2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、發(fā)展高選擇性、高靈敏度的Hg2+生物識別與傳感方法是頗為重要,也是一項(xiàng)富有挑戰(zhàn)的課題。如何對待Hg2+的熒光猝滅效應(yīng)以及避免Hg2+致蛋白變性,一直是開發(fā)基于蛋白的Hg2+熒光增強(qiáng)型傳感分子的難題。
  利用定點(diǎn)突變技術(shù),對148 His進(jìn)行一次突變,得到源于大型多管水母的GFP突變體,實(shí)現(xiàn)對Hg2+高選擇性、高靈敏度的熒光增強(qiáng)型傳感。低濃度熒光滴定實(shí)驗(yàn)表明,該識別體系對Hg2+具有低至亞納摩爾級的檢測限。吸收光譜和CD光譜實(shí)驗(yàn)指

2、明了Hg2+引起蛋白熒光增強(qiáng)的機(jī)理,即GFP基態(tài)生色團(tuán)的陰離子狀態(tài)吸收增強(qiáng)。此外,我們用單分子FCS研究了Hg2+對突變體蛋白的影響,發(fā)現(xiàn)熒光增強(qiáng)過程中蛋白沒有形成聚集、分子間二硫鍵以及發(fā)生構(gòu)象變化,卻觀察到源于三線態(tài)的暗態(tài)增多過程,結(jié)合熒光增強(qiáng)時(shí)量子產(chǎn)率下降以及熒光壽命減少的數(shù)據(jù),我們得以了解Hg2+對蛋白激發(fā)態(tài)的影響。進(jìn)一步突變研究使我們相信,在熒光增強(qiáng)過程中,Hg2+借助巰基的結(jié)合作用,穿過蛋白外表面的孔徑進(jìn)入內(nèi)部,影響生色團(tuán)基態(tài)

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