簡介：點(diǎn)擊查看更多曲古菌素A對(duì)血管平滑肌細(xì)胞生物學(xué)行為影響的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：中圖分類號(hào)UDC博士學(xué)位論文學(xué)校代碼Q53三密級(jí)公玨DP71表達(dá)改變對(duì)人支氣管上皮細(xì)胞HBE及肺腺癌細(xì)胞A549生物學(xué)特性的影響THEINFLUENCEEXERTEDTOTHEBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFHUMANBRONCHIALEPITHELIUMHBEANDLUNGADENOCARCINOMAA549CELLLINEBYTHEEXPRESSIONALTERATIONOFDP71作者姓名譚思創(chuàng)學(xué)科專業(yè)臨床醫(yī)學(xué)研究方向外科學(xué)學(xué)院系、所湘雅二醫(yī)院指導(dǎo)教師胡建國教授論文答辯日期型竺￡F答辯委員會(huì)主席牲叢中南大學(xué)二0一四年五月博士學(xué)位論文摘要摘要DYSTROPHIN抗肌萎縮蛋白基因位于人染色體XP211213，DYSTROPHINDP71是由DYSTROPHIN基因從位于62號(hào)外顯子和63號(hào)外顯子中的啟動(dòng)子區(qū)始動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄、翻譯的整個(gè)蛋白。翻譯的整個(gè)DP71蛋白保留了DYSTROPHIN蛋白的富含半胱氨酸區(qū)域和羧基端區(qū)域，在DYSTROPHIN基因編碼的多種蛋白之中DP71蛋白是在非肌肉組織內(nèi)分布最廣的一種。關(guān)于DP71的研究表明，在胚胎發(fā)育的多能干細(xì)胞中可以檢測到DP71的表達(dá)。DP71除了分布在細(xì)胞膜外，還在細(xì)胞核和細(xì)胞漿內(nèi)有一定量的表達(dá)。3’端的剪切主要產(chǎn)生DP71F和DP71D兩種剪切本。DP71D剪切本主要分布在細(xì)胞核，DP71F剪切本主要以細(xì)胞漿分布為主。相關(guān)的功能學(xué)研究表明，這兩種不同的剪切本在PCI2細(xì)胞的生長過程中起著同等重要的作用。通過和核纖層蛋白LAMINB、核膜蛋白EMERIN結(jié)合，DP71可以參與PCI2細(xì)胞分裂的過程。DP71還參與PCI2細(xì)胞的細(xì)胞黏附等生物學(xué)行為。目前大部分關(guān)于DP71的研究局限于PCI2細(xì)胞，在其他細(xì)胞中生物學(xué)功能尚未開展任何研究。本課題選擇正常人支氣管上皮細(xì)胞HBE、建立DP71過表達(dá)細(xì)胞模型，研究其生物學(xué)功能；選擇人肺腺癌細(xì)胞系A(chǔ)549、建立DP71過表達(dá)與表達(dá)抑制細(xì)胞模型；從在體裸鼠移植模型與離體細(xì)胞模型兩方面進(jìn)行DP71相關(guān)生物學(xué)功能研究，以期為進(jìn)一步研究DP71的生物學(xué)功能提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。II

簡介：第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文RNAI沉默MCPR1基因?qū)π∈箅裢婚g充質(zhì)細(xì)胞生物學(xué)行為的影響姓名張華利申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)口腔組織病理學(xué)指導(dǎo)教師金巖20070501獨(dú)獨(dú)創(chuàng)創(chuàng)性性聲聲明明秉承學(xué)校嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶W(xué)風(fēng)與優(yōu)良的科學(xué)道德，本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，不包含本人或他人已申請(qǐng)學(xué)位或其他用途使用過的成果。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了致謝。申請(qǐng)學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名日期保保護(hù)護(hù)知知識(shí)識(shí)產(chǎn)產(chǎn)權(quán)權(quán)聲聲明明本人完全了解第四軍醫(yī)大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即研究生在校攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬第四軍醫(yī)大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位仍然為第四軍醫(yī)大學(xué)。學(xué)?？梢怨颊撐牡娜炕虿糠謨?nèi)容（含電子版，保密內(nèi)容除外），可以采用影印，縮印或其他復(fù)制手段保存論文。學(xué)校有權(quán)允許論文被查閱和借閱，并在校園網(wǎng)上提供論文內(nèi)容的瀏覽和下載服務(wù)。論文作者簽名導(dǎo)師簽名日期

簡介：華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文靶向NOTCH1SHRNA重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其對(duì)L02HBX細(xì)胞生物學(xué)行為的影響姓名夏秀梅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)內(nèi)科學(xué)（消化系）指導(dǎo)教師程斌201105華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文4（2）將干擾效率最強(qiáng)的PSHRNA1重組質(zhì)粒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染至L02HBX細(xì)胞后，QRTPCR及WESTERNBLOTTING檢測NOTCH1信號(hào)通路NOTCH1受體、JAGGED1配體及靶基因HES1的MRNA及蛋白表達(dá)均下調(diào)（P001），其中NOTCH1基因RNA水平的抑制率達(dá)9168（P001）。（3）運(yùn)用PSHRNA1穩(wěn)定轉(zhuǎn)染L02HBX細(xì)胞干擾阻斷NOTCH1信號(hào)通路后，CCK8及流式細(xì)胞學(xué)檢測L02HBXSHRNA1細(xì)胞增殖、周期與凋亡狀況，與對(duì)照組相比，其細(xì)胞增殖速度減慢P005，細(xì)胞周期的G0G1期細(xì)胞比例增加（P001）、S期細(xì)胞比例減少（P005），細(xì)胞凋亡增加（P005）。（4）運(yùn)用PSHRNA1穩(wěn)定轉(zhuǎn)染L02HBX細(xì)胞干擾阻斷NOTCH1信號(hào)通路后，QRTPCR及WESTERNBLOTTING檢測L02HBXSHRNA1細(xì)胞的細(xì)胞周期抑制因子P16及凋亡抑制因子BCL2的表達(dá)水平。與對(duì)照組相比，P16的MRNA及蛋白表達(dá)均上調(diào)P005，BCL2的MRNA及蛋白表達(dá)均下調(diào)P0001。（5）運(yùn)用PSHRNA1穩(wěn)定轉(zhuǎn)染L02HBX細(xì)胞干擾阻斷NOTCH1信號(hào)通路后，EMSA檢測發(fā)現(xiàn)L02HBXSHRNA1細(xì)胞的NFΚB的DNA結(jié)合率降低。結(jié)論結(jié)論（1）靶向NOTCH1基因的SHRNA的重組質(zhì)粒構(gòu)建成功，含靶向NOTCH1基因的SHRNA的重組質(zhì)粒能有效阻斷NOTCH1信號(hào)通路；（2）干擾NOTCH1信號(hào)通路可以抑制L02HBX細(xì)胞的增殖，阻礙其細(xì)胞周期進(jìn)程及促進(jìn)凋亡，結(jié)合前期的研究結(jié)果，HBX可激活NOTCH1信號(hào)通路并促進(jìn)L02細(xì)胞的增殖與轉(zhuǎn)化，表明HBX可能通過NOTCH1信號(hào)通路的激活來促進(jìn)L02細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化；（3）在干擾NOTCH1信號(hào)通路抑制L02HBX細(xì)胞的增殖，阻礙其細(xì)胞周期進(jìn)程及促進(jìn)凋亡的過程中，可能通過上調(diào)細(xì)胞周期抑制因子P16與下調(diào)細(xì)胞凋亡抑制因子BCL2的表達(dá)而起作用；（4）NOTCH1信號(hào)通路可能與NFΚB信號(hào)通路之間發(fā)生串話作用，共同參與HBX致L02細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化與癌變發(fā)生機(jī)制。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞細(xì)胞性肝癌；HBX；NOTCH1；短發(fā)夾狀RNA；P16；BCL2；核轉(zhuǎn)錄因子KAPPAB。

簡介：關(guān)于未成熟DCS表面表達(dá)的LIGHT是否可以直接向未成熟DCS傳遞信號(hào)影響未成熟DCS功能目前國內(nèi)外也未見報(bào)道。然而用可溶性受體蛋白作用于DCS模擬T細(xì)胞與DCS之間的信號(hào)通路研究相應(yīng)共刺激通路的反向信號(hào)的文章已見報(bào)道。例如用可溶性CTLA4IG模擬T細(xì)胞表面的CTLA4作用于DCS表達(dá)的B71B72發(fā)現(xiàn)CTLA4IG可以刺激DCS產(chǎn)生IFNΓ；后者通過誘導(dǎo)吲哚胺2、3過氧化酶IDO活性增強(qiáng)大量分解T細(xì)胞增殖分化所必須的氨基酸色氨酸從而抑制活化T細(xì)胞的增殖；該效應(yīng)在維持母體和胎兒之間的免疫耐受、抑制T細(xì)胞對(duì)腫瘤、自身抗原及MHC不相容移植物的反應(yīng)具有重要作用。此外表達(dá)在B細(xì)胞上的B72也可傳遞逆向信號(hào)給B細(xì)胞刺激B細(xì)胞產(chǎn)生IGG1和IGE這種作用對(duì)于B72高表達(dá)的記憶B細(xì)胞特別重要。說明B7分子不僅可通過CD28CTLA4正向傳遞共刺激信號(hào)或共抑制信號(hào)給T淋巴細(xì)胞還可以逆向傳遞信號(hào)給抗原遞呈細(xì)胞或B淋巴細(xì)胞調(diào)節(jié)它們的免疫功能以達(dá)到調(diào)控機(jī)體免疫應(yīng)答的目的。另外可溶性CD28CD28IG可以通過B71、B72促進(jìn)DCS分泌IL6和IFNΓCD28IG處理過的DCS可以增強(qiáng)機(jī)體T細(xì)胞介導(dǎo)的抗腫瘤、抗微生物免疫應(yīng)答以及MHCI類抗原限制性遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)。由此可見B7CTLA4和B7CD28均可以互為配受體具有雙向傳遞信號(hào)的能力；也反映出共刺激分子對(duì)機(jī)體免疫功能的調(diào)節(jié)是復(fù)雜的、多樣性的。除了B7家族成員可以傳遞反向信號(hào)之外TNF家族成員也有相似功能。最近報(bào)道的TNFR超家族成員GITR與其配體GITRL便可互為配受體可以雙向傳遞信號(hào)調(diào)控免疫反應(yīng)。LIGHT作為TNF家族的新成員可以作為共刺激分子為Τ細(xì)胞的活化提供刺激信號(hào)同時(shí)還可以誘導(dǎo)骨髓增生異常綜合征MDS病人來源的未成熟DCS的成熟。這些已有的相關(guān)研究都主要集中在LIGHT與不同的受體結(jié)合之后發(fā)揮的不同生物學(xué)功能那么LIGHT自身是否也可以向其表達(dá)細(xì)胞傳遞信號(hào)它與其受體之間是否也互為配受體目前尚未見報(bào)道。本課題就上述問題展開研究用LTΒRIG融合蛋白作為工具初步探討LIGHT是否可以傳遞信號(hào)作用于未成熟DCS對(duì)未成熟DCS的表型及功能產(chǎn)生影響進(jìn)而起到免疫調(diào)節(jié)作用。所得研究結(jié)果將進(jìn)一步豐富LIGHT共刺激通路的理論知識(shí)。第一部分驗(yàn)證LTΒRIG融合蛋白可與未成熟DCS表面LIGHT有效結(jié)合LTΒRIG與未成熟DCS的有效結(jié)合是本課題的研究基礎(chǔ)因此必須對(duì)LTΒRIG的生物學(xué)活性及其結(jié)合效力進(jìn)行驗(yàn)證。1首先檢測LTΒRIG的生物學(xué)活性方法將C57BL6小鼠的脾臟單個(gè)核細(xì)胞作為反應(yīng)細(xì)胞BALBC小鼠的脾臟單個(gè)核細(xì)胞經(jīng)過絲裂霉素處理后作為刺激細(xì)胞兩種細(xì)胞11混合培養(yǎng)并加入LTΒRIG或者對(duì)照人IGG或與融合蛋白相同體積的PBS。3天后檢測3HTDR摻入量。結(jié)論單向混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)證實(shí)了LTΒRIG可以有效阻斷LIGHTHVEM信號(hào)通路對(duì)同種異基因混合淋巴細(xì)胞的增殖有明顯的抑制作用。2檢測LTΒRIG與未成熟DCS的特異性結(jié)合方法先用間接標(biāo)記的方法即先用大鼠抗小鼠LIGHT抗體與不同成熟狀態(tài)的DCS結(jié)合然后加入熒光標(biāo)記的抗大鼠的二抗流式細(xì)胞儀檢測不同成熟狀態(tài)的DCS表面LIGHT的表達(dá)水平。同樣是間接標(biāo)記法再檢測LTΒRIG與未成熟DCS的結(jié)合效力設(shè)抗LIGHT抗體阻斷對(duì)照及IGG對(duì)照。結(jié)論LTΒRIG可以特異性識(shí)別未成熟DCS表達(dá)的LIGHT。第二部分LTΒRIG融合蛋白對(duì)小鼠未成熟DCS表型、抗原吞噬及遞呈功能的影響本部分實(shí)驗(yàn)以LTΒRIG體外模擬LTΒR與未成熟DCS表面LIGHT的結(jié)合觀察LIGHT被激活后是否可以直接向未成熟DCS傳遞信號(hào)對(duì)未成熟DCS的免疫表型、抗原吞噬能力和抗原遞能力造成影響。方法用GMCSF、IL4體外擴(kuò)增C578L6小鼠骨髓來源的DCS于擴(kuò)增的第5天收集細(xì)胞并用CD11C磁珠純化得到高純度的未成熟DCS。然后體外繼續(xù)培養(yǎng)并在培養(yǎng)體系中加入LTΒRIG終濃度為5ΜGML或相同終濃度的IGG或與融合蛋白等體積的PBS①于加入蛋白后24H、48H分別檢測DCS的免疫表型；②加入蛋白后24H收集各組DCS用FITC標(biāo)記的卵白蛋白FITCOVA作為抗原檢測各組DCS對(duì)該抗原的吞噬能力流式細(xì)胞儀檢測PECD11CDCS中FITCOVA細(xì)胞的百分率及平均熒光強(qiáng)度用以反映DCS的吞噬能力③收集不同蛋白作用24H后各組DCS與CFSE預(yù)染的OVA323339肽特異性CD4T細(xì)胞混合培養(yǎng)84H流式細(xì)胞儀檢測CD4T細(xì)胞CFSE的熒光強(qiáng)度用以反應(yīng)不同處理組DCS的抗原遞呈能力。結(jié)論從DCS的免疫表型、抗原吞噬及抗原遞呈功能等方面初步說明ITΒRLIGHT信號(hào)通路可以反向傳遞刺激信號(hào)給未成熟DCS誘導(dǎo)DCS的成熟。第三部分LTΒRIG對(duì)DCS分泌細(xì)胞因子及抗原特異性CD4T細(xì)胞生物學(xué)功能的影響進(jìn)一步深入探討LTΒRIG誘導(dǎo)DCS成熟的機(jī)制。方法用ELISA和REALTIMEPCR的方法分別從蛋白質(zhì)水平和MRNA水平檢測DCS分泌IL12、IL10、IL6、TNFA等細(xì)胞因子及趨化因子的水平。檢測了DCS與OVA323339肽特異性T細(xì)胞混合培養(yǎng)后T細(xì)胞的胞內(nèi)及上清中IL2、IL4、IFNΓ的表達(dá)水平。結(jié)論IL6在DCS的成熟過程中發(fā)揮著重要作用。LTΒRIG促進(jìn)DCS成熟促進(jìn)抗原特異性CD4T細(xì)胞分泌TH2型細(xì)胞因子均是通過促DCS高分泌IL6實(shí)現(xiàn)的。為了排除實(shí)驗(yàn)過程中可能存在的LPS污染我們使用的所有金屬器具均經(jīng)過250℃高溫烘烤30MIN以上滅活LPS。所有塑料器具均是一次性無熱源產(chǎn)品。此外還實(shí)驗(yàn)證實(shí)了無LPS污染。方法將LTΒRIG煮沸10MIN使之完全變性之后再作用于未成熟DCS觀察未成熟DCS分泌IL6的水平。結(jié)果煮沸后LTΒRIG不能促進(jìn)DCS高分泌IL6與對(duì)照組無差異。結(jié)論DCS分泌IL6增高不是LPS污染導(dǎo)致的而是LTΒRIG與LIGHT特異性結(jié)合所引起的。第四部分LTΒRLIGHT信號(hào)通路對(duì)DCS及T細(xì)胞功能影響的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究本部分主要是對(duì)體外實(shí)驗(yàn)的體內(nèi)驗(yàn)證。方法①抗原特異性T淋巴細(xì)胞反應(yīng)將LTΒRIG處理24H的C57BL6小鼠骨髓來源的DCS與CFSE預(yù)染的OVA323339肽特異性CD4T細(xì)胞按110的比例混合DCS5105只；T5106只經(jīng)尾靜脈回輸入小鼠體內(nèi)同時(shí)尾靜脈注射入200NMOL的OVA323339肽在無病原菌的環(huán)境下飼養(yǎng)3天后處死動(dòng)物。取脾和淋巴結(jié)的淋巴細(xì)胞用PECD4流式抗體標(biāo)記細(xì)胞流式細(xì)胞儀檢測脾及淋巴結(jié)中CFSE陽性細(xì)胞的增殖情況ELISA檢測血清中細(xì)胞因子的表達(dá)水平。②同種異體混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)先將BALBC小鼠的脾臟單個(gè)核細(xì)胞用CD4和CD8磁珠進(jìn)行陽性篩選得到富集的T細(xì)胞并用CFSE染色。然后LTΒRIG處理C57BL6來源第5天DCS24之后與CFSE預(yù)染的BALBC小鼠來源的脾臟及淋巴結(jié)T細(xì)胞胞以110比例混合DCS5105只；T5106只后經(jīng)尾靜脈注射入8GRY60GO照射后的正常BALBC小鼠體內(nèi)3天后處死動(dòng)物取脾和淋巴結(jié)的淋巴細(xì)胞用PECD4流式抗體標(biāo)記細(xì)胞流式細(xì)胞儀檢測脾及淋巴結(jié)中CFSE陽性細(xì)胞的增殖情況ELISA檢測血清中細(xì)胞因子的表達(dá)水平。結(jié)果與體外實(shí)驗(yàn)一致LTΒRIG處理過的DCS回輸入體內(nèi)后對(duì)抗原特異性T淋巴細(xì)胞反應(yīng)以及同種異基因混合淋巴細(xì)胞的增殖均起到刺激作用。并且促進(jìn)T細(xì)胞分泌IL4部分增強(qiáng)TH2型免疫反應(yīng)。在本研究中首次用LTΒRIG融合蛋白為工具研究LIGHT信號(hào)通路是否存在反向信號(hào)。首先用流式細(xì)胞術(shù)的方法證實(shí)LTΒRIG可以與DCS表面的LIGHT分子有效結(jié)合在此基礎(chǔ)上研究LTΒRIG通過LIGHT對(duì)DCS狀態(tài)及功能的影響。從DCS細(xì)胞的免疫表型、細(xì)胞因子的分泌、吞噬能力和抗原遞呈能力等各方面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果均顯示LTΒRIG促進(jìn)DCS的成熟增強(qiáng)DCS對(duì)抗原特異性T淋巴細(xì)胞的刺激能力提示LTΒRLIGHT對(duì)DCS的免疫功能存在反向調(diào)節(jié)作用。最后通過尾靜脈回輸LTΒRIG作用過的DCS體內(nèi)證實(shí)LTΒRIG作用后的DCS可以促進(jìn)抗原特異性CD4T細(xì)胞反應(yīng)。至于LIGHT其他兩個(gè)受體是否也可以通過LIGHT向DCS傳遞類似的刺激信號(hào)這需要進(jìn)一步探討。本研究所得結(jié)論將進(jìn)一步豐富LIGHT信號(hào)通路對(duì)免疫反應(yīng)調(diào)控的理論知識(shí)。

簡介：第三軍醫(yī)大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明秉承學(xué)校嚴(yán)謹(jǐn)?shù)男ｏL(fēng)和科研作風(fēng)，本人申明所呈交的論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得我校或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料，與我同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請(qǐng)學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名』竺二肇日期坐第三軍醫(yī)大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解第三軍醫(yī)大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬第三軍醫(yī)大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為第三軍醫(yī)大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外，可以采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名J魚指導(dǎo)教師簽名聱璺日期竺70L566～果～～成～～究；|一開一～哥～一6一．白一獻(xiàn)問～文期～考位謝參學(xué)賣攻致

簡介：中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)學(xué)院碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼10023學(xué)號(hào)2009252囊泡膜結(jié)合蛋白相關(guān)蛋白YAP33對(duì)小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤生物學(xué)特性的影響IMPACTOFVAP33ONTHEBIOLOGICALPROPERTIESOFMURINEDENDRITICSARCOMACELLS所院姓名指導(dǎo)教師學(xué)科專業(yè)研究方向完成日期基礎(chǔ)學(xué)院趙文晶劉玉琴教授病理學(xué)與病理生理學(xué)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)機(jī)理研究201256中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)學(xué)院一、VAP33基因的擴(kuò)增33二、重組載體的構(gòu)建33三、重組質(zhì)粒PWPXLVAP33的鑒定一34四、VAP33在不同轉(zhuǎn)移潛能腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)～36五、重組慢病毒包裝和滴度測定一37六、穩(wěn)定過表達(dá)VAP33細(xì)胞株DG6VAP33和LALVAP33的建立與鑒定37七、VAP33過表達(dá)對(duì)小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞大小分布和形態(tài)的影響一39八、VAP33過表達(dá)對(duì)小鼠腫瘤細(xì)胞體外增殖能力的影響40九、VAP33過表達(dá)對(duì)小鼠腫瘤細(xì)胞集落形成能力的影響一4L十、VAP33過表達(dá)對(duì)小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞體外遷移能力的影響42十一、VAP33過表達(dá)對(duì)小鼠腫瘤細(xì)胞體外侵襲能力的影響一43十二、VAP33過表達(dá)對(duì)小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞體內(nèi)生長能力的影響44十三、VAP33過表達(dá)對(duì)小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力的影響一46討論Z17小結(jié)50／J、結(jié)50參考文獻(xiàn)5L附錄一文獻(xiàn)綜述55附錄二哺乳動(dòng)物及APLYSIA中VAP33氨基酸序列。附錄三重組子PWPXLVAP33測序結(jié)果62附錄四膜融合及GLUT4運(yùn)輸過程圖解63至定謝。64個(gè)人簡歷。65獨(dú)創(chuàng)性聲明662

簡介：⑧論文作者簽名當(dāng)迄整括導(dǎo)教師簽名貯紐盤論文評(píng)閱人1起紐曲一速垃盛弛玉D評(píng)閱人2匠之評(píng)閱人3匡左評(píng)閱人4一評(píng)閱人5答辯委員會(huì)主席塑復(fù)檻盎立白色委員1圣I翁I叢盈近墨。之￡絲委員2王盔生勃趁聾2亟量二出委員3鷙邊趨查受。姿色Z￡吐委員4區(qū)盤蟈盞選峰2查E紐委員5＼答辯日期絲笙疊二2空浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文致謝致謝首先衷心的感謝尊敬的導(dǎo)師滕理送老師這些年的在工作、學(xué)習(xí)和生活中給予的關(guān)心、理解和支持；感謝滕老師為我們提供的寬松、自由的學(xué)J平臺(tái)，因人而異的教育方式，以及在課題、論文寫作方面給予的指導(dǎo)，讓我在工作、學(xué)J和生活中獲得了很大的進(jìn)步。同時(shí)也真摯地感謝王海勇、何奎峰等師兄在課題、統(tǒng)計(jì)分析、論文寫作等方面給予的幫助和指導(dǎo)。感謝杭州市西溪醫(yī)院相關(guān)同事在資料收集、隨訪統(tǒng)計(jì)等工作方面給予的幫助和支持。感謝浙江大學(xué)研究生學(xué)院全體老師在這些年學(xué)J過程中給予的幫助和指導(dǎo)。感謝參加論文評(píng)審和論文答辯的各位專家教授。感謝這些年來家人和親友的理解與支持。謹(jǐn)此一并表示衷心的感謝和崇高的敬意。

簡介：牙周炎癥狀態(tài)對(duì)患牙牙髓中牙髓干細(xì)胞牙周炎癥狀態(tài)對(duì)患牙牙髓中牙髓干細(xì)胞生物學(xué)行為的影響生物學(xué)行為的影響孫?；ㄅ囵B(yǎng)類別全日制學(xué)位類型學(xué)術(shù)學(xué)位一級(jí)學(xué)科專業(yè)類口腔醫(yī)學(xué)二級(jí)學(xué)科專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)研究方向牙髓生物學(xué)及組織再生指導(dǎo)教師余擎教授（主任醫(yī)師）培養(yǎng)單位口腔醫(yī)院牙體牙髓病科二O一五年五月分類號(hào)R78UDC61631密級(jí)公開第四軍醫(yī)大學(xué)THEFOURTHMILITARYMEDICALUNIVERSITY第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文目錄縮略語表1中文摘要3英文摘要6前言11文獻(xiàn)回顧13正文32第一部分侵襲性牙周炎拔除患牙牙髓中干細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定321實(shí)驗(yàn)主要材料與設(shè)備342方法3621臨床病例資料和原代細(xì)胞培養(yǎng)3622牙髓干細(xì)胞DPSCS的擴(kuò)增及純化3623細(xì)胞克隆形成能力3824細(xì)胞增殖活力3825流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期及表面特異標(biāo)記物3826細(xì)胞成脂能力比較3827DPSCS成骨能力鑒定3928堿性磷酸酶ALP檢測4029體內(nèi)移植實(shí)驗(yàn)40210統(tǒng)計(jì)學(xué)分析423結(jié)果4231細(xì)胞分離培養(yǎng)4232細(xì)胞增殖活力4333細(xì)胞周期4334細(xì)胞表面特異標(biāo)記物檢測4435細(xì)胞成脂分化44

簡介：點(diǎn)擊查看更多人樹突狀細(xì)胞來源的四個(gè)新分子的克隆表達(dá)和生物學(xué)功能研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文姜黃素對(duì)宮頸癌CASKI細(xì)胞內(nèi)PLEIOTROPHIN表達(dá)的影響及其生物學(xué)意義的初步探討姓名范婷婷申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)婦產(chǎn)科指導(dǎo)教師趙純?nèi)?0080501重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文TMEMDN，N，N，NTETRAMETHYLETHYLENEDIAMINETRISTRISHYDROXYMETHYLAMINOMETHANE2N，N，N，N一四甲基乙二胺三羥甲基氨基甲烷

簡介：點(diǎn)擊查看更多重組人粒細(xì)胞集落刺激因子（rhG-csf）生物學(xué)活性測定方法研究及工作標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)定.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：點(diǎn)擊查看更多PACE4對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和乳腺癌細(xì)胞生物學(xué)功能的影響及作用機(jī)制研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：分類號(hào)R373密級(jí)不保密UDC578學(xué)校代碼11065碩士學(xué)位論文HCMVHCMV感染上調(diào)人星形膠質(zhì)細(xì)胞感染上調(diào)人星形膠質(zhì)細(xì)胞IGF2IGF2分泌對(duì)分泌對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞生物學(xué)行為影響的分子機(jī)制膠質(zhì)瘤細(xì)胞生物學(xué)行為影響的分子機(jī)制黃睿指導(dǎo)教師王斌教授學(xué)科專業(yè)名稱病原生物學(xué)論文答辯日期2015年6月2日良好，基本不發(fā)生形變，又能持續(xù)性的分泌IGF2，為下一步研究對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞影響的研究奠定基礎(chǔ)。2HCMV感染的星形膠質(zhì)細(xì)胞IGF2基因表達(dá)量隨著時(shí)間的延長呈遞增趨勢。星形膠質(zhì)細(xì)胞外分泌IGF2蛋白的表達(dá)量也同步增長。3建立共培養(yǎng)體系以后，免疫熒光結(jié)果顯示，與感染了HCMV的星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞表面磷酸化的IGFIR比例顯著增加。并且隨著共培養(yǎng)時(shí)間的延長，磷酸化IGFIR的比例有逐步遞增的趨勢。與未感染了HCMV的星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞表面磷酸化IGFIR比例基本不變，非磷酸化的IGFIR處于優(yōu)勢地位。4QRTPCR以及WESTERNBLOT驗(yàn)證了IGFIR下游MAPKATF5信號(hào)通路的激活，最終將影響到膠質(zhì)瘤細(xì)胞的發(fā)展。5CCK8檢測結(jié)果顯示膠質(zhì)瘤細(xì)胞與感染了HCMV的星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)或者培養(yǎng)液中加入外源性IGF2，可以促進(jìn)其增殖，且后者作用大于前者。而與未感染HCMV的星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)的膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖明顯落后于以上兩組。流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果顯示與感染了HCMV的星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)或者培養(yǎng)液中加入外源性IGF2的膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡率也呈現(xiàn)降低的趨勢，而與未感染HCMV的星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)的膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡率基本保持不變。結(jié)論結(jié)論1HCMVAD169感染人星形膠質(zhì)細(xì)胞將上調(diào)IGF2的基因表達(dá)，同時(shí)也促進(jìn)了人星形膠質(zhì)細(xì)胞外分泌IGF2蛋白增多。2與感染了HCMV的星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)的膠質(zhì)瘤細(xì)胞，IGFIR受體被激活，IGFIR磷酸化水平升高。在膠質(zhì)瘤細(xì)胞內(nèi)激活MAPK通路，最終導(dǎo)致了ATF5的高表達(dá)。3MAPKATF5通路的激活將會(huì)影響膠質(zhì)瘤細(xì)胞的生存及生長，提高膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖能力，減少了膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡，加速了病情的惡化甚至死亡。碩士研究生碩士研究生黃睿（病原生物學(xué)專業(yè)）黃睿（病原生物學(xué)專業(yè)）指導(dǎo)教師指導(dǎo)教師王斌王斌教授教授關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞HCMVHCMV感染；感染；IGF2IGF2；星形膠質(zhì)細(xì)胞；膠質(zhì)瘤；星形膠質(zhì)細(xì)胞；膠質(zhì)瘤ATF5ATF5

簡介：重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文SIRNA干擾ATX對(duì)乳腺癌MCF7細(xì)胞生物學(xué)活性的影響姓名顧海濤申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)外科學(xué)指導(dǎo)教師王繼見20090501重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文細(xì)胞的ATXMRNA含量陰性對(duì)照組O965士0076，空白質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組1097士0184，干擾片段轉(zhuǎn)染組05460721，P005；2WESTERNBLOT檢測三組細(xì)胞ATX蛋白表達(dá)陰性對(duì)照組07130027，空白質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組O6800052，干擾片段轉(zhuǎn)染組0501B0023，P005；3TANSWELL小室法檢測三組細(xì)胞侵襲力改變陰性對(duì)照組14126693，空白質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組13004690，干擾片段轉(zhuǎn)染組2601532，P005。通過T檢驗(yàn)和方差分析各組數(shù)據(jù)，干擾片段轉(zhuǎn)染組與空白質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組和陰性對(duì)照組比較P005，差異有顯著性。結(jié)論ATXSIRNA能有效抑制人乳腺癌細(xì)胞株ATX基因和蛋白的表達(dá)，降低人乳腺癌MCF7細(xì)胞的侵襲功。關(guān)鍵詞小干擾RNA，人乳腺癌細(xì)胞MCF一7，自分泌運(yùn)動(dòng)因子，孚L腺腫瘤