桑色素鋅(Ⅱ)、鎘(Ⅱ)、鈷(Ⅱ)配合物與DNA的作用機(jī)理及DNA電化學(xué)傳感器的研究.pdf

1、合成了三種桑色素過渡金屬配合物，通過元素分析及紅外光譜對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征。利用電化學(xué)的方法研究了這些化合物與DNA的作用機(jī)理，優(yōu)化了最佳反應(yīng)條件。運(yùn)用核酸雜交技術(shù)，分別選用電化學(xué)活性高的桑色素鎘(Ⅱ)和桑色素鈷(Ⅱ)作為指示劑制備了DNA電化學(xué)傳感器，用于識別和測定互補(bǔ)的DNA片斷。采用共價鍵合法對電極表面進(jìn)行修飾，制備成DNA探針，并將DNA探針應(yīng)用于靶序列DNA片斷的識別，具有良好的選擇性，可用于實(shí)際樣品的分析。共分為三部分。

2、 (1)合成了桑色素鋅(Ⅱ)配合物Zn(C15H9O7)2·3H2O(簡寫為ZnL2)，通過元素分析和紅外光譜對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征；在0.2mol·L-1的HAc—NaAc(pH5.0)緩沖溶液中用電化學(xué)分析方法研究了ZnL2與鮭魚精DNA的相互作用。結(jié)果表明，ZnL2與DNA的作用方式為嵌插結(jié)合，ZnL2與DNA結(jié)合反應(yīng)的化學(xué)計量系數(shù)為0.5，結(jié)合常數(shù)為4.15×104L0.5·mol-0.5。優(yōu)化了結(jié)合反應(yīng)條件，在最佳條件下，ZnL

3、2氧化峰電流的下降值與DNA的濃度在2.27×10-5～1.73×10-4mol·L-1的范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系，檢出限為6.15×10-7mol·L-1(S/N=3)。 (2)合成了桑色素鎘(Ⅱ)配合物Cd(C15H9O7)2·2H2O(簡寫為CdL2)，通過元素分析和紅外光譜對其進(jìn)行了表征。在0.20mol·L-1的Tris—HCl(pH5.8)緩沖溶液中，運(yùn)用電化學(xué)分析法研究了CdL2與鮭魚精DNA的相互作用。結(jié)果表明CdL

4、2通過嵌插作用與DNA結(jié)合，實(shí)驗(yàn)求得結(jié)合反應(yīng)的化學(xué)計量系數(shù)m=1.76(m≈2)，結(jié)合常數(shù)Ka=1.2×108L2·mol-2。以CdL2作為雜交指示劑，利用共價鍵合法成功制備了DNA電化學(xué)生物傳感器，該傳感器檢測大腸桿菌病毒的線性范圍為2.69×10-8～9.16×10-7mol·L-1，檢測限為9.30×10-9mol．L-1(S/N=3)。 (3)合成了桑色素鈷(Ⅱ)配合物Co(C15H9O7)2·3H2O(簡寫為CoL2

5、)，通過元素分析和紅外光譜對其進(jìn)行了表征。在0.20mol·L-1的PBS(pH6.0)緩沖溶液中，運(yùn)用電化學(xué)分析法研究了CoL2與鮭魚精DNA的相互作用。結(jié)果表明CoL2通過嵌插作用與DNA結(jié)合，實(shí)驗(yàn)求得CoL2與DNA結(jié)合反應(yīng)的化學(xué)計量系數(shù)m=2.12(m≈2)，結(jié)合常數(shù)Ka=3.59×109L2·mol-2。用帶有羧酸基團(tuán)的多壁碳納米管(MWCNTs—COOH)修飾玻碳電極，將5'端氨基修飾的核苷酸通過羧基共價固定在碳納米管上，利