來(lái)，對(duì)殼聚糖及其衍生物的性質(zhì)、功能研究和應(yīng)用開發(fā)已得到廣泛的重視。研究應(yīng)用范圍涉及到工業(yè)、農(nóng)業(yè)、生物工程、醫(yī)藥衛(wèi)生、食品工業(yè)、生物醫(yī)用材料、畜牧水產(chǎn)、化學(xué)化工等眾多領(lǐng)域，在

3、醫(yī)學(xué)領(lǐng)域更加突出，已有較多報(bào)道。但甲殼素和殼聚糖均不能直接溶于水，極大地限制了應(yīng)用。而殼聚糖C6位羥基最活潑，易于進(jìn)行化學(xué)修飾改性，通過(guò)羧甲基化改性后的羧甲基殼聚糖具有良好的水溶性，因此在醫(yī)藥、生物材料、化妝品等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用前景。 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)鹽酸降解法和氧化降解法將高分子量的殼聚糖降解成不同分子量梯度的殼聚糖，然后將其羧甲基化制備成相應(yīng)的不同分子量的羧甲基殼聚糖，同時(shí)對(duì)不同分子量的殼聚糖和相應(yīng)分子量的羧甲基殼聚糖的各項(xiàng)指標(biāo)

4、進(jìn)行測(cè)定。 分別以金黃色葡萄球菌和大腸桿菌為指示菌，研究不同分子量羧甲基殼聚糖對(duì)指示菌的最低抑菌濃度及其抑菌曲線，比較了不同分子量羧甲基殼聚糖對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌的抑菌活性。結(jié)果表明：不同分子量羧甲基殼聚糖對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌均具有抑菌活性；活性隨著分子量的降低和濃度增高而增強(qiáng)；對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制效果強(qiáng)于大腸桿菌。分子量為3KD左右的羧甲基殼聚糖的金黃色葡萄球菌最低抑菌濃度為0.5％，大腸桿菌的最低抑菌濃度為1

5、％。 在細(xì)胞水平上通過(guò)顯微觀察法和MTT細(xì)胞計(jì)數(shù)法研究了不同分子量的羧甲基殼聚糖在不同濃度下對(duì)小鼠皮膚成纖維細(xì)胞(NIH3T3)和人皮膚表皮角質(zhì)形成細(xì)胞(HaCaT)生長(zhǎng)及細(xì)胞形態(tài)的影響，同時(shí)分別與生長(zhǎng)因子bFGF和EGF比較。結(jié)果表明：不同分子量的羧甲基殼聚糖在濃度為1～1000ppm時(shí)對(duì)成纖維細(xì)胞和表皮角質(zhì)形成細(xì)胞生長(zhǎng)均有促進(jìn)作用，在濃度為100ppm時(shí)促進(jìn)作用最強(qiáng)；其促進(jìn)作用隨著分子量的減小而增強(qiáng)，分子量為3KD左右的羧甲

6、基殼聚糖對(duì)成纖維細(xì)胞和表皮角質(zhì)形成細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)作用最為顯著，分別與bFGF和EGF促生長(zhǎng)作用基本相當(dāng)。 以新西蘭兔為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，通過(guò)手術(shù)刀割創(chuàng)傷建立損傷模型，在形態(tài)學(xué)和組織學(xué)研究了不同分子量的羧甲基殼聚糖對(duì)促進(jìn)創(chuàng)面愈合的作用。結(jié)果表明：不同分子量的羧甲基殼聚糖都能促進(jìn)創(chuàng)面愈合，分子量在3KD左右的羧甲基殼聚糖對(duì)創(chuàng)傷愈合的促進(jìn)作用最為明顯，比對(duì)照組愈合時(shí)間明顯縮短。 本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示：分子量在3KD左右的羧甲基殼聚糖抑菌性最強(qiáng)