基于膠體金比色法的重金屬Hg2+快速超靈敏檢測新方法研究.pdf

1、快速超靈敏檢測重金屬Hg2+對人類健康和生態(tài)環(huán)境將有很重要的意義，本文建立基于核酸適配體的傳統(tǒng)型膠體金比色法、基于核酸適配體的信號增敏型膠體金比色法以及基于賴氨酸的膠體金比色法三種方法。
　　(1)基于核酸適配體的傳統(tǒng)型膠體金Hg2+比色法
　　本文應(yīng)用經(jīng)典的T-Hg2+-T錯配作為核心識別元素進(jìn)行Hg2+捕獲識別，使膠體金距離拉近而改變膠體金表面等離子共振，從顏色上就表現(xiàn)出膠體金從紅色變?yōu)樽仙蛩{(lán)灰色，從而可以肉眼檢測出H

2、g2+。我們優(yōu)化了偶聯(lián)物DNA-AuNPs重懸液的配方和識別探針的序列。在最佳的實(shí)驗(yàn)條件下，我們得到可視檢測下限為0.05nM(0.01 ppb)，并且經(jīng)過測定膠體金紫外-可見光譜建立一條標(biāo)準(zhǔn)曲線(R2=0.9916)，根據(jù)3σ法計(jì)算得出檢測下限為0.093 nM，同時也顯示出卓越的特異性。同時本研究應(yīng)用在實(shí)際樣品的檢測中，并且與儀器法電感耦合等離子體質(zhì)譜(1CP-MS)的檢測結(jié)果高度地一致。
　　(2)基于核酸適配體的信號增敏型

3、膠體金Hg2+比色法
　　本文在以上基于核酸適配體的傳統(tǒng)型膠體金比色法的基礎(chǔ)上通過修飾增強(qiáng)探針使更多的膠體金聚集而使顏色變化更明顯從而增加檢測靈敏度。我們分別優(yōu)化了識別探針R-DNA與增強(qiáng)探針E-DNA的比例、增強(qiáng)金的粒徑和樣品反應(yīng)加入順序。在最佳的實(shí)驗(yàn)條件下，我們得到可視檢測下限為0.005 nM(0.001 ppb)，并且經(jīng)過測定膠體金紫外-可見光譜建立一條標(biāo)準(zhǔn)曲線(R2=0.9921)，根據(jù)3σ法計(jì)算得出檢測下限為0.001

4、6 nM，同時也顯示出卓越的特異性。同時本研究并進(jìn)一步應(yīng)用在實(shí)際樣品的檢測中，我們對汞中毒的動物組織和流體樣品的檢測和ICP-MS結(jié)果一致，在環(huán)境監(jiān)測、食品安全等領(lǐng)域的具有潛在的應(yīng)用示范。
　　(3)基于賴氨酸的膠體金Hg2+比色法
　　經(jīng)過仔細(xì)并且認(rèn)真的研究，本文證實(shí)了含有至少兩個氨基的化合物可以在Hg2+存在的條件下有效的作為橋梁分子使得膠體金聚集產(chǎn)生顏色變化，從而作為基于膠體金的重金屬Hg2+檢測傳感器來檢測Hg2+。