簡(jiǎn)介：2008年生物化學(xué)與分子生物學(xué)考博試題一名詞解釋密碼子的變偶性程序性死亡岡崎片斷單克隆抗體基因治療SD序列移碼突變Z型DNA蛋白質(zhì)組學(xué)反向PCR二大題簡(jiǎn)述真核生物5’帽子結(jié)構(gòu)和功能。簡(jiǎn)述NO作為信號(hào)分子的調(diào)節(jié)作用。運(yùn)用你所學(xué)的知識(shí)和可能的實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，研究一個(gè)新基因的生理功能。已知A和B蛋白質(zhì)作用于同一生理功能，至少用三種方法證明A和B之間有無(wú)相互作用，并給出所用原理。結(jié)合當(dāng)前科學(xué)前沿，闡述真核生物基因表達(dá)調(diào)控。0808中科院分子生物學(xué)試題中科院分子生物學(xué)試題1、表觀遺傳，及調(diào)控方式，還有蛋白質(zhì)通過(guò)哪些共價(jià)修飾調(diào)控其功能2、蛋白質(zhì)與DNA結(jié)合的方法和比較，EMSA和DNASE1足跡法3、密碼子改造研究新蛋白藥物，原理，關(guān)鍵和方法4、設(shè)計(jì)研究未知基因（預(yù)測(cè)兩個(gè)跨膜區(qū)域）功能的實(shí)驗(yàn)方案（不低于4個(gè)）5、質(zhì)粒改造原則6、誘導(dǎo)全能干細(xì)胞的方法，實(shí)驗(yàn)方案等。（去年的NATURE上發(fā)表的）個(gè)人認(rèn)為除了第二和五題之外，其它的題目都屬于一騎絕塵的，要么會(huì)，要么不會(huì)，想蒙是絕對(duì)沒(méi)門(mén)的。這門(mén)專(zhuān)業(yè)課能及格，我想都不錯(cuò)了，特別是1，3，6題。不知道大家做的如何，反正第一題，我是意思都沒(méi)看懂，不知道連續(xù)的3問(wèn)是不是指1個(gè)東西。還是最后1問(wèn)是單獨(dú)的，與前面的2問(wèn)無(wú)關(guān)20082008年中科院動(dòng)物所生物化學(xué)與分子生物學(xué)年中科院動(dòng)物所生物化學(xué)與分子生物學(xué)博士題博士題一名詞解釋密碼子的變偶性程序性死亡岡崎片斷單克隆抗體基因治療SD序列移碼突變Z型DNA蛋白質(zhì)組學(xué)反向PCR二大題簡(jiǎn)述真核生物5’帽子結(jié)構(gòu)和功能。簡(jiǎn)述NO作為信號(hào)分子的調(diào)節(jié)作用。運(yùn)用你所學(xué)的知識(shí)和可能的實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，研究一個(gè)新基因的生理功能。已知A和B蛋白質(zhì)作用于同一生理功能，至少用三種方法證明A和B之間有無(wú)相互作用，三、哺乳動(dòng)物生殖細(xì)胞（配子）發(fā)生為例，簡(jiǎn)述減數(shù)分裂異同點(diǎn)（18分）四、詳述造血干細(xì)胞的增殖分化的調(diào)節(jié)（18分）五、解釋題（請(qǐng)選擇10個(gè)小題，每題3分，共30分）1、整合素2、信號(hào)肽3、奢侈基因4、PCR技術(shù)5、MAPK信號(hào)通路6、巨大染色體7、鈣泵8、通訊連接9、細(xì)胞分化10、細(xì)胞周期11、溶酶體12、MPF13、基因組14、核仁組織區(qū)15、G0期細(xì)胞中科院動(dòng)物所2002年細(xì)胞生物學(xué)（博士）名詞解釋?zhuān)款}3分，共36分）1、細(xì)胞周期2、細(xì)胞分化3、干細(xì)胞4、細(xì)胞外基質(zhì)5、上皮6、信號(hào)傳導(dǎo)7、轉(zhuǎn)染8、端粒9、免疫球蛋白10、細(xì)胞骨架11、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)12、反意義RNA

簡(jiǎn)介：1第二章第二章染色體與染色體與DNA1染色體（染色體（CHROMOSOME）是細(xì)胞在有絲分裂時(shí)遺傳物質(zhì)存在的特定形式，是間期細(xì)胞染色質(zhì)結(jié)構(gòu)緊密包裝的結(jié)果。真核生物的染色體在細(xì)胞生活周期的大部分時(shí)間里都是以染色質(zhì)染色質(zhì)CHROMATIN的形式存在的。染色質(zhì)是一種纖維狀結(jié)構(gòu)，叫做染色質(zhì)絲，它是由最基本的單位核小體核小體NUCLEOSOME成串排列而成的。原核生物原核生物PROKARYOTEDNA形成一系列的環(huán)狀附著在非組蛋白上形成類(lèi)核。DNA染色體非組蛋白蛋白質(zhì)組蛋白（H1,H2A,H2B,H3,H4）組蛋白的一般特性組蛋白的一般特性P24①進(jìn)化上的保守性②無(wú)組織特異性③肽鏈氨基酸分布的不對(duì)稱(chēng)性堿性氨基酸集中分布在N端的半條鏈上。④組蛋白的可修飾性甲基化、乙基化、磷酸化及ADP核糖基化等。⑤H5組蛋白的特殊性富含賴氨酸（24）鳥(niǎo)類(lèi)、魚(yú)類(lèi)及兩棲類(lèi)紅細(xì)胞染色體不含H1而帶有H5組蛋白的可修飾性組蛋白的可修飾性在細(xì)胞周期特定時(shí)間可發(fā)生甲基化、乙?；?、磷酸化和ADP核糖基化等。H3、H4修飾作用較普遍，H2B有乙?；饔?、H1有磷酸化作用。所有這些修飾作用都有一個(gè)共同的特點(diǎn)，即降低組蛋白所攜帶的正電荷。這些組蛋白修飾的意義一是改變?nèi)旧w的結(jié)構(gòu)，直接影響轉(zhuǎn)錄活性；二是核小體表面發(fā)生改變，使其他調(diào)控蛋白易于和染色質(zhì)相互接觸，從而間接影響轉(zhuǎn)錄活性。2、DNA1DNA的變性和復(fù)性■變性（變性（DENATURATIONDNA雙鏈的氫鍵斷裂，最后完全變成單鏈的過(guò)程稱(chēng)為變性。■增色效應(yīng)增色效應(yīng)HYPERCHROMATICEFFECT在變性過(guò)程中，260NM紫外線吸收值先緩慢上升，當(dāng)達(dá)到某一溫度時(shí)驟然上升，稱(chēng)為增色效應(yīng)。■融解溫度（融解溫度（MELTINGTEMPERATURE，TM變性過(guò)程紫外線吸收值增加的中點(diǎn)稱(chēng)為融解溫度。生理?xiàng)l件下為8595℃影響因素GC含量，PH值，離子強(qiáng)度，尿素，甲酰胺等■復(fù)性（復(fù)性（RENATURATION熱變性的DNA緩慢冷卻，單鏈恢復(fù)成雙鏈?！鰷p色效應(yīng)（減色效應(yīng)（HYPOCHROMATICEFFECT隨著DNA的復(fù)性，260NM紫外線吸收值降低的現(xiàn)象。2C值反?，F(xiàn)象（CVALUEPARADOXC值是一種生物的單倍體基因組DNA的總量。真核細(xì)胞基因組的最大特點(diǎn)是它含有大量的重復(fù)序列，而且功能DNA序列大多被不編碼蛋白質(zhì)的非功能DNA所隔開(kāi)，這就是著名的“C值反?，F(xiàn)象”。核小體核小體NUCLEOSOME用于包裝染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)單位，是由DNA鏈纏繞一個(gè)組蛋白核（H2A、H2B、H3、H42的八聚體】構(gòu)成的。原核生物原核生物基因組結(jié)構(gòu)特點(diǎn)●基因組很小，大多只有一條染色體●結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)煉●存在轉(zhuǎn)錄單元TRNASCRIPTIONALOPERON●多順?lè)醋覲OLYCISTRON重疊基因由基因內(nèi)基因、部分重疊基因、一個(gè)堿基重疊組成。真核生物真核生物基因組結(jié)構(gòu)特點(diǎn)●真核基因組結(jié)構(gòu)龐大3109BP、染色質(zhì)、核膜●單順?lè)醋印窕虿贿B續(xù)性斷裂基因（INTERRUPTEDGENE）、內(nèi)含子INTRON、外顯子EXON●非編碼區(qū)較多多于編碼序列91●含有大量重復(fù)序列■不重復(fù)序列不重復(fù)序列/單一序列單一序列在基因組中有一個(gè)或幾個(gè)拷貝。真核生物的大多數(shù)基因在單倍體中都是單拷貝的。如蛋清蛋白、血紅蛋白等功能主要是編碼蛋白質(zhì)?！鲋卸戎貜?fù)序列中度重復(fù)序列在基因組中的拷貝數(shù)為101～104。如RRNA、TRNA一般是不編碼蛋白質(zhì)的序列，在調(diào)控基因表達(dá)中起重要作用■高度重復(fù)序列高度重復(fù)序列拷貝數(shù)達(dá)到幾百個(gè)到幾百萬(wàn)個(gè)?！裥l(wèi)星DNAA?T含量很高的簡(jiǎn)單高度重復(fù)序列。1、DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)的一級(jí)結(jié)構(gòu)指4種脫氧核苷酸的連接及其排列順序，DNA序列是這一概念的簡(jiǎn)稱(chēng)。堿基序列特征●雙鏈反向平行配對(duì)而成●脫氧核糖和磷酸交替連接，構(gòu)成DNA骨架，堿基排在內(nèi)側(cè)核小體3方向相反，形成許多不連續(xù)的片段，最后再連成一條完整的DNA鏈為滯后鏈。在DNA復(fù)制過(guò)程中，前導(dǎo)鏈能連續(xù)合成，而滯后鏈只能是斷續(xù)的合成5??3?的多個(gè)短片段，這些不連續(xù)的小片段稱(chēng)為岡崎片段。4、切除RNA引物，填補(bǔ)缺口，連接相鄰的DNA片段（復(fù)制終止）當(dāng)復(fù)制叉遇到約22個(gè)堿基的重復(fù)性終止子序列（TER）時(shí)，TERTUS蛋白復(fù)合物能使DNAB不再將DNA解鏈，阻擋復(fù)制叉繼續(xù)前移。P47在DNA聚合酶Ⅰ催化下切除RNA引物；留下的空隙由DNA聚合酶Ⅰ催化合成一段DNA填補(bǔ)上；在DNA連接酶作用下，連接相鄰的DNA鏈（四）復(fù)制的幾種主要方式P42雙鏈環(huán)狀、Θ型復(fù)制、雙向等速1、滾環(huán)型滾環(huán)型（1）模板鏈和新合成的鏈分開(kāi)（2）不需RNA引物，在正鏈3‘－OH上延伸（3）只有一個(gè)復(fù)制叉2、D環(huán)復(fù)制環(huán)復(fù)制單向復(fù)制的特殊方式如動(dòng)物線粒體DNA（五）真核生物中DNA的復(fù)制特點(diǎn)1、真核生物每條染色體上有多個(gè)復(fù)制起點(diǎn)，多復(fù)制子（約150BP左右）；2、復(fù)制叉移動(dòng)的速度較慢（約50BP／秒），僅為原核生物的1／10。3、真核生物染色體在全部復(fù)制完之前,各個(gè)起始點(diǎn)不再重新開(kāi)始DNA復(fù)制；真核生物快速生長(zhǎng)時(shí)，往往采用更多的復(fù)制起點(diǎn)。4、真核生物有多種DNA聚合酶。5、真核生物DNA復(fù)制過(guò)程中的引物及岡崎片段的長(zhǎng)度均小于原核生物。（真核岡崎片段長(zhǎng)約100200BP，原核岡崎片段長(zhǎng)約10002000BP。）（六）原核和真核生物原核和真核生物DNA的復(fù)制特點(diǎn)比較的復(fù)制特點(diǎn)比較①?gòu)?fù)制起點(diǎn)（ORI）原核一個(gè)，真核多個(gè)；②復(fù)制子原核一個(gè)，真核多個(gè)；③復(fù)制子長(zhǎng)度原核長(zhǎng)；真核短；④復(fù)制叉原核多個(gè)；真核多個(gè)；⑤復(fù)制移動(dòng)速度原核較快；真核較慢；⑥真核生物染色體在全部完成復(fù)制前，各起始點(diǎn)的DNA復(fù)制不能再開(kāi)始。而在快速生長(zhǎng)的原核生物中，復(fù)制起點(diǎn)上可以連續(xù)開(kāi)始新的DNA復(fù)制。⑦原核生物染色體的復(fù)制與細(xì)胞分裂同步，可以多次復(fù)制；真核生物染色體的復(fù)制發(fā)生在S期，是細(xì)胞分類(lèi)的特定時(shí)期，而且僅此一次。四、DNA的修復(fù)DNA修復(fù)系統(tǒng)功能錯(cuò)配修復(fù)恢復(fù)錯(cuò)配堿基切除修復(fù)切除突變的堿基核甘酸切除修復(fù)修復(fù)被破壞的DNADNA直接修復(fù)SOS系統(tǒng)修復(fù)嘧啶二體或甲基化DNADNA的修復(fù)，導(dǎo)致變異1、錯(cuò)配修復(fù)錯(cuò)配修復(fù)（MISMATCHREPAIR）●DAM甲基化酶使母鏈位于5’GATC序列中腺甘酸甲基化●甲基化緊隨在DNA復(fù)制之后進(jìn)行（幾秒種后至幾分鐘內(nèi)）●根據(jù)復(fù)制叉上DNA甲基化程度，切除尚未甲基化的子鏈上的錯(cuò)配堿基2、堿基切除修復(fù)堿基切除修復(fù)EXCISIONREPAIR所有細(xì)胞中都帶有不同類(lèi)型、能識(shí)別受損核苷酸位點(diǎn)的糖苷水解酶，它能特意切除受損核苷酸上的NΒ糖苷鍵，在DNA鏈上形成去嘌呤或去嘧啶位點(diǎn)，統(tǒng)稱(chēng)為AP位點(diǎn)。一些堿基在自發(fā)或誘變下會(huì)發(fā)生脫酰胺，然后改變配對(duì)性質(zhì)，造成氨基轉(zhuǎn)換突變腺嘌呤變?yōu)榇吸S嘌呤與胞嘧啶配對(duì)鳥(niǎo)嘌呤變?yōu)辄S嘌呤與胞嘧啶配對(duì)胞嘧啶變?yōu)槟蜞奏づc腺嘌呤配對(duì)3、核苷酸切除修復(fù)核苷酸切除修復(fù)1）通過(guò)特異的核酸內(nèi)切酶識(shí)別損傷部位2）由酶的復(fù)合物在損傷的兩邊切除幾個(gè)核苷酸3）DNA聚合酶以母鏈為模板復(fù)制合成新子鏈4）DNA連接酶將切口補(bǔ)平4、DNA的直接修復(fù)的直接修復(fù)在DNA光解酶的作用下將環(huán)丁烷胸腺嘧啶二體和64光化物還原成為單體甲基轉(zhuǎn)移酶使O6甲基鳥(niǎo)嘌呤脫甲基生成鳥(niǎo)嘌呤，防止GT配對(duì)SOS反應(yīng)SOSRESPONSE是細(xì)胞DNA受到損傷或復(fù)制系統(tǒng)受到抑制的緊急情況下，細(xì)胞為求生存而產(chǎn)生的一種應(yīng)急措施。包括誘導(dǎo)DNA損傷修復(fù)、誘變效應(yīng)、細(xì)胞分裂的抑制以及溶原性細(xì)菌釋放噬菌體等。細(xì)胞癌變也與SOS反應(yīng)有關(guān)。兩個(gè)作用（1）DNA的修復(fù)；（2）產(chǎn)

簡(jiǎn)介：藥學(xué)分子生物學(xué)藥學(xué)分子生物學(xué)交卷時(shí)間20170709151524一、單選題12分核酸變性后可發(fā)生哪種效應(yīng)（）?A減色效應(yīng)?B增色效應(yīng)?C失去對(duì)紫外線的吸收能力?D最大吸收峰波長(zhǎng)發(fā)生轉(zhuǎn)移?E最小吸收峰波長(zhǎng)發(fā)生轉(zhuǎn)移糾錯(cuò)得分0知識(shí)點(diǎn)藥學(xué)分子生物學(xué)收起解析答案B解析22分真核生物的延伸因子是（）?AEFTU?BEFTS?CEFG?DEEF1?EEEF3糾錯(cuò)得分0知識(shí)點(diǎn)藥學(xué)分子生物學(xué)52分利用限制性核酸內(nèi)切酶酶切時(shí)切斷的是（）?A氫鍵?B磷酸二酯鍵?C配位鍵?D離子鍵?E疏水作用糾錯(cuò)得分0知識(shí)點(diǎn)藥學(xué)分子生物學(xué)收起解析答案B解析62分TRNA分子上結(jié)合氨基酸的序列是（）?ACAA3′?BCCA3′?CAAC3′?DACA3′?ECCA5′糾錯(cuò)得分0知識(shí)點(diǎn)藥學(xué)分子生物學(xué)收起解析答案B解析72分氨基酸活化酶（）

簡(jiǎn)介：生物秀考研頻道生物秀考研頻道您的考研助手您的考研助手HTTP//WWWBBIOOCOM/KY/生物秀下載平臺(tái)專(zhuān)業(yè)生物資源下載平臺(tái)HTTP//WWWBBIOOCOM/SOFT/1第二章第二章DNA與染色體與染色體一、填空題一、填空題1．病毒Φ．病毒ΦX174及M13的遺傳物質(zhì)都是的遺傳物質(zhì)都是單鏈單鏈DNA。2．AIDS病毒的遺傳物質(zhì)是病毒的遺傳物質(zhì)是單鏈單鏈RNA。3．X射線分析證明一個(gè)完整的射線分析證明一個(gè)完整的DNA螺旋延伸長(zhǎng)度為螺旋延伸長(zhǎng)度為34NM。4．．氫氫鍵負(fù)責(zé)維持鍵負(fù)責(zé)維持A-T間（或間（或G-C間）的親和力間）的親和力5．天然存在的．天然存在的DNA分子形式為右手分子形式為右手B型螺旋。型螺旋。二、選擇題（單選或多選）二、選擇題（單選或多選）1．證明．證明DNA是遺傳物質(zhì)的兩個(gè)關(guān)鍵性實(shí)驗(yàn)是是遺傳物質(zhì)的兩個(gè)關(guān)鍵性實(shí)驗(yàn)是肺炎球菌在老鼠體內(nèi)的毒性和肺炎球菌在老鼠體內(nèi)的毒性和T2噬菌體感染大腸噬菌體感染大腸桿菌。這兩個(gè)實(shí)驗(yàn)中主要的論點(diǎn)證據(jù)是桿菌。這兩個(gè)實(shí)驗(yàn)中主要的論點(diǎn)證據(jù)是（C）。）。A．從被感染的生物體內(nèi)重新分離得到．從被感染的生物體內(nèi)重新分離得到DNA作為疾病的致病劑作為疾病的致病劑B．DNA突變導(dǎo)致毒性喪失突變導(dǎo)致毒性喪失C．生物體吸收的外源．生物體吸收的外源DNA（而并非蛋白質(zhì)）改變了其遺傳潛能（而并非蛋白質(zhì)）改變了其遺傳潛能D．DNA是不能在生物體間轉(zhuǎn)移的，因此它一定是一種非常保守的分子是不能在生物體間轉(zhuǎn)移的，因此它一定是一種非常保守的分子E．真核心生物、原核生物、病毒的．真核心生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代能相互混合并彼此替代2．1953年WATSON和CRICK提出（提出（A）。）。A．多核苷酸．多核苷酸DNA鏈通過(guò)氫鍵連接成一個(gè)雙螺旋鏈通過(guò)氫鍵連接成一個(gè)雙螺旋B．DNA的復(fù)制是半保留的，常常形成親本的復(fù)制是半保留的，常常形成親本-子代雙螺旋雜合鏈子代雙螺旋雜合鏈C．三個(gè)連續(xù)的核苷酸代表一個(gè)遺傳密碼．三個(gè)連續(xù)的核苷酸代表一個(gè)遺傳密碼D．遺傳物質(zhì)通常是．遺傳物質(zhì)通常是DNA而非而非RNAE．分離到回復(fù)突變體證明這一突變并非是一個(gè)缺失突變．分離到回復(fù)突變體證明這一突變并非是一個(gè)缺失突變3．DNA雙螺旋的解鏈或變性打斷了互補(bǔ)堿基間的氫鍵，并因此改變了它們的光吸收特性。雙螺旋的解鏈或變性打斷了互補(bǔ)堿基間的氫鍵，并因此改變了它們的光吸收特性。以下哪以下哪些是對(duì)些是對(duì)DNA的解鏈溫度的的解鏈溫度的正確描述（正確描述（C、D）A．哺乳動(dòng)物．哺乳動(dòng)物DNA約為約為45℃，因此發(fā)燒時(shí)體溫高于℃，因此發(fā)燒時(shí)體溫高于42℃是十分危險(xiǎn)的℃是十分危險(xiǎn)的B．依賴于．依賴于A-T含量，因?yàn)楹浚驗(yàn)锳-T含量越高則雙鏈分開(kāi)所需要的能量越少含量越高則雙鏈分開(kāi)所需要的能量越少C．是雙鏈．是雙鏈DNA中兩條單鏈分開(kāi)過(guò)程中溫度變化范圍的中間值中兩條單鏈分開(kāi)過(guò)程中溫度變化范圍的中間值D．可通過(guò)堿基在．可通過(guò)堿基在260NM的特征吸收峰的改變來(lái)確定的特征吸收峰的改變來(lái)確定E．就是單鏈發(fā)生斷裂（磷酸二酯鍵斷裂）時(shí)的溫度．就是單鏈發(fā)生斷裂（磷酸二酯鍵斷裂）時(shí)的溫度生物秀考研頻道生物秀考研頻道您的考研助手您的考研助手HTTP//WWWBBIOOCOM/KY/生物秀下載平臺(tái)專(zhuān)業(yè)生物資源下載平臺(tái)HTTP//WWWBBIOOCOM/SOFT/3A．6倍B．10倍C．40倍D．240倍E．1000倍F．10000倍11．DNA在中期染色體中壓縮多少倍在中期染色體中壓縮多少倍（F）A．6倍B．10倍C．40倍D．240倍E．1000倍F．10000倍12．分裂間期的早期，．分裂間期的早期，DNA處于（處于（A）狀態(tài)。）狀態(tài)。A．單體連續(xù)的線性雙螺旋分子．單體連續(xù)的線性雙螺旋分子B．半保留復(fù)制的雙螺旋結(jié)構(gòu)．半保留復(fù)制的雙螺旋結(jié)構(gòu)C．保留復(fù)制的雙螺旋結(jié)構(gòu)．保留復(fù)制的雙螺旋結(jié)構(gòu)D．單鏈．單鏈DNAE．以上都不正確．以上都不正確13．分裂間期．分裂間期S期，期，DNA處于（處于（B）狀態(tài)。）狀態(tài)。A．單體連續(xù)的線性雙螺旋分子．單體連續(xù)的線性雙螺旋分子B．半保留復(fù)制的雙螺旋結(jié)構(gòu)．半保留復(fù)制的雙螺旋結(jié)構(gòu)C．保留復(fù)制的雙螺旋結(jié)構(gòu)．保留復(fù)制的雙螺旋結(jié)構(gòu)D．單鏈．單鏈DNAE．以上都不正確．以上都不正確14．當(dāng)一個(gè)基因具有活性時(shí)（．當(dāng)一個(gè)基因具有活性時(shí)（A、C）。）。A．啟動(dòng)子一般是不帶有核小體的．啟動(dòng)子一般是不帶有核小體的B．整個(gè)基因一般是不帶有核小體的．整個(gè)基因一般是不帶有核小體的C．基因被核小體遮蓋，但染色質(zhì)結(jié)構(gòu)已發(fā)生改變以至于整個(gè)基因?qū)怂崦附到飧用舾校虮缓诵◇w遮蓋，但染色質(zhì)結(jié)構(gòu)已發(fā)生改變以至于整個(gè)基因?qū)怂崦附到飧用舾腥?、判斷題三、判斷題1．在高鹽和低溫條件下由在高鹽和低溫條件下由DNA單鏈雜交形成的雙螺旋表現(xiàn)出幾乎完全的互補(bǔ)性，單鏈雜交形成的雙螺旋表現(xiàn)出幾乎完全的互補(bǔ)性，這一過(guò)程可看作這一過(guò)程可看作是一個(gè)復(fù)性（退火）反應(yīng)。是一個(gè)復(fù)性（退火）反應(yīng)。（錯(cuò)誤錯(cuò)誤）2．單個(gè)核苷酸通過(guò)磷酸二酯鍵連接到．單個(gè)核苷酸通過(guò)磷酸二酯鍵連接到DNA骨架上。骨架上。正確正確3．DNA分子整體都具有強(qiáng)的負(fù)電性分子整體都具有強(qiáng)的負(fù)電性，因此沒(méi)有極性，因此沒(méi)有極性。。（錯(cuò)誤錯(cuò)誤）4．在核酸雙螺旋（如．在核酸雙螺旋（如DNA）中形成發(fā)夾環(huán)結(jié)構(gòu)的頻率比單鏈分子低。發(fā)夾結(jié)構(gòu)的產(chǎn)生需要回文序）中形成發(fā)夾環(huán)結(jié)構(gòu)的頻率比單鏈分子低。發(fā)夾結(jié)構(gòu)的產(chǎn)生需要回文序列使雙鏈形成對(duì)稱(chēng)的發(fā)夾，呈十字結(jié)構(gòu)列使雙鏈形成對(duì)稱(chēng)的發(fā)夾，呈十字結(jié)構(gòu)。正確正確5．．病毒的遺傳因子可包括病毒的遺傳因子可包括1-300個(gè)基因。個(gè)基因。與生命有機(jī)體不同，與生命有機(jī)體不同，病毒的遺傳因子可能是病毒的遺傳因子可能是DNA或RNA，，（但不可能同時(shí)兼有）因此（但不可能同時(shí)兼有）因此DNA不是完全通用的遺傳物質(zhì)。不是完全通用的遺傳物質(zhì)。正確正確6．一段長(zhǎng)度．一段長(zhǎng)度100BP的DNA，具有，具有4100種可能的序列組合形式。種可能的序列組合形式。正確正確7．C0T1/2與基因組大小相關(guān)。與基因組大小相關(guān)。正確正確8．C0T1/2與基因組復(fù)雜性相關(guān)。與基因組復(fù)雜性相關(guān)。正確正確9．非組蛋白染色體蛋白負(fù)責(zé)．非組蛋白染色體蛋白負(fù)責(zé)30NM纖絲高度有序的壓縮。纖絲高度有序的壓縮。正確正確10．．因?yàn)榻M蛋白因?yàn)榻M蛋白H4在所有物種中都是一樣的，在所有物種中都是一樣的，可以預(yù)期該蛋白質(zhì)基因在不同物種中也是一樣的。（可以預(yù)期該蛋白質(zhì)基因在不同物種中也是一樣的。（錯(cuò)錯(cuò)誤）（不同物種組蛋白）（不同物種組蛋白H4基因的核苷酸序列變化很大基因的核苷酸序列變化很大，），）

簡(jiǎn)介：生物化學(xué)與分子生物學(xué)重點(diǎn)生物化學(xué)與分子生物學(xué)重點(diǎn)11BIOXCN20061113234437來(lái)源綠色生命網(wǎng)第一章緒論一、生物化學(xué)的的概念生物化學(xué)（BIOCHEMISTRY是利用化學(xué)的原理與方法去探討生命的一門(mén)科學(xué)，它是介于化學(xué)、生物學(xué)及物理學(xué)之間的一門(mén)邊緣學(xué)科。二、生物化學(xué)的發(fā)展1．?dāng)⑹錾锘瘜W(xué)階段是生物化學(xué)發(fā)展的萌芽階段，其主要的工作是分析和研究生物體的組成成分以及生物體的分泌物和排泄物。2．動(dòng)態(tài)生物化學(xué)階段是生物化學(xué)蓬勃發(fā)展的時(shí)期。就在這一時(shí)期，人們基本上弄清了生物體內(nèi)各種主要化學(xué)物質(zhì)的代謝途徑。3．分子生物學(xué)階段這一階段的主要研究工作就是探討各種生物大分子的結(jié)構(gòu)與其功能之間的關(guān)系。三、生物化學(xué)研究的主要方面1．生物體的物質(zhì)組成高等生物體主要由蛋白質(zhì)、核酸、糖類(lèi)、脂類(lèi)以及水、無(wú)機(jī)鹽等組成，此外還含有一些低分子物質(zhì)。2．物質(zhì)代謝物質(zhì)代謝的基本過(guò)程主要包括三大步驟消化、吸收→中間代謝→排泄。其中，中間代謝過(guò)程是在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行的，最為復(fù)雜的化學(xué)變化過(guò)程，它包括合成代謝，分解代謝，物質(zhì)互變，代謝調(diào)控，能量代謝幾方面的內(nèi)容。3．細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)存在多條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，而這些途徑之間通過(guò)一定的方式方式相互交織在一起，從而構(gòu)成了非常復(fù)雜的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)，調(diào)控細(xì)胞的代謝、生理活動(dòng)及生長(zhǎng)分化。4．生物分子的結(jié)構(gòu)與功能通過(guò)對(duì)生物大分子結(jié)構(gòu)的理解，揭示結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。5．遺傳與繁殖對(duì)生物體遺傳與繁殖的分子機(jī)制的研究，也是現(xiàn)代生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究的NH形成鏈間氫鍵；③側(cè)鏈基團(tuán)分別交替位于片層的上、下方。⑶Β轉(zhuǎn)角多肽鏈180°回折部分，通常由四個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成，借1、4殘基之間形成氫鍵維系。⑷無(wú)規(guī)卷曲主鏈骨架無(wú)規(guī)律盤(pán)繞的部分。3．三級(jí)結(jié)構(gòu)指多肽鏈所有原子的空間排布。其維系鍵主要是非共價(jià)鍵（次級(jí)鍵）氫鍵、疏水鍵、范德華力、離子鍵等，也可涉及二硫鍵。4．四級(jí)結(jié)構(gòu)指亞基之間的立體排布、接觸部位的布局等，其維系鍵為非共價(jià)鍵。亞基是指參與構(gòu)成蛋白質(zhì)四級(jí)結(jié)構(gòu)的而又具有獨(dú)立三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈。五、蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)1．兩性解離與等電點(diǎn)蛋白質(zhì)分子中仍然存在游離的氨基和游離的羧基，因此蛋白質(zhì)與氨基酸一樣具有兩性解離的性質(zhì)。蛋白質(zhì)分子所帶正、負(fù)電荷相等時(shí)溶液的PH值稱(chēng)為蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)。2．蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)蛋白質(zhì)具有親水溶膠的性質(zhì)。蛋白質(zhì)分子表面的水化膜和表面電荷是穩(wěn)定蛋白質(zhì)親水溶膠的兩個(gè)重要因素。3．蛋白質(zhì)的紫外吸收蛋白質(zhì)分子中的色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸殘基對(duì)紫外光有吸收，以色氨酸吸收最強(qiáng)，最大吸收峰為280NM。4．蛋白質(zhì)的變性蛋白質(zhì)在某些理化因素的作用下，其特定的空間結(jié)構(gòu)被破壞而導(dǎo)致其理化性質(zhì)改變及生物活性喪失，這種現(xiàn)象稱(chēng)為蛋白質(zhì)的變性。引起蛋白質(zhì)變性的因素有高溫、高壓、電離輻射、超聲波、紫外線及有機(jī)溶劑、重金屬鹽、強(qiáng)酸強(qiáng)堿等。絕大多數(shù)蛋白質(zhì)分子的變性是不可逆的。六、蛋白質(zhì)的分離與純化1．鹽析與有機(jī)溶劑沉淀在蛋白質(zhì)溶液中加入大量中性鹽，以破壞蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)，使蛋白質(zhì)從溶液中沉淀析出，稱(chēng)為鹽析。常用的中性鹽有硫酸銨、氯化鈉、硫酸鈉等。鹽析時(shí)，溶液的PH在蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)處效果最好。凡能與水以任意比例混合的有機(jī)溶劑，如乙醇、甲醇、丙酮等，均可引起蛋白質(zhì)沉淀。2．電泳蛋白質(zhì)分子在高于或低于其PI的溶液中帶凈的負(fù)或正電荷，因此在電場(chǎng)中可以移動(dòng)。電泳遷移率的大小主要取決于蛋白質(zhì)分子所帶電荷量以及分子大小。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多黃渤海中華哲水蚤現(xiàn)場(chǎng)食物的分子生物學(xué)分析方法及應(yīng)用精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：中圖分類(lèi)號(hào)中圖分類(lèi)號(hào)Q946單位代碼單位代碼10231學(xué)號(hào)號(hào)42009732轉(zhuǎn)IL4基因番茄（基因番茄（LYCOPERSIONESCULENTUMMILL）后代分子生物學(xué)檢測(cè)及其生理特性的研究學(xué)科專(zhuān)業(yè)植物學(xué)研究方向植物分子生物學(xué)作者姓名張鵬指導(dǎo)教師朱宏教授于麗杰教授哈爾濱師范大學(xué)二〇一二年六月ATHESISSUBMITTEDFORTHEDEGREEOFMASTERMOLECULARBIOLOGYDETECTIONANDPHYSIOLOGICALCHARACTERISTICSOFTRANSGENICTOMATOWITHINTERLEUKIN4GENECANDIDATEZHANGPENGSUPERVISORPROFZHUHONGPROFYULIJIESPECIALITYBOTANYDATEOFDEFENCEJUNE,2012DEGREECONFERRINGINSTITUTIONHARBINNORMALUNIVERSITY

簡(jiǎn)介：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文腺病毒載體介導(dǎo)共刺激分子B71基因?qū)和文讣?xì)胞瘤體外生物學(xué)特性的影響姓名王斌申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)小兒外科指導(dǎo)教師劉磊20070401中文論著摘要腺病毒載體介導(dǎo)共刺激分子B7．1基因?qū)和文讣?xì)胞瘤體外生物學(xué)特性的影響實(shí)驗(yàn)背景和目的人體的抗腫瘤免疫以T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫為主，T細(xì)胞的活化需雙信號(hào)刺激第一信號(hào)由T細(xì)胞抗原受體TCR與抗原提呈細(xì)胞APC上的抗原肽MHC分子復(fù)合物結(jié)合提供，第二信號(hào)由APC上的共刺激分子與T細(xì)胞上的相應(yīng)配體結(jié)合提供。只有雙信號(hào)共同刺激才能有效激活特異性的T細(xì)胞，缺乏第二信號(hào)造成T細(xì)胞克隆凋亡，使腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生免疫逃避。APC上的共刺激分子主要是一些粘附分子，其中B7．1分子是重要的粘附分子。肝母細(xì)胞瘤被認(rèn)為是一種弱免疫原性的惡性腫瘤，腫瘤細(xì)胞表面缺乏足夠的可以與淋巴細(xì)胞表面結(jié)合的配體，主要是指B7一ICD80和B72CD86，其中缺乏B7．1分子的表達(dá)是其無(wú)法提供第二信號(hào)的重要原因。我們希望通過(guò)基因轉(zhuǎn)染的技術(shù)手段達(dá)到提高肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞表面的B7．1分子抗體表達(dá)水平，恢復(fù)其傳導(dǎo)第二信號(hào)刺激的能力，從而誘導(dǎo)特異性抗腫瘤免疫反應(yīng)的目的。為此，我們進(jìn)行了以下的實(shí)驗(yàn)研究。1．檢測(cè)肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞中B7．1分子的表達(dá)水平。2通過(guò)含HB7．1基因的重組腺病毒載體轉(zhuǎn)染肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞株，建立B7．1分子高表達(dá)的陽(yáng)性克隆。3．觀察轉(zhuǎn)染后腫瘤細(xì)胞B7．1分子的表達(dá)水平及細(xì)胞生物學(xué)特性的變化4．觀察轉(zhuǎn)染含HB7．1基因的瘤苗對(duì)T淋巴細(xì)胞增殖的影響。實(shí)驗(yàn)方法通過(guò)含HB7．1基因的重組腺病毒載體轉(zhuǎn)入HEPG2細(xì)胞，流式細(xì)胞儀FCM檢測(cè)HEPG2和HEPG2／HB7．1細(xì)胞表面BT1分子的表達(dá)水平。觀察HEPG2和HEPG2／B_B7．1細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線。用混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)法檢測(cè)瘤苗對(duì)T淋巴細(xì)胞增

簡(jiǎn)介：山東大學(xué)碩士學(xué)位論文新型免疫分子TIM4對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞系RAW2647生物學(xué)活性的影響姓名續(xù)力云申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)醫(yī)學(xué)免疫學(xué)指導(dǎo)教師高立芬20080512山東大學(xué)碩士學(xué)位論文RPM，REVOLUTIONAPERMINUTE，每分轉(zhuǎn)數(shù)RT．PCR，REVERSETRANSCRIPTIONPCR，逆轉(zhuǎn)錄PCRS，SECOND，秒TNF．A，TUMORNECROSISFACTORALPHA，腫瘤壞死因子噸TIM，TCELLIMMUNOGLOBULINDOMAINANDMUCINDOMAINPROTEIN，T細(xì)胞免疫球蛋白域粘蛋白域蛋白TIM4，TCELLIMMUNOGLOBULINDOMAINANDMUCINDOMAINPROTEIN一4，T細(xì)胞免疫球蛋白域粘蛋白域蛋白48

簡(jiǎn)介：新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文58SRDNA和ITS序列同源性分析在酸馬奶酵母菌分子生物學(xué)鑒定中的應(yīng)用姓名茍榮申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)動(dòng)物遺傳育種與繁殖指導(dǎo)教師姚新奎20080601ABSTRACTINTHISTHESIS，THECATEGORYSTATUSOF6STRAINYEASTS，WHICHWEREISOLATEDFROMKOUMISSOF4DIFFERENTREGIONS，WASNOTDETERMINEDACCORDINGTOITSMORPHOLOGYANDBIOCHEMISTRY．GENOMEDNAWASEXTRACTEDANDUSEAPAIROFPRIMERS，NAMEDITS1ANDITS4AMPLIFY5．8SRRNAANDITSGENEFROMSTRAINSRESPECTIVELY．THEAMPLIFICATIONWASPURIFIEDANDCONNECTEDINTOTHEPMD19TVECTOR．AFTERCLONEANDIDENTIFICATION，DETERMINEDTHESEQUENCE．THENCOMPAREDTHESEQUENCESWEOBTAINEDWIMTHESEQUENCESINGENBANKDATABASEINORDERTOIDENTIFYTHESTRAINS．ANDPHYLOGENETICDENDROGRAMWEREESTABLISHED．COMBINEDWITHANALYSISOFTHEPHYOLGENETICTREEANDPARTIALSEQUENCESOF5．8SRDNAANDITS，Y12WASCLASSIFIEDASSACCHAROMYCESUNISPORUS．J14AND33WASCLASSIFIEDASKLUYVEROMYCESMARXIANUS．H19WASCLASSIFIEDASISSATCHENKIAORIENTALIS．30AND39WASCLASSIFIEDASCANDIDAETHANOLICA．THERESULTOFJ14WASASSAMEASTHATOF仃ADITIONALCLASSIFICATIONBEFORE．KEYWORDSKOUMISS；YEAST5．8SRDNAITS；HOMOLOGY；PHYLOGENETICDENDROGRAM

簡(jiǎn)介：重慶醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文1輕度認(rèn)知功能障礙與阿爾茨海默病臨床綜合性評(píng)價(jià)的對(duì)照研究2ALZHEIMER病大鼠腦內(nèi)突觸功能障礙分子生物學(xué)機(jī)制及干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究姓名李強(qiáng)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師胡長(zhǎng)林20080501重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文PKCⅣ巳蛆KGADPHGVDACHACHRSERLTPCREBGSK313DHYZJGPROTEINKINASEC蛋白激酶CMITOGENACTIVATEDPROTEINKINASES促分裂素原活化蛋白激酶GLYCERALDEHYDE一3．PHOSPHATE甘油醛3一磷酸脫氫酶DEHYDROGENASEGRANULOVACUOLARDEGENERATIONACETYLCHOLINE空泡變性乙酰膽堿ACETYLCHOLINERECEPTOR乙酰膽堿受體SERINE絲氨酸LONGTERMPOTENTIATION長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)CAMPRESPONSEELEMENTBINDINGCAMPI應(yīng)答元件結(jié)合GLYCOGENSYNTHASEKINASE一3PDIHUANGYIZHIJINGAO葡萄糖合成激酶．3D地黃益知浸膏RTPCRREVERSETRANSCRIPTIONPOLYMERASE逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)CHAINREACTIONPSD．95GAP43POSTSYNAPTICDENSITY95突觸后致密物一95GROWTH．ASSOCIATEDPROTEIN．43生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43EGTAETHYLENEGGLYCOLBISN,N,N’，N’一7,醇雙四乙酸EDTAETHYLENEDIAMINEN，NTERTRAACETIC乙二胺四乙酸ODSDS強(qiáng)SDEPCPIPFAACIDOPTICALDENSITY光密度十二烷基磺酸鈉TRISHYDROXYMETHYLAMINOMETHANE三羥甲基氨基甲烷DIETHYLPROCARBONATE二乙基焦碳酸酯PROPIDIUMIODIDE碘化丙錠PARAFORMALDOHYDE多聚甲醛2

簡(jiǎn)介：第二軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文1抑制糖皮質(zhì)激素受體表達(dá)導(dǎo)致小鼠巨噬細(xì)胞系RAW2647增殖加快的分子機(jī)制2非基因毒應(yīng)激對(duì)RHOB的誘導(dǎo)作用及其生物學(xué)意義姓名王曉慧申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師盧建20050501第二軍醫(yī)大學(xué)博J一學(xué)位論文1二曉慧DEXGCGRRHOBSⅡ沖CTLSHP．2MAPKDCCTNFANORNAISIRNAGREEDKCDⅪRAWGR一胄一舭VECTORABBREVIATJONSDEXAMETHASONEGLUCOCORTICOIDGLUCOCORTICOIDRECEPTORRASHOMOLOGBSIGNALREGULATINGPROTEINⅡ1SH2DMAINCONTAININGPROTEINPHOSPHASTASE2MITOGENACTIVEDPROTEINKINASEDEXTRANCOATEDCHARCOALTULTIORNECROSISFACTOR0【NITRICOXIDERNAINTERFEFENCESMALLINTERFERENCERNAGLUCOCORTIEOIDRESPONSEELEMENTCYCLINDEPENDENTKINASESCYCLINDEPENDENTKINASESINHIBITORTHERAW264．7CELLLINEWHICHSTABLYTRANSFECTEDWITHPSILENCER2．1一U6一GRSIRNAEXPRESSIONVECTORTHERAW264．7CELLLINEWHICHSTABLYTRANSFECTEDWITHBLANKPSILENCER2．1一U6EXPRESSIONVECTOR

簡(jiǎn)介：中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文1基于靶酶結(jié)構(gòu)的HCVNS3解旋酶抑制劑的虛擬篩選及分子生物學(xué)活性評(píng)價(jià)2真菌039007代謝產(chǎn)物抗動(dòng)脈粥樣硬化活性成分的提取分離姓名趙桂玉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)微生物與生化藥學(xué)指導(dǎo)教師司書(shū)毅20070601中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文英文縮略語(yǔ)LUCLUCIF打船EPBSPHOSPHATEBUFFERSALINEP雌RPEROXISOMEPROLIFERATORACTIVATEDRECEPTORRCTREVERSECHOLESTEROLTRANSPORTRNAMB伽UCLEICACIDRTPCRREVERSETRANSCRIPTIONPCRSRBISCAVENGERRECEPTORCLASSBTYPEISRBHSCAVENGERRECEPTORCLASSBTYPEIISREBP1STEROLREGULATORYELEMENTBINDINGPROTEINITCTOTALCHOLES幻ROLTGTRIGLYCERIDET墻TRIHYDROXYME也Y1鋤ILL咄TLL鋤E2螢火蟲(chóng)熒光素酶磷酸鹽緩沖液過(guò)氧化酶體增殖型激活體受體膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)核糖核酸逆轉(zhuǎn)錄．聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)清道夫受體B族I型清遵夫受體B族Ⅱ型固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白總膽固醇甘油三酯三羥甲基氨基甲烷

簡(jiǎn)介：1分子生物學(xué)大實(shí)驗(yàn)分子生物學(xué)大實(shí)驗(yàn)?zāi)康幕虻目寺〖氨磉_(dá)目的基因的克隆及表達(dá)第一節(jié)基因操作概述2一、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PCR2二、質(zhì)粒概述4三、凝膠電泳5四、大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備和轉(zhuǎn)化6五、重組質(zhì)粒的連接7六、限制性內(nèi)切酶消化7七、SDSPAGE蛋白質(zhì)電泳7第二節(jié)材料、設(shè)備及試劑7一、材料8二、設(shè)備8三、試劑9第三節(jié)操作步驟10一、目的基因的獲得10二、PET21BT（PET21BR、PET21B）載體的獲得11三、PET21B等與目的片段的連接作用12四、轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5Α進(jìn)行陽(yáng)性克隆子篩選與鑒定13五、轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21PLYST，搖菌進(jìn)行SDSPAGE電泳。14六、融合蛋白的毒力測(cè)定16第四節(jié)本實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)報(bào)告1634、模板PCR反應(yīng)必須以DNA為模板進(jìn)行擴(kuò)增，模板DNA可以是單鏈分子，也可以是雙鏈分子，可以是線狀分子，也可以是環(huán)狀分子線狀分子比環(huán)狀分子的擴(kuò)增效果稍好。就模板DNA而言，影響PCR的主要因素是模板的數(shù)量和純度。一般反應(yīng)中的模板數(shù)量為102～105個(gè)拷貝，對(duì)于單拷貝基因，這需要01ΜG的人基因組DNA，10NG的酵母DNA，1NG的大腸桿菌DNA。擴(kuò)增多拷貝序列時(shí)，用量更少。靈敏的PCR可從一個(gè)細(xì)胞，一根頭發(fā)，一個(gè)孢子或一個(gè)精子提取的DNA中分析目的序列。模板量過(guò)多則可能增加非特異性產(chǎn)物。DNA中的雜質(zhì)也會(huì)影響PCR的效率。5、TAQDNA聚合酶一般TAQDNA聚合酶活性半衰期為925℃130MIN，95℃40MIN，97℃5MIN?，F(xiàn)在人們又發(fā)現(xiàn)許多新的耐熱的DNA聚合酶，這些酶的活性在高溫下活性可維持更長(zhǎng)時(shí)間。TAQDNA聚合酶的酶活性單位定義為74℃下，30MIN，摻入10NMOLLDNTP到核酸中所需的酶量。TAQDNA聚合酶的一個(gè)致命弱點(diǎn)是它的出錯(cuò)率，一般PCR中出錯(cuò)率為2104核苷酸每輪循環(huán)。在100ΜLPCR反應(yīng)中，15～2單位的TAQDNA聚合酶就足以進(jìn)行30輪循環(huán)。所用的酶量可根據(jù)DNA、引物及其它因素的變化進(jìn)行適當(dāng)?shù)脑鰷p。酶量過(guò)多會(huì)使產(chǎn)物非特異性增加，過(guò)少則使產(chǎn)量降低。6、反應(yīng)緩沖液反應(yīng)緩沖液一般含10～50MMOLLTRISCL20℃下PH83～88，50MMOLLKCL和適當(dāng)濃度的MG2。TRISCL在20℃時(shí)PH為83～88，但在實(shí)際PCR反應(yīng)中，PH為68～78。50MMOLL的KCL有利于引物的退火。另外，反應(yīng)液可加入5MMOLL的二硫蘇糖醇DDT或100ΜGML的牛血清白蛋白BSA，它們可穩(wěn)定酶活性。（二）、PCR反應(yīng)參數(shù)1、變性在第一輪循環(huán)前，在94℃下變性5～10MIN非常重要，它可使模板DNA完全解鏈，然后加入TAQDNA聚合酶HOTSTART，這樣可減少聚合酶在低溫下仍有活性從而延伸非特異性配對(duì)的引物與模板復(fù)合物所造成的錯(cuò)誤。變性不完全，往往使PCR失敗，因?yàn)槲醋冃酝耆腄NA雙鏈會(huì)很快復(fù)性，減少DNA產(chǎn)量。一般變性溫度與時(shí)間為94℃1MIN。在變性溫度下，雙鏈DNA解鏈只需幾秒鐘即可完全，所耗時(shí)間主要是為使反應(yīng)體系完全達(dá)到適當(dāng)?shù)臏囟取?、退火引物退火的溫度和所需時(shí)間的長(zhǎng)短取決于引物的堿基組成，引物的長(zhǎng)度、引物與模板的配對(duì)程度以及引物的濃度。實(shí)際使用的退火溫度比擴(kuò)增引物的TM值約低5℃。一般當(dāng)引物中GC含量高，長(zhǎng)度長(zhǎng)并與模板完全配對(duì)時(shí)，應(yīng)提高退火溫度。退火溫度越高，所得產(chǎn)物的特異性越高。通常退火溫度和時(shí)間為37℃～55℃，1～2MIN。3、延伸延伸反應(yīng)通常為72℃，接近于TAQDNA聚合酶的最適反應(yīng)溫度75℃。實(shí)際

簡(jiǎn)介：證明證明DNA是遺傳物質(zhì)的關(guān)鍵性實(shí)驗(yàn)是（是遺傳物質(zhì)的關(guān)鍵性實(shí)驗(yàn)是（AC）。）。A肺炎球菌在老鼠體內(nèi)的毒性BBDNA的X光衍射CT噬菌體感染大腸桿菌D孟德?tīng)柕耐愣闺s交E摩爾根的果蠅連鎖遺傳試驗(yàn)?zāi)壳暗闹行姆▌t所包含的遺傳信息傳遞包括（目前的中心法則所包含的遺傳信息傳遞包括（ADE）。）。ADNA到DNAB蛋白質(zhì)到RNACRNA到RNADRNA到DNAEDNA到RNA1953年WATSON和CRICK提出提出AA多核苷酸DNA鏈通過(guò)氫鍵連接成一個(gè)雙螺旋BDNA的復(fù)制是半保留的，常常形成親本子代雙螺旋雜合鏈C三個(gè)連續(xù)的核苷酸代表一個(gè)遺傳密碼D遺傳物質(zhì)通常是DNA而非RNAE遺傳信息的傳遞是從DNA到RNA組蛋白都含有大量的（組蛋白都含有大量的（C）。）。A精氨酸和組氨酸B組氨酸和賴氨酸C精氨酸和賴氨酸組蛋白的凈電荷是（組蛋白的凈電荷是（A）。）。A正B中性C負(fù)核小體是由（核小體是由（BCDE）各兩個(gè)分子生成的八聚體。）各兩個(gè)分子生成的八聚體。AH1BH2ACH2BDH3EH4GC含量越高含量越高TM值越高的原因是（值越高的原因是（B）。）。AGC之間形成共價(jià)鍵BGC之間形成三個(gè)氫鍵CGC之間形成離子鍵DGC易于甲基化DNA的復(fù)制（的復(fù)制（B）A包括一個(gè)雙螺旋中兩條子鏈的合成B遵循新的子鏈與其親本鏈相配對(duì)的原則C依賴于物種特異的遺傳密碼D可以從DNA鏈上的任何一個(gè)部位開(kāi)始E是一個(gè)描述基因表達(dá)的過(guò)程一個(gè)復(fù)制子是一個(gè)復(fù)制子是CA細(xì)胞分裂期間復(fù)制產(chǎn)物被分離之后的DNA片段B復(fù)制的DNA片段和在此過(guò)程中所需的酶和蛋白C任何自發(fā)復(fù)制的DNA序列它與復(fù)制起始點(diǎn)相連D從起始密碼子到終止密碼子之間的DNA片段E復(fù)制起點(diǎn)和復(fù)制叉之間的DNA片段下列關(guān)于下列關(guān)于DNA復(fù)制的說(shuō)法是正確的有（復(fù)制的說(shuō)法是正確的有（DEF）A按全保留機(jī)制進(jìn)行B接3’→5’方向進(jìn)行C需要4種DNMP的參與D需要DNA連接酶的作用E涉及RNA引物的形成F需要DNA聚合酶Ⅰ滾環(huán)復(fù)制（滾環(huán)復(fù)制（D）A是細(xì)菌DNA的主要復(fù)制方式B涉及岡崎片段的合成C產(chǎn)生的復(fù)制子總是雙鏈環(huán)狀拷貝D是噬菌體DNA在細(xì)菌中最通常的種復(fù)制方式DNA多聚體的形成要求有模板和一個(gè)自由多聚體的形成要求有模板和一個(gè)自由3’OH端的存在。這個(gè)末端的形成是靠（端的存在。這個(gè)末端的形成是靠（ACD）A在起點(diǎn)或?qū)槠纹鹗嘉稽c(diǎn)上的一個(gè)RNA引發(fā)體的合成B自由的脫氧核糖核苷酸和模板一起隨機(jī)按WATSONCRICK原則進(jìn)行配對(duì)