簡(jiǎn)介：第三軍醫(yī)大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明秉承學(xué)校嚴(yán)謹(jǐn)?shù)男ｏL(fēng)和科研作風(fēng)，本人申明所呈交的論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包含為獲得我?；蚱渌逃龣C(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料，與我同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。申請(qǐng)學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名橙日期I第三軍醫(yī)大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本人完全了解第三軍醫(yī)大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬第三軍醫(yī)大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為第三軍醫(yī)大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤(pán)，允許論文被查閱和借閱。學(xué)校可以公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外，可以采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名乏遍指導(dǎo)教師簽名知弋廠(chǎng)1‘’日期笙蘭目錄英文縮寫(xiě)一覽表??????????????????????????????1英文摘要?????????????????????????????????．3中文摘要?????????????????????????????????6正文穩(wěn)定過(guò)表達(dá)WNT5A對(duì)K562細(xì)胞生物學(xué)性狀影響的研究??????????8前言??????????????????????????????????????????．．8日U舌??????????????????????????????????????????．．第一部分構(gòu)建質(zhì)粒PSEBWNT5A與穩(wěn)定過(guò)表達(dá)細(xì)胞株K562一WNT5A的研究???。9材料與方法???????????????????????????????9結(jié)果?????????????????????????????????????????26討論?????????????????????????????????????????；1第二部分穩(wěn)定過(guò)表達(dá)WNT5A對(duì)K562細(xì)胞生物學(xué)性狀影響的研究???????33材料與方法??????????????????????????????33結(jié)果?????????????????????????????????????????40討論?????????????????????????????????????????Z15全文總結(jié)????????????????????????????????47致謝??????????????????????????????????????????48參考文獻(xiàn)???????????????????????????????一49文獻(xiàn)綜述WNT5A與血液系統(tǒng)???????????????????????．．52參考文獻(xiàn)????????????????????????????????56攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表文章????????????????????????．．59

簡(jiǎn)介：分類(lèi)號(hào)華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文密級(jí)錦鯉鰭條細(xì)胞系的建立及其生物學(xué)特性分析ESTABLISHMENTANDCHARACTERIZATIONOFAFINCELLLINEFROMORNAMENTALCARP，CYPRINUSCARPIO研究生付思思指導(dǎo)教師吳志新副教授湯蓉博士專(zhuān)業(yè)水產(chǎn)養(yǎng)殖獲得學(xué)位名稱(chēng)農(nóng)學(xué)碩士研究方向水產(chǎn)動(dòng)物疾病與免疫獲得學(xué)位時(shí)間2012年月日華中農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院二。一二年六月錦鯉鰭條細(xì)胞系的建立及其生物學(xué)特性分析目錄摘要IABSTRACTII縮略語(yǔ)表Ⅳ第一章文獻(xiàn)綜述11魚(yú)類(lèi)細(xì)胞培養(yǎng)研究進(jìn)展12魚(yú)類(lèi)細(xì)胞培養(yǎng)的基本方法。421魚(yú)類(lèi)細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境條件422魚(yú)類(lèi)細(xì)胞培養(yǎng)的常用培養(yǎng)基和添加物523魚(yú)類(lèi)細(xì)胞培養(yǎng)的組織來(lái)源624魚(yú)類(lèi)細(xì)胞原代培養(yǎng)的常用方法725魚(yú)類(lèi)細(xì)胞系的永生化73魚(yú)類(lèi)細(xì)胞系的應(yīng)用831細(xì)胞培養(yǎng)在魚(yú)類(lèi)病毒學(xué)方面的應(yīng)用932細(xì)胞培養(yǎng)在毒理學(xué)方面的應(yīng)用933細(xì)胞培養(yǎng)在其他方面的應(yīng)用一104本論文的研究目的和研究意義11第二章錦鯉組織培養(yǎng)及鰭條細(xì)胞系的建立13L材料與方法1311主要試劑一1312主要儀器1313實(shí)驗(yàn)方法一14131組織塊法進(jìn)行細(xì)胞的原代培養(yǎng)14132細(xì)胞的傳代培養(yǎng)14133細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇142結(jié)果與分析1521錦鯉組織的原代培養(yǎng)1522錦鯉組織的傳代培養(yǎng)1523凍存細(xì)胞的復(fù)蘇能力183討侖19

簡(jiǎn)介：日目錄目錄153與惡性腫瘤發(fā)生的關(guān)系。1116結(jié)語(yǔ)與展望11第二章哺乳動(dòng)物及禽鳥(niǎo)類(lèi)B淋巴細(xì)胞因子及增殖誘導(dǎo)配體的研究進(jìn)展。1321哺乳動(dòng)物BAFF／ARIL的分子克隆1322哺乳動(dòng)物BAFF／ARLL的分子結(jié)構(gòu)及組織分布1323家畜類(lèi)BAFF／APRIL的生物學(xué)功能。14第二部分實(shí)驗(yàn)部分。15第一章?lián)P子鱷B細(xì)胞刺激因子YABAFF的克隆、表達(dá)及生物學(xué)功能研究1611實(shí)驗(yàn)材料16111實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、質(zhì)粒和宿主菌16112試劑和耗材16113實(shí)驗(yàn)儀器1612實(shí)驗(yàn)方法16121RNA抽提16122簡(jiǎn)并引物的設(shè)計(jì)17123RTPCR17124CDNA末端快速擴(kuò)增RACE18

簡(jiǎn)介：UDC論文題目研究生道目娜指導(dǎo)教師奎熳熬授奎疆副熬授專(zhuān)業(yè)．．．．．動(dòng)物堂．一一研究方向動(dòng)物細(xì)胞王猩學(xué)院生僉抖堂堂隨二零一三年五月道日娜猞刪三種組織成纖維細(xì)胞體JL培養(yǎng)體系的建立及生物學(xué)特性分祈猞猁三種組織成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)體系的建立及生物學(xué)特性分析摘要為研究猞猁細(xì)胞體外培養(yǎng)體系及生物學(xué)特性，深入開(kāi)展猞猁基因組學(xué)及瀕危野生動(dòng)物保護(hù)工程，本研究獲取猞猁心臟、軀體、睪丸三種組織，采用組織塊培養(yǎng)法，用MEM培養(yǎng)液進(jìn)行原代、傳代培養(yǎng)，進(jìn)行常規(guī)冷凍和復(fù)蘇，建立了猞猁三種組織成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)體系，并對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察、生長(zhǎng)曲線(xiàn)測(cè)定、微生物污染檢測(cè)、染色體核型分析、熒光蛋白質(zhì)粒轉(zhuǎn)染表達(dá)等特性研究。結(jié)果顯示猞猁心臟、軀體及睪丸來(lái)源的組織塊分別在培養(yǎng)5,6D、89D、1112D時(shí)開(kāi)始有成纖維樣細(xì)胞從中長(zhǎng)出。在進(jìn)行傳代時(shí)，這3種組織來(lái)源的細(xì)胞群體倍增時(shí)間均為40H，通常在4～5D可鋪滿(mǎn)瓶底；對(duì)比細(xì)胞凍存前后存活率，細(xì)胞復(fù)蘇后活率較凍存前有所下降，但均有較高的存活率，都達(dá)到90％以上；三種組織細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)均呈“S“型，符合體外培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)規(guī)律，均經(jīng)歷了潛伏期、指數(shù)生長(zhǎng)期和停滯期；細(xì)菌、真菌、病毒、支原體等微生物污染檢測(cè)呈陰性；對(duì)猞猁50個(gè)中期分裂細(xì)胞進(jìn)行染色體數(shù)目統(tǒng)計(jì)，染色體數(shù)目為2N38，為19對(duì)，其中18對(duì)為常染色體，1對(duì)為性染色體。有約88％44／50的細(xì)胞染色體具有正常二倍體特性，說(shuō)明試驗(yàn)所培養(yǎng)的細(xì)胞遺傳特性相對(duì)穩(wěn)定。脂質(zhì)體介導(dǎo)的紅色熒光蛋白質(zhì)粒轉(zhuǎn)染猞猁三種組織成纖維細(xì)胞，用81AL脂質(zhì)體介導(dǎo)499質(zhì)粒轉(zhuǎn)染24H即可獲得較滿(mǎn)意的轉(zhuǎn)染效率。轉(zhuǎn)染率分別為心臟來(lái)源細(xì)胞58％、軀體來(lái)源細(xì)胞51％、睪丸來(lái)源細(xì)胞46％，表明本研究體外培養(yǎng)的猞猁

簡(jiǎn)介：碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文題目題目利用噬菌體展示技術(shù)淘選利用噬菌體展示技術(shù)淘選Α‐2,6唾液酸糖模擬肽并檢測(cè)其在唾液酸糖模擬肽并檢測(cè)其在NEURO2A細(xì)胞中的生物學(xué)活性細(xì)胞中的生物學(xué)活性英文題目英文題目SCREENINGOFΑ‐2,6‐SIALYLLACTOSEMIMETICPEPTIDEVIAPHAGEDISPLAYANDANALYSISOFITSBIOACTIVITYONNEURO2ACELL姓名秘勇建學(xué)號(hào)10920020所在學(xué)院醫(yī)學(xué)院導(dǎo)師姓名MELITTASCHACHNER教授趙煒疆副研究員專(zhuān)業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)入學(xué)日期2009年9月答辯日期2012年5月III

簡(jiǎn)介：中山大學(xué)碩士學(xué)位論文碳納米管對(duì)植物細(xì)胞影響的細(xì)胞生物學(xué)分析姓名申聰香申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)植物學(xué)指導(dǎo)教師姚楠20100606中山大學(xué)碩士學(xué)位論文CELLBIOLOGYANALYSISOFEFFECTSOFCARBONNANOTUBESONPLANTCELLSABSTRACTMAJORBOTANYNAMECONGXIANGSHENSUPERVISORPROFNANYAOASNEWMEMBERSOFNANOMATERIALFAMILYCARBONNANOTUBESCNTSHAVEMANYUNIQUESTRUCTURALANDMECHANICALPROPERTIES，THEIRPOTENTIALAPPLICATIONSESPECIALLYINBIOMEDICINEHAVEINCREASINGINRECENTYEARSTHEEFFECTSOFCNTSONTHEECOLOGICALENVKONMENTANDHUMANHEAITHAREALSOGRADUALLYCAUSEDTHESCIENTIST’SATTENTIONINTHEAGRICULTURALPRODUCTIONNANOTECHNOLOGYHASACONSIDERABLEAPPLICATIONPROSPECTINENHANCINGTHEABILITYOFPLANTSTOABSORBNUTRIENTS，INCREASINGTHEEFFICIENCYOFPESTICIDESANDHERBICIDES，ALLOWINGLOWERDOSESTOBEUSEDETCHOWEVERTHETOXICOLOGICALIMPACTOFNANOPARTICLESHASRARELYBEENSTUDIEDINPLANTSITISANIMPORTANTPROSPECTIVERESEARCHTOSTUDYTHEEFFECTSOFNANOMATERIALONPLANTSANDENVIRONMENT，ANDEVALUATECARBONNANOTUBESBIOCOMPATIBILITYEXACTLYUSINGAPROTOPLASTSYSTEMFROMARABIDOPSISORRICELEAVES，COMBINEDWITHLIGHTMICROSCOPE，ELECTRONMICROSCOPE，EMTUNELANDRTPCR，WETESTEDFORTHEEFFECTSOFSINGLEWALLEDCARBONNANOTUBESSWCNTSONPLANTCELLSFROMMANYASPECTSWEEXPOSEDLEAFPROTOPLASTCELLSANDPLANTTISSUESTOSWCNTSANDEXAMINEDCELLVIABILITYCELLMORPHOLOGYDNADAMAGE，REACTIVEOXYGENSPECIESROSGENERATIONANDMOLECULARSIGNALINGALTERATIONSWEFOUNDTHATTHEEFFECTOFSWCNTSONTHESURVIVALOFCEUSWASDOSEDEPENDENT，BUTNOTTIMEDEPENDENTWEALSOFOUNDSWCNTSCANCAUSEADVERSECELLULARRESPONSESINCLUDINGCELLAGGREGATIONCHROMATINCONDENSATIONWITHAⅢ

簡(jiǎn)介：天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文毛囊干細(xì)胞和表皮干細(xì)胞生物學(xué)特性的比較研究姓名楊青申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)生物學(xué)；生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師李秀蘭201205天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文始FSCS的增殖活性明顯高于ESCS，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義護(hù)005，第10、14、18天FSCS的增殖活性逐漸增強(qiáng)，直到第26天，增殖活性開(kāi)始下降ESCS在第10天達(dá)到了增殖最高峰后細(xì)胞增殖活性迅速下降。FSCS顯示出持續(xù)高增殖，其高增殖時(shí)間是ESCS的2倍。3、流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞周期結(jié)果顯示，傳代培養(yǎng)的FSCS和ESCS隨代次延長(zhǎng)S期百分比和PI值均有下降，同代次細(xì)胞FSCSPI值大于ESCS。4、熒光定量PCR檢測(cè)兔FSCS和ESCS的P1整合素和K19基因表達(dá)，顯示FSCS151整合素和K19MRNA表達(dá)明顯高于ESCS。5、“兩步酶”分離法可獲取大量人FSCS和ESCS；單細(xì)胞培養(yǎng)FSCS細(xì)胞大部分在24H1為貼壁，傳代細(xì)胞增殖迅速，3天左右達(dá)到80％以上融合。組織塊培養(yǎng)5天可見(jiàn)細(xì)胞在組織周?chē)莱?，?xì)胞呈表皮樣。生長(zhǎng)迅速，15天時(shí)可見(jiàn)表皮樣細(xì)胞周?chē)霈F(xiàn)成纖維樣的細(xì)胞。ESCS培養(yǎng)3天時(shí)細(xì)胞多懸浮生長(zhǎng)。傳代細(xì)胞增殖緩慢，培養(yǎng)7天細(xì)胞達(dá)到80％融合。6、人FSCS和ESCSB1整合素、K19免疫染色均陽(yáng)性。FSCS與ESCS生長(zhǎng)曲線(xiàn)相比，F(xiàn)SCS具有更高的增殖活性且有一個(gè)相對(duì)較長(zhǎng)高增殖活性的生長(zhǎng)期。結(jié)論1、“兩步酶”消化法是一種安全、高效的FSCS和ESCS的分離方法?？稍谳^短時(shí)間內(nèi)為實(shí)驗(yàn)研究提供大量目標(biāo)細(xì)胞。2、人和兔來(lái)源的FSCS與ESCS均表達(dá)表皮干細(xì)胞標(biāo)志B1整合素和K19，且FSCS顯示高表達(dá)。3、獲取的FSCS和ESCS均具有較高的增殖能力，經(jīng)體外培養(yǎng)的FSCS能在體外長(zhǎng)時(shí)間擴(kuò)增且細(xì)胞周期分布穩(wěn)定。4、FSCS和ESCS均可以作為皮膚組織工程的種子細(xì)胞，F(xiàn)SCS不僅獲取容易且具有更高的增殖活性和多分化潛能，對(duì)構(gòu)建全層工程皮膚，F(xiàn)SCS更有優(yōu)勢(shì)。關(guān)鍵詞毛囊干細(xì)胞表皮干細(xì)胞組織工程皮膚BL整合素角蛋白19

簡(jiǎn)介：學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所提交的學(xué)位是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作和取得的研究成果。本論文中除引文外，所有實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)和有關(guān)材料均是真實(shí)的。本論文中除引文和致謝的內(nèi)容外，不包含其他人或其它機(jī)構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果。其他同志對(duì)本研究所做的貢獻(xiàn)均已在論文中作了聲明并表示了謝意。學(xué)位論文作者簽名沌R希日期≯＼1辱歲同2B同學(xué)位論文使用授權(quán)聲明研究生在校攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬南京師范大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保存本學(xué)位論文的電子和紙質(zhì)文檔，可以借閱或上網(wǎng)公布本學(xué)位論文的部分或全部?jī)?nèi)容，可以采用影印、復(fù)印等手段保存、匯編本學(xué)位論文。學(xué)?？梢韵驀?guó)家有關(guān)機(jī)關(guān)或機(jī)構(gòu)送交論文的電子和紙質(zhì)文檔，允許論文被查閱和借閱。保密論文在解密后遵守此規(guī)定保密論文注釋本學(xué)位論文屬于保密論文，保密期限為年。學(xué)位論文作者簽名癍閂芳指導(dǎo)教師簽名1之夕勿主一日期2DFL辱5月2D目日期■■RI目錄目錄摘要工ABSTRACTII前沿IV第一部分1文獻(xiàn)綜述1第1章B淋巴細(xì)胞刺激因子BAFF的研究進(jìn)展211BAFF的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及組織分布2111BAFF的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)2112BAFF的表達(dá)分布412BAFF受體4121BAFFR512TACI。5123BCMA613BAFF介導(dǎo)的信號(hào)通路614BAFF的生物學(xué)功能8141BAFF對(duì)B細(xì)胞的作用_8142BAFF對(duì)T細(xì)胞的作用9143BAFF與抗體生產(chǎn)和分化1015BAFF與相關(guān)疾病11151BAFF與自身免疫病11152BAFF與感染12153BAFF與惡性腫瘤1316結(jié)語(yǔ)和展望13第2章Y一干擾素誘導(dǎo)的溶酶體巰基還原酶GILT的研究進(jìn)展1521干擾素簡(jiǎn)介1522溶酶體簡(jiǎn)介1523Y一干擾素誘導(dǎo)的溶酶體巰基還原酶GILT16231GILT的生物學(xué)活性16232GILT與李斯特病16233國(guó)內(nèi)外研究概況和發(fā)展趨勢(shì)17第二部分18實(shí)驗(yàn)部分18

簡(jiǎn)介：SOUTHWESTUNIVERSITYCODE10635STUDENTNUMBER112012410002323UNIVERSITYMASTERDISSERTATIONREACTIVEOXYGENSPECLESELECTROCHEMCIAL1～‘‘●’L●OSENSORSANDTHEIRAPPLICATIONINCELLBIOLOGYSTUDIES』L●MAJORANALYTICALCHEMISTRYFIELDBIOSENSORANDITSAPPLICATIONSINCELLBIOLOGYSUPERVISORASSOCIATEPROF．LINGYUCANDIDATELIXIAGAOCHONGQING，CHINAMAY2015目錄中文摘要???????????????????????????????IABSTRACT?????????????????????????????III第1章緒論?????????????????????????????．．11．1活性氧簡(jiǎn)述??????????????????????????11．1．1活性氧的產(chǎn)生和性質(zhì)???????????????????．．11．1．2活性氧對(duì)機(jī)體的危害???????????????????一41．1．3活性氧的清除??????????????????????．．61．1．4活性氧的檢測(cè)??????????????????????一71．2活性氧及細(xì)胞損傷???????????????????????111．3生物電化學(xué)傳感器???????????????????????121．3．1生物電化學(xué)傳感器的發(fā)展?????????????????121．3．2生物電化學(xué)傳感器的應(yīng)用?????????????????131．3．3生物電化學(xué)傳感器的發(fā)展趨勢(shì)???????????????131．4本論文的選題依據(jù)及研究思路??????????????????14第2章超氧陰離子和一氧化氮參與小分子抑制劑威羅菲尼對(duì)黑色素瘤細(xì)胞的殺傷。。。。。。．。。。．．．。，。。。。。。。。．。。．．。．。。。．。。。。。。。．?。。．．。。。。。。．．．．。。．。。。。。。。。。．．．．。。．．。．。。。．。。．?。。。。。。．．．。。．．．。。。。。。。。。。．。。．．。。。。。。。。。。。。。．．．】172．1引言????????????????????????????．．172．2實(shí)驗(yàn)部分??????????????????????????．．182．2．1材料與試劑???????????????????????182．2．2儀器??????????????????????????????????．182．2．3細(xì)胞生長(zhǎng)能力與毒性實(shí)驗(yàn)?????????????????182．2．4電化學(xué)傳感器檢測(cè)02一和NO水平?????????????192．2．5細(xì)胞氧化應(yīng)激與線(xiàn)粒體膜電位的熒光分析??????????202．2．6統(tǒng)計(jì)分析????????????????????????202．3結(jié)果與討論?????????????????????????一212．3．1PLX4032誘導(dǎo)的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制???????????????212．3．2電化學(xué)傳感器監(jiān)測(cè)A375和MV3細(xì)胞時(shí)02一和NO的釋放???212．3．3熒光法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)02“和NO水平?????????????25

簡(jiǎn)介：分類(lèi)號(hào)Q962密級(jí)公開(kāi)UDC學(xué)位論文昆蟲(chóng)細(xì)胞系的建立及其生物學(xué)特性與應(yīng)用研究STUDIESONESTABLISHMENTOFINSECTCELLLINESITSBIOLOGICALACTERISTICSAPPLICATION張欣指導(dǎo)教師姓名陳曉鳴研究員申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)生態(tài)學(xué)研究方向昆蟲(chóng)細(xì)胞工程論文提交日期2011年5月論文答辯日期2011年6月學(xué)位授予日期2011年7月答辯委員會(huì)主席評(píng)閱人北京中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院學(xué)位論文昆蟲(chóng)細(xì)胞系的建立及其生物學(xué)特性與應(yīng)用研究中國(guó)北京學(xué)位論文作者張欣指導(dǎo)教師姓名陳曉鳴研究員指導(dǎo)小組成員馮穎研究員申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)生態(tài)學(xué)研究方向昆蟲(chóng)細(xì)胞工程論文答辯日期2011年6月

簡(jiǎn)介：申請(qǐng)上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文細(xì)胞色素酶細(xì)胞色素酶CYP2E1CYP2E1與芳香族底物結(jié)合的生物信息與結(jié)構(gòu)生與芳香族底物結(jié)合的生物信息與結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究物學(xué)研究學(xué)校上海交通大學(xué)院系系生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院班級(jí)級(jí)B0808093學(xué)號(hào)號(hào)1080809087理學(xué)理學(xué)碩士生碩士生李玨研究研究領(lǐng)域領(lǐng)域生物醫(yī)學(xué)工程導(dǎo)師師魏冬青（教授）上海交通大學(xué)上海交通大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院20112011年3月

簡(jiǎn)介：分類(lèi)號(hào)分類(lèi)號(hào)密級(jí)UDC編號(hào)碩士學(xué)位論文松江鱸（TRACHIDERMUSFIATUS）腎細(xì)胞系的建立及生物學(xué)特性分析單莉娟1211003指導(dǎo)教師姓名李霞教授專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)海洋生物學(xué)論文答辯日期2015年6月2日學(xué)位授予日期2015年6月2日MASTERALDISSERTATIONESTABLISHMENTACTETIZATONOFKIDNEYCELLLINESFROMROUGHSKINSCULPINTRACHIDERMUSFIATUSSUPERVISPROFESSLIXIAMASTERCIDATESHANLIJUANCOLLEGEOFFISHERIESLIFESCIENCEDALIANOCEANUNIVERSITYDALIANPRCHINAJUNE2015

簡(jiǎn)介：研究背景隨著牙髓再生治療術(shù)的開(kāi)展應(yīng)用，臨床上已有越來(lái)越多患牙髓炎或根尖周炎的年輕恒牙經(jīng)治療后，牙根繼續(xù)發(fā)育以及根尖孔閉合。其中，位于根尖部牙乳頭組織中的根尖乳頭干細(xì)胞（STEMCELLSFROMAPICALPAPILLA，SCAPS），由于具有高效的多向分化潛能，且在外界刺激時(shí)可從根尖區(qū)域遷移至受損部位進(jìn)行增殖、分化，因此在牙髓再生治療術(shù)中起重要作用。自噬是細(xì)胞內(nèi)普遍存在的一種溶酶體依賴(lài)性的降解途徑，對(duì)細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)的維持具有重要作用，可參與防御細(xì)胞感染及影響細(xì)胞免疫反應(yīng)。研究證實(shí)，自噬參與血管生成、神經(jīng)生成、骨生成等過(guò)程，對(duì)維持干細(xì)胞的穩(wěn)態(tài)、自我更新能力、多向分化潛能具有重要作用。細(xì)胞外刺激因素如饑餓、炎性因子（TNF?。┑?，均能激活細(xì)胞自噬水平的活化。TNFΑ是參與牙髓、根尖周炎癥的重要細(xì)胞因子，本課題組前期研究已證實(shí)TNFΑ可促進(jìn)SCAPS的增殖并參與調(diào)控其成骨成牙本質(zhì)分化能力。研究報(bào)道，TNFΑ可誘導(dǎo)多種細(xì)胞自噬水平的活化，如巨噬細(xì)胞、骨骼肌細(xì)胞、破骨細(xì)胞等，然而關(guān)于TNFΑ作用下人SCAPS自噬水平的變化，以及自噬對(duì)其凋亡、分化能力影響的研究仍知之甚少。了解TNFΑ作用下自噬對(duì)人SCAPS的影響，有利于我們更深入的理解炎癥狀態(tài)下人SCAPS的生物學(xué)特性改變，從而有助于為臨床牙髓再生治療術(shù)提供新思路。研究目的本實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑谟诔醪教接慣NFΑ對(duì)人SCAPS自噬水平的影響及其可能相關(guān)的機(jī)制；初步探討自噬對(duì)TNFΑ作用下人SCAPS的凋亡及成骨分化的影響，為后續(xù)對(duì)炎癥微環(huán)境下自噬與人SCAPS分化關(guān)系的研究提供一定的參考。方法1、TNFΑ影響人根尖乳頭干細(xì)胞自噬水平及相關(guān)機(jī)制的初步研究體外通過(guò)改良組織塊培養(yǎng)法和有限稀釋法培養(yǎng)獲得人SCAPS。蛋白免疫印跡法（WESTERNBLOT）、GFPLC3質(zhì)粒轉(zhuǎn)染、吖啶橙染色檢測(cè)不同濃度TNF?。?、10NGML）作用下SCAPS的自噬水平改變。WESTERNBLOT法檢測(cè)TNF?。?、10NGML）作用下SCAPS的ERK12通路的磷酸化水平，及TNFΑ（5NGML）U0126（0、10、20、30ΜM）分別作用下SCAPS的自噬水平及ERK12通路的磷酸化水平。2、抑制自噬對(duì)TNFΑ作用下人根尖乳頭干細(xì)胞凋亡及成骨分化影響的初步研究TNFΑ（5NGML）、TNFΑ（5NGML）3MA（5MM）分別處理SCAPS，WESTERNBLOT、GFPLC3質(zhì)粒轉(zhuǎn)染檢測(cè)SCAPS的自噬水平；CCK8法檢測(cè)細(xì)胞活力；流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡。TNFΑ（5NGML）、TNF?。?NGML）3MA（5MM）分別處理SCAPS并誘導(dǎo)成骨向分化，QRTPCR檢測(cè)成骨向分化第3、7、14天時(shí)成骨相關(guān)基因ALP、BSP、OCN的表達(dá)。結(jié)果1、WESTERNBLOT、GFPLC3轉(zhuǎn)染、吖啶橙染色結(jié)果均表明，5、10NGMLTNFΑ作用下SCAPS的自噬水平顯著上調(diào)（P＜005），且10NGMLTNFΑ較5NGMLTNFΑ誘導(dǎo)SCAPS自噬的能力更強(qiáng)（P＜005）。WESTERNBLOT顯示5、10NGMLTNFΑ作用下SCAPS的PERKERK水平升高（P＜005）；20、30ΜMU0126處理能有效降低PERKERK及LC3IIΒACTIN水平（P＜005），10ΜMU0126作用下PERKERK及LC3IIΒACTIN水平與對(duì)照組無(wú)明顯差異。2、WESTERNBLOT和GFPLC3質(zhì)粒轉(zhuǎn)染結(jié)果顯示，自噬抑制劑3MA能顯著抑制TNFΑ作用下SCAPS自噬水平的活化（P＜005）。CCK8結(jié)果顯示TNFΑ處理組細(xì)胞活力與對(duì)照組無(wú)明顯差異，TNFΑ3MA處理組細(xì)胞活力較TNFΑ處理組下降（P＜005）。流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示TNFΑ處理組細(xì)胞凋亡率與對(duì)照組無(wú)明顯差異，TNFΑ3MA處理組細(xì)胞凋亡率較TNFΑ處理組顯著上調(diào)（P＜005）。QRTPCR結(jié)果顯示TNFΑ處理組的成骨相關(guān)基因ALP、OCN、BSP表達(dá)量在第3、7、14天較對(duì)照組均增加（P＜005）；TNFΑ3MA處理組的ALP、BSP表達(dá)量在第3、7、14天較TNFΑ處理組均降低（P＜005），OCN的表達(dá)量在第3、7天較TNFΑ處理組降低（P＜005）。結(jié)論1TNFΑ能誘導(dǎo)SCAPS自噬水平的活化，可能與ERK12通路相關(guān)。2自噬可能對(duì)TNFΑ作用下的SCAPS起到細(xì)胞保護(hù)作用，對(duì)抗細(xì)胞凋亡，提高細(xì)胞生存率。3自噬的抑制將下調(diào)TNFΑ作用下SCAPS分化過(guò)程中成骨相關(guān)基因的表達(dá)，抑制SCAPS的成骨向分化，提示自噬在TNFΑ作用下SCAPS的成骨分化過(guò)程中具有重要作用。

簡(jiǎn)介：SPIO對(duì)兩種干細(xì)胞生物學(xué)特性影響及利用對(duì)兩種干細(xì)胞生物學(xué)特性影響及利用磁靶向技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞遷移的初探磁靶向技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞遷移的初探馬亮培養(yǎng)類(lèi)別非全日制學(xué)位類(lèi)型學(xué)術(shù)學(xué)位一級(jí)學(xué)科專(zhuān)業(yè)類(lèi)口腔醫(yī)學(xué)二級(jí)學(xué)科專(zhuān)業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)研究方向干細(xì)胞示蹤與磁靶向遷移指導(dǎo)教師余擎教授（主任醫(yī)師）培養(yǎng)單位口腔醫(yī)院牙體牙髓病科二O一七年五月分類(lèi)號(hào)R7813UDC61631密級(jí)公開(kāi)第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文目錄縮略語(yǔ)表1中文摘要3ABSTRACT7前言12文獻(xiàn)回顧15正文35第一部分SPIO對(duì)人牙髓干細(xì)胞的生物學(xué)影響及核磁共振示蹤觀察35實(shí)驗(yàn)一人牙髓干細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定351材料3511組織來(lái)源3512主要儀器3513主要試劑3614主要溶液配方362方法3621人牙髓干細(xì)胞的培養(yǎng)3622細(xì)胞鑒定373結(jié)果3731原代牙髓干細(xì)胞的培養(yǎng)與純化3732牙髓干細(xì)胞的鑒定374討論38實(shí)驗(yàn)二MIRB標(biāo)記人牙髓干細(xì)胞401材料4011主要儀器4012主要試劑402方法4121MIRB標(biāo)記HDPSCS4122普魯士藍(lán)染色4123細(xì)胞標(biāo)記效率測(cè)定4124激光共聚焦觀察鐵顆粒在細(xì)胞內(nèi)的分布41

簡(jiǎn)介：本文以煙草葉片為培養(yǎng)材料，進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)試驗(yàn)，研究植物細(xì)胞包被系統(tǒng)酸性降解。利用光學(xué)顯微鏡、透射電鏡、原子力顯微鏡和熒光顯微鏡觀察整個(gè)愈傷組織誘導(dǎo)過(guò)程中細(xì)胞包被系統(tǒng)的形態(tài)學(xué)變化。應(yīng)用酶聯(lián)免疫法ELISA和高效液相色譜法同步檢測(cè)培養(yǎng)材料的細(xì)胞內(nèi)源激素和單糖、多糖含量變化。探討植物細(xì)胞發(fā)生脫分化的外部環(huán)境條件和細(xì)胞內(nèi)所發(fā)生的生物學(xué)效應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn)在酸性培養(yǎng)基上植物材料的細(xì)胞包被系統(tǒng)發(fā)生酸性降解是細(xì)胞發(fā)生脫分化的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。分別取兩種培養(yǎng)條件下的正常煙草葉片，即盆栽實(shí)生苗和組培繼代苗的葉片外植體進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)。在愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)過(guò)程中，使用激光共聚焦顯微鏡和PH計(jì)同步測(cè)定了發(fā)生脫分化過(guò)程中細(xì)胞內(nèi)和培養(yǎng)基的PH值。發(fā)現(xiàn)在煙草葉片外植體愈傷組織誘導(dǎo)過(guò)程中，盆栽實(shí)生苗和組培繼代苗的培養(yǎng)基的初始PH值低于正常細(xì)胞內(nèi)的PH值，說(shuō)明進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)的外植體細(xì)胞生長(zhǎng)于酸性條件下。并且利用光學(xué)顯微鏡、透射電鏡、原子力顯微鏡和熒光顯微鏡觀察了煙草盆栽實(shí)生苗和組培繼代苗的葉片外植體愈傷誘導(dǎo)過(guò)程中細(xì)胞壁、質(zhì)膜和微管的形態(tài)學(xué)變化。在誘導(dǎo)愈傷初期，細(xì)胞內(nèi)PH大幅度降低與形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞壁和質(zhì)膜變得粗糙微管解聚開(kāi)始發(fā)生降解的時(shí)間吻合。說(shuō)明細(xì)胞內(nèi)的H大量集中在細(xì)胞壁的某個(gè)區(qū)域?qū)е录?xì)胞壁降解，進(jìn)而引起細(xì)胞的酸性生長(zhǎng)。在誘導(dǎo)末期，細(xì)胞內(nèi)PH值先驟然降低后大幅度升高與具有胚性愈傷組織形成的時(shí)間相吻合。分析了兩種不同培養(yǎng)條件下的盆栽實(shí)生苗和組培繼代苗的內(nèi)源激素ABA、GA3、ZR、IAA含量和ABA/GA3比值和單糖、多糖的含量變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)GA3在誘導(dǎo)培養(yǎng)初期大量增加，與細(xì)胞內(nèi)PH大幅度降低的發(fā)生時(shí)間一致，表明內(nèi)源GA3是培養(yǎng)初期細(xì)胞內(nèi)PH值降低的直接影響因子。內(nèi)源ABA在誘導(dǎo)培養(yǎng)末期與細(xì)胞內(nèi)PH的變化相近，表明ABA在培養(yǎng)末期與細(xì)胞內(nèi)PH關(guān)系密切。ABA含量越高越容易促進(jìn)胚性愈傷組織的發(fā)生，ABA、ABA/GA3、GA3與愈傷組織的胚性發(fā)生呈正相關(guān)，是誘導(dǎo)胚性愈傷組織發(fā)生的必要條件。ZR的強(qiáng)烈合成有利于愈傷組織的誘導(dǎo)，但是一旦愈傷發(fā)生，其需求量可能也隨之降低，只要維持愈傷組織的生長(zhǎng)即可。組培繼代苗的內(nèi)源IAA在誘導(dǎo)培養(yǎng)中與愈傷組織的發(fā)生成正相關(guān)，盆栽實(shí)生苗的IAA含量始終處于下降趨勢(shì)，可能是由于材料的生長(zhǎng)條件不同造成了內(nèi)源激素表達(dá)上的差異。對(duì)于單糖和多糖的測(cè)定結(jié)果表明，當(dāng)細(xì)胞包被系統(tǒng)容易發(fā)生酸性降解時(shí)，細(xì)胞內(nèi)葡萄糖、蔗糖和果糖的含量增加，說(shuō)明細(xì)胞包被系統(tǒng)的酸性降解使得一部分細(xì)胞壁多糖纖維分解為易被細(xì)胞吸收的糖，也使得細(xì)胞更易吸收外界多糖并且將其分解為單糖。細(xì)胞包被系統(tǒng)的酸性降解同時(shí)也需要葡萄糖和蔗糖等的填充。