腺病毒載體介導共刺激分子b7.1基因對兒童肝母細胞瘤體外生物學特性的影響

1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文腺病毒載體介導共刺激分子B7.1基因對兒童肝母細胞瘤體外生物學特性的影響姓名：王斌申請學位級別：碩士專業(yè)：小兒外科指導教師：劉磊20070401中文論著摘要·腺病毒載體介導共刺激分子B 7 ．1 基因對兒童肝母細胞瘤體外生物學特性的影響實驗背景和目的人體的抗腫瘤免疫以T 細胞介導的細胞免疫為主，T 細胞的活化需雙信號刺激：第一信號由T 細胞抗原受體( T C R ) 與抗原提呈細胞( AP C ) 上的

2、抗原肽- M H C 分子復合物結合提供，第二信號由A P C 上的共刺激分子與T 細胞上的相應配體結合提供。只有雙信號共同刺激才能有效激活特異性的T 細胞，缺乏第二信號造成T 細胞克隆凋亡，使腫瘤細胞產生免疫逃避。AP C 上的共刺激分子主要是一些粘附分子，其中B 7 ．1 分子是重要的粘附分子。肝母細胞瘤被認為是一種弱免疫原性的惡性腫瘤，腫瘤細胞表面缺乏足夠的可以與淋巴細胞表面結合的配體，主要是指B 7 一I ( C D 8 0 )

3、 和B 7 - 2 ( C D 8 6 ) ，其中缺乏B 7 ．1 分子的表達是其無法提供第二信號的重要原因。我們希望通過基因轉染的技術手段達到提高肝母細胞瘤細胞表面的B 7 ．1 分子抗體表達水平，恢復其傳導第二信號刺激的能力，從而誘導特異性抗腫瘤免疫反應的目的。為此，我們進行了以下的實驗研究。1 ．檢測肝母細胞瘤細胞中B 7 ．1 分子的表達水平。2 通過含h B 7 ．1 基因的重組腺病毒載體轉染肝母細胞瘤細胞株，建立B 7 ．1

4、 分子高表達的陽性克隆。3 ．觀察轉染后腫瘤細胞B 7 ．1 分子的表達水平及細胞生物學特性的變化4 ．觀察轉染含h B 7 ．1 基因的瘤苗對T 淋巴細胞增殖的影響。實驗方法通過含h B 7 ．1 基因的重組腺病毒載體轉入H e p G 2 細胞，流式細胞儀( F C M )檢測H e p G 2 和H e p G 2 ／h B 7 ．1 細胞表面B T - 1 分子的表達水平。觀察H e p G 2 和H e p G 2 ／b _