雙組分蛋白質(zhì)離子交換吸附行為研究.pdf

1、離子交換色譜是目前應(yīng)用最廣泛的液相色譜技術(shù)，為了更好地指導(dǎo)離子交換色譜技術(shù)在蛋白質(zhì)大分子分離純化中的實際應(yīng)用，本文選取牛血清白蛋白(BSA)和牛血紅蛋白(Hb)作為雙組分模型蛋白，Q Sepharose FF作為離子交換介質(zhì)，對其吸附行為進行了一系列的研究，主要包括以下幾個方面：
　　 1.通過不同pH值、離子強度、緩沖液體系和不同蛋白濃度比條件下的熱力學(xué)平衡研究，證明了雙組分吸附中的競爭行為的存在，BSA在吸附中占主導(dǎo)地位。B

2、SA的吸附主要受液相條件影響，而Hb的吸附主要由BSA的競爭吸附?jīng)Q定。雙組分蛋白離子交換次序吸附的研究證明吸附順序?qū)Φ鞍踪|(zhì)的競爭吸附有一定影響。
　　 2.用單組分空間質(zhì)量作用模型(SMA模型)參數(shù)對不同條件下雙組分蛋白離子交換吸附等溫線進行擬合，其結(jié)果表明多組分SMA模型能夠用于雙組分蛋白競爭吸附平衡的描述，且對強吸附蛋白組分的擬合效果較好。對同一蛋白來說，多組分SMA模型在有利于其競爭吸附條件下的擬合精度提高，反之精度降低。

3、
　　 3.單雙組分動力學(xué)研究結(jié)果表明BSA的傳質(zhì)擴散速率大于Hb。BSA在雙組分條件下的傳質(zhì)擴散速率與單組分條件下相同，而Hb在雙組分中的傳質(zhì)則進一步被BSA抑制，從而BSA先與吸附位點作用，Hb則只能與沒被BSA占據(jù)的位點作用。
　　 4.通過色譜穿透實驗實現(xiàn)了不同的雙組分蛋白濃度比的條件下蛋白混合溶液的高效分離，收集到的有高純度，高回收率的單組分Hb蛋白。
　　 本文通過對雙組分蛋白質(zhì)離子交換吸附過程進行系