基于納米材料熒光檢測(cè)生物分子的研究.pdf

1、納米金和氧化石墨烯作為目前新興的兩種重要的納米材料，在實(shí)際生活中各個(gè)領(lǐng)域的應(yīng)用越來(lái)越廣泛，特別是在生命科學(xué)、藥物分析中的應(yīng)用。兩種納米材料均有著自身優(yōu)良的特性及作為納米材料的特性，為生物傳感器的構(gòu)建提供條件。核酸適配體對(duì)靶物質(zhì)的高特異識(shí)別能力和高親和力，為檢測(cè)物質(zhì)消除干擾，且可進(jìn)行功能化修飾在納米金或者氧化石墨烯上用來(lái)制備核酸適配體傳感器。熒光探針是指利用熒光信號(hào)與目標(biāo)物的濃度存在關(guān)系,通過觀察熒光強(qiáng)度的變化來(lái)檢測(cè)靶物質(zhì)。本論文通過構(gòu)建

2、不同機(jī)理的熒光探針檢測(cè)生物小分子物質(zhì)包括腺苷、多巴胺以及卡那霉素。由此方法構(gòu)建的熒光探針檢測(cè)簡(jiǎn)便，具備高靈敏度、高選擇性。
　　(1)第一章介紹了以下內(nèi)容：納米金和氧化石墨烯的性質(zhì)特征、制備方法以及應(yīng)用研究；核酸適配體的制備及應(yīng)用；熒光傳感器的機(jī)理分析；本論文的研究意義及主要研究?jī)?nèi)容。
　　(2)基于納米金和氧化石墨烯構(gòu)建的熒光探針檢測(cè)溶液中的分析物質(zhì)。在本實(shí)驗(yàn)中，腺苷適配體可通過Au-S鍵修飾在納米金表面，無(wú)靶物質(zhì)腺苷時(shí)，

3、納米金-適配體可通過π-π堆疊作用吸附在氧化石墨烯表面，納米金-適配體-氧化石墨烯的復(fù)合物沉淀將會(huì)生成；在靶物質(zhì)腺苷存在時(shí)，納米金-適配體會(huì)存在于上清液中，不會(huì)全部與氧化石墨烯形成沉淀。加入熒光素，無(wú)靶物質(zhì)腺苷的上清液熒光較強(qiáng)，有靶物質(zhì)腺苷的上清液熒光較弱。通過檢測(cè)熒光的強(qiáng)度，不同濃度的腺苷可被檢測(cè)。線性范圍5×10-8M到5×10-7M，檢出限為5.8×10-9M。這個(gè)熒光探針對(duì)腺苷的檢測(cè)特異性強(qiáng)，其他類似物均無(wú)明顯干擾。并且此熒光探

4、針對(duì)于實(shí)際樣品中的腺苷檢測(cè)具有重要的意義。
　　(3)基于氨基芘和氧化石墨烯構(gòu)建的熒光探針檢測(cè)多巴胺。在無(wú)多巴胺存在時(shí)，熒光物質(zhì)氨基芘的熒光可被熒光淬滅劑氧化石墨烯淬滅，主要是通過氨基芘與氧化石墨烯之間的π-π堆疊作用。在多巴胺存在時(shí)，多巴胺將會(huì)吸附在氧化石墨烯的表面，使氨基芘從其表面析出。由于多巴胺與氧化石墨烯之間的強(qiáng)吸附作用，這個(gè)熒光探針具有較好的靈敏度和選擇性。線性范圍為4×10-9M to4×10-7M，檢出限為7.53n

5、M。本實(shí)驗(yàn)探討了氧化石墨烯與適配體對(duì)多巴胺的吸附作用，手段為熒光光譜、紅外光譜、以及朗繆爾吸附理論分析?？芍趸?duì)多巴胺有更強(qiáng)的吸附作用，因此兩者的強(qiáng)吸附作用使該熒光探針可對(duì)樣品中多巴胺進(jìn)行檢測(cè)。
　　(4)基于陽(yáng)離子體熒光產(chǎn)物、適配體、氧化石墨烯及DNA酶的相互作用檢測(cè)靶物質(zhì)卡那霉素。陽(yáng)離子體熒光產(chǎn)物在加入適配體時(shí)熒光淬滅，加入氧化石墨烯，熒光進(jìn)一步淬滅，當(dāng)加入靶物質(zhì)卡那霉素和DNA酶時(shí)，帶有陽(yáng)離子熒光物質(zhì)的適配體從氧化石