擬南芥UF1基因響應(yīng)非生物脅迫的初步研究.pdf

1、脫落酸(ABA)和微絲骨架參與植物對(duì)非生物脅迫的響應(yīng)。本實(shí)驗(yàn)中，選取了一個(gè)擬南芥中受ABA、NaCl和微絲解聚劑Latrunculin B誘導(dǎo)的、功能未知的基因UF1作為研究對(duì)象。對(duì)UF1的表達(dá)模式、蛋白的亞細(xì)胞定位、突變體和超表達(dá)轉(zhuǎn)基因植株的種子萌發(fā)和幼苗對(duì)鹽和ABA的敏感性、突變體和超表達(dá)株系中幾個(gè)關(guān)鍵的ABA應(yīng)答基因表達(dá)量的變化、突變體內(nèi)的微絲骨架和在鹽脅迫下的動(dòng)態(tài)變化及UF1互作蛋白的篩選鑒定等方面進(jìn)行了初步研究，主要結(jié)果為:<

2、br>　　(1)實(shí)時(shí)熒光定量PCR和GUS組織化學(xué)染色結(jié)果表明，UF1在多種營(yíng)養(yǎng)器官和生殖器官中都表達(dá)，其中在幼苗、成苗的莖、花、角果以及種子中表達(dá)量較高。
　　(2)檢測(cè)轉(zhuǎn)化35S∷UF1-GFP擬南芥植株的根分生區(qū)、成熟區(qū)、下胚軸和葉表皮細(xì)胞內(nèi)融合蛋白的定位，初步確定UF1定位于擬南芥細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。
　　(3)UF1參與擬南芥對(duì)NaCl脅迫的響應(yīng)。175mM NaCl脅迫條件下UF1表達(dá)量下調(diào)的突變體ufl種子萌發(fā)速率比野生

3、型擬南芥慢，而超表達(dá)轉(zhuǎn)基因植株的種子萌發(fā)速率快于野生型擬南芥。
　　(4)UFl參與ABA信號(hào)通路。qRT-PCR和GUS組織化學(xué)染色結(jié)果顯示UF1基因的表達(dá)受ABA誘導(dǎo);UF1表達(dá)量下調(diào)的突變體ufl在1.0μMABA處理?xiàng)l件下種子的萌發(fā)速率、子葉轉(zhuǎn)綠率和幼苗根長(zhǎng)均低于野生型擬南芥，表現(xiàn)為對(duì)ABA的敏感性增強(qiáng);相反，UF1超表達(dá)株系對(duì)ABA的敏感性降低;實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)100μM ABA處理5h后突變體和超表達(dá)轉(zhuǎn)基因植