熒光DNA-銀納米簇對生物分子及汞離子的檢測.pdf

1、近些年來，以DNA為模板合成的銀納米簇(DNA-Ag NCs)因其粒徑小且具有優(yōu)異的光學(xué)性質(zhì)而受到科研工作者的廣泛關(guān)注。結(jié)合文獻(xiàn)本文設(shè)計了不同序列的模板DNA來合成Ag NCs，并分別對其光學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了研究。從中篩選出熒光性能較好的B-DNA-Ag NCs對生物分子和重金屬Hg2+進(jìn)行了檢測，并進(jìn)一步探究了DNA-Ag NCs與靶分子的作用機(jī)理。主要研究工作如下:
　　(1)設(shè)計了不同序列的ssDNA模板，合成了有熒光性能的DNA

2、-Ag NCs，并對DNA-Ag NCs的光學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，不同序列DNA合成的Ag NCs的熒光性質(zhì)不同，從中選擇了量子產(chǎn)率高(～29％)且熒光較穩(wěn)定的B-DNA-Ag NCs，進(jìn)行了后續(xù)的檢測實驗。
　　(2)以B-DNA-Ag NCs作為熒光探針對生物硫醇(Cys、GSH)和乙酰膽堿酯酶(AChE)的活性進(jìn)行了檢測。該方法對Cys和GSH的檢出限分別為0.134μM和0.172μM，檢測范圍分別為0-5.0μM和

3、0.5-4.5μM。另外，該方法通過DNA-Ag NCs熒光強(qiáng)度變化可以間接檢測AChE的活性，對AChE活性的檢出限為0.07I U/L，檢測范圍為0-4.0U/L。進(jìn)一步對巰基分子與DNA-Ag NCs作用機(jī)理進(jìn)行了研究。紫外可見吸收結(jié)果表明二者作用形成了不發(fā)射熒光的復(fù)合物，此過程屬于靜態(tài)淬滅;瞬態(tài)熒光結(jié)果表明巰基分子與DNA-Ag NCs存在激發(fā)態(tài)的相互作用，此過程屬于動態(tài)淬滅;透射電鏡結(jié)果表明二者相互作用使得DNA-Ag NCs

4、聚集成較大顆粒進(jìn)而導(dǎo)致熒光淬滅。該方法還可應(yīng)用于尿液中生物硫醇的檢測。
　　(3)以B-DNA-Ag NCs為熒光探針對溶液中的Hg2+進(jìn)行了檢測。該方法對Hg2+的檢出限低至4.5nM，檢測范圍為0-150nM。進(jìn)一步對Hg2+與DNA-Ag NCs可能的作用機(jī)理進(jìn)行了研究。紫外可見吸收結(jié)果表明，Hg2+與DNA-Ag NCs作用生成了不發(fā)射熒光的復(fù)合物;綜合穩(wěn)態(tài)熒光及瞬態(tài)熒光結(jié)果分析得出，Hg2+＜80nM時，淬滅過程為純粹的