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文檔簡(jiǎn)介
1、研究目的:
運(yùn)動(dòng)中骨骼肌的鐵代謝調(diào)控機(jī)制尚不明確,有研究表明一氧化氮(NO)參與細(xì)胞的鐵代謝,但目前尚缺乏直接的證據(jù)說(shuō)明運(yùn)動(dòng)中NO對(duì)骨骼肌細(xì)胞鐵代謝的調(diào)控機(jī)制,本研究通過(guò)應(yīng)用L-NAME,研究NO對(duì)游泳訓(xùn)練大鼠骨骼肌鐵代謝的影響,觀察大鼠游泳訓(xùn)練后骨骼肌非血紅素鐵(NHI)、NO水平、骨骼肌鐵相關(guān)蛋白的變化及其相互關(guān)系,為運(yùn)動(dòng)后機(jī)體適應(yīng)性變化機(jī)制和運(yùn)動(dòng)中NO對(duì)骨骼肌鐵代謝調(diào)節(jié)機(jī)制提供了依據(jù)。
研究方法:
2、> 健康雌性斷乳SD大鼠隨機(jī)分為靜息組(SED)、運(yùn)動(dòng)組(EXE)、靜息+NOS抑制組(SED-LNAME)、運(yùn)動(dòng)+NOS抑制組(EXE-LNAME)。運(yùn)動(dòng)組和運(yùn)動(dòng)+NOS抑制組大鼠在水深50cm的玻璃游泳池內(nèi)游泳,游泳5d/w(休息2d),1次/d,每次游泳持續(xù)時(shí)間為:第1w30min,第2w60min,第3w開始固定為120min。SED除游泳運(yùn)動(dòng)以外,其余處理與EXE相同;靜息+NOS抑制組和運(yùn)動(dòng)+NOS抑制組均以灌胃的方式
3、給予一氧化氮合酶拮抗劑(L-NG-nitro-arginine methyl ester,LNAME,1mg/ml)的蒸餾水,大鼠飼料為AIN-93標(biāo)準(zhǔn)飼料,由南通特洛菲飼料科技有限公司提供。L-NG-硝基精氨酸甲酯(L-NAME)購(gòu)于Sigma公司。游泳運(yùn)動(dòng)3個(gè)月后,取大鼠股四頭肌,測(cè)定其NHI、NO水平及氧化(MDA)與抗氧化(SOD、TAOC)指標(biāo);應(yīng)用Western blot檢測(cè)DMT1-IRE、DMT1-nonIRE、TfR1
4、、FP1蛋白表達(dá)水平的變化。
研究結(jié)果:
(1)NHI含量:與靜息組比較,運(yùn)動(dòng)組NHI含量顯著升高(P<0.01);應(yīng)用L-NAME后,靜息+NOS抑制組與靜息組較之,無(wú)顯著性差異;運(yùn)動(dòng)+NOS抑制組與運(yùn)動(dòng)組比較,NHI含量降低(P<0.05)。
(2)NO含量:與靜息組比較,運(yùn)動(dòng)組NO含量顯著升高(P<0.01);應(yīng)用L-NAME后,靜息+NOS抑制組與靜息組較之,無(wú)顯著性差異;運(yùn)動(dòng)+NOS抑
5、制組與運(yùn)動(dòng)組比較,NO含量降低(P<0.05)。
(3)鐵代謝相關(guān)蛋白:與靜息組比較,運(yùn)動(dòng)組DMT1-nonIRE蛋白表達(dá)水平無(wú)顯著性差異,DMT1-IRE水平(P<0.01)、TfR1水平(P<0.01)顯著升高、FP1水平(P<0.05)降低;靜息+NOS抑制組與靜息組較之,DMT1-nonIRE、DMT1-IRE、TfR、FP1水平都無(wú)顯著性差異;運(yùn)動(dòng)+NOS抑制組與運(yùn)動(dòng)組比較,DMT1-nonIRE蛋白表達(dá)水平無(wú)顯
6、著性差異,DMT1-IRE水平(P<0.05)降低、TfR1水平(P<0.01)顯著降低、FP1水平(P<0.01)顯著升高。
(4)氧化與抗氧化:與靜息組比較,運(yùn)動(dòng)組MDA水平無(wú)顯著性差異,SOD水平(P<0.05)、TAOC水平(P<0.01)升高;靜息+NOS抑制組與靜息組較之,無(wú)顯著性差異;運(yùn)動(dòng)+NOS抑制組與運(yùn)動(dòng)組比較,MDA水平升高(P<0.05),SOD水平(P<0.05)、TAOC水平(P<0.05)降低。
7、
研究結(jié)論:
運(yùn)動(dòng)后,大鼠股四頭肌NO水平增加,抗氧化能力增強(qiáng),股四頭肌細(xì)胞膜上的TfR1和DMT1-IRE表達(dá)增加、向細(xì)胞外釋放鐵的FP1表達(dá)降低,導(dǎo)致肌細(xì)胞內(nèi)貯鐵增加,使NHI含量升高,且NO含量與肌細(xì)胞鐵含量有顯著的相關(guān)性,保證機(jī)體內(nèi)Hb和Mb的合成,線粒體電子傳遞鏈中細(xì)胞色素氧化酶的組成等,滿足運(yùn)動(dòng)中骨骼肌細(xì)胞對(duì)氧氣的需求及線粒體產(chǎn)生足夠的ATP,保證機(jī)體運(yùn)動(dòng)所需的能量。本研究更進(jìn)一步闡明了運(yùn)動(dòng)中NO
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