羧甲基殼聚糖止血作用研究及其血液安全性評(píng)價(jià).pdf

1、目的:有效的止血是外科手術(shù)中需要解決的重要問(wèn)題,尤其對(duì)于多血管的實(shí)質(zhì)性臟器,如肝外傷出血,常伴有大量失血導(dǎo)致的凝血功能障礙等。常用的止血方法如直接壓迫、結(jié)扎和電灼止血等很難奏效。目前已研發(fā)出多種止血材料,臨床肝臟外科手術(shù)中常用的止血材料包括可吸收明膠海綿、膠原蛋白海綿、氧化纖維素和纖維蛋白膠。它們各自存在不同的缺點(diǎn)和局限性,前三者需要正常的凝血功能作為其發(fā)揮作用的前提,后者雖然可在凝血功能障礙時(shí)發(fā)揮止血作用,但由于其準(zhǔn)備耗時(shí)、易被活動(dòng)性

2、出血沖走,在肝臟外傷手術(shù)中使用受限。因此,更有效的止血材料仍有待開發(fā)。羧甲基殼聚糖是由甲殼素經(jīng)脫乙?；玫降漠a(chǎn)物--殼聚糖,經(jīng)羧甲基化的衍生物,具有良好的水溶性和生物相容性、生物降解性、成膜性、止血、愈創(chuàng)、消炎等作用,在醫(yī)用生物材料的應(yīng)用方面有廣闊前景。本論文旨在研究羧甲基殼聚糖為基質(zhì)的止血材料的止血效果、止血機(jī)理和愈創(chuàng)效果,以及其經(jīng)機(jī)體降解吸收后對(duì)血液系統(tǒng)的影響,為該材料的長(zhǎng)期、廣泛地應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　 方法:1.研究羧

3、甲基殼聚糖的理化性質(zhì),檢測(cè)其水分、灰分、水溶性、重金屬含量、等電點(diǎn)、脫乙酰度、羧化度、粘均分子量、數(shù)均分子量、紅外圖譜和體外降解率。2.以Wistar大鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,制造肝素化大鼠肝臟敞開型傷口模型。設(shè)定實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組和空白組,每組實(shí)驗(yàn)前皮下注射低分子量肝素鈉,然后實(shí)驗(yàn)組使用羧甲基殼聚糖用于傷口創(chuàng)面,對(duì)照組使用速即紗,空白組不使用任何物質(zhì)。通過(guò)計(jì)算出血量和止血率評(píng)價(jià)材料的止血效果,并探討了材料的止血機(jī)理。分別于術(shù)后1周、2周和3周,肉眼

4、觀察以及制作肝臟損傷部位的病理組織切片,評(píng)價(jià)材料促進(jìn)傷口愈合的情況。3.將羧甲基殼聚糖植入大鼠腹腔(135mg／kg),分別于6h,12h,1d,2d,3d,4d,7d,10d及14d采集血樣,檢測(cè)凝血酶時(shí)間(TT)、凝血酶原時(shí)間(PT)、部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、纖維蛋白原(FIB)以及血小板第四因子(PF4)評(píng)價(jià)材料對(duì)大鼠凝血功能的影響,檢測(cè)抗凝血酶-Ⅲ(ATⅢ)評(píng)價(jià)材料對(duì)大鼠抗凝功能的影響,檢測(cè)纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)、D

5、二聚體(DO)以及纖溶酶原(PLG)評(píng)價(jià)材料對(duì)大鼠纖溶功能的影響,檢測(cè)全血粘度低切(BVL)、中切(BVM)、高切(BVH),以及血漿粘度(PV)評(píng)價(jià)材料對(duì)大鼠血液流變的影響。
　　 結(jié)果:1.實(shí)驗(yàn)所用的羧甲基殼聚糖水溶性較好,重金屬含量小于10,符合可吸收植入型醫(yī)用生物材料要求。2.在大鼠肝臟左葉部分切除為出血模型的實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)組的止血成功率為88.9％,對(duì)照組為44.4％,空白組為0％；在出血量方面,實(shí)驗(yàn)組的出血量0.23±

6、0.16也明顯低于對(duì)照組的0.43±0.31和空白組的0.56±0.33。肉眼觀察和病理組織切片觀察的結(jié)果都表明羧甲基殼聚糖具有更好的促進(jìn)傷口愈合能力,并易于在體內(nèi)降解吸收,不易形成粘連。3.在設(shè)定的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)上,各個(gè)指標(biāo)的實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組之間差異均不顯著,說(shuō)明羧甲基殼聚糖對(duì)大鼠血液系統(tǒng)無(wú)顯著影響。
　　 結(jié)論:本論文中使用的羧甲基殼聚糖具有良好的水溶性和降解性；止血、愈創(chuàng)能力優(yōu)于速即紗,且對(duì)血液系統(tǒng)無(wú)顯著影響,是一種安全有效的理