CaMBP-10參與植物抗生物和非生物脅迫作用與機(jī)制的研究.pdf

1、植物非特異性轉(zhuǎn)脂蛋白(nsLTPs)是一類廣泛存在于高等植物中的堿性小分子蛋白家族。許多研究表明，生物和非生物脅迫能夠誘導(dǎo)nsLTPs過表達(dá)，并且nsLTPs能不同程度的誘導(dǎo)植物系統(tǒng)性獲得抗性的產(chǎn)生。Ca2+-CaM信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)也參與了植物體內(nèi)眾多調(diào)節(jié)功能。本實(shí)驗(yàn)室曾在中國大白菜中分離得到了一種分子量約10kDa的鈣調(diào)素結(jié)合蛋白CaMBP-10（簡稱BP-10）。通過核苷酸序列和氨基酸序列比對和脂結(jié)合活性等理化性質(zhì)分析，已經(jīng)確定BP-1

2、0是植物非特異性轉(zhuǎn)脂蛋白家族的新成員。本論文以白菜和擬南芥為材料，研究了BP-10在體內(nèi)參與植物抗生物和非生物脅迫的作用，探討CaM參與這種功能的調(diào)節(jié)，并通過蛋白質(zhì)組學(xué)的方法初步了解這種作用的機(jī)制。
　　 首先，通過高鹽、ABA和SA處理與RT-PCR、蛋白表達(dá)分析，對白菜體內(nèi)的BP-10功能進(jìn)行了研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，BP-10的表達(dá)出現(xiàn)了不同程度的上調(diào)，初步說明了其在體內(nèi)參與了對環(huán)境的防御功能。其次，為了進(jìn)一步確定BP-10是

3、轉(zhuǎn)脂蛋白家族成員并能參與植物的抗生物和非生物脅迫作用，分別對轉(zhuǎn)BP-10和轉(zhuǎn)BP-10的CaM結(jié)合缺失突變體（簡稱4ABP-10）的轉(zhuǎn)基因擬南芥進(jìn)行了抗性研究。通過真菌孢子、鹽和旱的脅迫，我們對轉(zhuǎn)基因擬南芥的葉片侵染情況、種子發(fā)芽率、幼苗根長和成苗表型進(jìn)行了分析。結(jié)果顯示轉(zhuǎn)BP-10的轉(zhuǎn)基因擬南芥在全部脅迫過程中的抗性都要明顯好于轉(zhuǎn)4ABP-10的轉(zhuǎn)基因擬南芥和野生型擬南芥，而轉(zhuǎn)4ABP-10的轉(zhuǎn)基因擬南芥與野生型擬南芥的生長狀態(tài)沒有太