簡(jiǎn)介：1第一章第一章緒論緒論研究對(duì)象是細(xì)胞CELL細(xì)胞生物學(xué)就是從細(xì)胞的不同層次不同層次來(lái)研究生命活動(dòng)基本規(guī)律生命活動(dòng)基本規(guī)律的學(xué)科細(xì)胞的不同層次是指“細(xì)胞整體細(xì)胞整體”、“細(xì)胞顯微、超微結(jié)構(gòu)細(xì)胞顯微、超微結(jié)構(gòu)”和“分子水平分子水平”三個(gè)層次緒論分三部分一、細(xì)胞生物學(xué)研究?jī)?nèi)容；二、細(xì)胞生物學(xué)發(fā)展簡(jiǎn)史；三、細(xì)胞生物學(xué)發(fā)展現(xiàn)狀及發(fā)展前景一、細(xì)胞生物學(xué)研究?jī)?nèi)容一、細(xì)胞生物學(xué)研究?jī)?nèi)容首先研究細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)，細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)，然后是細(xì)胞的功能細(xì)胞的功能。顯微結(jié)構(gòu)顯微結(jié)構(gòu)在光學(xué)顯微鏡下細(xì)胞的結(jié)構(gòu)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)包括亞顯微結(jié)構(gòu)亞顯微結(jié)構(gòu)也叫超微結(jié)構(gòu)，指的是電子顯微鏡下細(xì)胞的結(jié)構(gòu)細(xì)胞的功能功能物質(zhì)的吸收、合成與分解、增殖與分化、遺傳與變異等等二、細(xì)胞生物學(xué)發(fā)展簡(jiǎn)史二、細(xì)胞生物學(xué)發(fā)展簡(jiǎn)史細(xì)胞生物學(xué)發(fā)展的幾個(gè)重要時(shí)期細(xì)胞生物學(xué)發(fā)展的幾個(gè)重要時(shí)期（一）細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)（一）細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)最早發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的是胡克（胡克（ROBERTHOOKE）CELLAR小室──CELL。最早的一架顯微鏡是由ZJANSEN于1604年創(chuàng)造的，放大倍數(shù)1030倍，又稱為“跳蚤鏡”；半個(gè)多世紀(jì)之后，HOOKE（胡克）創(chuàng)造了第一架有科研價(jià)值的顯微鏡，放大倍數(shù)40140倍，并從木栓中發(fā)現(xiàn)蜂巢狀小室──細(xì)胞，HOOKE于1665年發(fā)表顯微圖譜顯微圖譜一書(shū)。他在這本書(shū)中描繪的“微小孔洞”被認(rèn)為是細(xì)胞學(xué)史上第一個(gè)細(xì)胞模式圖第一個(gè)細(xì)胞模式圖。第一次觀察到活細(xì)胞活細(xì)胞的是列文虎克列文虎克（AVLEEUWENHOEK）。（二）細(xì)胞學(xué)說(shuō)的創(chuàng)立和細(xì)胞學(xué)的形成二）細(xì)胞學(xué)說(shuō)的創(chuàng)立和細(xì)胞學(xué)的形成1、細(xì)胞學(xué)說(shuō)的創(chuàng)立及其意義1831年，布朗（RBROWN）發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞核；1835年，杜雅?。‥DUJARDIN）發(fā)現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞中的粘液質(zhì)，并稱其為“肉樣質(zhì)肉樣質(zhì)”（SARCODE）1839年，蒲肯野（PURKINJE）發(fā)現(xiàn)了植物細(xì)胞中的物質(zhì)，稱為“原生質(zhì)原生質(zhì)”P(pán)ROTOPLASM1839年，馮莫爾（VONMOHL）發(fā)現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞中的“肉樣質(zhì)”和植物細(xì)胞中的“原生質(zhì)”在性質(zhì)上是一樣的。1838年，德國(guó)植物學(xué)家施萊登（施萊登（MSCHLEIDON）提出所有的植物體都是由細(xì)胞組合而成的；1839年，德國(guó)動(dòng)物學(xué)家施旺（施旺（SCHWANN）認(rèn)為動(dòng)物體也是由細(xì)胞所組成的，并肯定了一切生物體都是由細(xì)胞組成的。二人的觀點(diǎn)就是著名的“細(xì)胞學(xué)說(shuō)細(xì)胞學(xué)說(shuō)”（CELLTHEY），施萊登和施旺施萊登和施旺同時(shí)成為細(xì)胞學(xué)說(shuō)的創(chuàng)始人細(xì)胞學(xué)說(shuō)的創(chuàng)始人。1855年，德國(guó)病理學(xué)家魏爾肖（魏爾肖（RVIRCHOW）提出“細(xì)胞來(lái)自細(xì)胞”?！凹?xì)胞學(xué)說(shuō)細(xì)胞學(xué)說(shuō)”包括三個(gè)內(nèi)容包括三個(gè)內(nèi)容（1）細(xì)胞是多細(xì)胞生物的最小結(jié)構(gòu)單位，對(duì)單細(xì)胞生物來(lái)說(shuō)，一個(gè)細(xì)胞就是一個(gè)個(gè)體；（2）多細(xì)胞生物的每一個(gè)細(xì)胞為一個(gè)代謝活動(dòng)單位，執(zhí)行特定的功能；（3）細(xì)胞只能通過(guò)細(xì)胞分裂而來(lái)。2、細(xì)胞學(xué)的經(jīng)典時(shí)期1）原生質(zhì)理論的提出；2）細(xì)胞分裂的研究；3）重要細(xì)胞器的發(fā)現(xiàn)1883年VONBENEDEN和BOVERI發(fā)現(xiàn)了中心體；1894年ALTMANN發(fā)現(xiàn)了線粒體；1898年GOLGI發(fā)現(xiàn)了高爾基體，并用他的名字來(lái)命名。3、細(xì)胞學(xué)的形成和細(xì)胞學(xué)的分支赫特維希OHERTWIG于1892年發(fā)表了細(xì)胞與組織的著名著作，這一著作標(biāo)志著細(xì)胞學(xué)（細(xì)胞學(xué)（CYTOLOGY）作為一門(mén)獨(dú)立的生物學(xué)科的建立。HERTWIG兄弟二人（OHERTWIG和RHERTWIG）WILSONEB于1896年發(fā)表了名為發(fā)育和遺傳中的細(xì)胞發(fā)育和遺傳中的細(xì)胞一書(shū)，THECELLINDEVELOPMENTHEREDITY，成為細(xì)3（1）光學(xué)放大系統(tǒng)包括目鏡和物鏡；（2）照明系統(tǒng)包括光源、折光鏡和聚光器；（3）支架和機(jī)械系統(tǒng)。分辨力（分辨力（RESOLUTION））是指顯微鏡將物體放大成像后，能將物體相近兩點(diǎn)分辨清楚的距離極限。D代表分辨力D061NA其中其中代表光波波長(zhǎng)；NA為鏡口率，也稱數(shù)字孔徑數(shù)字孔徑。NANSIN2NUMERICALAPERTURE從公式中可以看出，鏡口率與N和SIN2成正比，通常我們用的介物鏡鏡口質(zhì)為空氣，空氣，N1；油鏡用的香柏油香柏油N1515；一般不能再提高介質(zhì)折射率，而鏡口角最大也不能超過(guò)1800，所以SIN2的最大值小于1；那么根據(jù)這些數(shù)值推算，普通顯微鏡的最小分辨距離不會(huì)小于02UM，所以通常認(rèn)為光鏡的分辨力極限為02UM，放大倍數(shù)最高為1000倍。標(biāo)本一點(diǎn)（二）特殊顯微鏡（二）特殊顯微鏡1、紫外光顯微鏡（ULTRAVIOLETMICROSCOPE）2、熒光顯微鏡（FLUESCENTMICROSCOPE）3、暗場(chǎng)顯微鏡（也叫暗視野顯微鏡DARKFIELDMICROSCOPE）背景是暗的，樣品是亮的特殊裝置中央遮中央遮光板光板和暗視野聚光器暗視野聚光器4、相差顯微鏡（PHASECONTRASTMICROSCOPE）將光程差（光程差（也就是相位差）相位差）轉(zhuǎn)化為光強(qiáng)差（光強(qiáng)差（即振幅差）振幅差）相差相差是指同一光線經(jīng)過(guò)折射率不同的介質(zhì)時(shí)，引起相位發(fā)生的變化。相位相位是指某一時(shí)間光的波動(dòng)所能達(dá)到的位置。直射光和衍射光相遇，會(huì)產(chǎn)生干涉現(xiàn)象，這時(shí)如果兩者相位相同，則兩束光合光的振幅加大；物體變亮。若兩者相位相反，則兩束光合光的振幅減小，物體變暗。相差顯微鏡的特殊部件加在物鏡中的環(huán)形相板環(huán)形相板和加在聚光器中的環(huán)形光闌環(huán)形光闌。凸形相板凸形相板────明反差（BRIGHTCONTRAST）或負(fù)反差（NEGATIVECONTRST）；凹形相板凹形相板────暗反差（DARKCONTRAST）或正反差（POSITIVECONTRAST）。環(huán)形光闌作用把光分成直射光和衍射光，保證直射光線通過(guò)環(huán)形相板的環(huán)形區(qū)。5、激光共聚焦掃描顯微鏡也稱為激光掃描顯微鏡（LASERSCANNINGMICROSCOPE）簡(jiǎn)稱LSM二、電子顯微鏡（二、電子顯微鏡（ELECTRONMICROSCOPE）簡(jiǎn)稱電鏡）簡(jiǎn)稱電鏡電鏡用的光源是電子束，透鏡為電磁場(chǎng)。光源是電子束，透鏡為電磁場(chǎng)。電子束波長(zhǎng)與電壓成反比，即電壓越高、波長(zhǎng)越短。例如，電壓為6萬(wàn)伏，則00488埃，比最短的可見(jiàn)光4000埃約小10萬(wàn)倍。電鏡的基本構(gòu)造主要如下電子束照明系統(tǒng)；電磁透鏡成像系統(tǒng)；真空系統(tǒng)；記錄系統(tǒng)；電源系統(tǒng)。電鏡與光鏡的主要區(qū)別光鏡光鏡電鏡電鏡光源可見(jiàn)光電子束介質(zhì)空氣（香柏油）真空聚光鏡光學(xué)透鏡電磁透鏡分辨力0301UM01NM放大倍數(shù)1000倍百萬(wàn)倍透射式電子顯微鏡（TEMTRANSMISSIONELECTRONMICROSCOPE）觀察標(biāo)本內(nèi)部細(xì)微結(jié)構(gòu)掃描式電子顯微鏡（SEMSCANNINGELECTRONMICROSCOPE）觀察標(biāo)本表面形態(tài)結(jié)構(gòu)負(fù)染色技術(shù)負(fù)染色技術(shù)背景發(fā)暗，樣品發(fā)亮。

簡(jiǎn)介：細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞生物學(xué)一、第一章緒論（一）細(xì)胞生物學(xué)研究的內(nèi)容及現(xiàn)狀主要說(shuō)明細(xì)胞生物學(xué)是研究和揭示細(xì)胞基本生命活動(dòng)規(guī)律的科學(xué)。因?yàn)榧?xì)胞是生命體結(jié)構(gòu)與功能的基本單位，一切疾病和發(fā)病機(jī)制也是以細(xì)胞病變?yōu)榛A(chǔ)，所以細(xì)胞的研究即是生命科學(xué)的出發(fā)點(diǎn)，主要研究?jī)?nèi)容可歸為①生物膜與細(xì)胞器（生物膜是細(xì)胞重要的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)，細(xì)胞器是認(rèn)識(shí)細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能的重要組成部分）細(xì)胞信號(hào)傳遞了解基本生命活動(dòng)的分子機(jī)制和揭示生命的本質(zhì)有重要的理論意義，轉(zhuǎn)導(dǎo)基礎(chǔ)為蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)之間的復(fù)雜的相互作用，是通過(guò)復(fù)雜的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)而實(shí)現(xiàn)的，呈現(xiàn)高度的非線性關(guān)系。細(xì)胞骨架體系（包括細(xì)胞質(zhì)骨架與核骨架），維持細(xì)胞形態(tài)，保持細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)。④細(xì)胞核，染色體及基因表達(dá)細(xì)胞核為遺傳物質(zhì)DNA儲(chǔ)存和復(fù)制的場(chǎng)所和RNA轉(zhuǎn)錄與加工的場(chǎng)所；染色質(zhì)為遺傳物質(zhì)的載體，核仁轉(zhuǎn)錄RRNA和組裝核糖體亞單位。核孔復(fù)合體為核質(zhì)之間物質(zhì)交換與信息交流的門(mén)控通路，DNA結(jié)合蛋白可分為組蛋白和非組蛋白。⑤細(xì)胞增殖及調(diào)控是了解生物生長(zhǎng)發(fā)育的基礎(chǔ)，是研究癌變及逆轉(zhuǎn)的重要途徑。⑥細(xì)胞分化及干細(xì)胞生物學(xué)實(shí)質(zhì)在于信號(hào)介導(dǎo)下由組合調(diào)控引發(fā)的組織特異性基因的表達(dá)。⑦細(xì)胞死亡為主動(dòng)過(guò)程，主要有細(xì)胞凋亡，細(xì)胞壞死，自噬性細(xì)胞死亡三個(gè)方式，以維持生物體正常的生長(zhǎng)發(fā)育，自穩(wěn)態(tài)的維持，免疫耐受的形成及腫瘤監(jiān)控等過(guò)程。⑧細(xì)胞衰老是研究人、動(dòng)植物生命的基礎(chǔ)⑨細(xì)胞工程用人工方法使不同細(xì)胞基因或基因組重組形成雜交細(xì)胞或?qū)⒒蚧蚧蚪M由一種細(xì)胞轉(zhuǎn)移至另一種細(xì)胞中，使之跨越種間障礙，產(chǎn)生新的遺傳性狀，如動(dòng)物體細(xì)胞雜交實(shí)驗(yàn)和哺乳生物體的克隆⑩細(xì)胞的起源與進(jìn)化。（二）細(xì)胞學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)發(fā)展簡(jiǎn)史分為三個(gè)階段（生物科學(xué)時(shí)期、實(shí)驗(yàn)生物學(xué)時(shí)期、現(xiàn)代生物學(xué)時(shí)期）（2）細(xì)胞的基本共性具有相似的化學(xué)成分（C、H、O、N、P、S）脂蛋白體系的生物膜細(xì)胞能量轉(zhuǎn)換的基地，并形成相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)胞內(nèi)環(huán)境相同的遺傳裝置以DNA儲(chǔ)存和傳遞遺傳信息，以RNA為轉(zhuǎn)錄物指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成，蛋白質(zhì)的合成場(chǎng)所是核糖體。④一分為二的分裂方式遺傳物質(zhì)在分裂前復(fù)制加倍，在分裂時(shí)均勻地分配到兩個(gè)子細(xì)胞內(nèi)。（二）原核細(xì)胞與古核細(xì)胞細(xì)胞結(jié)構(gòu)都是由細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜、細(xì)胞核組成，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、溶酶體和線粒體等細(xì)胞器；細(xì)胞核內(nèi)有染色體。細(xì)菌、放線菌和支原體等微生物是肉眼看不到的，它們沒(méi)有細(xì)胞核，也沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器。由此，把細(xì)胞分為真核細(xì)胞和原核細(xì)胞兩大類(lèi)，所以生物界分為原核生物與真核生物。原核生物由單個(gè)原核細(xì)胞構(gòu)成，而真核生物又可分為單細(xì)胞真核生物與多細(xì)胞真核生物。另一類(lèi)群是古核細(xì)胞，它們的遺傳信息表達(dá)系統(tǒng)與其他的原核細(xì)胞差異很大，而與真核細(xì)胞卻更為接近，所以從原核細(xì)胞中分離出來(lái)，稱為古核細(xì)胞，相應(yīng)的生物稱為古核生物。（1）原核細(xì)胞沒(méi)有典型的核結(jié)構(gòu)，如細(xì)菌。包括支原體、衣原體、立克次體、細(xì)菌、放線菌和藍(lán)藻等。原核細(xì)胞的基因組很小，主要遺傳物質(zhì)僅為一個(gè)環(huán)狀DNA，沒(méi)有細(xì)胞器、細(xì)胞核膜，體積也很小。無(wú)法進(jìn)行復(fù)雜的細(xì)胞分化，無(wú)法形成多細(xì)胞生命體。支原體是能在無(wú)生命培基中生長(zhǎng)繁殖的最小最簡(jiǎn)單的細(xì)胞，具備細(xì)胞的基本形態(tài)結(jié)構(gòu)與功能，沒(méi)有細(xì)胞壁，只有細(xì)胞膜，沒(méi)有核區(qū)，主要以一分為二的方式進(jìn)行分裂繁殖?？傊гw體積小，僅為細(xì)菌的110，可通過(guò)細(xì)胞濾器，可寄生在細(xì)胞內(nèi)繁殖。最早發(fā)現(xiàn)的支原體是PPLO（擬胸膜肺炎病原體）。一個(gè)細(xì)胞生存與繁殖必須具備的結(jié)構(gòu)裝置與機(jī)能是細(xì)胞膜、DNA與RNA、核糖體以及酶。細(xì)菌和藍(lán)藻A細(xì)菌是分布最廣、個(gè)體數(shù)量最多、與人類(lèi)關(guān)系極為密切的有機(jī)體，其細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)主要有細(xì)胞膜（最重要的結(jié)構(gòu)）、細(xì)胞壁、中膜體、莢膜與鞭毛。細(xì)胞壁胞壁較厚、堅(jiān)韌且有彈性，主要成分是肽聚糖，對(duì)細(xì)胞有保護(hù)作用。青霉素的抑菌

簡(jiǎn)介：1福師福師014春細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞生物學(xué)在線作業(yè)一在線作業(yè)一一、單選題（共25道試題，共50分。）1凋亡誘導(dǎo)因子是（A）年克隆的第一個(gè)能夠誘導(dǎo)CASPASE非依賴性的細(xì)胞凋亡。A1999B2000C2001D20022糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能為（B）P176A脂質(zhì)的合成B蛋白質(zhì)的合成C水分的運(yùn)輸D營(yíng)養(yǎng)運(yùn)輸3原核細(xì)胞的直徑為（D）微米P22A0011B0022C0110D02104哪種受體主要存在于神經(jīng)、肌肉等可興奮細(xì)胞中（A）P241A離子通道耦聯(lián)受體B酶聯(lián)受體CG蛋白耦聯(lián)受體D跨膜受體5不屬于細(xì)胞骨架的是（D）P目錄ⅢA微絲B微管C中間絲D蛋白絲6G蛋白是三聚體（A）結(jié)合調(diào)節(jié)蛋白。P231AGTPBGDPCGMPDCGMP7（A）結(jié)合是CDK激酶活性表現(xiàn)的先決條件。A周期蛋白和CDKBCDK和組蛋白CCDK和核纖層蛋白D組蛋白和核纖層蛋白8水孔蛋白AQP2的功能（A）P106A腎集液管中水通透力B腎集液管中水的保持C唾液腺、淚腺和肺泡上皮的液體分泌D植物液泡水的攝入，調(diào)節(jié)膨壓9下列不屬于膜脂成分的是（D）P85A磷脂B糖脂C膽固醇D脂肪10水孔蛋白AQP3的功能（B）P106A腎集液管中水通透力B腎集液管中水的保持C唾液腺、淚腺和肺泡上皮的液體分泌D植物液泡水的攝入，調(diào)節(jié)膨壓11屬于單體聚合蛋白的是（C）P269AARP24復(fù)合物B胸腺素C抑制蛋白D絲束蛋白12（B）介導(dǎo)各種離子和分子的跨膜運(yùn)動(dòng)。P109AATP驅(qū)動(dòng)泵B耦聯(lián)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白C光驅(qū)動(dòng)泵D跨膜蛋白13不是哺乳動(dòng)物中的電子傳遞復(fù)合物是（D）P136（共有4中ABC和細(xì)胞色素C氧化酶）ANADH脫氫酶B琥珀酸脫氫酶C細(xì)胞色素還原酶D氧化酶14原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的主要區(qū)別在于有無(wú)完整的（C）P36A細(xì)胞膜B細(xì)胞器C細(xì)胞核D細(xì)胞壁15將信號(hào)從一條途徑傳播到另外途徑的蛋白是（D）P225A轉(zhuǎn)承蛋白B信使蛋白C接頭蛋白D分歧蛋白16第一個(gè)被鑒定出來(lái)的核孔復(fù)合體蛋白是（B）P312APOM121BGP210CNUP180DP6217屬于成核蛋白的是（A）P269AARP23復(fù)合物B胸腺素C抑制蛋白D絲束蛋白18下列不是G蛋白亞基的是（D）P231①（三聚體GTP結(jié)合蛋白簡(jiǎn)稱為G蛋白，由三個(gè)不同的亞基組成，分別是Α亞基、Β亞基、Γ亞基）AGΑBGΒCGΓDGΛ19線粒體最外面的一層單位膜結(jié)構(gòu)，厚約（A）NM，光滑而有彈性。P128①A6B8C10D1220能與WGA結(jié)合，C端有FXFG重復(fù)序列的核孔復(fù)合體蛋白是（A）P313①表APOM121BGP210CNUP180DP633三、判斷題（共10道試題，共20分。）1由于紅細(xì)胞直徑較大，所以無(wú)法通過(guò)直徑比自己小的毛細(xì)血管。P96①AA錯(cuò)誤B正確2內(nèi)膜是位于外膜的內(nèi)側(cè)把膜間隙與基質(zhì)分開(kāi)的一層單位膜結(jié)構(gòu)，厚1618NM（68NM）。P129①AA錯(cuò)誤B正確3核仁是真核細(xì)胞間期核中最顯著的結(jié)構(gòu)。BP355①A錯(cuò)誤B正確4肌纖維實(shí)在胚胎期由大量的單核成肌細(xì)胞融合而成。P277①BA錯(cuò)誤B正確5真核細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)體系尺寸均是在2040NM。（520NM）AA錯(cuò)誤B正確6NO有專門(mén)的儲(chǔ)存及釋放調(diào)節(jié)機(jī)制。P220①AA錯(cuò)誤B正確7核仁DNA主要為RDNA，是轉(zhuǎn)錄RRNA的模板。P356BA錯(cuò)誤B正確8協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)靠間接消耗ATP所完成的主動(dòng)運(yùn)輸方式。PII4①BA錯(cuò)誤B正確9植物細(xì)胞（動(dòng)物細(xì)胞）培養(yǎng)主要有兩種類(lèi)型原代細(xì)胞和傳代細(xì)胞。P72①②AA錯(cuò)誤B正確10同向轉(zhuǎn)運(yùn)是物質(zhì)運(yùn)輸方向與離子轉(zhuǎn)移方向相同。P114②BA錯(cuò)誤B正確福師福師細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞生物學(xué)在線作業(yè)二在線作業(yè)二一、單選題（共25道試題，共50分。）1攜帶信號(hào)從一部分傳遞到另一部分的蛋白是（B）P225②A轉(zhuǎn)承蛋白B信使蛋白C接頭蛋白D分歧蛋白2哪種受體主要存在于神經(jīng)、肌肉等可興奮細(xì)胞中（A）A離子通道耦聯(lián)受體B酶聯(lián)受體CG蛋白耦聯(lián)受體D跨膜受體3不是電子顯微鏡的基本構(gòu)造的是（D）P57①A電子束照明系統(tǒng)B成像系統(tǒng)和真空系統(tǒng)C記錄系統(tǒng)D數(shù)據(jù)系統(tǒng)4G蛋白耦聯(lián)受體含有（B）個(gè)疏水殘基肽段形成跨膜Α螺旋區(qū)。P231④A5B7C9D115將信號(hào)從一條途徑傳播到另外途徑的蛋白是（D）P226⑥A轉(zhuǎn)承蛋白B信使蛋白C接頭蛋白D分歧蛋白6以下哪個(gè)是由磷脂雙分子層與鑲嵌蛋白質(zhì)構(gòu)成。（A）A細(xì)胞質(zhì)膜B細(xì)胞質(zhì)C細(xì)胞核D核糖體P83①7糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能為（B）A脂質(zhì)的合成B蛋白質(zhì)的合成C水分的運(yùn)輸D營(yíng)養(yǎng)運(yùn)輸8（C）對(duì)溶質(zhì)的主動(dòng)運(yùn)輸與光能的輸入相耦聯(lián)。P109①AATP驅(qū)動(dòng)泵B耦聯(lián)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白C光驅(qū)動(dòng)泵D跨膜蛋白9（A）負(fù)責(zé)簡(jiǎn)單地將信息傳給信號(hào)鏈的下一個(gè)組分。P225①A轉(zhuǎn)承蛋白B信使蛋白C接頭蛋白D傳感蛋白10原核細(xì)胞核糖體沉降系數(shù)為（B）P367①A50SB70SC90SD110S11水孔蛋白AQP3的功能（B）P106表A腎集液管中水通透力AQP2B腎集液管中水的保持AQP3C唾液腺、淚腺和肺泡上皮的液體分泌AQP5D植物液泡水的攝入，調(diào)節(jié)膨壓ΓTIP12不是哺乳動(dòng)物中的電子傳遞復(fù)合物是（D）P136ANADH脫氫酶B琥珀酸脫氫酶C細(xì)胞色素還原酶D氧化酶13原肌球蛋白在肌細(xì)胞中占總蛋白的（A）P278①A5B11C16D21應(yīng)力激活的陽(yáng)離子通道（D）P103表53

簡(jiǎn)介：第七章細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)與細(xì)胞內(nèi)膜系統(tǒng),?細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)?內(nèi)質(zhì)網(wǎng)?高爾基體?溶酶體與過(guò)氧化物酶體?細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的分選,主要內(nèi)容,第一節(jié)細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)CYTOPLASMICMATRIX,基本概念在真核細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，除去可分辨的細(xì)胞器以外的膠狀物質(zhì)，稱細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)。,,?細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)與胞質(zhì)溶膠用差速離心法分離細(xì)胞勻漿物組分，先后除去細(xì)胞核、線粒體、溶酶體、高爾基體和細(xì)胞質(zhì)膜等細(xì)胞器或細(xì)胞結(jié)構(gòu)后，存留在上清液中的主要是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)的成分。稱之為胞質(zhì)溶膠。?主要成分中間代謝有關(guān)的數(shù)千種酶類(lèi)、細(xì)胞質(zhì)骨架結(jié)構(gòu)。,細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)是一個(gè)高度有序的體系，其中細(xì)胞質(zhì)骨架纖維貫穿在粘稠的蛋白質(zhì)膠體中，多數(shù)的蛋白質(zhì)直接或間接地與骨架結(jié)合從而完成特定的生物學(xué)功能。,?特點(diǎn),1完成各種中間代謝過(guò)程如糖酵解過(guò)程、磷酸戊糖途徑、糖醛酸途徑等蛋白質(zhì)的合成與脂肪酸的合成2與細(xì)胞質(zhì)骨架相關(guān)的功能維持細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、胞內(nèi)物質(zhì)運(yùn)輸及能量傳遞等,細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)的功能,3蛋白質(zhì)修飾和選擇性降解,1）輔酶或輔基與酶的共價(jià)結(jié)合。2）磷酸化與去磷酸化。3）糖基化。,1蛋白質(zhì)的化學(xué)修飾,OLINKEDOLIGOSACCHARIDE,NLINKEDOLIGOSACCHARIDES,4）對(duì)某些蛋白質(zhì)的N端進(jìn)行甲基化修飾。5）酰基化。,SRC基因編碼的酪氨酸激酶與豆蔻酸的共價(jià)結(jié)合，促使激酶轉(zhuǎn)移并靠豆蔻酸鏈結(jié)合到細(xì)胞質(zhì)膜上，只有這樣，細(xì)胞才能被轉(zhuǎn)化。,2蛋白質(zhì)的選擇性降解,決定蛋白質(zhì)壽命的信號(hào)為存在于N端的第一個(gè)氨基酸N端第一個(gè)是GLY、PRO、SER、MET、THR、ALA、VAL、CYS，穩(wěn)定N端第一個(gè)是其他12種不穩(wěn)定，能被泛素降解途徑（UBIQUITINDEPENDENTPATHWAY）所識(shí)別，目的蛋白的LYS被泛素化后送往蛋白酶復(fù)合體（PROTEOSOME）降解泛素降解途徑UBIQUITINDEPENDENTPATHWAY泛素是一種由76個(gè)氨基酸殘基組成的小分子蛋白，具有蛋白質(zhì)降解和細(xì)胞周期調(diào)控等多種生物學(xué)功能。,3降解變性和錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì),分子伴侶CHAPERONES是一種引導(dǎo)蛋白質(zhì)正確折疊的蛋白質(zhì)。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)折疊時(shí)，它們能保護(hù)蛋白質(zhì)分子免受其它蛋白質(zhì)的干擾。很多分子伴侶屬于熱休克蛋白（HEATSHOCKPROTEIN，HSP）,幫助變性或錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)重新折疊，形成正確的分子構(gòu)象,4對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的修飾,1MOLECULARCHAPERONE與未折疊或部分折疊的蛋白質(zhì)結(jié)合，防止蛋白質(zhì)降解。2CHAPERONIN陪伴蛋白。多個(gè)分子伴侶蛋白形成的復(fù)合體，能直接推動(dòng)蛋白質(zhì)的折疊。,4對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的修飾,分子伴侶CHAPERONES,細(xì)胞內(nèi)膜系統(tǒng)ENDOMEMBRANESYSTEMS,概念細(xì)胞內(nèi)膜系統(tǒng)是在結(jié)構(gòu)、功能、乃至發(fā)生上相關(guān)的，由膜圍繞的細(xì)胞器或細(xì)胞結(jié)構(gòu)。主要包括內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、溶酶體、胞內(nèi)體和分泌泡等。,內(nèi)膜系統(tǒng)是動(dòng)態(tài)的,這些膜是相互流動(dòng)的，處于動(dòng)態(tài)平衡，功能上相互協(xié)調(diào),,●ER是真核細(xì)胞中最大的細(xì)胞器●ER的膜占細(xì)胞膜系統(tǒng)的一半●所包圍的體積占細(xì)胞總體積的10,ER,,一、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的形態(tài)結(jié)構(gòu),內(nèi)質(zhì)網(wǎng)ENDOPLASMICRETICULUM,ER,,微粒體細(xì)胞勻漿等人工過(guò)程，破碎的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)形成的近似球形的囊泡,,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的化學(xué)組成,主要為蛋白質(zhì)、脂類(lèi)。磷脂占5060,蛋白質(zhì)約占20?！魞?nèi)質(zhì)網(wǎng)的標(biāo)志酶是葡萄糖6磷酸酶和CYTP450?！艏?xì)胞色素P450在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜中最為豐富P4,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的化學(xué)組成,三、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的類(lèi)型,核糖體,,,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),,滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),分為粗面型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（ROUGHENDOPLASMICRETICULUM，RER）和光面型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（SMOOTHENDOPLASMICRETICULUM，SER）。RER呈扁平囊狀，排列整齊，有核糖體附著。SER呈分支管狀或小泡狀，無(wú)核糖體附著。分別是ER連續(xù)結(jié)構(gòu)的一部分。,A光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能,脂的合成與轉(zhuǎn)運(yùn),內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能,,磷脂轉(zhuǎn)位因子磷脂的轉(zhuǎn)位是由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜中磷脂轉(zhuǎn)位因子或稱翻轉(zhuǎn)酶幫助的。有選擇性的,保證了膜中磷脂分布的不對(duì)稱。,合成包括磷脂和膽固醇幾乎全部的膜脂。其中最主要的磷脂是磷脂酰膽堿（卵磷脂）。3種酶都在ER上。,磷脂轉(zhuǎn)運(yùn)有兩種方式。一種是憑借一種水溶性蛋白,叫磷脂交換蛋白PHOSPHOLIPIDEXCHANGEPROTEIN,PEP的作用另一種是以出芽的方式轉(zhuǎn)運(yùn)到高爾基體、溶酶體和細(xì)胞質(zhì)膜上,磷脂轉(zhuǎn)運(yùn),糖原分解釋放葡萄糖,解毒作用光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)含有一些酶用于清除一些脂溶性廢物以及代謝產(chǎn)生的有害物質(zhì)豐富的氧化酶系統(tǒng)如細(xì)胞色素P450、NADH細(xì)胞色素C還原酶等能使許多有害物質(zhì)解毒,轉(zhuǎn)化為易于排出的物質(zhì)。,CA2離子濃度的調(diào)節(jié)作用肌質(zhì)網(wǎng)是細(xì)胞內(nèi)特化的光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),是貯存CA2的細(xì)胞器。,PROTEINSSYNTHESIZEDONRIBOSOMESOFRERINCLUDE向細(xì)胞外分泌的蛋白質(zhì)膜的整合蛋白構(gòu)成細(xì)胞器中的可溶性駐留蛋白,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能,◆,蛋白質(zhì)的合成蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn),包括糖基化、羥基化、?；?、二硫鍵形成等，其中最主要的是糖基化，幾乎所有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成的蛋白質(zhì)最終被糖基化。,蛋白質(zhì)的修飾與加工,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上進(jìn)行N連接的糖基化。糖分子首先被糖基轉(zhuǎn)移酶轉(zhuǎn)移到膜上的磷酸長(zhǎng)醇分子上，裝配成寡糖鏈。再被寡糖轉(zhuǎn)移酶轉(zhuǎn)到新合成肽鏈特定序列（ASNXSER或ASNXTHR）的天冬酰胺殘基上。,RER腔中豐富的蛋白二硫健異構(gòu)酶（PDI）和分子伴侶系統(tǒng)，為蛋白質(zhì)多肽鏈的折疊提供了極為有利的環(huán)境。,2粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與蛋白質(zhì)的折疊,蛋白二硫異構(gòu)酶（PDI）,切斷二硫鍵，幫助新合成的蛋白重新形成二硫鍵并處于正確折疊的狀態(tài),結(jié)合蛋白BIP蛋白是一類(lèi)分子伴侶,屬于HSP70家族。,識(shí)別錯(cuò)誤折疊的蛋白或未裝配好的蛋白亞單位并促進(jìn)重新折疊與裝配。,BIP在ER蛋白質(zhì)的折疊作用,一、高爾基復(fù)合體的形態(tài)結(jié)構(gòu),高爾基體的形態(tài)結(jié)構(gòu),,高爾基體是一種有極性的細(xì)胞器位置恒定,結(jié)構(gòu)極性,功能極性,電鏡,,扁平囊/中間高爾基網(wǎng)包括順面、中間和反面扁囊/高爾基堆,,,,成熟面MATUREFACE,小囊泡/順面高爾基網(wǎng)/形成面/未成熟面/凸面,,大囊泡/反面高爾基網(wǎng)/分泌面/凹面,,,形成面FORMINGFACE,光鏡網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),?高爾基體順面網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)（CGN）又稱CIS膜囊?高爾基體中間膜囊多數(shù)糖基修飾；糖脂的形成；多糖的合成高爾基體反面膜囊以及反面高爾基體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)（TRANSGOLGINETWORK，TGN）,,高爾基體的4個(gè)組成部分,?嗜鋨反應(yīng)CIS面膜囊被特異地染色；?焦磷酸硫胺素酶TPP酶可特異顯示高爾基體的TRANS面的1～2層膜囊；?煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酶NADP酶或甘露糖酶可顯示高爾基體中間幾層扁平囊；?胞嘧啶單核苷酸酶CMP酶或核苷酸二磷酸酶可顯示靠近TRANS面上的一些膜囊狀和管狀結(jié)構(gòu)，CMP酶也是溶酶體的標(biāo)志酶。,高爾基體各部膜囊的４種標(biāo)志細(xì)胞化學(xué)反應(yīng),高爾基體的主要功能是將內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成的多種蛋白質(zhì)進(jìn)行加工、分類(lèi)與包裝，然后分門(mén)別類(lèi)地運(yùn)送到細(xì)胞特定的部位或分泌到細(xì)胞外。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成的脂類(lèi)一部分也要通過(guò)高爾基體向細(xì)胞質(zhì)膜和溶酶體膜等部位運(yùn)輸，因此可以說(shuō)，高爾基體是細(xì)胞內(nèi)大分子運(yùn)輸?shù)囊粋€(gè)主要交通樞紐。此外高爾基體還是細(xì)胞內(nèi)糖類(lèi)合成的工廠，在細(xì)胞生命活動(dòng)中起多種重要的作用。,二、高爾基體的功能,◆O連接的糖基化將糖鏈轉(zhuǎn)移到多肽鏈的絲氨酸、蘇氨酸或羥賴氨酸的羥基上，稱為O連接的糖基化。◆N連接的寡聚糖進(jìn)一步加工內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上磷酸多萜醇上的糖基轉(zhuǎn)移到多肽的天冬酰胺（ASN）上高爾基體加工，切除葡萄糖和部分甘露糖分子，添加特定的單糖，形成成熟的糖蛋白,高爾基體中蛋白質(zhì)的糖基化,高甘露糖側(cè)鏈的修飾,成熟的N連接的寡糖鏈,哺乳動(dòng)物高爾基體中進(jìn)行的修飾過(guò)程,復(fù)雜的N連接糖基化,,N連接與O連接的寡糖比較,蛋白質(zhì)的糖基化生物學(xué)意義,不同的蛋白質(zhì)的糖基化具有不同的功能,糖基化的主要作用是蛋白質(zhì)在成熟過(guò)程中折疊成正確構(gòu)象和增加蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性；多羥基糖側(cè)鏈影響蛋白質(zhì)的水溶性及蛋白質(zhì)所帶電荷的性質(zhì)。對(duì)多數(shù)分選的蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)，糖基化并非作為蛋白質(zhì)的分選信號(hào)。,進(jìn)化上的意義寡糖鏈具有一定的剛性，從而限制了其它大分子接近細(xì)胞表面的膜蛋白，這就可能使真核細(xì)胞的祖先具有一個(gè)保護(hù)性的外被，同時(shí)又不象細(xì)胞壁那樣限制細(xì)胞的形狀與運(yùn)動(dòng)。,◆無(wú)生物活性的蛋白原（PROPROTEIN）?高爾基體?切除N端或兩端的序列?成熟的多肽。如胰島素、胰高血糖素及血清白蛋白等。,蛋白質(zhì)在高爾基體中酶解加工類(lèi)型,◆蛋白質(zhì)前體?高爾基體?水解?同種有活性的多肽，如神經(jīng)肽等。泛素分子◆含有不同信號(hào)序列的蛋白質(zhì)前體?高爾基體?加工成不同的產(chǎn)物。腦啡肽原、ACTH/內(nèi)啡肽原和強(qiáng)啡肽原不同的肽的不同加工方式1有些多肽分子太小，在核糖體上難以有效地合成，如只有5個(gè)AA的神經(jīng)肽。2有些可能缺少包裝并轉(zhuǎn)運(yùn)到分泌泡中的必要信號(hào)。3防止活性物質(zhì)在合成部位發(fā)揮活性?！袅蛩峄饔靡苍诟郀柣羞M(jìn)行，供體3’磷酸腺苷5’磷酸硫酸，PAPS,蛋白質(zhì)在高爾基體中酶解加工類(lèi)型,1949年，DEDUVE將大鼠肝組織勻漿，并對(duì)其中各種細(xì)胞器進(jìn)行分級(jí)分離，以期找出哪些細(xì)胞器與糖代謝的酶有關(guān)。在測(cè)定作為對(duì)照的酸性磷酸酶活性時(shí)，發(fā)現(xiàn)酶的活性主要在線粒體的組分中。但實(shí)驗(yàn)結(jié)果卻出現(xiàn)了一些反常的現(xiàn)象，如蒸餾水提取物中酶的活性比在蔗糖滲透平衡液抽提物中酶的活性高。放置一段時(shí)間的抽提物比新鮮制品中的酶活性高，而且其酶的活性卻與沉淀物線粒體無(wú)關(guān)。隨后又發(fā)現(xiàn)其它幾種水解酶也有類(lèi)似的現(xiàn)象，從而推測(cè)在線粒體組分中還存在一種新的細(xì)胞器。1955年，DEDUVE與NOVIKOFF合作首次用電子顯微鏡證明了溶酶體的存在。,溶酶體LYSOSOME,溶酶體（LYSOSOME）幾乎存在于所有的動(dòng)物細(xì)胞中。溶酶體是單層膜圍繞、內(nèi)含多種酸性水解酶類(lèi)的囊泡狀細(xì)胞器。其主要功能是進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)的消化作用。,溶酶體LYSOSOME,溶酶體的特點(diǎn),1、溶酶體是一種異質(zhì)性的細(xì)胞器,溶酶體的類(lèi)型,◆初級(jí)溶酶體PRIMARYLYSOSOME◆次級(jí)溶酶體SECONDARYLYSOSOME▲自噬性溶酶體AOTOLYSOSOME▲異噬性溶酶體HETEROLYSOSOME◆后溶酶體POSTLYSOSOME,初級(jí)溶酶體（PRIMARYLYSOSOME）,此類(lèi)溶酶體是含有有多種酸性水解酶，但無(wú)作用底物，外面只有一層單位膜，其中的酶處于非活性狀態(tài)。,次級(jí)溶酶體（SECONDARYLYSOSOME）,此類(lèi)溶酶體中含有水解酶和相應(yīng)的底物，是正在進(jìn)行或完成消化作用的溶酶體，可分為自噬溶酶體和異噬溶酶體。,肝細(xì)胞脂褐質(zhì),后溶酶體（殘?bào)w）RESIDUALBODY,已失去酶活性，僅留未消化的殘?jiān)拭?，殘?bào)w可通過(guò)外排作用排出細(xì)胞，也可能留在細(xì)胞內(nèi)逐年增多，如肝細(xì)胞中的脂褐質(zhì)。,2、溶酶體內(nèi)含有50多種酸性水解酶,THEPRINCIPALSITESOFINTRACELLULARDIGESTION,LYSOSOMESCANDIGESTEVERYKINDOFBIOLOGICALMOLECULE,酸性磷酸酶是溶酶體的標(biāo)志酶，,◆溶酶體的膜上具有多種載體蛋白用于水解產(chǎn)物向外轉(zhuǎn)運(yùn)◆溶酶體的膜上嵌有質(zhì)子泵◆溶酶體的膜蛋白高度糖基化◆溶酶體的膜含有能促進(jìn)膜穩(wěn)定性的膽固醇,3、溶酶體膜穩(wěn)定性,溶酶體的主要功能是消化作用，根據(jù)其消化的物質(zhì)又可將他的作用分為以下3種1清除無(wú)用的生物大分子、衰老的細(xì)胞器及衰老損傷和死亡的細(xì)胞,二、溶酶體的功能,溶酶體和蛋白酶體（1）很多生物大分子的半壽期只有幾個(gè)小時(shí)至幾天，（2）肝細(xì)胞中線粒體的平均壽命約10天（3）細(xì)胞質(zhì)膜不斷更新，（4）?成人的紅細(xì)胞僅能存活120天，每天要清除1011個(gè)紅細(xì)胞，（5）發(fā)育中和成體凋亡的細(xì)胞,2．防御作用,（1）吞噬細(xì)胞位于肝、脾及血管中，清除抗原抗體復(fù)合物單核細(xì)胞→巨噬細(xì)胞（過(guò)氧化物及超氧過(guò)物）（2）麻瘋桿菌、利什曼原蟲(chóng)、某些病毒利用吞噬細(xì)胞的吞噬作用進(jìn)入細(xì)胞抑制溶酶體酶的活性，在細(xì)胞內(nèi)釋放核殼進(jìn)行增殖。,3其它重要的生理功能（1）作為細(xì)胞內(nèi)的消化“器官”為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)。,,（2）在分泌腺細(xì)胞中，溶酶體常常攝入分泌顆粒，可能參與分泌過(guò)程的調(diào)節(jié)。甲狀腺球蛋白（腺體內(nèi)腔）→溶酶體→水解成甲狀腺素，然后分泌到細(xì)胞外毛細(xì)血管中。免疫應(yīng)答的抗原遞呈過(guò)程。（3）兩棲類(lèi)發(fā)育過(guò)程中蝌蚪尾巴的退化，哺乳動(dòng)物斷奶后乳腺的退行性變化等都涉及某些特定細(xì)胞程序性死亡及周?chē)罴?xì)胞將其清除，這些過(guò)程都與溶酶體有關(guān)。,（4）在受精過(guò)程中的作用，精子的頂體相當(dāng)于特化的溶酶體，其中含多種水解酶類(lèi)，如透明質(zhì)酸酶、酸性磷酸酶及蛋白水解酶等，它能溶解卵細(xì)胞的外被及濾泡細(xì)胞，產(chǎn)生孔道，使精子進(jìn)入卵細(xì)胞。,在細(xì)胞凋亡過(guò)程中以出芽的形式形成凋亡小體，被巨噬細(xì)胞吞噬并消化。,自噬作用清除無(wú)用的生物大分子、衰老的細(xì)胞器及衰老損傷和死亡的細(xì)胞,溶酶體的生物發(fā)生,溶酶體的形成是一個(gè)相當(dāng)復(fù)雜的過(guò)程,涉及的細(xì)胞器有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體和內(nèi)體,,一、過(guò)氧化物酶體PEROXISOME的形態(tài)結(jié)構(gòu),電鏡由一層單位膜包圍、高電子密度、圓形或卵圓形的細(xì)胞器。,過(guò)氧化物酶體PEROXISOME,過(guò)氧化物酶體PEROXISOM又稱微體MICROBODY，是由單層膜圍繞的內(nèi)含一種或幾種氧化酶類(lèi)的異質(zhì)性細(xì)胞器。,二、過(guò)氧化物酶體所含的酶,酶,,氧化酶50，特征氧化底物的同時(shí)，將氧還原成過(guò)氧化氫。如尿酸氧化酶，D／L氨基酸氧化酶等,過(guò)氧化氫酶40,作用對(duì)氧化酶作用底物后形成的過(guò)氧化氫還原成水。,標(biāo)志酶過(guò)氧化氫酶。,,微體與初級(jí)溶酶體的特征比較,新的過(guò)氧化物酶體的發(fā)生,蛋白質(zhì)的分選,蛋白質(zhì)在細(xì)胞質(zhì)中起始合成后,或是在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中,或是轉(zhuǎn)移到粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上繼續(xù)合成,然后通過(guò)不同的途徑轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞的特定部位的過(guò)程稱為蛋白質(zhì)的定向轉(zhuǎn)運(yùn)或蛋白質(zhì)分選。,第五節(jié)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的分選,后轉(zhuǎn)移翻譯后運(yùn)輸,,共轉(zhuǎn)移共翻譯運(yùn)輸,1、門(mén)控運(yùn)輸（GATEDTRANSPORT）如核孔可以選擇性的主動(dòng)運(yùn)輸大分子物質(zhì)和RNP復(fù)合體，并且允許小分子物質(zhì)自由進(jìn)出細(xì)胞核。2、跨膜運(yùn)輸（TRANSMEMBRANETRANSPORT）蛋白質(zhì)通過(guò)跨膜通道進(jìn)入目的地。如細(xì)胞質(zhì)中合成的蛋白質(zhì)在信號(hào)序列的引導(dǎo)下，通過(guò)線粒體上的轉(zhuǎn)位因子，以解折疊的線性分子進(jìn)入線粒體。3、膜泡運(yùn)輸（VESICULARTRANSPORT）蛋白質(zhì)被選擇性地包裝成運(yùn)輸小泡，定向轉(zhuǎn)運(yùn)到靶細(xì)胞器。如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)向高爾基體的物質(zhì)運(yùn)輸、高爾基體分泌形成溶酶體、細(xì)胞攝入某些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或激素，都屬于這種運(yùn)輸方式。4、蛋白質(zhì)在細(xì)胞基質(zhì)中的運(yùn)輸（細(xì)胞骨架體系）。,從蛋白質(zhì)分選的類(lèi)型或機(jī)制的角度看，可以分為以下途徑,細(xì)胞內(nèi)合成的蛋白質(zhì)之所以能夠定向的轉(zhuǎn)運(yùn)到特定的細(xì)胞器取決于兩個(gè)方面其一是蛋白質(zhì)中包含特殊的信號(hào)序列（SIGNALSEQUENCE）。其二是細(xì)胞器上具特定的信號(hào)識(shí)別裝置（分選受體，SORTINGRECEPTOR）。,蛋白質(zhì)分選的基本原理,靠新生肽上的特殊的信號(hào)序列以及加工后形成的標(biāo)記與特定的受體相互作用而完成的,信號(hào)序列的作用,靶向輸送蛋白的信號(hào)序列,信號(hào)斑（SIGNALPATCH）,共轉(zhuǎn)移在細(xì)胞質(zhì)中起始合成后轉(zhuǎn)移到粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成的蛋白質(zhì)，肽鏈在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上邊合成邊轉(zhuǎn)移到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中稱為共轉(zhuǎn)移。,合成后蛋白的去向,1進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中,2跨膜蛋白的合成,信號(hào)錨定序列（SIGNALANCHORSEQUENCE）引導(dǎo)新生肽鏈從細(xì)胞質(zhì)進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)并錨定在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜中。,停止轉(zhuǎn)運(yùn)錨定序列（STOPTRANSFERANCHORSEQUENCE）它是存在于新生肽中能夠使肽鏈通過(guò)膜轉(zhuǎn)移停止的一段信號(hào)序列,結(jié)果導(dǎo)致蛋白質(zhì)錨定在膜的雙脂層,停止轉(zhuǎn)運(yùn)信號(hào)以Α螺旋的形式錨定在雙脂層。,蛋白質(zhì)的分選運(yùn)輸途徑主要有四類(lèi)1、門(mén)控運(yùn)輸（GATEDTRANSPORT）2、跨膜運(yùn)輸（TRANSMEMBRANETRANSPORT）3、膜泡運(yùn)輸（VESICULARTRANSPORT）4、蛋白質(zhì)在細(xì)胞基質(zhì)中的運(yùn)輸（細(xì)胞骨架體系）。,胞內(nèi)膜泡運(yùn)輸沿微管或微絲運(yùn)行，動(dòng)力來(lái)自馬達(dá)蛋白。與膜泡運(yùn)輸有關(guān)的馬達(dá)蛋白有3類(lèi)一類(lèi)是動(dòng)力蛋白（DYNEIN），可向微管負(fù)端移動(dòng)；另一類(lèi)為驅(qū)動(dòng)蛋白（KINESIN），可牽引物質(zhì)向微管的正端移動(dòng)；第三類(lèi)是肌球蛋白（MYOSIN）,可向微絲的正極運(yùn)動(dòng)。在馬達(dá)蛋白的作用下，可將膜泡轉(zhuǎn)運(yùn)到特定的區(qū)域，,,細(xì)胞內(nèi)部?jī)?nèi)膜系統(tǒng)各個(gè)部分之間的物質(zhì)傳遞常常通過(guò)膜泡運(yùn)輸方式進(jìn)行。如從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)到高爾基體；高爾基體到溶酶體；細(xì)胞分泌物的外排，都要通過(guò)過(guò)渡性小泡進(jìn)行轉(zhuǎn)運(yùn)。膜泡運(yùn)輸是一種高度有組織的定向運(yùn)輸，各類(lèi)運(yùn)輸泡之所能夠被準(zhǔn)確地運(yùn)到靶細(xì)胞器，主要是因?yàn)榧?xì)胞器的胞質(zhì)面具有特殊的膜標(biāo)志蛋白。許多膜標(biāo)志蛋白存在于不止一種細(xì)胞器，不同的膜標(biāo)志蛋白組合，決定膜的表面識(shí)別特征。,三膜泡運(yùn)輸VESICLETRANSLOCATION）,膜泡運(yùn)輸是蛋白運(yùn)輸?shù)囊环N特有的方式，普遍存在于真核細(xì)胞中。在轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中不僅涉及蛋白本身的修飾、加工和組裝，還涉及到多種不同膜泡定向運(yùn)輸及其復(fù)雜的調(diào)控過(guò)程。,三種不同類(lèi)型的包被小泡,網(wǎng)格蛋白有被小泡,COPII有被小泡,COPI有被小泡,?在受體介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)吞途徑中，也負(fù)責(zé)將物質(zhì)從質(zhì)膜?細(xì)胞質(zhì)，胞內(nèi)體?溶酶體,1網(wǎng)格蛋白有被小泡,網(wǎng)格蛋白衣被小泡是最早發(fā)現(xiàn)的衣被小泡，?介導(dǎo)高爾基體到內(nèi)體、溶酶體、植物液泡的運(yùn)輸泡運(yùn)輸。?高爾基體TGN是網(wǎng)格蛋白有被小泡形成的發(fā)源地,網(wǎng)格蛋白CLATHRIN,50～100NM,,五邊形網(wǎng)格結(jié)構(gòu),三腿蛋白,當(dāng)網(wǎng)格蛋白衣被小泡形成時(shí)，可溶性蛋白DYNAMIN聚集成一圈圍繞在芽的頸部，將小泡柄部的膜盡可能地拉近（小于15NM），從而導(dǎo)致膜融合，掐斷衣被小泡。,THEFORMATIONOFCLATHRINCOATEDPITSINTHETGN,2COPII有被小泡,這種類(lèi)型的小泡是介導(dǎo)從ER到順面高爾基體、從順面高爾基體到高爾基體中間膜囊、從中間膜囊到反面高爾基體的運(yùn)輸。小泡的外被是外被蛋白COPⅡCOATPROTEINⅡ，外被蛋白是一個(gè)大的復(fù)合體，稱為外被體COATOMER,是個(gè)多亞基的蛋白復(fù)合物。構(gòu)成的亞基有SEC23/SEC24、SEC13/SEC31和SEC16等,COPⅡ被膜小泡的裝配COPⅡ小泡的裝配需要一種稱為SAR1的G蛋白的參與。當(dāng)SAR1中GDP與GTP進(jìn)行了交換,誘導(dǎo)SEC23和SEC24蛋白的結(jié)合,接著是SEC13和SEC31蛋白的結(jié)合,最后由一種結(jié)合在ER表面的大蛋白質(zhì),SEC16與SEC23/SEC24復(fù)合物、SEC13/SEC31復(fù)合物相互作用,裝配成一個(gè)完整的小泡。,COPⅠ是一種胞質(zhì)溶膠蛋白質(zhì)復(fù)合物,由7個(gè)亞基組成Α、Β、Β＇、Γ、Δ、Ε、Ζ。COPⅠ在出芽小泡的胞質(zhì)溶膠面聚合,形成COPⅠ被膜小泡。由COPⅠ作為外被的小泡稱為COPⅠ被膜小泡。功能負(fù)責(zé)回收、轉(zhuǎn)運(yùn)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)逃逸蛋白（ESCAPEDPROTEINS）返回內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)向高爾基體輸送運(yùn)輸小泡時(shí)，一部分自身的蛋白質(zhì)也不可避免的被運(yùn)送到了高爾基體。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)通過(guò)對(duì)逃逸蛋白的回收機(jī)制，使之返回它們正常駐留的部位。COPI衣被小泡還可以介導(dǎo)高爾基體不同區(qū)域間的蛋白質(zhì)運(yùn)輸。,3、COPI衣被小泡,,COPⅠ被膜小泡的形成,裝配反應(yīng)因子ASSEMBLYREACTIONFACTOR,ARF裝配反應(yīng)因子是外被體外被的裝配和去裝配的信號(hào)。ARF是一種單體GTPASE。,,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的結(jié)構(gòu)和功能蛋白羧基端的一個(gè)四肽序列LYSASPGLULEUCOO，即KDEL信號(hào)序列。這段序列在高爾基體的膜受有相應(yīng)的受體,一旦進(jìn)入高爾基體就會(huì)被高爾基體上的受體結(jié)合,形成COPI回流小泡被運(yùn)回內(nèi)質(zhì)網(wǎng),所以將該序列稱為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)滯留信號(hào)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的膜蛋白（如SRP受體）在C端有一個(gè)不同的回收信號(hào)，通常是LYSLYSXX（KKXX，X任意氨基酸），同樣可保證它們的回收。,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)滯留信號(hào)ERRETENTIONSIGNAL,衣被小泡沿著細(xì)胞內(nèi)的微管被運(yùn)輸?shù)桨屑?xì)胞器，各類(lèi)運(yùn)輸小泡之所以能夠被準(zhǔn)確地和靶膜融合，是因?yàn)檫\(yùn)輸小泡表面的標(biāo)志蛋白能被靶膜上的受體識(shí)別，其中涉及識(shí)別過(guò)程的兩類(lèi)關(guān)鍵性的蛋白質(zhì)是SNARES和RABS。其中SNARE介導(dǎo)運(yùn)輸小泡特異性停泊和融合，RAB的作用是使運(yùn)輸小泡靠近靶膜。,小泡的定向運(yùn)輸、?？亢腿诤蠙C(jī)理,JAMESROTHMAN和他的同事根據(jù)對(duì)動(dòng)物細(xì)胞融合研究的發(fā)現(xiàn),提出有關(guān)小泡尋靶的SNARE假說(shuō)SNAREHYPOTHESIS,不同的小泡具有不同的SNARES,SNARES的作用是保證識(shí)別的特異性和介導(dǎo)運(yùn)輸小泡與目標(biāo)膜的融合。動(dòng)物細(xì)胞中已發(fā)現(xiàn)20多種SNARES，分別分布于特定的膜上，位于運(yùn)輸小泡上的叫作VSNARES，位于靶膜上的叫作TSNARES。。,RABSRAB屬于單體GTP酶，已知30余種。位于膜上，每一種細(xì)胞器至少含有一種以上的RAB。RABS的作用是促進(jìn)和調(diào)節(jié)運(yùn)輸小泡的停泊和融合,調(diào)節(jié)SNARES復(fù)合體的形成。RABS還有許多效應(yīng)因子，其作用是幫助運(yùn)輸小泡聚集和靠近靶膜,SNARES,VSNARES和TSNARES都具有一個(gè)螺旋結(jié)構(gòu)域，能相互纏繞形成跨SNARES復(fù)合體（TRANSSNARESCOMPLEXES），并通過(guò)這個(gè)結(jié)構(gòu)將運(yùn)輸小泡的膜與靶膜拉在一起，實(shí)現(xiàn)運(yùn)輸小泡特異性停泊和融合,在SNARES接到新一輪的運(yùn)輸小泡停泊之前，SNARES必須以分離的狀態(tài)存在，NSF催化SNARES的分離，它是一種類(lèi)似分子伴娘的ATP酶，它能利用ATP作為能量通過(guò)插入幾個(gè)適配蛋白（ADAPTORPROTEIN）將SNARES復(fù)合體的螺旋纏繞分開(kāi)，以便開(kāi)始下一輪的轉(zhuǎn)運(yùn)。,名詞解釋內(nèi)膜系統(tǒng)微粒體信號(hào)識(shí)別顆粒共轉(zhuǎn)移（CANTRANSLOCATION）與后轉(zhuǎn)移（POSTTRANSLOCATION）蛋白分選（PROTEINSORTING）微體問(wèn)答1什么是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)其主要結(jié)構(gòu)組成與功能是什么2滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有何差異有哪些主要功能3高爾基復(fù)合體具有哪些功能4高爾基體在形態(tài)結(jié)構(gòu)上至少由互相聯(lián)系的那幾個(gè)部分組成，請(qǐng)簡(jiǎn)述各部分的功能。5溶酶體的基本功能是什么6溶酶體的發(fā)生過(guò)程是什么7如果從蛋白質(zhì)的類(lèi)型或機(jī)制的角度看，蛋白質(zhì)分選的途徑有哪些類(lèi)型8膜泡運(yùn)輸方式中有哪幾種同類(lèi)型的包被小泡,各有什么功能,

簡(jiǎn)介：細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)主要內(nèi)容二,,第一節(jié)細(xì)胞周期概述,1細(xì)胞周期；2細(xì)胞周期時(shí)相與主要事件；3細(xì)胞周期同步化,1細(xì)胞周期,細(xì)胞周期概述細(xì)胞周期指連續(xù)分裂的細(xì)胞從一次分裂中期到下一次分裂的中期所經(jīng)歷的過(guò)程。正常情況下，沿著G1SG2M期運(yùn)轉(zhuǎn)。細(xì)胞周期經(jīng)歷的時(shí)間稱為細(xì)胞周期時(shí)間（TC）。,從增殖的角度看，細(xì)胞可分為3類(lèi)①連續(xù)分裂細(xì)胞（周期中細(xì)胞）；在細(xì)胞周期連續(xù)運(yùn)轉(zhuǎn)。上皮組織的基底層細(xì)胞②靜止期細(xì)胞（G0期細(xì)胞）；③終端分化細(xì)胞。分化程度很高，一旦生成后，則終生不再分裂。,◆靜止期細(xì)胞GO細(xì)胞?暫時(shí)脫離開(kāi)細(xì)胞周期，停止分裂，去執(zhí)行一定的生物學(xué)功能，給予適當(dāng)?shù)拇碳?，又可以重新進(jìn)入細(xì)胞周期進(jìn)行分裂增殖的細(xì)胞。如肝細(xì)胞。?G0期是細(xì)胞周期以外的一個(gè)時(shí)期，不含在正常的細(xì)胞周期之內(nèi)，去向未定。?向G0期細(xì)胞的轉(zhuǎn)變，多發(fā)生在G1晚期，而再進(jìn)入細(xì)胞周期發(fā)生在G1初期。,③終端分化細(xì)胞,◆終末分化細(xì)胞?分裂程度很高，終生不在分裂，但保持生理機(jī)能的細(xì)胞。如橫紋肌細(xì)胞。?G0期細(xì)胞和終末分化細(xì)胞的界限有時(shí)難以劃分，有的細(xì)胞過(guò)去認(rèn)為屬于終末分化細(xì)胞，目前可能被認(rèn)為是G0期細(xì)胞。,細(xì)胞周期,分為4個(gè)期G1期GAP1，指從有絲分裂完成到期DNA復(fù)制之前的間隙時(shí)間。S期SYNTHESISPHASE，指DNA復(fù)制的時(shí)期。G2期GAP2，指DNA復(fù)制完成到有絲分裂開(kāi)始之前的一段時(shí)間。M期又稱D期MITOSISORDIVISION，細(xì)胞分裂開(kāi)始到結(jié)束。,3細(xì)胞周期同步化,細(xì)胞同步化是指自然的，或經(jīng)人為選擇或誘導(dǎo)產(chǎn)生的細(xì)胞周期同步化。前者稱為自然同步化，后者稱為人工同步化。1．多核體如粘菌只進(jìn)行核分裂，而不發(fā)生胞質(zhì)分裂，形成多核體。數(shù)量眾多的核處于同一細(xì)胞質(zhì)中，進(jìn)行同步化分裂，使細(xì)胞核達(dá)108，體積達(dá)56CM。瘧原蟲(chóng)也具有類(lèi)似的情況。,細(xì)胞分裂的類(lèi)型,無(wú)絲分裂AMITOSIS又稱直接分裂，由REMARK（1841）發(fā)現(xiàn)于雞胚血細(xì)胞，不涉及紡錘體形成及染色體變化。有絲分裂MITOSIS又稱為間接分裂，由FLEMING1882年首次發(fā)現(xiàn)于動(dòng)物，STRASBURGER1880發(fā)現(xiàn)于植物。減數(shù)分裂MEIOSIS）染色體復(fù)制一次，細(xì)胞連續(xù)分裂兩次。,第二節(jié)細(xì)胞分裂,（一）有絲分裂過(guò)程,●前期PROPHASE●前中期PROMETAPHASE●中期METAPHASE●后期ANAPHASE●末期TELOPHASE●胞質(zhì)分裂CYTOKINESIS,概述,前期前期的主要事件是①染色質(zhì)凝縮，②分裂極確立與紡錘體開(kāi)始形成，③核仁解體，④核膜消失。前期最顯著的特征是染色質(zhì)通過(guò)螺旋化和折疊，變短變粗，形成光學(xué)顯微鏡下可以分辨的染色體，每條染色體包含2個(gè)染色單體。早在S期兩個(gè)中心粒已完成復(fù)制，在前期移向兩極，兩對(duì)中心粒之間形成紡錘體微管，當(dāng)核膜解體時(shí)，兩對(duì)中心粒已到達(dá)兩極，并在兩者之間形成紡錘體,前期PROPHASE標(biāo)志前期開(kāi)始的第一個(gè)特征是染色質(zhì)開(kāi)始濃縮CONDENSATION形成有絲分裂染色體MITOTICCHROMOSOME）,這種染色體由兩條染色單體CHROMATID構(gòu)成。,前期①染色質(zhì)凝縮，②分裂極確立與紡錘體開(kāi)始形成，③核仁解體，④核膜消失。,S期中心粒已完成復(fù)制，在前期移向兩極，兩對(duì)中心粒之間形成紡錘體微管，核膜解體時(shí)，中心粒已到達(dá)兩極，并形成紡錘體。,紡錘體有三種微管結(jié)構(gòu)①極體微管（POLARMT）兩極間的微管，在紡錘體中部重疊，重疊部位結(jié)合有分子馬達(dá)。②著絲點(diǎn)微管（KINETOCHOREMT），是從著絲點(diǎn)到另一極的微管；③星體微管（ASTRALMT），由中心粒放射出來(lái)的微管。植物沒(méi)有中心粒和星體，其紡錘體稱無(wú)星紡錘體。,有兩類(lèi)馬達(dá)蛋白參與染色體和分裂極的分離，一類(lèi)是動(dòng)力蛋白（DYNEIN），另一類(lèi)是驅(qū)動(dòng)蛋白（KINESIN）。植物沒(méi)有中心粒和星體，其紡錘體叫作無(wú)星紡錘體，分裂極的確定機(jī)理尚不明確。,前中期PROMETAPHASE,指由核膜解體到染色體排列到赤道面EQUATORIALPLANE這一階段。紡錘體微管向細(xì)胞內(nèi)部侵入，與染色體的著絲點(diǎn)結(jié)合。著絲點(diǎn)處的分子馬達(dá)使染色體向微管的負(fù)端移動(dòng)。,前中期核膜解體到染色體排列到赤道面EQUATORIALPLANE上。,在光鏡下可以看到，此時(shí)染色體也就是既向一極移動(dòng)也向另一極移動(dòng)，是以振蕩的方式移向紡錘體中部的。其原因是姊妹染色單體的著絲點(diǎn)都結(jié)合有微管和分子馬達(dá)。,中期METAPHASE,◆所有染色體排列到赤道板METAPHASEPLATE上，標(biāo)志著細(xì)胞分裂已進(jìn)入中期確保染色體正確排列在赤道板上機(jī)制著絲粒微管動(dòng)態(tài)平衡形成的張力,后期ANAPHASE,◆排列在赤道面上的染色體的姐妹染色單體分離產(chǎn)生向極運(yùn)動(dòng)。,中期染色體排列到赤道面上。,后期指妹妹染色體單體分開(kāi)并移向兩極的時(shí)期。分為后期A、后期B兩個(gè)過(guò)程。,◆后期A動(dòng)粒微管去裝配變短，染色體產(chǎn)生兩極運(yùn)動(dòng)后期B極間微管長(zhǎng)度增加，兩極之間的距離逐漸拉長(zhǎng)，介導(dǎo)染色體向極運(yùn)動(dòng),末期TELOPHASE,◆染色單體到達(dá)兩極，即進(jìn)入了末期（TELOPHASE）。,到達(dá)兩極的染色單體開(kāi)始去濃縮◆核膜開(kāi)始重新組裝◆GOLGI體和ER重新形成并生長(zhǎng)◆核仁也開(kāi)始重新組裝，RNA合成功能逐漸恢復(fù),有絲分裂結(jié)束,動(dòng)物細(xì)胞胞質(zhì)分裂,胞質(zhì)分裂雖然核分裂與胞質(zhì)分裂（CYTOKINESIS）是相繼發(fā)生的，但屬于兩個(gè)分離的過(guò)程，例如大多數(shù)昆蟲(chóng)的卵，核可進(jìn)行多次分裂而無(wú)胞質(zhì)分裂，某些藻類(lèi)的多核細(xì)胞可長(zhǎng)達(dá)數(shù)尺，以后胞質(zhì)才分裂形成單核細(xì)胞。,動(dòng)物細(xì)胞胞質(zhì)分裂,1INANIMALCELLSFURROW,胞質(zhì)分裂CYTOKINESIS開(kāi)始于細(xì)胞分裂后期，在赤道板周?chē)?xì)胞表面下陷，形成環(huán)形縊縮，稱為分裂溝FURROW。分裂溝的位置與紡錘體極性微管和鈣離子濃度升高的變化有關(guān)。,收縮環(huán)（肌球蛋白和肌動(dòng)蛋白參與）,胞質(zhì)分裂開(kāi)始時(shí)，大量肌動(dòng)蛋白和肌球蛋白在中間體處組裝成微絲并相互組成微絲束，環(huán)繞細(xì)胞，稱為收縮環(huán)（CONTRACTILERING。收縮環(huán)收縮，收縮環(huán)處細(xì)胞膜融合并形成兩個(gè)子細(xì)胞分裂溝位置的的確立，肌動(dòng)蛋白聚集，收縮環(huán)形成，收縮環(huán)收縮，收縮環(huán)處細(xì)胞融合,2INPLANTCELLS,與動(dòng)物細(xì)胞胞質(zhì)分裂不同的是，植物細(xì)胞胞質(zhì)分裂是因?yàn)樵诩?xì)胞內(nèi)形成新的細(xì)胞膜和細(xì)胞壁而將細(xì)胞分開(kāi)。,植物細(xì)胞末期近兩極處紡錘絲消失，中間微管保留，并數(shù)量增加，形成成膜體。來(lái)自高爾基體囊泡沿微管轉(zhuǎn)運(yùn)到成膜體中間。融合形成細(xì)胞板CELLPLATE，囊泡的內(nèi)含物形成初生壁和中膠層，囊泡膜形成質(zhì)膜，融合留下的管道形成胞間連絲。,動(dòng)粒與著絲粒,動(dòng)粒（著絲點(diǎn)）是附在著絲粒上的結(jié)構(gòu)，每條中期染色體上有兩個(gè)動(dòng)粒，分別位于著絲粒的兩側(cè)，分裂時(shí)進(jìn)入子細(xì)胞，S期時(shí)動(dòng)粒復(fù)制。,,電鏡下，動(dòng)粒為園盤(pán)狀的結(jié)構(gòu)，分內(nèi)、中、外三層。動(dòng)粒和著絲粒結(jié)構(gòu)和功能聯(lián)系緊密，常被稱為著絲粒－動(dòng)粒復(fù)合體。,1減數(shù)分裂前間期的特點(diǎn),◆S期持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)◆S期僅復(fù)制全部DNA的997999％,其余的0103％將在前期I的偶線期才復(fù)制。?500010000片段，長(zhǎng)10005000BP?L蛋白與DNA片段結(jié)合，阻止復(fù)制?DNA片段與減數(shù)分裂前期染色體配對(duì)與重組有關(guān)。,特點(diǎn)細(xì)胞僅進(jìn)行一次DNA復(fù)制，隨后進(jìn)行兩次分裂。意義既有效獲得了父母雙方的遺傳物質(zhì)，保持后代的遺傳性，又可以增加更多的變異機(jī)會(huì)，確保生物的多樣性，增強(qiáng)生物適應(yīng)環(huán)境變化的能力。,稱前減數(shù)分裂間期或前減數(shù)分裂期PREMEIOSIS。間期也可分為G1期、S期和G2期。G2期是有絲分裂向減數(shù)分裂轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵時(shí)期。減數(shù)分裂的S期時(shí)間較長(zhǎng)，部分DNA（約03左右）是在合線期合成的。,間期,分裂期,（一）減數(shù)分裂I1、前期I（持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)）減數(shù)分裂的特殊過(guò)程主要發(fā)生在前期I，通常分為5個(gè)時(shí)期①細(xì)線期（LEPTOTENE），②偶線期（ZYGOTENE），③粗線期（PACHYTENE），④雙線期（DIPLOTENE），⑤終變期（DIAKINESIS）。,1）細(xì)線期染色體呈細(xì)線狀，具有念珠狀的染色粒，端粒通過(guò)接觸斑與核膜相連。2）偶線期亦稱合線期，是同源染色體配對(duì)的時(shí)期。概念聯(lián)會(huì)復(fù)合體SYNAPTONEMALCOMPLEX，SC）二價(jià)體（BIVALENT）四分體（TETRAD）。這一時(shí)期合成約03左右的DNA，稱為ZDNA。3）粗線期同源染色體的非姊妹染色單體間發(fā)生交換的時(shí)期；合成PDNA，大小為1001000BP，編碼一些與DNA點(diǎn)切和修復(fù)有關(guān)的酶類(lèi)；合成減數(shù)分裂期專有的組蛋白，并將體細(xì)胞類(lèi)型的組蛋白部分或全部的置換下來(lái)。4）雙線期時(shí)間較長(zhǎng)，聯(lián)會(huì)的同源染色體相互排斥、四分體清晰可見(jiàn)，開(kāi)始分離，交叉開(kāi)始端化TERMINALIZATION。聯(lián)會(huì)復(fù)合體消失。,補(bǔ)充植物細(xì)胞雙線期一般較短，許多動(dòng)物卵細(xì)胞中雙線期停留的時(shí)間非常長(zhǎng)。人的卵母細(xì)胞在五個(gè)月胎兒中已達(dá)雙線期，而一直到排卵都停在雙線期，排卵年齡大約在1250歲之間。魚(yú)類(lèi)、兩棲類(lèi)、爬行類(lèi)、鳥(niǎo)類(lèi)以及無(wú)脊椎動(dòng)物的昆蟲(chóng)中，雙線期的二階體解螺旋而形成燈刷染色體，這一時(shí)期是卵黃積累的時(shí)期。5）終變期二階體顯著變短。由于交叉端化過(guò)程的進(jìn)一步發(fā)展，故交叉數(shù)目減少，通常只有一至二個(gè)交叉。RNA轉(zhuǎn)錄停止，核仁此時(shí)開(kāi)始消失，四分體較均勻地分布在細(xì)胞核中，核被膜解體。,2、中期I（紡錘體裝配）3、后期I二價(jià)體的兩條同源染色體分開(kāi)，分別向兩極移動(dòng)。同源染色體隨機(jī)分向兩極，染色體重組，人類(lèi)染色體重組概率有223個(gè)。4、末期I5、減數(shù)分裂間期。（二）減數(shù)分裂II可分為前、中、后、末四個(gè)四期，與有絲分裂相似。一個(gè)精母細(xì)胞形成4個(gè)精子；一個(gè)卵母細(xì)胞形成一個(gè)卵子及23個(gè)極體。,四、減數(shù)分裂與有絲分裂的比較,1減數(shù)分裂發(fā)生在有性生殖的組織中，分裂后形成性細(xì)胞；有絲分裂發(fā)生在正在生長(zhǎng)的組織中，分裂后形成體細(xì)胞。2減數(shù)分裂的前間期的S期時(shí)間長(zhǎng)，并且僅合成997％的DNA剩余的在合線期合成；有絲分裂的間期短，合成全部的DNA。3減數(shù)分裂的前期I變化復(fù)雜時(shí)間長(zhǎng)，發(fā)生同源染色體的配對(duì)及非姐妹染色單體之間片段的交換與重組；有絲分裂中每條染色體獨(dú)立活動(dòng)，不發(fā)生配對(duì)及交換現(xiàn)象。4減數(shù)分裂的中期I同源染色體的著絲點(diǎn)位于赤道板的兩側(cè)；有絲分裂的中期著絲點(diǎn)位于赤道板上。,減數(shù)分裂與有絲分裂的異同,5減數(shù)分裂后期I同源染色體分離，而姐妹染色單體不分離；有絲分裂的后期著絲點(diǎn)分離，姐妹染色單體分離成為兩條獨(dú)立的染色體。6減數(shù)分裂的末期II形成四個(gè)1N的性細(xì)胞；有絲分裂的末期形成兩個(gè)2N的體細(xì)胞。7減數(shù)分裂DNA復(fù)制一次，細(xì)胞連續(xù)分裂兩次；有絲分裂DNA復(fù)制一次，細(xì)胞分裂一次。8減數(shù)分裂在遺傳性狀上有變化；有絲分裂前后親代與子代在遺傳性狀上無(wú)變化。,ATHECELLCYCLECONTROLSYSTEMTRIGGERS觸發(fā)）THEMAJORPROCESSESOFTHECELLCYCLE,BTHECONTROLSYSTEMCANARRESTTHECELLCYCLEATSPECIFICCHECKPOINTS,CTHECELLCYCLECONTROLSYSTEMISBASEDONCYCLICALLYACTIVEDPROTEINKINASESCYCLINDEPENDENTKINASES周期蛋白依賴的蛋白激酶CDKSENGINEMOLECULESFORCELLCYCLE,第三節(jié)細(xì)胞周期的調(diào)控CELLCYCLECONTROL,CDK,CDC2與細(xì)胞周期蛋白結(jié)合才具有激酶的活性，故名細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶CYCLINDEPENDENTKINASE，CDK。CDC2又被稱為CDK1，可將特定蛋白磷酸化，促進(jìn)細(xì)胞周期運(yùn)行，又稱作細(xì)胞周期引擎。如將核纖層蛋白磷酸化導(dǎo)致核纖層解體、核膜消失；將H1磷酸化導(dǎo)致染色體的凝縮等。在動(dòng)物中已知7種CDK。均含有一段相似的激酶結(jié)構(gòu)域，這一區(qū)域有一段保守序列，即PSTAIRE，與周期蛋白的結(jié)合有關(guān)。,CDK1的調(diào)節(jié)與活化CAKCDK1ACTIVITINGKINASE,M期CDK的激活起始于分裂期CYCLIN的積累。結(jié)合CYCLINB的CDK1被WEE1將THR14和TYR15磷酸化而不具有活性，使CDK/CYCLIN不斷積累。,M期CDK的激活,CDK1的調(diào)節(jié)與活化CAKCDK1ACTIVITINGKINASE,M期CDK的激活,在M期，WEE1的活性下降，CDC25使CDK去磷酸化，去除了CDK活化的障礙。CDK的激活需要THR161的磷酸化，它是在CDK激酶CDKACTIVATINGKINASECAK的作用下完成的。,細(xì)胞周期調(diào)控系統(tǒng)的主要作用,◆在適當(dāng)時(shí)候激活細(xì)胞周期各個(gè)時(shí)相的相關(guān)酶和蛋白,然后自身失活正調(diào)控◆確保每一時(shí)相事件的全部完成負(fù)調(diào)控◆對(duì)外界環(huán)境因子起反應(yīng)如多細(xì)胞生物對(duì)增殖信號(hào)的反應(yīng),第十四章程序性細(xì)胞死亡與細(xì)胞衰老（一）,2013526,,一動(dòng)物細(xì)胞的程序性死亡,概念體內(nèi)外因素誘導(dǎo)下，由基因嚴(yán)格調(diào)控而發(fā)生的一種生理性細(xì)胞自殺過(guò)程，又稱程序性細(xì)胞死亡（PROGRAMMDCELLDEATH．PCD）。,動(dòng)物細(xì)胞的死亡方式主要包括3種1凋亡（APOPTOSIS）2壞死NECROSIS3自噬AUTOPHAGE,定義由體內(nèi)外因素觸發(fā)細(xì)胞內(nèi)預(yù)存的死亡程序而導(dǎo)致的細(xì)胞死亡過(guò)程稱為細(xì)胞凋亡。,12動(dòng)物細(xì)胞凋亡過(guò)程中的形態(tài)學(xué)變化,（1）凋亡的起始細(xì)胞膜變化細(xì)胞凋亡的特征是細(xì)胞首先變圓,隨即與鄰周細(xì)胞脫離,失去微絨毛,細(xì)胞膜完整；微絨毛、細(xì)胞突起和細(xì)胞表面皺褶消失；胞膜迅速發(fā)生空泡化（BLEBBING），內(nèi)質(zhì)網(wǎng)不斷擴(kuò)張并與胞膜融合，形成膜表面的芽狀突起，稱為出芽（BUDDING）。,,,（2）凋亡小體的形成,細(xì)胞膜內(nèi)陷將細(xì)胞自行分割為多個(gè)外有膜包裹、內(nèi)涵物不外泄的細(xì)胞凋亡小體。,凋亡小體（APOPOSISBOBY）由透亮空泡和不透光的濃密的核碎片兩部分組成。,（3）凋亡小體被清除,被吞噬細(xì)胞或鄰周細(xì)胞所識(shí)別、吞噬,或自然脫落而離開(kāi)生物。不引起炎癥反應(yīng)和次級(jí)損傷。,13細(xì)胞凋亡的生理病理意義①確保正常發(fā)育、生長(zhǎng)清除多余的、失去功能價(jià)值的細(xì)胞（指趾間組織細(xì)胞）②維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定清除受損突變細(xì)胞，自身反應(yīng)細(xì)胞，衰老細(xì)胞③發(fā)揮積極的防御功能感染病毒細(xì)胞凋亡，阻止病毒復(fù)制,2細(xì)胞壞死,特征線粒體膨脹，細(xì)胞骨架降解，溶酶體釋放酶，細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)沉淀靠近核膜邊，蛋白質(zhì)合成下降，由于膜破裂，出現(xiàn)炎癥反應(yīng),一般過(guò)程因補(bǔ)體反應(yīng)或烈性病毒感染破壞了質(zhì)膜，或者能量依賴性離子泵被破壞產(chǎn)生的鈉鉀等離子沿著各自的濃度梯度進(jìn)入細(xì)胞，從而導(dǎo)致細(xì)胞吸水膨脹，最終破膜而死。,細(xì)胞凋亡與壞死的區(qū)別,,,,壞死凋亡,1性質(zhì),2誘導(dǎo)因素,強(qiáng)烈刺激，隨機(jī)發(fā)生,較弱刺激，非隨機(jī)發(fā)生,3生化特點(diǎn),4形態(tài)變化,5DNA電泳,6炎癥反應(yīng),7凋亡小體,8基因調(diào)控,被動(dòng)過(guò)程，無(wú)新蛋白合成，不耗能,主動(dòng)過(guò)程，有新蛋白合成，耗能,細(xì)胞結(jié)構(gòu)全面溶解、破壞、細(xì)胞腫脹,胞膜及細(xì)胞器相對(duì)完整細(xì)胞皺縮，核固縮,彌散性降解，電泳呈均一DNA片狀,DNA片段化（180200BP），電泳呈“梯”狀條帶,溶酶體破裂，局部炎癥反應(yīng),溶酶體相對(duì)完整，局部無(wú)炎癥反應(yīng),有,病理性，非特異性,生理性或病理性，特異性,無(wú),有,無(wú),3細(xì)胞自噬,,自噬體（AUTOPHAGOSOME細(xì)胞內(nèi)衰老的細(xì)胞器等被內(nèi)質(zhì)網(wǎng)或高爾基體的膜包裹而形成的小體。,細(xì)胞中出現(xiàn)大的雙層膜包裹的自噬泡，稱為自噬小體（AUTOPHAGOSOME,雙層膜來(lái)自內(nèi)質(zhì)網(wǎng)或細(xì)胞質(zhì)中的膜泡。自噬小體中包裹著整個(gè)的細(xì)胞器和部分細(xì)胞質(zhì)，自噬小體與溶酶體融合后，內(nèi)含物被溶酶體中的水解酶消化。,動(dòng)物細(xì)胞為了維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的動(dòng)態(tài)平衡，需要不斷降解功能失?；虿恍枰募?xì)胞結(jié)構(gòu)，如各種蛋白，細(xì)胞器以及各種胞質(zhì)組分。通常，壽命較短的蛋白如調(diào)控蛋白等通過(guò)泛素蛋白酶體系統(tǒng)進(jìn)行降解；而壽命較長(zhǎng)的細(xì)胞結(jié)構(gòu)及蛋白則通過(guò)細(xì)胞自噬途徑，由溶酶體進(jìn)行降解。,自噬作用對(duì)細(xì)胞的生命活動(dòng)有什么意義,酶系統(tǒng)的更新細(xì)胞質(zhì)中某些暫時(shí)不需要的酶系統(tǒng),需要通過(guò)自噬作用進(jìn)行更新。舊細(xì)胞器的清除細(xì)胞器都有一定的壽命,為了保證細(xì)胞正常的代謝活動(dòng),必須不斷地清除衰老的細(xì)胞器和生物大分子。很多生物大分子的半衰期只有幾小時(shí)或幾天。肝細(xì)胞中線粒體的壽命平均約10天左右。參與細(xì)胞發(fā)育如紅細(xì)胞發(fā)育成熟后,所有的細(xì)胞器都要通過(guò)自噬作用被清除。應(yīng)激反應(yīng)在細(xì)胞饑餓條件下,自噬作用也特別強(qiáng),主要是為細(xì)胞提供能量,維持細(xì)胞的生命活動(dòng)。,4細(xì)胞凋亡的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),CASPASE依賴性途徑CASPASE非依賴性途徑當(dāng)受到凋亡誘導(dǎo)因素作用，兩種途徑均會(huì)被激活CASPASE依賴的細(xì)胞凋亡又包括三種方式①受體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡（外源通路）；②線粒體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡（內(nèi)源通路）；③內(nèi)質(zhì)網(wǎng)介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡（內(nèi)源通路）。,CASPASE依賴性細(xì)胞凋亡,途徑主要有兩條通過(guò)胞外死亡受體信號(hào)激活細(xì)胞內(nèi)的凋亡酶CASPASE（外源途徑）；通過(guò)線粒體釋放凋亡酶激活因子激活CASPASE（內(nèi)源途徑）。,1外源途徑,細(xì)胞表面的凋亡受體是屬于腫瘤壞死因子受體（TNFR）家族的跨膜蛋白，它們包括FAS（APO1/CD95）、TNFR1、DR3/WSL、DR4/TRAILR1和DR5/TRAILR2。其配體屬于TNF家族，目前已比較清楚的是FAS介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡途徑。,FAS基因介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡機(jī)制,3種機(jī)制①FAS基因介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡過(guò)程可能是三聚體形式FASL配體和FAS受體結(jié)合激活FAS,被激活的FAS通過(guò)死亡功能區(qū)之間的相互作用和FADD受體蛋白結(jié)合,FADD又通過(guò)它的MORT結(jié)構(gòu)域,同凋亡蛋白酶CASPASE8結(jié)合,激活CASPASE8活性,后者再去激活其他的CASPASE蛋白酶。這樣,通過(guò)這一級(jí)聯(lián)系統(tǒng)的凋亡信號(hào)傳遞作用,最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。,FAS具有三個(gè)富含半胱氨酸的胞外區(qū)和一個(gè)稱為死亡結(jié)構(gòu)域（DEATHDOMAIN，DD）的胞內(nèi)區(qū)。FAS的配體FASL（FASLIGAND）與FAS結(jié)合后，F(xiàn)AS三聚化使胞內(nèi)的DD區(qū)構(gòu)象改變，然后與接頭蛋白FADD（FASASSOCIATEDDEATHDOMAIN）的DD區(qū)結(jié)合，F(xiàn)ADD的N端DED區(qū)（DEATHEFFECTORDOMAIN）就能與CASPASE8（或10）前體蛋白結(jié)合，形成DISCDEATHINDUCINGSIGNALINGCOMPLEX。,胞外區(qū),胞內(nèi)區(qū),FADDN端通過(guò)DED區(qū)（DEATHEFFECTORDOMAIN）與CASPASE8前體蛋白和CAP3結(jié)合，引起CASPASE8、10通過(guò)自身剪激活，它們啟動(dòng)CASPASE的級(jí)聯(lián)反應(yīng)，使CASPASE3、6、7激活，這幾種CASPASE可降解胞內(nèi)結(jié)構(gòu)蛋白和功能蛋白，最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。,②FAS介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡還可能以神經(jīng)酰胺作為第二信使傳遞信號(hào),通過(guò)激活一系列蛋白激酶和轉(zhuǎn)錄因子最終激活共同信號(hào)傳遞通路,引起細(xì)胞凋亡,這一過(guò)程被稱為神經(jīng)鞘磷脂循環(huán)。③另外有絲分裂原蛋白激酶MAPA的兩個(gè)亞類(lèi)JNK和ERK也可以傳遞FAS的凋亡信號(hào)。,5細(xì)胞凋亡的檢測(cè),誘發(fā)因素,抑制因素,形態(tài)學(xué)觀察；生物化學(xué)檢測(cè)；分子生物學(xué)檢測(cè)；免疫學(xué)檢測(cè)。,檢測(cè)手段,細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)分析,細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化主要表現(xiàn)為細(xì)胞皺縮CELLSHRINKAGE，失去細(xì)胞連接CELLJUNCTION，微絨毛MICROVILLI消失，發(fā)泡BLEBBING，染色質(zhì)濃集并靠近核膜，形成沿核膜收縮的新月?tīng)铙wCRESCENTS，形成凋亡小體APOPTOTICBODY等。,細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測(cè)方法,形態(tài)學(xué)簡(jiǎn)單檢測(cè)方法,1、HE染色、光鏡觀察凋亡細(xì)胞呈圓形，胞核深染，胞質(zhì)濃縮，染色質(zhì)成團(tuán)塊狀，細(xì)胞表面有“出芽”現(xiàn)象。2、丫啶橙（AO染色，熒光顯微鏡觀察活細(xì)胞核呈黃綠色熒光，胞質(zhì)呈紅色熒光。凋亡細(xì)胞核染色質(zhì)呈黃綠色濃聚在核膜內(nèi)側(cè)，可見(jiàn)細(xì)胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺(tái)盼藍(lán)染色如果細(xì)胞膜不完整、破裂，臺(tái)盼藍(lán)染料進(jìn)入細(xì)胞，細(xì)胞變藍(lán)，即為壞死。如果細(xì)胞膜完整，細(xì)胞不為臺(tái)盼藍(lán)染色，則為正常細(xì)胞或凋亡細(xì)胞。此方法對(duì)反映細(xì)胞膜的完整性，區(qū)別壞死細(xì)胞有一定的幫助。4、透射電鏡觀察可見(jiàn)凋亡細(xì)胞表面微絨毛消失，核染色質(zhì)固縮、邊集，常呈新月形，核膜皺褶，胞質(zhì)緊實(shí)，細(xì)胞器集中，胞膜起泡或出“芽”及凋亡小體和凋亡小體被臨近巨噬細(xì)胞吞噬現(xiàn)象。,2DNA凝膠電泳法檢測(cè)DNA降解,DNA降解過(guò)程的特點(diǎn)1發(fā)生于凋亡早期，由內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶激活引起2DNA在核小體連接部位斷裂，產(chǎn)生180－200BP為最小單位的單體或寡聚體片斷3DNA碎片可被細(xì)胞膜包裹，形成凋亡小體,,原理凋亡細(xì)胞降解產(chǎn)生一系列規(guī)則的DNA片斷，其電泳結(jié)果呈典型的“梯狀帶”LADDER；而壞死或凋亡后壞死細(xì)胞的DNA分解是隨機(jī)的，產(chǎn)生的碎片分子量大小不一，在電泳時(shí)形成“涂片狀”SMEAR。普通瓊脂糖凝膠電泳、SOUTHERNBLOTTING、放射自顯影32PDATP或32PDCTP連接到DNA片斷的3’端,生化改變,特點(diǎn)CYSTEINECONTAININGASPARTATESPECIFICPROTEASE（含半胱氨酸的天門(mén)冬氨酸特異水解酶）,APOPTOSIS,凋亡過(guò)程與調(diào)控,和凋亡有關(guān)的兩個(gè)酶,作用切割染色質(zhì)DNA,DNASE,特點(diǎn)CA2/MG2增強(qiáng)活性，ZN2抑制其活性,CASPASES,作用滅活凋亡抑制物,水解蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，形成凋亡小體,水解凋亡相關(guān)活性蛋白,使抑制凋亡因子失活，如CAD/ICAD破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，如LAMINA，形成凋亡小體將調(diào)節(jié)區(qū)與催化區(qū)分離，使蛋白失活，如GELSOLIN,CASPASE作用機(jī)理,CASPASES家族簡(jiǎn)介,1993年YUAN從哺乳類(lèi)細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)第1個(gè)CED3同源分子，叫白細(xì)胞介素1Β轉(zhuǎn)換酶（INTERLEUKIN1ΒCONVERTINGENZYME，ICE），PROICE含404個(gè)氨基酸，分子量45KD。在一定形式下可自身催化產(chǎn)生20KD和10KD二個(gè)片段，聚合形成（P20）2P102雜四聚體，為活化的ICE。到1998年底為止共發(fā)現(xiàn)有14個(gè)CED3同源分子，分別定名為CASPASE114。,CASPASES蛋白酶半胱氨酸蛋白酶家族，稱為CASPASES。CASPASE可譯為胱冬肽酶家族，與線蟲(chóng)CED3同源的調(diào)控哺乳動(dòng)物細(xì)胞凋亡的蛋白酶家族。體內(nèi)均以酶原（相對(duì)分子質(zhì)量30000～50000）形式存在，包括3個(gè)功能區(qū)N端區(qū)抑制區(qū)域、大亞單位（約20000）、小亞單位（約10000）死亡區(qū)域；被激活的過(guò)程相似，即通過(guò)功能區(qū)間特異位點(diǎn)的蛋白酶解，繼而以大小亞單位形式形成異源二聚體。,CASPASES的分子的結(jié)構(gòu)特征,CASPASES的分子均具有下列的結(jié)構(gòu)特征①以無(wú)活性的PROCASPASES形式存在。②在PROCASPASES的N端均含有一段P2P27的前區(qū)域（PRODOMAIN）。③活性形式均是由2個(gè)大亞基（1720KD）和2個(gè)小亞基（1012KD）組成的雜四聚體。一分子PROCASPASE只能分裂產(chǎn)生1個(gè)大亞基和1個(gè)小亞基。④在大亞基的C端均含有QACXG（XRQ或G）的活性中心，其中半胱氨酸（C）是必需氨基酸，故CASPASE是屬于半胱氨酸蛋白酶類(lèi)。,TUNEL法檢測(cè)TUNELTDTMEDIATEDDUTPNICKENDLABELING終末脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的原位缺口末端標(biāo)記技術(shù)。原理在TDT的作用下，帶有標(biāo)記物的DUTP被連接在斷裂DNA3’末端，然后通過(guò)相應(yīng)的方法檢測(cè)標(biāo)記物，從而判斷是否有凋亡發(fā)生。應(yīng)用范圍石蠟包埋的組織切片、冰凍組織切片、培養(yǎng)細(xì)胞、組織中分離的細(xì)胞,ELISA法原理以抗組蛋白抗體包被微孔板壁，加入標(biāo)本，凋亡細(xì)胞的核小體可與抗體結(jié)合，再加入抗DNA片斷POD復(fù)合物，與核小體中的DNA片斷結(jié)合，最后加入POD顯色底物，以酶標(biāo)儀測(cè)定光密度以進(jìn)行定量分析。,細(xì)胞凋亡發(fā)生機(jī)制,1氧化損傷2鈣穩(wěn)態(tài)失衡3線粒體損傷,（一）氧化損傷機(jī)制,氧自由基可破壞機(jī)體正常的氧化/還原的動(dòng)態(tài)平衡，造成生物大分子的氧化損傷，干擾正常的生命活動(dòng)，形成嚴(yán)重的氧化應(yīng)激狀態(tài)后果誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。,氧化損傷引起細(xì)胞凋亡的依據(jù)①各種氧化劑（H2O2）可直接誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡②抑制超氧化物歧化酶（SOD）活性可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡③抗氧化劑（VITE、胡蘿卜素等）可阻斷有氧化應(yīng)激背景的各種凋亡誘導(dǎo)因素（TNFА、電離輻射）引起的細(xì)胞凋亡,①引起DNA損傷，激活P53基因②引起DNA損傷，活化多聚ADP核糖合成酶，耗竭輔酶ⅠNAD，消耗大量ATP③攻擊細(xì)胞膜

簡(jiǎn)介：第四章基因突變的分子細(xì)胞生物學(xué)效應(yīng),本章重點(diǎn)內(nèi)容,遺傳性酶病和分子病等基本概念基因突變導(dǎo)致蛋白質(zhì)功能改變的機(jī)制基因突變引起性狀改變的分子機(jī)制,蛋白質(zhì)的合成與運(yùn)輸途徑,蛋白質(zhì)的合成與運(yùn)輸途徑,SRP,,第一節(jié)基因突變對(duì)蛋白質(zhì)產(chǎn)生的影響,影響蛋白質(zhì)的生物合成改變蛋白質(zhì)的功能效應(yīng)改變蛋白質(zhì)的細(xì)胞定位,突變對(duì)蛋白質(zhì)合成的影響,影響MRNA和蛋白質(zhì)合成的突變影響蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的突變影響蛋白質(zhì)亞細(xì)胞定位的突變影響蛋白質(zhì)與其它蛋白質(zhì)結(jié)合的突變影響輔基或輔助因子與蛋白質(zhì)結(jié)合、去除的突變影響蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性,原發(fā)性損害繼發(fā)性損害,突變對(duì)蛋白質(zhì)合成的影響,影響MRNA和蛋白質(zhì)合成的突變?cè)l(fā)性缺陷①Β地中海貧血↓②遺傳性胎兒血紅蛋白持續(xù)癥↑繼發(fā)性缺陷急性間歇性卟啉癥（AIP）,突變對(duì)蛋白質(zhì)合成的影響,影響蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的突變?cè)l(fā)性缺陷血紅蛋白疏水區(qū)被極性氨基酸取代留下間隙繼發(fā)性缺陷EHLERSDANLOS綜合征Ⅱ型（賴氨酸羥化酶缺陷）,突變對(duì)蛋白質(zhì)合成的影響,影響蛋白質(zhì)亞細(xì)胞定位的突變?cè)l(fā)性缺陷甲基丙二酸尿癥,甲基丙二酰輔A羧基變位酶與琥珀酰COA的合成,影響蛋白質(zhì)亞細(xì)胞定位的突變,繼發(fā)性缺陷包涵體細(xì)胞病Α甘露糖酶缺乏溶酶體中的水解分子帶有獨(dú)特的標(biāo)記甘露糖6磷酸M6P，它是溶酶體水解酶分選的重要識(shí)別信號(hào),,突變對(duì)蛋白質(zhì)合成的影響,影響蛋白質(zhì)與其它多肽鏈結(jié)合的突變?cè)l(fā)性缺陷親和力PROΑ1Ⅰ和PROΑ2Ⅰ基因突變→形成Ⅰ型膠原困難→骨發(fā)育不良。繼發(fā)性缺陷ZELLWEGER綜合征胎盤(pán)鐵轉(zhuǎn)運(yùn)功能障礙過(guò)氧化物酶體,突變對(duì)蛋白質(zhì)合成的影響,影響輔基或輔助因子與蛋白質(zhì)結(jié)合、去除的突變?cè)l(fā)性缺陷同型胱氨酸尿癥胱硫醚合成酶輔助因子磷酸吡哆醛繼發(fā)性缺陷有關(guān)的酶發(fā)生缺陷,突變對(duì)蛋白質(zhì)功能的改變,功能丟失的突變功能加強(qiáng)的突變新特性的突變,突變對(duì)蛋白質(zhì)功能的效應(yīng),突變蛋白的細(xì)胞定位與病理生理發(fā)生部位,組織特異性蛋白突變苯丙酮尿癥肝腎苯丙氨酸羥化酶缺陷持家蛋白的突變尿素循環(huán)代謝障礙精氨酸琥珀酸合成酶和精氨酸琥珀酸裂解酶（肝）,第二節(jié)基因突變引起性狀改變的機(jī)制,酶蛋白分子基因突變→酶缺陷→代謝缺陷非酶蛋白分子,基因突變引起酶缺陷,結(jié)構(gòu)基因突變引起的酶結(jié)構(gòu)改變酶完全失去活性酶具一定的活性，但穩(wěn)定性降低酶與底物的親和力降低復(fù)合酶的酶蛋白分子與輔助因子的親和力下降調(diào)節(jié)基因突變引起酶合成速度下降不能合成MRNA降低MRNA的合成量,酶缺陷引起代謝缺陷,酶與代謝反應(yīng)的關(guān)系,酶的生成和體內(nèi)酶促反應(yīng),酶缺陷引起代謝缺陷,酶缺陷對(duì)代謝反應(yīng)的影響膜轉(zhuǎn)運(yùn)酶的缺陷,色氨酸代謝示意圖,酶缺陷引起代謝缺陷,酶缺陷對(duì)代謝反應(yīng)的影響酶缺陷導(dǎo)致中間產(chǎn)物或底物的堆積底物的堆積本身對(duì)機(jī)體有害半乳糖血癥,酶缺陷引起代謝缺陷,酶缺陷導(dǎo)致中間產(chǎn)物或底物的堆積底物的堆積本身對(duì)機(jī)體有害底物的堆積本身無(wú)害，但激發(fā)次要代謝途徑的開(kāi)放,1苯丙酮尿癥；2尿黑酸尿癥；3白化病,酶缺陷引起代謝缺陷,酶缺陷導(dǎo)致代謝終產(chǎn)物減少或缺乏,1苯丙酮尿癥；2尿黑酸尿癥；3白化病,酶缺陷引起代謝缺陷,酶缺陷導(dǎo)致反饋調(diào)節(jié)機(jī)制紊亂先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥21羥化酶,腎上腺皮質(zhì)激素的合成,直接引起疾病底物堆積次要途徑開(kāi)放產(chǎn)生有毒物質(zhì)→間接致病,產(chǎn)物不足反饋調(diào)節(jié)機(jī)制紊亂→間接致病代謝受阻,酶缺陷引起代謝缺陷,,,直接引起疾病,酶缺陷↓,,

簡(jiǎn)介：第五章消化與吸收,第一節(jié)概述,第三節(jié)胃內(nèi)消化,第四節(jié)小腸內(nèi)消化,第五節(jié)大腸內(nèi)消化,第二節(jié)口腔內(nèi)消化,第六節(jié)吸收,第一節(jié)概述消化DIGESTION食物在消化道內(nèi)被分解成為可吸收的小分子物質(zhì)的過(guò)程。吸收ABSORPTION消化后的小分子物質(zhì)通過(guò)消化道粘膜進(jìn)入血液或淋巴的過(guò)程。一、消化的方式有兩種①機(jī)械消化②化學(xué)消化,,,消化過(guò)程示意總匯,,,二、消化道平滑肌的特性一一般特性1對(duì)化學(xué)、機(jī)械牽張和溫度刺激較為敏感2緊張性收縮3自動(dòng)節(jié)律性運(yùn)動(dòng)4伸展性,二電生理特性1靜息電位,,2慢波（基本電節(jié)律）平滑肌在靜息電位基礎(chǔ)上，自發(fā)的周期性地去極化和復(fù)極化形成的緩慢電位波動(dòng)，稱為慢波SLOWWAVE或基本電節(jié)律BASICELECTRICALRHYTHM。,靜息電位（RP）為50～60MV，主要由K外流形成的；并與鈉泵的生電作用有關(guān)。,,慢波的產(chǎn)生機(jī)制慢波電位起源于縱行肌和環(huán)行肌之間的CAJIAL細(xì)胞，可能與生電性鈉泵的周期性活動(dòng)有關(guān)。慢波的作用能降低動(dòng)作電位產(chǎn)生的閾值（使RP接近于產(chǎn)生AP的閾電位）；是控制胃腸運(yùn)動(dòng)的起步電位。3動(dòng)作電位AP當(dāng)慢波去極化達(dá)到閾電位時(shí)，就可產(chǎn)生一個(gè)或多個(gè)動(dòng)作電位，隨后出現(xiàn)平滑肌的收縮。產(chǎn)生機(jī)制慢波去極化達(dá)到閾電位時(shí)→CA2通道開(kāi)放→CA2內(nèi)流，也有NA內(nèi)流→動(dòng)作電位AP。4消化間期復(fù)合肌電,三、消化腺的分泌功能分泌消化液,消化液的主要功能1、稀釋食物2、改變消化道內(nèi)的PH3、水解復(fù)雜的食物成分4、保護(hù)消化道粘膜，防止物理性和化學(xué)性的損傷,三、消化道的內(nèi)分泌功能,一胃腸激素的作用表61二）腦腸肽的概念,激素主要生理作用引起釋放的因素促胃液素促進(jìn)胃酸和胃蛋白酶原分泌蛋白質(zhì)分解產(chǎn)物胃泌素）促進(jìn)胃竇收縮迷走神經(jīng)興奮G細(xì)胞分泌促進(jìn)胰液主要是酶分泌組織胺ACH促進(jìn)消化道粘膜生長(zhǎng)促胰液素促進(jìn)胰液水和HCO3分泌迷走神經(jīng)興奮促進(jìn)膽汁水和HCO3分泌鹽酸＞蛋白質(zhì)產(chǎn)物＞脂酸鈉S細(xì)胞分泌抑制胃酸分泌膽囊收縮素促進(jìn)膽囊收縮迷走神經(jīng)興奮CCK促進(jìn)胰液中胰酶的分泌蛋白產(chǎn)物＞脂肪酸鈉＞鹽酸I細(xì)胞分泌加強(qiáng)促胰液素引起的HCO3的分泌促進(jìn)胰腺外分泌組織生長(zhǎng),,,,,,胃腸激素的生理作用及引起釋放的因素,胃腸道內(nèi)分泌細(xì)胞的分布及產(chǎn)物,第二節(jié)口腔內(nèi)消化,一、唾液及其作用一唾液的性質(zhì)和成分唾液為無(wú)色無(wú)味近于中性的液體。PH66～71成分水，有機(jī)物唾液淀粉酶、粘蛋白、球蛋白、溶菌酶等，無(wú)機(jī)物NA、K、HCO3、CL等。二唾液的作用1潤(rùn)濕和溶解食物2清潔和保護(hù)口腔3化學(xué)性消化作用4殺菌作用,二、咀嚼和吞咽一咀嚼粉碎、攪拌、混合二吞咽吞咽過(guò)程分三期第一期口腔→咽部隨意動(dòng)作第二期咽→食管上端反射動(dòng)作第三期食管→胃食管蠕動(dòng),,食團(tuán)后端興奮性反應(yīng)（環(huán)行肌收縮、縱行肌舒張）,食團(tuán)擴(kuò)張刺激,→,食團(tuán)前端抑制性反應(yīng)（環(huán)行肌舒張、縱行肌收縮）,食管內(nèi)的壓力中段≈胸內(nèi)壓，為負(fù)壓兩端＞胸內(nèi)壓。上段咽食管連接處（1～3CM）的高壓區(qū)（667～107KPA）。作用防止空氣進(jìn)入食管；避免食管內(nèi)的食物被吸出而入肺。下段食管賁門(mén)連接處上方（3～6CM）的高壓區(qū)（內(nèi)壓比胃高067～133KPA）。作用防胃內(nèi)容物逆流入食管，起到了類(lèi)似生理性括約肌的作用，故稱為食管下括約肌。,咀嚼味覺(jué)嗅覺(jué)條件反射,疲勞失水恐懼,延髓唾液中樞（Ⅶ、Ⅸ腦神經(jīng)核）,副交感神經(jīng),,唾液分泌增加（量多、稀?。?NE,,ⅦⅨ,,,,,,ACH,,,M受體,Β受體,,交感神經(jīng),,三唾液分泌的調(diào)節(jié)略,唾液分泌增加（量少、粘稠）,,唾液腺,,,胃的外分泌腺①賁門(mén)腺②泌酸腺分布在占全胃粘膜約2／3的胃底和胃體部。泌酸腺由三種細(xì)胞組成壁細(xì)胞→分泌鹽酸、內(nèi)因子主細(xì)胞→分泌胃蛋白酶原粘液頸細(xì)胞→分泌粘液③幽門(mén)腺分布在幽門(mén)部，是分泌堿性粘液的腺體。,第三節(jié)胃內(nèi)消化,一、胃液及其作用,一胃液的性質(zhì)、成分和作用性質(zhì)無(wú)色酸性液體，PH09～15分泌量15～25L/日。成分鹽酸（胃酸）、胃蛋白酶原、內(nèi)因子、粘液、HCO3等。,1鹽酸⑴來(lái)源由壁細(xì)胞分泌。⑵分泌量基礎(chǔ)排酸量空腹時(shí)正常人0～5MMOL/H。最大排酸量20～25MMOL/H（組胺試驗(yàn)）。⑶作用①激活胃蛋白酶原，提供胃蛋白酶適宜環(huán)境；②使蛋白質(zhì)變性，利于蛋白質(zhì)的分解；③抑制和殺死細(xì)菌④促進(jìn)胰液、膽汁和小腸液的分泌；⑤有助于小腸對(duì)鐵和鈣的吸收；,胃酸分泌機(jī)制,質(zhì)子泵,,質(zhì)子泵已被證實(shí)是各種因素引起胃酸分泌的最后通路，選擇性抑制質(zhì)子泵的藥物如奧美拉唑又叫洛賽克可有效的抑制胃酸的分泌。,CL通道,2胃蛋白酶原⑴來(lái)源由主細(xì)胞分泌⑵作用胃蛋白酶原⑶特點(diǎn)①以酶原形式分泌，須激活后才有活性；②最適PH為20～35，PH＞50則失活；,,,胃酸,,,,胃蛋白酶→水解食物蛋白,,多肽,3粘液及胃的屏障⑴來(lái)源粘液由表面上皮細(xì)胞、賁門(mén)腺和幽門(mén)腺細(xì)胞、泌酸區(qū)的粘液頸細(xì)胞分泌。HCO3主要由非泌酸細(xì)胞分泌，少量由組織間液滲入胃內(nèi)。⑵成分以糖蛋白為主要成分的粘液，覆蓋在胃粘膜的表面，形成一個(gè)厚約500ΜM左右的粘液凝膠層。⑶作用形成粘液碳酸氫鹽屏障。①潤(rùn)滑作用②中和③有效防止胃酸和胃蛋白酶對(duì)粘膜的侵蝕。,,,胃粘膜屏障組成胃粘膜上皮細(xì)胞的腔面膜和鄰近細(xì)胞間的緊密連接，所構(gòu)成的一道致密結(jié)締組織樣的脂蛋白層。作用脂溶性物質(zhì)易通透，而離子難以通過(guò),防H向內(nèi)擴(kuò)散、防NA向外擴(kuò)散。,3內(nèi)因子⑴來(lái)源由壁細(xì)胞分泌⑵成分糖蛋白（有2個(gè)亞單位）⑶作用與維生素Ｂ12結(jié)合，保護(hù)維生素Ｂ12不被破壞，促進(jìn)回腸末端維生素Ｂ12的吸收。當(dāng)壁細(xì)胞受損或減少時(shí)，可發(fā)生巨幼紅細(xì)胞性貧血。,,二胃液分泌的調(diào)節(jié)1引起胃液分泌的內(nèi)源性物質(zhì)（1）乙酰膽堿支配胃的迷走神經(jīng)節(jié)后纖維末梢釋放的遞質(zhì)為乙酰膽堿，乙酰膽堿作用于壁細(xì)胞上的M受體，引起胃酸分泌增加，其作用可被阿托品阻斷。（2）胃泌素由胃竇和十二指腸粘膜中的G細(xì)胞合成和釋放，通過(guò)血液循環(huán)作用于壁細(xì)胞，刺激其分泌胃酸。（3）組織胺由胃泌酸區(qū)粘膜中的嗜鉻樣細(xì)胞ECL分泌，通過(guò)局部擴(kuò)散到達(dá)鄰近的壁細(xì)胞，作用于壁細(xì)胞上的組胺2型受體H2受體，有很強(qiáng)的刺激胃酸分泌的作用。甲氰咪呱可阻斷H2受體而抑制胃酸分泌。,,,促進(jìn)胃酸分泌的內(nèi)源性物質(zhì),乙酰膽堿,組胺,胃泌素,迷走神經(jīng)節(jié)后纖維,嗜鉻樣細(xì)胞,G細(xì)胞,磷脂酰肌醇系統(tǒng)腺苷酸環(huán)化酶↑磷脂酰肌醇系統(tǒng)↓↓↓CA2↑CAMP↑CA2↑壁細(xì)胞,,,,M受體,H2受體,胃泌素受體,胃泌素受體,M受體,,,,,,泌酸↑,,質(zhì)子泵,2消化期的胃液分泌,進(jìn)食后的胃液分泌，一般按感受食物刺激的感受器所在的部位不同，人為的劃分為三個(gè)時(shí)期頭期、胃期、腸期。,分泌特點(diǎn)①分泌量大、酸度高、消化力強(qiáng)胃蛋白酶含量高。②分泌量與食欲、精神因素有關(guān)。,●條件反射與非條件反射迷走神經(jīng)為共同傳出神經(jīng),其末梢遞質(zhì)ACH引起胃液分泌。,（1）頭期,●迷走胃泌素迷走神經(jīng)的末梢遞質(zhì)GRP胃泌素釋放肽引起胃竇部G細(xì)胞分泌胃泌素。,分泌機(jī)制,口腔機(jī)械、化學(xué)刺激,●擴(kuò)張胃竇部→壁內(nèi)神經(jīng)叢短反射→G細(xì)胞釋放胃泌素；●食物的化學(xué)成分→G細(xì)胞釋放胃泌素。分泌特點(diǎn)①分泌量和酸度也很高。②消化力胃蛋白酶量低于頭期。,（2）胃期,●擴(kuò)張胃體和胃底→迷走迷走長(zhǎng)反射和壁內(nèi)神經(jīng)叢短反射→胃腺分泌。,分泌機(jī)制,（3）腸期分泌機(jī)制●食物由胃進(jìn)入小腸后，刺激小腸引起的胃液分泌?！耋w液調(diào)節(jié)因素有胃泌素、縮膽囊素、腸泌酸素尚未提純分泌特點(diǎn)①分泌量較低，約占消化期總的胃液分泌量的10。②酸度和胃蛋白酶含量均較低。,食物刺激眼、耳、鼻口、舌、咽、食管,胃底、胃體機(jī)械刺激,胃幽門(mén)部化學(xué)刺激,胃腺,機(jī)械小腸刺激化學(xué),胃液,胃泌素,小腸I細(xì)胞,頭期,胃期,腸期,胃幽門(mén)部機(jī)械刺激,中樞,壁內(nèi)神經(jīng)叢,壁內(nèi)神經(jīng)叢,幽門(mén)部G細(xì)胞,12指腸G細(xì)胞,,,Ⅴ、Ⅻ、Ⅸ、Ⅹ,Ⅰ、Ⅱ、Ⅷ,縮膽囊素,,,,,,,,,,,,,,,Ⅹ,Ⅹ,,,,,消化期胃液分泌的調(diào)節(jié),,3抑制胃液分泌的因素,⑴鹽酸①胃竇PH12～15→抑制G細(xì)胞分泌胃泌素。②胃竇PH12～15→刺激D細(xì)胞分泌生長(zhǎng)抑素→抑制G細(xì)胞分泌胃泌素和抑制壁細(xì)胞分泌胃酸。③12指腸PH≤25→刺激S細(xì)胞分泌促胰液素→抑制胃泌素分泌和抑制胃液分泌。⑵脂肪脂肪及其消化產(chǎn)物刺激小腸粘膜→“腸抑胃素”→抑制胃液分泌。⑶高滲溶液①刺激小腸滲透壓感受器→加強(qiáng)腸胃反射→抑制胃液分泌。②刺激小腸粘膜釋放“腸抑胃素”→抑制胃液分泌。,神經(jīng)降壓素、抑胃肽等,小結(jié)影響胃液分泌的因素━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━促進(jìn)抑制─────────────────────────食物蛋白質(zhì)糖鹽酸脂肪高滲溶液─────────────────────────激素胃泌素糖皮質(zhì)激素胰泌素胰高血糖素ACTH胰島素生長(zhǎng)抑素抑胃肽PG縮膽囊素腸泌酸素腸抑胃素球抑胃素─────────────────────────藥物ACH組胺阿托品甲氰咪呱咖啡因乙醇奧美拉唑（洛賽克）CA2毛果云香堿─────────────────────────神經(jīng)迷走神經(jīng)壁內(nèi)神經(jīng)叢反射交感神經(jīng)腸胃反射迷走迷走反射情緒應(yīng)激狀態(tài)惡劣情緒━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━,二、胃運(yùn)動(dòng)一胃運(yùn)動(dòng)的主要形式1緊張性收縮2容受性舒張3胃蠕動(dòng),（二）胃排空及其控制食糜由胃排入十二指腸的過(guò)程,稱為胃的排空。胃的蠕動(dòng)是胃排空的動(dòng)力。排空速度因食物而異糖類(lèi)＞蛋白質(zhì)＞脂肪混合食物通常需要4～6小時(shí)。影響因素①胃內(nèi)因素胃的內(nèi)容物對(duì)胃壁擴(kuò)張的刺激，通過(guò)壁內(nèi)神經(jīng)叢反射或迷走迷走反射，引起胃運(yùn)動(dòng)的加強(qiáng)，促進(jìn)胃的排空。促胃液素,使胃運(yùn)動(dòng)加強(qiáng)，促進(jìn)排空。②十二指腸內(nèi)因素食糜中的酸、脂肪及滲透壓、機(jī)械擴(kuò)張等刺激十二指腸壁上的感受器，反射性地抑制胃運(yùn)動(dòng)，引起胃排空減慢，稱為腸胃反射。促胰液素、抑胃肽等,抑制胃的運(yùn)動(dòng)，胃排空,,,,胃內(nèi)食物,機(jī)械擴(kuò)張,蛋白質(zhì)分解產(chǎn)物,迷走迷走反射,壁內(nèi)神經(jīng)叢局部反射,胃蠕動(dòng)↑緊張性↑,胃內(nèi)壓∨十二指腸內(nèi)壓,胃排空,胃竇GC,胃泌素,,,,,,,,,十二指腸食糜,高滲溶液,鹽酸、脂肪,胃蠕動(dòng)↓緊張性↓,胃內(nèi)壓∧十二指腸內(nèi)壓,胃排空暫停,腸胃反射,腸抑胃素,,,,胃內(nèi)壓∨十二指腸內(nèi)壓,再次胃排空,胃蠕動(dòng)↑緊張性↑,食糜在腸內(nèi)吸收,抑制因素解除,,,,影響胃排空的因素,（三）嘔吐嘔吐是一種保護(hù)意義的防御性反射活動(dòng)。嘔吐中樞延髓,一、小腸內(nèi)的消化液一胰液及其作用1胰液的性質(zhì)和成分胰液為無(wú)色透明的堿性液體，PH約78～84。成人每日分泌量為1～2L，滲透壓約與血漿相等。2胰液的成分和作用1水和碳酸氫鹽中和、保護(hù)腸粘膜不受胃酸的侵蝕，為小腸內(nèi)各種消化酶的活動(dòng)提供最適PH。2胰淀粉酶胰淀粉酶水解淀粉為麥芽糖和葡萄糖。,第四節(jié)小腸內(nèi)消化,,,3胰脂肪酶在輔脂酶的幫助下，可分解甘油三酯為脂肪酸、甘油一酯和甘油。4胰蛋白酶和糜蛋白酶胰蛋白酶和糜蛋白酶剛分泌出來(lái)是無(wú)活性的酶原，作用是分解蛋白質(zhì)。,腸致活酶、胰蛋白酶,胰蛋白酶,,,,多肽和氨基酸,胰蛋白酶原,糜蛋白酶原,胰蛋白酶,糜蛋白酶,月示、胨,蛋白質(zhì),,,,胰蛋白酶糜蛋白酶,（二）膽汁及其作用肝膽汁為金黃色、偏堿性，每天分泌量約1L1膽汁的主要成分1膽鹽主要為甘氨膽酸鈉和牛磺膽酸鈉。2膽固醇膽汁中的膽固醇是肝臟脂肪代謝的產(chǎn)物。3膽色素膽紅素是血紅蛋白的降解產(chǎn)物。另外，膽汁中還含有脂肪酸，卵磷脂及血漿中無(wú)機(jī)鹽等。但膽汁中沒(méi)有消化酶。,2膽汁的作用1乳化脂肪，有利于脂肪分解2有助膽固醇和脂肪酸的吸收促進(jìn)脂溶性維生素維生素A、D、E、K的吸收此外，膽汁在十二脂腸還可以中和一部分胃酸。,膽鹽進(jìn)入小腸后，90以上被回腸末端粘膜吸收，通過(guò)門(mén)V又回到肝臟，再成為合成膽汁的原料，然后膽汁又分泌入腸，這一過(guò)程稱為膽鹽的腸肝循環(huán)。,膽鹽的腸肝循環(huán),HTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170417/5292703HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170417/5292700HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170417/5292698HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170417/5292691HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170417/5292685HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170417/5292683HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170417/5292681HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170417/5292659HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170417/5292656HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170417/5292642HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170417/5292639HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170417/5292626HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170417/5292623HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170417/5292618HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170417/5292615HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170417/5292611HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170417/5292609HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170418/5294468HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170418/5294457HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170418/5294445HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170418/5294435HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170418/5294429HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170418/5294423HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170418/5294417HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170418/5294406HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170418/5294397HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170418/5294390HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170418/5294385HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170418/5294377HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170418/5294355HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170418/5294345HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170418/5294340HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170418/5294313HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170418/5294304HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170418/5294300HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170418/5294294HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170418/5294288HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170418/5294269HTML,三小腸液的分泌1小腸液的性質(zhì)和成分2小腸液的作用1稀釋作用2保護(hù)作用潤(rùn)滑、保護(hù)、溶菌3消化作用腸致活酶腸淀粉酶肽酶等二、小腸運(yùn)動(dòng)（一）小腸的運(yùn)動(dòng)形式1緊張性收縮2分節(jié)運(yùn)動(dòng)是小腸特有的運(yùn)動(dòng)形式。分節(jié)運(yùn)動(dòng)的作用①使食糜與消化液充分混合，便于化學(xué)性消化②使食糜與腸壁緊密接觸，促進(jìn)消化產(chǎn)物的吸收③擠壓腸壁，促進(jìn)血液和淋巴液回流。,3蠕動(dòng)①蠕動(dòng)沖②逆蠕動(dòng)（二）回盲括約肌的功能,第五節(jié)大腸內(nèi)消化一、大腸液及其作用大腸液的主要成分為粘液和碳酸氫鹽大腸液的主要作用是保護(hù)腸粘膜、潤(rùn)滑大便。二、大腸運(yùn)動(dòng)和排便反射一大腸的運(yùn)動(dòng)形式袋狀往返運(yùn)動(dòng)；分節(jié)推進(jìn)運(yùn)動(dòng)；蠕動(dòng)。二排便反射見(jiàn)后三、大腸內(nèi)細(xì)菌的作用合成B族和K族維生素。,二排便反射,HTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283524HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283522HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283519HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283515HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283507HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283487HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283481HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283472HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283463HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283415HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283405HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283401HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283394HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283724HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283635HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283626HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283619HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283600HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283585HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283578HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283572HTML,HTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283564HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283560HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283542HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170412/5283535HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285870HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285844HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285834HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285818HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285813HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285809HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285782HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285770HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285766HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285757HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285744HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285741HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285721HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285697HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285682HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285680HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285645HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285616HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285615HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285606HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285601HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285587HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285568HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285566HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285555HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285554HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285550HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285546HTML,第六節(jié)吸收,一、吸收的部位口腔部分藥物（如硝酸甘油、嗎啡）。胃酒精和少量水分。小腸能力最強(qiáng)、種類(lèi)最多，是主要的吸收部位，有利條件是①食物已被消化為適于吸收的小分子物質(zhì)②食物在小腸內(nèi)停留時(shí)間長(zhǎng)，有充分的吸收時(shí)間③吸收面積大④有豐富的毛細(xì)血管和毛細(xì)淋巴管有利于吸收大腸水分和無(wú)機(jī)鹽，也吸收葡萄糖和一些藥物。,,糖類(lèi)、蛋白質(zhì)和脂肪的消化產(chǎn)物，大部分在十二指腸和空腸內(nèi)被吸收?；啬c主動(dòng)吸收膽鹽和維生素B12,HTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285543HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285539HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170413/5285537HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170414/5288047HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170414/5288040HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170414/5288030HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170414/5288026HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170414/5288024HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170414/5288021HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170414/5288017HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170414/5288005HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170414/5288003HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170414/5288001HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170414/5287998HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170414/5287997HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170414/5287988HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170414/5287984HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170414/5287982HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170414/5287977HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXBK/170414/5287953HTMLHTTP//NEWS39NET/TXSDXB

簡(jiǎn)介：第三章細(xì)胞生物學(xué)的研究方法,練習(xí)題一、不定向選擇題（05分/題）1、用于活細(xì)胞觀察的技術(shù)有（ABC）。A相差顯微鏡技術(shù)B微分干涉顯微鏡技術(shù)C暗視野顯微鏡技術(shù)2、可用（B）技術(shù)來(lái)研究質(zhì)膜結(jié)構(gòu)的不對(duì)稱性A熒光顯微鏡技術(shù)B冰凍斷裂蝕刻技術(shù)C相差顯微鏡技術(shù)3、假設(shè)你對(duì)重建生活細(xì)胞的有絲分裂過(guò)程中染色體的三維結(jié)構(gòu)感興趣，你將選擇哪種技術(shù)（C）A冰凍斷裂蝕刻技術(shù)B掃描電鏡技術(shù)C激光共焦點(diǎn)掃描顯微鏡技術(shù)4、如果對(duì)生物大分子進(jìn)行動(dòng)態(tài)研究和追蹤，你采用哪種技術(shù)（AB）A放射自顯影技術(shù)B熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)C超速離心技術(shù)5、流式細(xì)胞儀可用于（ABCD）。A細(xì)胞分選B蛋白質(zhì)含量測(cè)定CDNA含量測(cè)定DRNA含量測(cè)定二、名詞解釋（1分/題）1、單克隆抗體技術(shù)2、原位雜交技術(shù)3、免疫熒光標(biāo)記技術(shù)4、細(xì)胞融合三、動(dòng)物克隆過(guò)程中應(yīng)用了哪些技術(shù)（15分）細(xì)胞拆合、細(xì)胞培養(yǎng)、顯微操作技術(shù),◆膜蛋白在膜中位置測(cè)定可以通過(guò)非通透性試劑對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行標(biāo)記或修飾實(shí)驗(yàn)進(jìn)行。,根據(jù)右圖各處理細(xì)胞的膜蛋白SDS聚丙烯凝膠電泳的帶型判斷5種膜蛋白在膜中的位置，用簡(jiǎn)圖表示。A）對(duì)照B）用不能透過(guò)細(xì)胞質(zhì)膜的胰蛋白酶處理完整的細(xì)胞C）先提高細(xì)胞質(zhì)膜的透性，再用胰蛋白酶處理透性細(xì)胞,,,,,,,,,,,,,,,,3,2,4,5,1,3,2,2,3,4,4,5,1,ABC,2、細(xì)胞外基質(zhì)（EXTRACELLULARMATRIX，ECM）指分布于細(xì)胞外空間,由細(xì)胞分泌的蛋白和多糖所構(gòu)成的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。動(dòng)物細(xì)胞外基質(zhì)的基本成分是、、、和。其中能夠形成水性的膠狀物，構(gòu)成細(xì)胞外基質(zhì)的基質(zhì)；和構(gòu)成細(xì)胞外基質(zhì)的骨架，賦予細(xì)胞外基質(zhì)一定的強(qiáng)度和韌性；和起粘著作用，促使細(xì)胞同細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)合。,2、細(xì)胞外基質(zhì)（EXTRACELLULARMATRIX，ECM）指分布于細(xì)胞外空間,由細(xì)胞分泌的蛋白和多糖所構(gòu)成的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。動(dòng)物細(xì)胞外基質(zhì)的基本成分是膠原蛋白、彈性蛋白、蛋白聚糖、纖連蛋白和層黏連蛋白。其中蛋白聚糖能夠形成水性的膠狀物，構(gòu)成細(xì)胞外基質(zhì)的基質(zhì)；膠原蛋白和彈性蛋白構(gòu)成細(xì)胞外基質(zhì)的骨架，賦予細(xì)胞外基質(zhì)一定的強(qiáng)度和韌性；纖連蛋白和層黏連蛋白起粘著作用，促使細(xì)胞同細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)合。,3、細(xì)胞識(shí)別（CELLRECOGNITION）指細(xì)胞對(duì)同種或異種細(xì)胞、同源或異源細(xì)胞以及對(duì)自己和異己分子的認(rèn)識(shí)和鑒別。4、細(xì)胞黏著（CELLADHESION）指在細(xì)胞識(shí)別的基礎(chǔ)上,細(xì)胞發(fā)生聚集形成細(xì)胞團(tuán)或組織的過(guò)程。既可介導(dǎo)同親型細(xì)胞黏著，又可介導(dǎo)異親型細(xì)胞黏著的細(xì)胞黏著分子是D。A鈣黏蛋白B整聯(lián)蛋白C選擇素D免疫球蛋白超家族,1、假若你新發(fā)現(xiàn)一個(gè)新的細(xì)胞膜蛋白，通過(guò)序列分析提示為一個(gè)多次跨膜蛋白。為了確定跨膜次數(shù)及其末端朝向，你在細(xì)胞內(nèi)高表達(dá)了該蛋白1）通過(guò)免疫熒光技術(shù)標(biāo)記細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)用抗N端抗體直接標(biāo)記活細(xì)胞時(shí)，出現(xiàn)膜上熒光，而用抗C端抗體時(shí)卻沒(méi)有。用甲醇固定細(xì)胞（此時(shí)細(xì)胞膜被破壞）后，則兩種抗體都出現(xiàn)膜上熒光標(biāo)記；2）如果先將細(xì)胞膜分離純化，然后用蛋白酶充分降解膜外部分，再經(jīng)SDSPAGE和銀染，發(fā)現(xiàn)有10條主帶，其中3條在對(duì)照細(xì)胞（即僅轉(zhuǎn)染了空質(zhì)粒載體的細(xì)胞）的相應(yīng)細(xì)胞中也有；3）如果先用蛋白酶處理，再分離細(xì)胞膜，則發(fā)現(xiàn)6條主帶，對(duì)照樣品有其中的2條。從以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果，試分析該多次跨膜蛋白的結(jié)構(gòu)。2、比較CAMP信號(hào)通路和磷脂酰肌醇信號(hào)通路的異同點(diǎn)。,練習(xí)題,答案實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析1用抗N端抗體直接標(biāo)記活細(xì)胞時(shí)，出現(xiàn)膜上熒光，而用抗C端抗體時(shí)卻沒(méi)有出現(xiàn)膜上熒光。說(shuō)明所研究的膜蛋白多態(tài)鏈的N端在胞外，C端在胞內(nèi)。2將細(xì)胞膜分離純化，然后用蛋白酶充分降解膜外部分，再經(jīng)SDSPAGE和銀染，發(fā)現(xiàn)有10條主帶，其中三條在對(duì)照細(xì)胞即僅轉(zhuǎn)染了空質(zhì)粒載體的細(xì)胞的相應(yīng)樣品中也有。說(shuō)明所研究膜蛋白極有可能是7次跨膜的多肽鏈，另外的三次跨膜結(jié)構(gòu)是質(zhì)粒載體自身核苷酸序列表達(dá)的。3如果先用蛋白酶處理，再分離細(xì)胞膜，發(fā)現(xiàn)了6條主帶，而對(duì)照樣品有其中的兩條。說(shuō)明多肽鏈在胞內(nèi)由四部分組成三個(gè)環(huán)狀結(jié)構(gòu)域C端部分，另外的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)區(qū)域是質(zhì)粒載體自身核苷酸序列表達(dá)的。4綜上所述所研究的膜蛋白多肽鏈的N端在胞外，C端在胞內(nèi)；多肽鏈?zhǔn)?次跨膜形成的，在胞內(nèi)和胞外分別有三個(gè)環(huán)狀結(jié)構(gòu)域，其結(jié)構(gòu)模型與7次跨膜的G蛋白偶聯(lián)受體極其相似。,1、兩個(gè)蛋白激酶K1和K2，在胞內(nèi)信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)中依次起作用。如果兩個(gè)蛋白激酶中任何一個(gè)含有致其永久性失活的突變，則細(xì)胞對(duì)胞外信號(hào)無(wú)反應(yīng)。假如一種突變使K1永久激活，則在含有該種突變的細(xì)胞中即使沒(méi)有胞外信號(hào)也可觀察到一種響應(yīng)。現(xiàn)有一種雙突變細(xì)胞含有失活突變的K2和帶激活突變的K1，觀察到即使沒(méi)有胞外信號(hào)，也會(huì)產(chǎn)生反應(yīng)。那么在正常信號(hào)傳遞途徑中，是K1激活K2還是K2激活K1簡(jiǎn)要說(shuō)明理由2、在一系列實(shí)驗(yàn)中，將編碼突變型受體酪氨酸激酶的基因?qū)爰?xì)胞。這些突變基因比正?；虻谋磉_(dá)高很多，而細(xì)胞仍表達(dá)來(lái)自其正常受體基因的正常受體。導(dǎo)入下列突變受體酪氨酸激酶基因，會(huì)產(chǎn)生什么樣的結(jié)果簡(jiǎn)要說(shuō)明理由。1）缺少胞外結(jié)構(gòu)域；2）缺少胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域。,練習(xí)題,練習(xí)題,在水中構(gòu)建含NA/K泵作為唯一膜蛋白的人工脂質(zhì)體小泡，并假設(shè)每一個(gè)泵反向轉(zhuǎn)運(yùn)NA和K,所有NA/K泵分子原來(lái)面向胞質(zhì)的部分現(xiàn)在朝向小泡外面。分析在下列條件下將會(huì)發(fā)生什么情況，并簡(jiǎn)要說(shuō)明理由（5分）1將小泡懸浮在含NA和K的溶液中，并且小泡內(nèi)溶液有同樣的離子組成；2將ATP加到（1）所描述的懸浮液內(nèi)；3加入ATP，但是小泡內(nèi)外溶液中只含有K而不含有NA；4加入ATP，但是小泡內(nèi)外溶液中只含有NA而不含有K；5在（1）所述的懸浮液中加入ATP，但是小泡膜除了含有NA/K泵以外，還含有K滲漏通道。,,1沒(méi)事2吸NA排KA3沒(méi)事4泡內(nèi)NA濃度小幅上升5吸NA排K直到K濃度平衡,課后作業(yè),試述粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)對(duì)分泌蛋白的合成、加工及轉(zhuǎn)運(yùn)5分。試述蛋白質(zhì)分選轉(zhuǎn)運(yùn)的基本途徑及類(lèi)型（5分）。,試述粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)對(duì)分泌蛋白的合成、加工及轉(zhuǎn)運(yùn)5分。,利用游離的氨基酸、MRNA和小麥胚芽提取物組成的無(wú)細(xì)胞體系研究蛋白質(zhì)合成，小麥胚芽提取物內(nèi)有核糖體和翻譯所需的輔助因子。如果利用該體系研究新生肽的轉(zhuǎn)移，對(duì)于表1中的每個(gè)實(shí)驗(yàn)條件，請(qǐng)指出蛋白質(zhì)是否完全合成，成熟蛋白質(zhì)是否具有信號(hào)序列，以及是否能跨膜轉(zhuǎn)移并簡(jiǎn)要說(shuō)明理由。（5分）,無(wú)細(xì)胞體系研究蛋白質(zhì)合成的實(shí)驗(yàn)方案,練習(xí)題,■指出下列哪些過(guò)程可直接被秋水仙素、紫杉醇、細(xì)胞松弛素阻斷（05分/個(gè)）1）軸突運(yùn)輸2）紡錘體的形成3）紡錘體的解體4）吞噬作用5）胞質(zhì)環(huán)流6）動(dòng)物細(xì)胞的胞質(zhì)分裂■簡(jiǎn)述細(xì)胞骨架在動(dòng)植物細(xì)胞有絲分裂中的作用。（5分）,,1、微管（秋水仙素）2、微管（秋水仙素）3、微管（紫杉醇）4、微絲（細(xì)胞松弛素）5、微絲（細(xì)胞松弛素）6、微絲（細(xì)胞松弛素）,簡(jiǎn)述細(xì)胞骨架在動(dòng)植物細(xì)胞有絲分裂中的作用。（5分）,微管1形成紡錘體2組織染色體運(yùn)動(dòng)（中期、后期）3參與植物細(xì)胞的胞質(zhì)分裂（壁物質(zhì)的運(yùn)輸軌道，并控制微纖絲的排列）微絲參與動(dòng)物細(xì)胞的胞質(zhì)分裂（動(dòng)物收縮環(huán)）中間纖維核膜的解體與重建（核纖層）,以哺乳動(dòng)物為例，說(shuō)明核糖體的生物發(fā)生過(guò)程,練習(xí)題,采用3HTDR脈沖標(biāo)記一種哺乳動(dòng)物細(xì)胞系A(chǔ)，以標(biāo)記后的時(shí)間為橫坐標(biāo)，3H標(biāo)記的處于有絲分裂期的細(xì)胞占處于有絲分裂期的總細(xì)胞百分比為縱坐標(biāo)作圖。2H后出現(xiàn)標(biāo)記的正處于有絲分裂的細(xì)胞，25H后達(dá)到第一個(gè)峰曲線升支的一半高度，8H后達(dá)到第一個(gè)峰曲線降支的一半，18H后達(dá)到第二個(gè)峰曲線升支的一半，則該細(xì)胞的細(xì)胞周期時(shí)間以及各時(shí)相的時(shí)間分別是多少,2,0,,25,,8,,18,脈沖標(biāo)記DNA復(fù)制和細(xì)胞分裂指數(shù)觀察測(cè)定法原理對(duì)測(cè)定細(xì)胞進(jìn)行脈沖標(biāo)記、定時(shí)取材、利用放射自顯影技術(shù)顯示標(biāo)記細(xì)胞，通過(guò)統(tǒng)計(jì)標(biāo)記有絲分裂細(xì)胞百分?jǐn)?shù)的辦法來(lái)測(cè)定細(xì)胞周期。有關(guān)名詞TG1G1期的持續(xù)時(shí)間TG2G2期的持續(xù)時(shí)間TSS期的持續(xù)時(shí)間TMM期的持續(xù)時(shí)間TC一個(gè)細(xì)胞周期的持續(xù)時(shí)間PLM標(biāo)記的有絲分裂細(xì)胞所占的比例TDR胸腺嘧啶脫氧核苷，是DNA的特異前體，能被S期細(xì)胞攝入，而摻進(jìn)DNA中。通常使用的是3H或者14C標(biāo)記的TDR。,,■測(cè)定原理①待測(cè)細(xì)胞經(jīng)3HTDR標(biāo)記后，所有S期細(xì)胞均被標(biāo)記。②S期細(xì)胞經(jīng)G2期才進(jìn)入M期，所以一段時(shí)間內(nèi)PLM0。③開(kāi)始出現(xiàn)標(biāo)記M期細(xì)胞時(shí)，表示處于S期最后階段的細(xì)胞，已渡過(guò)G2期，所以從PLM0到出現(xiàn)PLM的時(shí)間間隔為T(mén)G2。④S期細(xì)胞逐漸進(jìn)入M期，PLM上升，到達(dá)到最高點(diǎn)的時(shí)候說(shuō)明來(lái)自處于S最后階段的細(xì)胞，已完成M，進(jìn)入G1期。所以從開(kāi)始出現(xiàn)M到PLM達(dá)到最高點(diǎn)的時(shí)間就是TM。⑤當(dāng)PLM開(kāi)始下降時(shí)，表明處于S期最初階段的細(xì)胞也已進(jìn)入M期，所以出現(xiàn)M到PLM又開(kāi)始下降的一段時(shí)間等于TS。⑥從M出現(xiàn)到下一次M出現(xiàn)的時(shí)間間隔就等于TC，根據(jù)TCTG1TSTG2TM即可求出TG1的長(zhǎng)度。,PLM,,,,,TC1825155TM25221TG2開(kāi)頭一段）2TS82555TG115512557,流式細(xì)胞儀測(cè)定法,,,,C,8040,B峰,S期,練習(xí)題,,3分,,（1）突變體1是CDC25,因?yàn)闆](méi)有CDC25就不能去除CDC2上抑制性的磷酸基團(tuán)，MPF無(wú)活性，細(xì)胞將不正常地長(zhǎng)期生長(zhǎng)而不進(jìn)入分裂；1分突變體2是WEEL,因?yàn)闆](méi)有WEEL就不能將抑制性的磷酸基團(tuán)添加在CDC2上，MPF有活性，細(xì)胞在未成熟時(shí)即提前分裂。1分（2）在兩種突變體中G2期不正常，在突變體1中延長(zhǎng)，突變體2中縮短。因?yàn)镸PF啟動(dòng)細(xì)胞從G2期進(jìn)入M期的相關(guān)事件，誘導(dǎo)細(xì)胞進(jìn)入M期。1分,CDC25C,WEEL/MIKL,CAK,APC,,,翻譯后水平的調(diào)控,B,D,C238,B,D,,,ABC,ABDE,ABCDE,BCDE,真核細(xì)胞基因表達(dá)調(diào)控有哪些不同環(huán)節(jié)，各有何作用（4分）四個(gè)不同環(huán)節(jié)（各1分）1、轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控決定某個(gè)基因是否會(huì)被轉(zhuǎn)錄，什么時(shí)候轉(zhuǎn)錄，并決定轉(zhuǎn)錄的頻率。包括轉(zhuǎn)錄激活和轉(zhuǎn)錄阻遏。2、轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控決定初始MRNA轉(zhuǎn)錄物（HNRNA）被加工為能翻譯成多肽的MRNA的途徑。包括組成型剪接和選擇性剪接兩種方式，其中選擇性剪接是一種廣泛存在的RNA加工機(jī)制。3、翻譯水平的調(diào)控決定某種MRNA是否會(huì)真正得到翻譯，如果能翻譯還決定翻譯的頻率和時(shí)間長(zhǎng)短。一般通過(guò)細(xì)胞質(zhì)中特異MRNA和多種蛋白的相互作用來(lái)實(shí)現(xiàn)的，涉及MRNA翻譯的調(diào)控、MRNA穩(wěn)定性的調(diào)控、MRNA的細(xì)胞質(zhì)定位等。4、翻譯后水平的調(diào)控蛋白質(zhì)合成后通常還需加工、修飾和正確折疊才能成為有活性的蛋白質(zhì)。,練習(xí)題,3、簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞CASPASE依賴性的兩條凋亡途徑。,決定死亡的,執(zhí)行死亡的,與死亡細(xì)胞被吞噬有關(guān)的,死亡細(xì)胞在吞噬體中被降解的,天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶,死亡受體,細(xì)胞色素C,APAF1CED4的同源物,11,天冬氨酸,酶原,起始CASPASE,執(zhí)行CASPASE,當(dāng)細(xì)胞接受凋亡信號(hào)分子FAS,TNF等后，凋亡細(xì)胞表面信號(hào)分子受體（APO1,CD95,TNFR1）聚集，并通過(guò)胞質(zhì)區(qū)的死亡結(jié)構(gòu)域招募接頭蛋白FADD，TRADD和CASPASE酶原形成死亡誘導(dǎo)信號(hào)復(fù)合物DISC，起始CASPASE在復(fù)合物中通過(guò)自身切割而活化，進(jìn)而切割激活執(zhí)行CASPASE，活化的執(zhí)行CASPASE切割細(xì)胞內(nèi)重要的結(jié)構(gòu)和功能蛋白，引起細(xì)胞凋亡。由線粒體起始的內(nèi)源途徑當(dāng)細(xì)胞接受凋亡信號(hào)刺激，線粒體的外膜通透性發(fā)生改變（主要受BCL2蛋白家族的調(diào)控）。細(xì)胞色素C從線粒體釋放到細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中，與APAF1CED4的同源物和CASPASE9前體形成凋亡復(fù)合體，并活化CASPASE9，再進(jìn)一步激活執(zhí)行CASPASE，活化的執(zhí)行CASPASE切割細(xì)胞內(nèi)重要的結(jié)構(gòu)和功能蛋白，引起細(xì)胞凋亡。,

簡(jiǎn)介：廣東醫(yī)學(xué)院生物教研室張華華,第六章細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞器,CYTOPLASMANDORGANELLE,第六章之三,第三節(jié)內(nèi)膜系統(tǒng)（部分）溶酶體過(guò)氧化物酶體內(nèi)膜系統(tǒng)綜合,溶酶體（LYSOSOME）,1955年DEDUVE與NOVIKOFF首次發(fā)現(xiàn)溶酶體。溶酶體為直徑很小的囊狀小體，其外包以一層厚約6NM的單位膜，膜內(nèi)含有活性很高的酸性水解酶60多種。其主要功能是進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)消化。,LYSOSOME溶酶體,LYSOSOME的形態(tài)特征,LYSOSOME的類(lèi)型,LYSOSOME形成過(guò)程,LYSOSOME的功能,（細(xì)胞內(nèi)的消化器）,LYSOSOMELY,內(nèi)含60多種酸性水解酶，標(biāo)志酶是酸性磷酸酶,具有多型性和異質(zhì)性，即形態(tài)及內(nèi)含的水解酶種類(lèi)不完全相同,膜有質(zhì)子泵H維持內(nèi)環(huán)境酸性PH5,一、形態(tài)特征,膜蛋白高度糖基化，防止溶酶體膜被降解,CYTOLOGY,二溶酶體的類(lèi)型,,,初級(jí)溶酶體,次級(jí)溶酶體,三級(jí)溶酶體肝細(xì)胞中的脂褐質(zhì),動(dòng)物細(xì)胞溶酶體系統(tǒng)示意圖,二、溶酶體的類(lèi)型,1內(nèi)體性溶酶體由高爾基復(fù)合體成熟面的扁平囊形成有被小泡，脫落后再與內(nèi)體合并即為內(nèi)體性溶酶體。,2吞噬性溶酶體當(dāng)內(nèi)體性溶酶體與細(xì)胞內(nèi)衰老的細(xì)胞器或由細(xì)胞胞吞作用攝入的外來(lái)物質(zhì)融合后便形成吞噬性溶酶體。21自噬性溶酶體22異噬性溶酶體23終末溶酶體,二、溶酶體的類(lèi)型,CYTOLOGY,胞吞作用,吞噬作用,自噬作用,內(nèi)吞體,吞噬體,自噬體,初級(jí)溶酶體,自噬溶酶體,異噬溶酶體,次級(jí)溶酶體,三、溶酶體的形成,ER上核糖體合成溶酶體酶蛋白,進(jìn)入ER腔進(jìn)行N連接糖基化,進(jìn)入GC順面膜囊,寡糖鏈上甘露糖殘基磷酸化，形成６磷酸甘露糖M6P,與TGN上的M6P受體結(jié)合,出芽形成特異性運(yùn)輸小泡,內(nèi)吞體,內(nèi)體性LY,融合,,,,,,,初級(jí)溶酶體的形成,,內(nèi)吞體,RER,順面,反面,,高爾基體,溶酶體酶,,,加入磷酸基團(tuán),M6P,成熟的溶酶體酶,ATP,,,ADPPI,,H,去除磷酸,,PH5,初級(jí)（內(nèi)體性）溶酶體,,三、溶酶體的形成,四、FUNCTIONOFLYSOSOME,胞吞作用ENDOCYTOSIS,,（一）對(duì)細(xì)胞內(nèi)吞物質(zhì)的消化,溶酶體對(duì)外源性物質(zhì)的消化過(guò)程,吞噬作用PHAGOCYTOSIS,吞飲作用PINOCYTOSIS,四、FUNCTIONOFLYSOSOME,自身物質(zhì),衰老細(xì)胞器,分泌顆粒,,（二）對(duì)自身物質(zhì)的分解,（三）細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)作用,（四）防御保護(hù)功能,（五）在個(gè)體發(fā)生發(fā)育過(guò)程中的作用,溶酶體膜破裂，酶釋放入胞質(zhì)中引起細(xì)胞本身被消化自溶,如蝌蚪尾巴的消失,四、FUNCTIONOFLYSOSOME,四、FUNCTIONOFLYSOSOME,精子與卵細(xì)胞受精,（五）在個(gè)體發(fā)生發(fā)育過(guò)程中的作用,精子的頂體其本質(zhì)也是一種溶酶體,在受精過(guò)程中,頂體中的酶被釋放到細(xì)胞外,消化卵外周的卵泡細(xì)胞,便于精子進(jìn)入卵細(xì)胞達(dá)到受精的目的,,,,,,,,,內(nèi)體,,,,初級(jí)溶酶體,,吞噬體,,,,吞噬溶酶體,,吞飲體,,,多泡小體,自噬體,,,,,自噬溶酶體,,,分泌顆粒,,,異噬性溶酶體,,殘余體,,,,,,,胞外消化,溶酶體的消化作用,自噬性溶酶體,,五、溶酶體與疾病,（一）先天性溶酶體?。ㄈ狈δ撤N水解酶）,如貯（蓄）積病,（二）溶酶體膜的穩(wěn)定性失常所致疾病,如矽肺（LY膜破裂）（一種職業(yè)?。?如痛風(fēng)（LY膜破裂）,如泰薩病,,,粘多糖貯積癥HUNTER綜合征,過(guò)氧化物酶體PEROXISOME,PS,又稱微體，由單層膜包圍，中有一些中等致密度的顆粒狀物質(zhì)和結(jié)晶狀結(jié)構(gòu)的囊狀小體，所含物質(zhì)主要有過(guò)氧化氫酶和其它一些氧化酶。,過(guò)氧化物酶體的結(jié)構(gòu)過(guò)氧化物酶體的功能,過(guò)氧化物酶體PEROXISOME,PS,過(guò)氧化物酶體的結(jié)構(gòu),是一種具有異質(zhì)性的細(xì)胞器，在不同生物及不同發(fā)育階段有所不同。通常呈圓形或橢圓形，偶見(jiàn)半月形或長(zhǎng)方形。中央含類(lèi)核體（人和鳥(niǎo)除外，類(lèi)核體為尿酸氧化酶的結(jié)晶）；人的肝、腎細(xì)胞中過(guò)氧化物酶體典型。內(nèi)含40多種酶，過(guò)氧化氫酶是標(biāo)志酶,電鏡下的過(guò)氧化物酶體,過(guò)氧化物酶體的功能,1、對(duì)有毒物質(zhì)的解毒作用2、對(duì)細(xì)胞中氧張力的調(diào)節(jié)作用3、對(duì)細(xì)胞質(zhì)氧化型輔酶Ⅰ的再生作用4、參與脂肪、核酸和糖的代謝,RH2O2→RH2O2H2O2R’H2→R’H2OH2O2對(duì)細(xì)胞具有毒害作用，上述反應(yīng)可解毒。,1、對(duì)有毒物質(zhì)的解毒作用,溶酶體LYSOSOME,形態(tài)特征,形成,RER/自體分裂,過(guò)氧化物酶體PEROXISOME,異質(zhì)性，中央常有類(lèi)核體,酶,酸性水解酶,氧化酶和過(guò)氧化物酶、H2O2酶,標(biāo)志酶,酸性磷酸酶,H2O2酶,功能,細(xì)胞消化,氧化脂肪酸、解毒,ER\GC,多型、異質(zhì)性,內(nèi)膜系統(tǒng)結(jié)構(gòu)上的統(tǒng)一性,內(nèi)膜系統(tǒng)功能上的統(tǒng)一性,是細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的加工、分選和運(yùn)輸系統(tǒng),核糖體,GC,,,,,直接穿膜運(yùn)輸,通過(guò)小泡運(yùn)輸,,細(xì)胞的內(nèi)膜系統(tǒng),,思考題,1、試述內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的形態(tài)結(jié)構(gòu)、類(lèi)型及功能,2、什么是信號(hào)肽試述蛋白質(zhì)合成的信號(hào)假說(shuō),3、簡(jiǎn)述高爾基體的形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能,4、溶酶體是怎樣形成的分為幾類(lèi)各有何特點(diǎn)具有哪些功能,5、分泌蛋白在細(xì)胞內(nèi)是如何合成和運(yùn)輸?shù)?

簡(jiǎn)介：1,2,鈣粘著蛋白,免疫球蛋白超家族,整聯(lián)蛋白,選擇蛋白,3,黏著連接,緊密連接,間隙連接,橋粒,4,CHAPTER5細(xì)胞通訊,5,OUTLINE,51細(xì)胞通訊的基本特點(diǎn)52信號(hào)分子53受體54CAMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑55磷脂酰肌醇信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑56酶連受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)57信號(hào)的整合與終止,6,CELLCOMMUNICATION,7,細(xì)胞通訊的途徑與方式,◆酶活性的變化◆基因表達(dá)的變化◆細(xì)胞骨架構(gòu)型◆通透性的變化◆DNA合成活性的變化◆細(xì)胞死亡程序的變化等。,胞外配體,細(xì)胞骨架,細(xì)胞連接,胞外基質(zhì),8,51細(xì)胞通訊的基本特點(diǎn),細(xì)胞通訊的一般過(guò)程和所引起的反應(yīng)?一般過(guò)程◆識(shí)別●信號(hào)分子●受體蛋白◆信號(hào)傳導(dǎo)強(qiáng)調(diào)信號(hào)的產(chǎn)生和細(xì)胞間傳送?！粜盘?hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)強(qiáng)調(diào)接受、轉(zhuǎn)換的方式和結(jié)果。,信號(hào)發(fā)出細(xì)胞,信號(hào)分子,受體,靶細(xì)胞,9,細(xì)胞通訊的兩種方式,●通訊連接間隙連接和胞間連絲●分泌的信號(hào)●細(xì)胞表面的信號(hào),10,細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的基本特點(diǎn)●信號(hào)轉(zhuǎn)換●逐級(jí)放大●通過(guò)構(gòu)像的改變?cè)谛盘?hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中，上游蛋白對(duì)下游蛋白活性的改變主要是通過(guò)添加或除去磷酸基團(tuán)進(jìn)行的。,胞內(nèi)的保守蛋白,GTPASE三體G蛋白，單體G蛋白（RAS）激酶和磷酸酶,11,12,細(xì)胞通訊的作用,13,細(xì)胞的兩種效應(yīng),14,52信號(hào)分子,信號(hào)分子及類(lèi)型?概念◆化學(xué)分子●非營(yíng)養(yǎng)物●非能源物質(zhì)●非結(jié)構(gòu)物質(zhì)●不是酶◆是用來(lái)在細(xì)胞間和細(xì)胞內(nèi)傳遞信息的分子蛋白質(zhì)、多肽、核苷酸、脂類(lèi)衍生物、類(lèi)固醇和氣體分子,15,?信號(hào)分子的類(lèi)型及傳導(dǎo)方式,◆激素內(nèi)分泌細(xì)胞（如腎上腺、睪丸、卵巢、胰腺、甲狀腺、甲狀旁腺和垂體）合成的化學(xué)信號(hào)分子，經(jīng)血液循環(huán)運(yùn)送到體內(nèi)各部位的靶細(xì)胞。主要有3種蛋白與肽類(lèi)激素、類(lèi)固醇激素、氨基酸衍生物。,16,◆局部化學(xué)介質(zhì)與旁分泌PARACRINE細(xì)胞分泌化學(xué)介質(zhì)LOCALCHEMICALMEDIATOR到細(xì)胞外液中作用于鄰近靶細(xì)胞。蛋白質(zhì)和肽類(lèi)（生長(zhǎng)因子）、氨基酸和脂肪酸衍生物（前列腺素）。,17,◆自分泌AUTOCRINE是指細(xì)胞對(duì)自身產(chǎn)生的物質(zhì)發(fā)生反應(yīng),常見(jiàn)于病理?xiàng)l件下,如肝細(xì)胞合成的釋放生長(zhǎng)因子,可以刺激自身,導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞增生,失去控制。這種信號(hào)中最主要的一類(lèi)是前列腺素PG。,18,◆神經(jīng)遞質(zhì)●神經(jīng)遞質(zhì)是由神經(jīng)末梢分泌到觸突SYNAPSES中的信號(hào)分子（乙酰膽堿）；●它們?cè)谶M(jìn)入靶細(xì)胞之前，觸突必需同靶細(xì)胞挨得很近很近；●為了引起鄰近靶細(xì)胞的反應(yīng)，還必需產(chǎn)生電信號(hào)。神經(jīng)遞質(zhì)僅作用于相連接的靶細(xì)胞。,腎上腺素兼有神經(jīng)遞質(zhì)和旁分泌的功能,19,20,53受體,?一般特性◆概念●與配體結(jié)合并產(chǎn)生特定效應(yīng)的蛋白質(zhì)統(tǒng)稱為受體?！舸嬖诓课弧衲け砻媸荏w●胞內(nèi)受體◆膜受體的主要功能是●接受信號(hào)，傳導(dǎo)信號(hào),,21,胞內(nèi)受體的結(jié)構(gòu),22,三種類(lèi)型的細(xì)胞表面受體,離子通道偶聯(lián)受體IONCHANNELLINKEDRECEPTOR,G蛋白偶聯(lián)受體GPROTEINLINKEDRECEPTOR,酶聯(lián)受體ENZYMELINKEDRECEPTOR,23,?IONCHANNELLINKEDRECEPTOR,◆見(jiàn)于可興奮細(xì)胞間的突觸信號(hào)傳遞，產(chǎn)生一種電效應(yīng)。◆受體本身就是形成通道的跨膜蛋白，如乙酰膽堿受體就是離子通道偶聯(lián)受體?！羲鼈兌酁閿?shù)個(gè)亞基組成的寡聚體蛋白,除有配體結(jié)合部位外,本身就是離子通道的一部分,并籍此將信號(hào)傳遞至細(xì)胞內(nèi)。,24,乙酰膽堿受體與信號(hào)傳遞,25,乙酰膽堿受體,銀環(huán)蛇毒素,26,?G蛋白偶聯(lián)受體●G蛋白偶聯(lián)受體是最大的一類(lèi)細(xì)胞表面受體，超過(guò)1000種。●它們介導(dǎo)許多細(xì)胞外信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)，包括激素、局部介質(zhì)和神經(jīng)遞質(zhì)。●G蛋白偶聯(lián)受體主要參與味道、氣味和光的感受。,27,●7次跨膜的?螺旋●信號(hào)分子誘導(dǎo)構(gòu)型變化，激活細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的G蛋白?！馟蛋白激活后，與G蛋白偶聯(lián)受體分離，進(jìn)一步作用于靶酶或離子通道?！襁M(jìn)化保守。,28,?G蛋白◆組成一般由三個(gè)亞基組成,分別叫Α、Β、Γ,Β、Γ兩亞基通常緊密結(jié)合在一起,只有在蛋白變性時(shí)才分開(kāi)?！艄δ芪稽c(diǎn)Α亞基具有三個(gè)功能位點(diǎn)①GTP結(jié)合位點(diǎn)②鳥(niǎo)苷三磷酸水解酶GTPASE活性③ADP核糖化位點(diǎn)。,29,G蛋白偶聯(lián)受體與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),30,G蛋白與信號(hào)傳遞,31,?酶聯(lián)受體ENZYMELINKEDRECEPTOR◆受體蛋白既是受體又是酶，一旦被配體激活即具有酶活性并將信號(hào)放大，又稱催化受體CATALYTICRECEPTOR?！暨@類(lèi)受體傳導(dǎo)的信號(hào)主要與細(xì)胞生長(zhǎng)、分裂有關(guān)。,32,酶聯(lián)受體,心房肽,表皮生長(zhǎng)因子,第二信使SECONDMESSENGER信號(hào)分子與受體結(jié)合后向胞內(nèi)進(jìn)行信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，通常把細(xì)胞外的信號(hào)稱為第一信使，而把細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的非蛋白信號(hào)物質(zhì)稱為第二信使。目前公認(rèn)的第二信使有CAMP、DAG、IP3、CGMP和CA2。,34,?效應(yīng)物EFFECTOR◆接收信息后能夠直接引起反應(yīng)效應(yīng)的物質(zhì)，通常是酶；●如腺苷酸環(huán)化酶在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中能夠?qū)TP轉(zhuǎn)變成CAMP引起細(xì)胞內(nèi)的反應(yīng)。,35,CAMP的產(chǎn)生,36,NO氣體分子介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),◆一氧化氮是有毒、可溶性的氣體，產(chǎn)自精氨酸，在一些組織中作為局部介質(zhì)起作用。NO能夠引起血管壁的平滑肌細(xì)胞松弛，血液流通順暢。◆旁分泌信號(hào)，存在于神經(jīng)、免疫和循環(huán)系統(tǒng)?！魯U(kuò)散進(jìn)入細(xì)胞，不必通過(guò)跨膜受體轉(zhuǎn)運(yùn)，不同于類(lèi)固醇分子。,37,一氧化氮的信號(hào)作用,38,夜寧新NITEWORKS,是目前為止只有這個(gè)產(chǎn)品是全世界唯一的能預(yù)防心腦血管疾病的食品,39,54CAMP信號(hào)途徑,◆CAMP信號(hào)途徑又稱PKA系統(tǒng)，是蛋白激酶A系統(tǒng)的簡(jiǎn)稱PROTEINKINASEASYSTEM,PKA；◆該系統(tǒng)屬G蛋白偶聯(lián)受體信號(hào)傳導(dǎo)；◆在該系統(tǒng)中,細(xì)胞外信號(hào)要被轉(zhuǎn)換成第二信使CAMP引起細(xì)胞反應(yīng)。,40,,●激活型激活型的信號(hào)→激活型的受體→激活型的G蛋白→腺苷酸環(huán)化酶活性↑從而提高CAMP的濃度引起細(xì)胞的反應(yīng)?！褚种菩鸵种菩偷男盘?hào)→抑制型的受體→抑制型的G蛋白→腺苷酸環(huán)化酶活性↓；從而降低CAMP的濃度引起細(xì)胞的反應(yīng)。,41,541系統(tǒng)組成,?激活型的系統(tǒng)組成◆激活型受體STIMULATERECEPTOR,RS●腎上腺素Β型受體,胰高血糖素受體等●此類(lèi)受體都是7次跨膜的膜整合蛋白?！艏せ钚偷腉蛋白將受體接收的信號(hào)傳遞給腺苷酸環(huán)化酶，使該酶激活?！粜?yīng)物腺苷酸環(huán)化酶,42,受體、G蛋白和效應(yīng)物,43,◆該系統(tǒng)中三個(gè)成員存在的實(shí)驗(yàn)證據(jù)●通過(guò)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)證明受體與腺苷酸環(huán)化酶是兩種不同的蛋白質(zhì)；●高效信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)需要G蛋白的存在；●GTP可增強(qiáng)激素對(duì)腺苷酸環(huán)化酶的激發(fā),44,證明G蛋白作用的實(shí)驗(yàn),45,,?抑制型的系統(tǒng)組成◆抑制型受體INHIBITERECEPTOR,RI抑制型的受體RI通過(guò)GI抑制腺苷酸環(huán)化酶的活性,降低膜內(nèi)CAMP的水平。◆抑制型G蛋白GIPROTEINS抑制型的GTP結(jié)合蛋白傳遞抑制性信號(hào),降低腺苷酸環(huán)化酶的活性。◆效應(yīng)物∶腺苷酸環(huán)化酶。,46,激活型與抑制型受體進(jìn)行信號(hào)傳導(dǎo)的效應(yīng),47,542CAMP信號(hào)途徑,?CAMP的產(chǎn)生與信號(hào)放大?CAMP的產(chǎn)生?CAMP的信號(hào)放大,48,G蛋白偶聯(lián)受體與CAMP的產(chǎn)生,49,?信號(hào)放大蛋白激酶A的激活●結(jié)構(gòu)PKA2個(gè)調(diào)節(jié)亞基和2個(gè)催化亞基。●激活CAMP連接2個(gè)調(diào)節(jié)亞基，導(dǎo)致2個(gè)調(diào)節(jié)亞基和2個(gè)催化亞基分離，2個(gè)分離的催化亞基具有酶活性，可使靶酶的絲氨酸殘基磷酸化，糖原分解。,50,蛋白激酶A的激活,51,?蛋白激酶A的作用機(jī)理,被激活的蛋白激酶A可以以兩種方式起作用?2個(gè)分離的催化亞基具有酶活性，可使靶酶的絲氨酸殘基磷酸化，激活糖原分解的酶。?PKA還可以轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核中磷酸化某些重要的核蛋白，其中主要是CREB（CAMPRESPONSEELEMENT）,激活糖異生有關(guān)的酶。,52,PKA的胞質(zhì)和核功能,,,53,THEFREECATALYTICSUBUNITOFPROTEINKINASEATRANSLOCATESTOTHENUCLEUSANDPHOSPHORYLATESTHETRANSCRIPTIONFACTORCREBCREBINDINGPROTEIN,LEADINGTOEXPRESSIONOFCAMPINDUCIBLEGENES,54,543CAMP途徑的信號(hào)解除和抑制,?信號(hào)解除●通過(guò)磷酸二酯酶將CAMP降解,形成5‘AMP；●通過(guò)抑制型的信號(hào)作用于RI,然后通過(guò)GI起作用。,55,CAMP的合成與分解,56,CAMP信號(hào)的抑制,57,?毒素對(duì)CAMP信號(hào)途徑的影響◆霍亂毒素CHOLERATOXIN能把NAD上的NAD核糖轉(zhuǎn)移到GS蛋白的Α亞基上，使G蛋白核糖化ADPRIBOSYLATION,抑制GTPASE活性，這樣將抑制GTP的水解，使用有處于激活狀態(tài)。◆百日咳毒素WHOOPINGCOUCHTOXIN作用機(jī)理同霍亂毒素不同，但是使GI蛋白進(jìn)行ADP核糖化，阻止GI蛋白Α亞基上的GDP被GTP取代,其結(jié)果也是使CAMP的濃度增加。,58,核糖化作用,59,G蛋白與信號(hào)傳遞,A、不能水解,B、不能取代,

簡(jiǎn)介：PAGE1,腫瘤概念,,CANCERISAGENETICDISEASE,ARISINGFROMANACCUMULATIONOFMUTATIONSTHATPROMOTECLONALSELECTIONOFCELLSWITHINCREASINGLYAGGRESSIVEBEHAVIORTHEVASTMAJORITYOFMUTATIONSINCANCERARESOMATICANDAREFOUNDONLYINANINDIVIDUALSCANCERCELLSHOWEVER,ABOUT1OFALLCANCERSARISEININDIVIDUALSWITHANUNMISTAKABLEHEREDITARYCANCERSYNDROMETHESEINDIVIDUALSCARRYAPARTICULARGERMLINEMUTATIONINEVERYCELLOFTHEIRBODYSCIENCEVOL278NO5340,PP1043–1050,7NOVEMBER1997,腫瘤是機(jī)體在各種致瘤因素的作用下，局部組織的細(xì)胞在基因水平上失去對(duì)其生長(zhǎng)的正常調(diào)控，導(dǎo)致克隆性異常增生而形成的新生物（病理學(xué)－衛(wèi)生部統(tǒng)編教材第五版2001）。,PAGE2,癌細(xì)胞的基本特征1、細(xì)胞生長(zhǎng)與增殖失去控制2、具有浸潤(rùn)性和擴(kuò)散性3、細(xì)胞間相互作用改變4、蛋白表達(dá)譜系或蛋白活性改變5、MRNA轉(zhuǎn)錄譜系改變6、體外培養(yǎng)的惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞的特征二、癌基因與抑癌基因癌基因－控制細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂的正?；虻囊环N突變形式抑癌基因－正常細(xì)胞增殖過(guò)程中的負(fù)調(diào)控因子三、腫瘤的發(fā)生是基因突變逐漸積累的結(jié)果,PAGE3,NORMALCELLPOPULATIONSREGISTERTHENUMBEROFCELLGENERATIONS,CELEGANCETHELINEAGEOFALL959SOMATICCELLSINTHEADULTBODYCOULDBEHASBEENTRACEDTOTHEIRFOUNDERANDCANBEDEPICTEDASAPEDIGREE,PAGE4,發(fā)育生物學(xué)關(guān)注的是不同細(xì)胞譜系中的細(xì)胞個(gè)體如何從其周?chē)@取信息，使其進(jìn)入特定的分化程序，而不關(guān)注與腫瘤發(fā)生最相關(guān)的問(wèn)題，有無(wú)特定的控制系統(tǒng)決定一個(gè)生物體特定的細(xì)胞譜系一生中能夠傳多少代一個(gè)細(xì)胞系譜的分支是否能夠無(wú)限制生長(zhǎng)（GROW,或者每一個(gè)細(xì)胞譜系分裂次數(shù)是否為預(yù)先設(shè)定，有限的,PAGE5,1960LEONARDHAYFLIK’SWORKBYCOUNTINGTHENUMBEROFTIMESTHATPOPULATIONOFCELLSHADDOUBLEDWHENTHECELLSENTERINTOSENESCENCE,THEYCOULDREMAINVIABLEBUTNONPROLIFERATINGFORASLONGASAYEAR,PAGE6,LOSSOFPROLIFERATIVECAPACITYWITHAGE,PAGE7,SENESCENTCELLSWHENTHECELLSENTERINTOSENESCENCE,THEYCEASEPROLIFERATINGBUTREMAINVIABLE,“FRIEDEGGAPPEARANCE”ISTHEMORPHOLOGICALFEATUREBECAUSEOFTHEENLARGEDCYTOPLASMMETABOLICALLY,SENESCENTCELLSCHARACTERISTICALLYEXPRESSTHESENESCENCEASSOCIATED,ACIDICΒGALACTOSIDASEENZYME,WHICHCANBEDETECTEDBYSUPPLYINGTHEMWITHSUBSTRATETHATTURNSBLUEUPONCLEAVAGEBYTHISENZYME,PAGE8,CANCERCELLSNEEDTOBECOMEIMMORTALINORDERTOFORMCANCER,GENERATIONSOFCELLSFORMINGATUMORA1CM3109CELL,LIFETHREATENINGTUMOR103CM3≈1012CELL,103≈210,HENCE1012≈240CYCLESCELLPD601018CELL≈109CM3≈106KG,PAGE9,,GENERATIONSOFCELLSFORMINGATUMORBCELLPOPULATIONSTHATAREEVOLVINGTOWARDTHENEOPLASITICSTATEANDTHOSETHATAREALREADYNEOPLASTICEXPERIENCESUBSTANTIALATTRITIONDURINGEACHCELLGENERATION,HOWCANNORMALCELLSTHROUGHOUTTHEBODYPOSSIBLYREMEMBERTHEIRREPLICATIVEHISTORYHOWCANCANCERCELLSERASETHEMEMORYOFTHISHISTORYANDACQUIRETHEABILITYTOPROLIFERATEINDEFINITELY,PAGE10,CELLPHYSIOLOGICSTRESSESIMPOSEALIMITATIONONREPLICATION,INFLUENCEOFCULTURECONDITIONSONTHEONSETOFSENESCENCEOXYGENCONCENTRATIONPLASTICORFEEDERCELLINTHECULTUREINFLUENCETHEEXPRESSIONOFTUMORSUPPRESSORGENEEXPRESSION,SOTOTHESENESCENCEINVITROMECHANISMSENESCENCE,PAGE11,INCREASEDEXPRESSIONOFP16ANDP21PROGRESSIVELYDURINGEXTENDEDCULTUREINVITRO,ECTOPICEXPRESSIONOFP16INCELLSCAUSEDTHEMTODEVELOPMANYOFTHEATTRIBUTESOFREPLICATIVESENESCENCE,NORMALCELLS,FORCEDEXPRESSIONOFP16,SENESCENTCELLS,ACTINSTRESSFIBERSORANGEFOCALCONTACTSWITHTHESUBSTRATEYELLOW,PAGE12,ROLEOFLARGETANTIGENINCIRCUMVENTINGSENESCENCEINACTIVATIONOFBOTHPRBANDP53ISNEEDEDTOENSURETHATTHESECELLSDONOTSENESCEINCULTURETHISCANBEARCHIVEDTHROUGHTHEEXPRESSIONOFTHESV40LARGETANTIGENINTHETARGETCELLS,PAGE13,EVIDENCEOFSENESCENTCELLSINLIVINGTISSUESADEFINITIVEPROOFTHATSENESCENCEISANINVIVOPHENOMENONISCRITICALTOOURUNDERSTANDINGOFCANCERDEVELOPMENT,BRCA1MUTANTWHICHISINVOLVEDINMAINTAININGGENOMICINTEGRITY,THEPRESENCEOFSENESCENTHUMANMELANOCYTSWITHINDYSPLASTICNEVI,TREATMENTOFTUMORSWITHCHEMOTHERAPEUTICDRUGSCARBOPLATINANDTAXOLPRIORTOSURGICALEXCISIONOFTHETUMOR,PAGE14,SENESCENCEREPRESENTSAHALTINCELLPROLIFERATIONWITHRETENTIONOFCELLVIABILITYOVEREXTENDEDPERIODSOFTIME,WHILECRISISINVOLVESDEATHBYAPOPTOSISSENESCENTCELLSSEEMTOHAVEAREASONABLYBUTNOTTOTALLYSTABLEKARYOTYPE,WHILECELLSINCRISISSHOWWIDESPREADKARYOTYPICINSTABILITY,危象的時(shí)相、形態(tài)變化提示其觸發(fā)機(jī)制是獨(dú)立于衰老的，啟動(dòng)危象的分子裝置確實(shí)是細(xì)胞譜系從胚胎早期（進(jìn)入GROWTHANDDIVISIONCYCLE以后記錄細(xì)胞連續(xù)傳代的功能性計(jì)數(shù)裝置,THEPROLIFERATIONOFCULTUREDCELLSISLIMITEDBYTHETELOMERESOFTHEIRCHROMOSOMES,PAGE15,BARBARAMCCLINTOCK1941年報(bào)道了玉米染色人體端粒和轉(zhuǎn)座子，獲得1983年諾獎(jiǎng),TELOMERESDETECTEDBYFISHLEFT,RIGHTKARYOTYPESEENINLEFTCOMPAREDWITHTHATOFCELLSHAVEBEENDEPRIVEDOFTRF2實(shí)驗(yàn)室DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)顯現(xiàn)出哺乳動(dòng)物染色體線狀結(jié)構(gòu)的致命缺陷。真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染DNA需要線狀化使其不穩(wěn)定TA質(zhì)粒,PAGE16,SHORTENINGOFTELOMERICDNA5′TTAGGG3′TANDEMLYREPEATEDHEXANUCLEOTIDESEQUENCEINCONCERTWITHCELLPROLIFERATION,PAGE17,DICENTRICCHROMOSOMES,ANAPHASEBRIDGES,ANDINTERNUCLEARBRIDGES,PAGE18,MECHANISMSOFBREAKAGEFUSIONBRIDGECYCLES,PAGE19,端粒與細(xì)胞危象進(jìn)入危象的細(xì)胞準(zhǔn)確的呈現(xiàn)染色體缺失端粒時(shí)的核型紊亂模式。這些細(xì)胞內(nèi)融合的染色體（BREAKAGEFUSIONBRIDGE）端粒很短，甚至端粒全無(wú)。提示觸發(fā)細(xì)胞危象分子機(jī)制存在于端粒內(nèi)。,PAGE20,測(cè)量端粒DNA的長(zhǎng)度不能準(zhǔn)確預(yù)測(cè)細(xì)胞的增殖潛能即便已知一個(gè)細(xì)胞端粒DNA的長(zhǎng)度，該細(xì)胞距離危象的增殖代數(shù)并不能精確預(yù)測(cè)。一個(gè)細(xì)胞內(nèi)的端粒縮短速率不同，細(xì)胞內(nèi)最短的端?？赡軟Q定細(xì)胞的增殖潛能，因?yàn)檫@個(gè)端粒將決定最早的斷裂融合橋接出現(xiàn)時(shí)間，從而發(fā)生危象。此外，我們不知道端粒短到何種程度才失去其保護(hù)功能。有時(shí)數(shù)KB長(zhǎng)的端粒已失去保護(hù)染色體端端融合的能力。,PAGE21,INCIPIENTCANCERCELLSCANESCAPECRISISBYEXPRESSINGTELOMERASE,THETELOMERICREPEATAMPLIFICATIONPROTOCOLASSAYTRAPASSAY,PAGE22,ACTIVATIONOFTELOMERASEACTIVITYFOLLOWINGESCAPEFROMCRISIS,PAGE23,PREVENTIONOFCRISISBYEXPRESSIONOFTELOMERASE,體外培養(yǎng)細(xì)胞的危象及重生是體內(nèi)癌前細(xì)胞克隆的重現(xiàn)癌前細(xì)胞克隆進(jìn)入永生的途徑重建端粒端粒酶是端粒重建的關(guān)鍵8590人體腫瘤可檢測(cè)到明顯的端粒酶活性ACQUISITIONOFTELOMERASEACTIVITYISACAUSEOFESCAPEFROMCRISISRATHERTHANACORRELATE,PAGE24,1、端粒酶全酶是由多種、不同的（MULTIPLE,DISTINCT）亞單位構(gòu)成，在正常、危象前的人體細(xì)胞缺失的唯一亞單位是催化亞單位。端粒酶全酶其他亞單位（包括HTR端粒酶相關(guān)RNA分子）在危象前的細(xì)胞均適量?jī)?chǔ)存。2、端粒酶的表達(dá)（而不是其它酶）允許細(xì)胞規(guī)避危象，因?yàn)槎肆Ｃ柑禺惖刈饔糜诙肆NA，所以縮短的端粒確實(shí)是危象的關(guān)鍵原因。3、實(shí)驗(yàn)顯示，端粒酶活性的獲得（從大量進(jìn)入危象的細(xì)胞群中自主產(chǎn)生的變異細(xì)胞）足以使細(xì)胞逃逸危象，其產(chǎn)生的子代細(xì)胞能夠無(wú)限制生長(zhǎng)（永生化）。,PAGE25,TELOMERASEPLAYSAKEYROLEINTHEPROLIFERATIONOFHUMANCANCERCELLS,PAGE26,TELOMERASEACTIVITYANDTHEPROGNOSISOFPEDIATRICTUMORS,PAGE27,EARLYPASSAGECELLS,40POPULATIONDOUBLINGSLATERHTERTISADISTANTRELATIVEOFTHEREVERSETRANSCRIPTASEOFHIV,COPYCHOICEMISMATCHREPAIRMECHANISMMAYBEINVOLVED,BECAUSETHEALTSTATEISREADILYACTIVATEDWHENSOMEOFTHEGENESWEREDEPRIVEDONEOFTHEFUNCTIONSOFMISMATCHREPAIRISTOSUPPRESSRECOMBINATIONBETWEENIMPERFECTLYHOMOLOGOUSDNASEQUENCES,SOMEIMMORTALIZEDCELLSCANMAINTAINTELOMERESWITHOUTTELOMERASE,PAGE28,THEALTISASSOCIATEDPREFERENTIALLYWITHASPECIFICSUBSETOFTUMORS,SUCHASSOFTTISSUESARCOMA,OSTEOSARCOMA,GLIOBLASTOMACELLSINALTSTATETELOMERICDNA＞30KBTELOMERASEPOSITIVECELLS510KBDNTERTFAILSTOINDUCECRISISINALTTUMORCELLLINE●ALTPOSITIVECELLSDONOTDEPENDONTELOMERASEFORTHEIRGROWTH●DNHTERTENZYMEISNOTINTRINSICALLYCYTOTOXICHTERTISADISTANTRELATIVEOFTHEREVERSETRANSCRIPTASEOFHIV,PAGE29,TELOMERESPLAYDIFFERENTROLESINCELLSOFLABMICEANDINHUMANCELLS,EROSIONOFTELOMERESOVERMULTIPLEORGANISMICGENERATIONSINPOPULATIONSOFMTR/MICE,TELOMERICDNAHUMAN/MICE68KB/3040KBMITOSESHUMAN/MICELIFETIME1016/1011,01OFHUMANCELLAND1OFHUMANLIFESPANHUMANCELLIMMORTALIZATION,THEINTRODUCTIONOFBOTHTHESV40LARGETONCOGENETOAVOIDSENESCENCEANDTHEHTERTGENETOAVOIDCRISIS,PAGE30,TELOMEREANDBONEMARROWCOLLAPSEOFDYSKERATOSISCONGENITAXLINKEDFORMOFTHEDISEASE,APROTEINKNOWNASDYSKERINISABSENTORMALFUNCTIONINGDYSKERINASSOCIATESWITHTHETELOMERASEASSOCIATEDRNASUBUNITHTRANDHELPSHTRTOASSEMBLEINTHETELOMERASEHOLOENZYMEANAUTOSOMALDOMINANTVERSIONOFTHESAMEDISEASEISCAUSEDBYTHEINHERITANCEOFADEFECTIVEHTRENCODINGGENECELLSINPROLIFERATINGTISSUESOFAFFECTEDINDIVIDUALSEXHIBITDICENTRICCHROMOSOMES,WHICHAREINDICATIVEOFINTERCHROMOSOMALFUSIONS,

簡(jiǎn)介：第一章細(xì)胞是生物體的基本結(jié)構(gòu),第二節(jié)植物細(xì)胞,臨清市清華園學(xué)校鄭元明,1、生物課本“想一想議一議”，萌萌為什么沒(méi)有觀察到菠菜葉細(xì)胞答顯微鏡只能觀察薄而透明的物體，菠菜葉不透明，所以觀察不到。2、我們?cè)趺磶退鉀Q這個(gè)問(wèn)題答我們可以取少量的菠菜葉，制成玻片標(biāo)本進(jìn)行觀察。,教學(xué)目標(biāo)1、舉例說(shuō)出玻片的基本類(lèi)型。2、學(xué)會(huì)制作植物細(xì)胞臨時(shí)裝片，能繪制植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)圖。3、認(rèn)識(shí)植物細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)及各部分的功能。重點(diǎn)認(rèn)識(shí)植物細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)及各部分的功能。難點(diǎn)學(xué)會(huì)制作植物細(xì)胞臨時(shí)裝片，能繪制植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)圖,玻片標(biāo)本的分類(lèi),,切片,涂片,裝片,,,,用從生物體上切取的薄片制成,用液體的生物材料經(jīng)過(guò)涂抹制成,用從生物體上撕下或挑取的少量材料制成,非常微小的生物可直接做成裝片,,,觀察實(shí)驗(yàn),植物細(xì)胞臨時(shí)裝片制作方法,目的1、學(xué)習(xí)制作洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮細(xì)胞臨時(shí)裝片；2、練習(xí)畫(huà)細(xì)胞結(jié)構(gòu)圖；3、觀察植物細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)。,,排序,1、用潔凈的紗布把載玻片和蓋玻片擦拭干凈,2、把載玻片放在試驗(yàn)臺(tái)上，用滴管在載玻片的中央滴一滴清水。,2、制作步驟,準(zhǔn)備,用鑷子從洋蔥鱗片葉內(nèi)側(cè)撕取一小塊透明薄膜內(nèi)表皮。,把撕下的內(nèi)表皮浸入載玻片的水滴中，用鑷子把它展平。,,用鑷子夾起蓋玻片，使它的一邊先接觸載玻片上的水滴，然后緩緩地放下，蓋在要觀察的材料上。,思考這樣做的原因,,3、染色步驟,把一滴稀碘液滴在蓋玻片的一側(cè)。,用吸水紙從蓋玻片的另一側(cè)吸引，使染液浸潤(rùn)標(biāo)本的全部。,植物細(xì)胞臨時(shí)裝片的制作和觀察,擦→滴→撕→展→蓋→染→吸1擦擦拭載玻片和蓋玻片2滴用滴管在載玻片中央滴一滴清水3撕用鑷子從洋蔥鱗片內(nèi)表皮葉上撕取一塊4展展平放于水滴中央5蓋蓋蓋玻片，從水滴一邊逐漸放下，防止產(chǎn)生氣泡6染把一滴碘液滴在蓋玻片的一側(cè)7吸用吸水紙從蓋玻片的另一側(cè)吸引,使染液浸潤(rùn)標(biāo)本,制作步驟,洋蔥表皮細(xì)胞,黃瓜表層果肉細(xì)胞,生物圖的畫(huà)法和注意事項(xiàng),1、用3H繪畫(huà)筆2、依照在低倍顯微鏡下觀察到的物象，選一個(gè)細(xì)胞畫(huà)出各部分，周?chē)募?xì)胞只勾出輪廓就可以了。,,3、圖中比較暗的地方，用鉛筆點(diǎn)上細(xì)點(diǎn)來(lái)表示（越暗的地方，細(xì)點(diǎn)越多。不能涂陰影表示暗處）。4、字盡量注在圖的右側(cè)。用尺引出水平的指示線，然后注字。5、在圖的下方寫(xiě)出所畫(huà)圖形的名稱,洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮細(xì)胞模式圖,課堂練習(xí)一、找茬游戲1植物細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞壁。2細(xì)胞膜里具有遺傳物質(zhì)。3擠壓水果可以得到果汁，這些汁液主要來(lái)自細(xì)胞核。4撕取洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮制成的玻片叫涂片。5在光學(xué)顯微鏡下不容易看清楚的細(xì)胞結(jié)構(gòu)是細(xì)胞核。,植物細(xì)胞有細(xì)胞壁,細(xì)胞核里具有遺傳物質(zhì)。,擠壓水果可以得到果汁，這些汁液主要來(lái)自液泡。,撕取洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮制成的玻片叫裝片。,在光學(xué)顯微鏡下不容易看清楚的細(xì)胞結(jié)構(gòu)是細(xì)胞膜。,二搶答題,1、為了使臨時(shí)裝片內(nèi)不產(chǎn)生氣泡或少產(chǎn)生氣泡，蓋蓋玻片時(shí)應(yīng)該（）A把蓋玻片平放在載玻片上B事先多滴幾滴清水C讓蓋玻片的一邊接觸載玻片的水滴，重重地壓D讓蓋玻片的一邊接觸載玻片的水滴，輕輕地平放,2、植物細(xì)胞中，具有支持和保護(hù)細(xì)胞作用的結(jié)構(gòu)是（）A細(xì)胞壁B細(xì)胞膜C細(xì)胞質(zhì)D細(xì)胞核3、用顯微鏡觀察洋蔥鱗片的表皮細(xì)胞,在視野中可觀察到其（）A排列緊密、卵圓形B排列緊密、長(zhǎng)方形C排列疏松、卵圓形D排列疏松、長(zhǎng)方形,4、細(xì)胞的結(jié)構(gòu)由外向里依次是（）A細(xì)胞膜、細(xì)胞壁、細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)B細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核C細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)D細(xì)胞壁、細(xì)胞核、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)5、在觀察臨時(shí)裝片時(shí)，如在視野中看到中央發(fā)亮、周邊黑暗的圓圈，該圓圈可能是（）A污物B氣泡C細(xì)胞D墨水,1、說(shuō)出圖中各結(jié)構(gòu)的名稱。2、結(jié)構(gòu)①對(duì)細(xì)胞有保護(hù)和作用,含有細(xì)胞液的結(jié)構(gòu)是；含有遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)是；。。,,,,二識(shí)圖題,支持,液泡,細(xì)胞核,1細(xì)胞壁,2細(xì)胞膜,3葉綠體,4細(xì)胞核,5液泡,6細(xì)胞質(zhì),同學(xué)們?cè)僖?jiàn),

簡(jiǎn)介：1課程編號(hào)H1402017生物技術(shù)綜合大實(shí)驗(yàn)（一）教學(xué)大綱一、實(shí)驗(yàn)課程基本信息課程編號(hào)H1402017課程學(xué)時(shí)／實(shí)驗(yàn)課程學(xué)分4適用專業(yè)生物技術(shù)開(kāi)課學(xué)期5實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)60應(yīng)做實(shí)驗(yàn)個(gè)數(shù)3～4所屬實(shí)驗(yàn)室生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心二、實(shí)驗(yàn)教學(xué)目的及要求生物技術(shù)綜合大實(shí)驗(yàn)（一）是為生物技術(shù)專業(yè)高年級(jí)學(xué)生開(kāi)設(shè)的一門(mén)設(shè)計(jì)及研究性實(shí)驗(yàn)課程。課程實(shí)驗(yàn)題材大多數(shù)來(lái)自于老師的科研項(xiàng)目，創(chuàng)新性強(qiáng)，反映前沿?zé)狳c(diǎn)。旨在通過(guò)本課程的學(xué)習(xí)，培養(yǎng)本科生創(chuàng)新意識(shí)和提高他們綜合運(yùn)用前期的理論和實(shí)驗(yàn)知識(shí)獨(dú)立地分析問(wèn)題與解決問(wèn)題的能力、科研能力和團(tuán)隊(duì)精神，為培養(yǎng)基礎(chǔ)厚、知識(shí)新、素質(zhì)高、能力強(qiáng)的創(chuàng)新型和研究型人才打下良好的基礎(chǔ)。要求學(xué)生在掌握基礎(chǔ)知識(shí)理論的前提下，分小組獨(dú)立設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，并主完成，并提交論文報(bào)告。三、實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)的基本要求1、預(yù)習(xí)要求（課前預(yù)習(xí)，基本理論和原理要求等）學(xué)生在每次實(shí)驗(yàn)前，查閱相關(guān)文獻(xiàn)，明確實(shí)驗(yàn)原理、所涉及的主要方法和技術(shù)，預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果等，并設(shè)計(jì)完整的實(shí)驗(yàn)方案。2、實(shí)驗(yàn)操作方面的要求運(yùn)用基礎(chǔ)理論知識(shí)，規(guī)范操作的前提下，逐步完成設(shè)計(jì)內(nèi)容，并解決實(shí)驗(yàn)中遇到的問(wèn)題。3、實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求按規(guī)定時(shí)間完成論文報(bào)告。實(shí)驗(yàn)報(bào)告中除了報(bào)告實(shí)驗(yàn)結(jié)果外，還要對(duì)實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的異常情況和現(xiàn)象進(jìn)行分析、說(shuō)明和討論。四、考核形式及要求本課程的考核是以平時(shí)成績(jī)?yōu)榛A(chǔ)，期末采取筆試和實(shí)驗(yàn)操作考核相結(jié)合，筆試實(shí)行閉卷考試，操作部分采取分組選題、同時(shí)操作，三名教師同時(shí)觀察、記分，取平均成績(jī)。最后，綜合得到總成績(jī)，構(gòu)成為總成績(jī)平時(shí)成績(jī)30＋筆試成績(jī)35＋操作面試35。五、實(shí)驗(yàn)教材及參考書(shū)目實(shí)驗(yàn)教材潘繼承等生物學(xué)綜合實(shí)驗(yàn)武漢華中科技大學(xué)出版社，20102六、實(shí)驗(yàn)教學(xué)計(jì)劃表項(xiàng)目編號(hào)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)每組人數(shù)實(shí)驗(yàn)類(lèi)別實(shí)驗(yàn)性質(zhì)實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求01精氨酸激酶（ARGININEKINASEAK）的表達(dá)與純化154選做綜合了解IPTG誘導(dǎo)目的基因表達(dá)的基本過(guò)程；掌握利用親和層析的基本原理及方法；強(qiáng)化聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)。02食用植物油脂品質(zhì)檢驗(yàn)154選做綜合學(xué)習(xí)實(shí)際樣品的分析方法及相關(guān)技能。掌握鑒別食用植物油脂品質(zhì)的基本感官鑒別方法。03檸檬酸液體深層發(fā)酵和提取204選做綜合鞏固發(fā)酵設(shè)備的操作技術(shù)；掌握發(fā)酵過(guò)程的控制和檢測(cè)技術(shù)；掌握檸檬酸提取工藝。04藻膽蛋白生物合成及其光譜分析254選做綜合掌握工程菌的表達(dá)方式；熟悉紫外分光光度計(jì)和熒光光譜儀的原理和使用方法；掌握基本的凝膠電泳方法以及色素蛋白親和層析提純法。05VHB基因在黑曲霉中的表達(dá)及其抗體的制備154選做綜合學(xué)生在熟練掌握分子克隆技術(shù)的基礎(chǔ)上，靈活運(yùn)用所學(xué)知識(shí)和技術(shù)，創(chuàng)造性開(kāi)展實(shí)驗(yàn)工作06典型污染物對(duì)淡水腹足動(dòng)物的毒理效應(yīng)154選做綜合訓(xùn)練學(xué)生掌握簡(jiǎn)單、有效的檢測(cè)重金屬及持久性有機(jī)污染物毒理效應(yīng)的生物標(biāo)志物方法及原理07枯草芽孢桿菌發(fā)酵劑的制備及應(yīng)用技術(shù)154選做綜合掌握自然界是菌種分離技術(shù)；掌握固體發(fā)酵技術(shù)；了解微生物應(yīng)用技術(shù)。08植物總DNA的提取及特定序列的PCR擴(kuò)增154選做綜合掌握植物DNA的提取技術(shù)；掌握瓊脂糖凝膠電腦技術(shù)；了解DNA的檢驗(yàn)技術(shù)。09土壤微生物總DNA的提取與純化154選做綜合掌握土壤中DNA的提取技術(shù)；掌握瓊脂糖凝膠電腦技術(shù)；了解DNA的檢驗(yàn)技術(shù)；掌握DNA的分離技術(shù)。60注實(shí)驗(yàn)類(lèi)別只填必做、選做兩類(lèi)中的一類(lèi)。實(shí)驗(yàn)性質(zhì)只填基礎(chǔ)、綜合、設(shè)計(jì)三類(lèi)中的一類(lèi)。執(zhí)筆人胡遠(yuǎn)亮

簡(jiǎn)介：第一講細(xì)胞生物學(xué)概述細(xì)胞生物學(xué)研究的內(nèi)容與現(xiàn)狀,一、細(xì)胞生物學(xué)是現(xiàn)代生命科學(xué)的重要基礎(chǔ)學(xué)科細(xì)胞生物學(xué)是在顯微、亞顯微與分子水平等不同層次上研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)、功能及生命活動(dòng)規(guī)律的科學(xué)。細(xì)胞生物學(xué)研究的對(duì)象是細(xì)胞。細(xì)胞分子生物學(xué)是當(dāng)前細(xì)胞生物學(xué)發(fā)展的主要方向。細(xì)胞生物學(xué)研究的主要內(nèi)容是細(xì)胞的形態(tài)與結(jié)構(gòu)、代謝與調(diào)控、增殖分化、遺傳變異、衰老與死亡、起源與進(jìn)化、興奮與運(yùn)動(dòng)以及細(xì)胞的傳遞等。,二、細(xì)胞生物學(xué)的主要研究?jī)?nèi)容大致可分為以下幾個(gè)方面一細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究二生物膜與細(xì)胞器的研究三細(xì)胞骨架體系的研究四細(xì)胞增殖及其調(diào)控（五細(xì)胞分化及其調(diào)控六細(xì)胞的衰老與程序死亡七細(xì)胞的起源進(jìn)化八細(xì)胞工程,三、當(dāng)前細(xì)胞生物學(xué)研究的總體趨勢(shì)與重點(diǎn)領(lǐng)域（一）當(dāng)前細(xì)胞生物學(xué)研究中的三大基本問(wèn)題1、細(xì)胞內(nèi)的基因組是如何在時(shí)間與空間上有序表達(dá)的2、基因表達(dá)的產(chǎn)物如何逐級(jí)裝配成基本結(jié)構(gòu)體系及各種細(xì)胞器3、基因表達(dá)的產(chǎn)物如何調(diào)節(jié)細(xì)胞最重要的生命活動(dòng)過(guò)程的,（二）當(dāng)前細(xì)胞基本生命活動(dòng)研究的若干重大課題1、染色體DNA與蛋白質(zhì)相互作用關(guān)系主要是非組蛋白對(duì)基因組的作用。2、細(xì)胞增殖、分化、凋亡（程序性死亡）的相互關(guān)系及調(diào)控3、細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)的研究4、細(xì)胞結(jié)構(gòu)體系的裝配,一、細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)英國(guó)學(xué)者胡克于1665年制造了第一臺(tái)有科研價(jià)值的顯微鏡，第一次描述了植物細(xì)胞的構(gòu)造，細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)是在1665年。16771683年，荷蘭人列文胡克用自己設(shè)計(jì)好的顯微鏡第一次觀察到活細(xì)胞。二、細(xì)胞學(xué)說(shuō)的建立及其意義1、建立18381839年德國(guó)植物學(xué)家施萊登和動(dòng)物學(xué)家施旺提出一切植物、動(dòng)物都是由細(xì)胞組成的，細(xì)胞是一切動(dòng)植物的基本單位，這就是著名的“細(xì)胞學(xué)說(shuō)”。2、細(xì)胞學(xué)說(shuō)的基本內(nèi)容①一切有機(jī)體都是由細(xì)胞發(fā)育而來(lái)的，并由細(xì)胞和細(xì)胞產(chǎn)物所構(gòu)成；②每個(gè)細(xì)胞是一個(gè)相對(duì)獨(dú)立的單位，執(zhí)行特定的功能；③細(xì)胞只能通過(guò)細(xì)胞分裂而來(lái)。,第二講細(xì)胞概述,（一）細(xì)胞的概念細(xì)胞是生命活動(dòng)的基本單位細(xì)胞是有膜包圍的能進(jìn)行獨(dú)立繁殖的最小原生質(zhì)團(tuán)，簡(jiǎn)單地說(shuō)細(xì)胞是生命活動(dòng)的基本單位。可以從以下角度去理解①細(xì)胞是構(gòu)成有機(jī)體的基本單位；②細(xì)胞是有是代謝與功能的基本單位，有嚴(yán)格自動(dòng)控制的代謝體系，并且有保證完成生命過(guò)程有序性的獨(dú)立的結(jié)構(gòu)裝置。③有機(jī)體的生長(zhǎng)發(fā)育是依靠細(xì)胞增殖、分化與凋亡來(lái)實(shí)現(xiàn)的。細(xì)胞是有機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育的基礎(chǔ)；④細(xì)胞具有遺傳的全能性（除少數(shù)特化細(xì)胞），是遺傳的基本單位。,（二）細(xì)胞的基本共性細(xì)胞的基本共性有①所有細(xì)胞都有細(xì)胞膜；②所有細(xì)胞都有DNA與RNA；③細(xì)胞都有核糖體；④細(xì)胞都以一分為二的方式分裂增殖。,,三、細(xì)胞,（三）細(xì)胞的種類(lèi),A、特點(diǎn)①無(wú)典型的細(xì)胞核，遺傳物質(zhì)僅由一個(gè)裸露的環(huán)狀DNA構(gòu)成；②細(xì)胞內(nèi)沒(méi)有分化出以膜為基礎(chǔ)的細(xì)胞器與細(xì)胞核膜。,1、種類(lèi)繁多的細(xì)胞可以分為原核細(xì)胞、古核細(xì)胞與真核細(xì)胞。,2、原核細(xì)胞,B、種類(lèi)大約出現(xiàn)在35億年前，包括支原體、衣原體、立克次體、細(xì)菌、放線菌及藍(lán)藻藍(lán)細(xì)菌等6類(lèi)。,支原體支原體是目前發(fā)現(xiàn)的最小、最簡(jiǎn)單的細(xì)胞，直徑只有0103ΜM,能在體外生長(zhǎng)，也能寄生在細(xì)胞內(nèi)。,細(xì)菌（1）形態(tài)球菌、桿菌、螺旋菌。（2）核區(qū)與基因一個(gè)環(huán)狀的DNA分子盤(pán)繞在核區(qū)，沒(méi)有或有極少的組蛋白，無(wú)明顯的FEULGEN（福爾根）反應(yīng)。DNA復(fù)制不受細(xì)胞分裂周期的限制，可以連續(xù)進(jìn)行，且DNA復(fù)制、RNA轉(zhuǎn)錄、蛋白質(zhì)翻譯可以同時(shí)進(jìn)行,這是細(xì)菌乃至整個(gè)原核細(xì)胞與真核細(xì)胞最顯著的差異之一。,（3）細(xì)菌細(xì)胞的表面結(jié)構(gòu)主要指細(xì)胞膜、細(xì)胞壁及其特化結(jié)構(gòu)中膜體、莢膜、鞭毛等。細(xì)胞膜是細(xì)胞表面的重要結(jié)構(gòu)。,細(xì)胞膜的功能包括①選擇性地物質(zhì)運(yùn)輸；②細(xì)菌細(xì)胞膜有豐富的酶系，執(zhí)行重要的代謝功能。中膜體由細(xì)胞膜內(nèi)陷形成，可能起DNA復(fù)制的支點(diǎn)作用細(xì)胞壁的共同成分是肽聚糖，革蘭氏陽(yáng)性菌與陰性菌細(xì)胞壁成分與結(jié)構(gòu)差異明顯。莢膜是某些細(xì)菌表面的特殊結(jié)構(gòu)，是位于細(xì)胞壁表面的一層粘液物質(zhì)。鞭毛是某些細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,（4）細(xì)菌細(xì)胞的核糖體核糖體的沉降系數(shù)為70S，由50S大亞單位和30S亞單位組成。大亞單位含有23SRRNA,5SRRNA和30多種蛋白質(zhì)，對(duì)紅霉素與氯霉素敏感；小亞單位含有16SRNA與20多種蛋白質(zhì)，對(duì)四環(huán)素與鏈霉素敏感。,（5）細(xì)菌細(xì)胞擬核外DNA擬核外DNA質(zhì)粒。裸露的環(huán)狀DNA，能自我復(fù)制，并可整合到核DNA中。,（6）細(xì)菌細(xì)胞的內(nèi)生孢子又稱芽孢，是對(duì)不良環(huán)境有強(qiáng)抵抗力的休眠體。是細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的重要物質(zhì)特別是DNA，積聚在細(xì)胞的一端，形成致密體，可度過(guò)惡劣環(huán)境。,藍(lán)藻又稱藍(lán)細(xì)菌，是原核生物，又是最簡(jiǎn)單的自養(yǎng)植物類(lèi)型之一。藍(lán)藻含有豐富的色素，可進(jìn)行類(lèi)似高等植物的光合作用。其中央相當(dāng)于細(xì)菌的核區(qū)；光合作用片層由藻膽蛋白構(gòu)成，作用是將光能傳遞給葉綠素A；細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含物有的是儲(chǔ)存的養(yǎng)料，有的功能不詳；細(xì)胞膜外有細(xì)胞壁和膠質(zhì)層鞘。,C、原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的比較原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的根本區(qū)別①細(xì)胞膜系統(tǒng)的分化演變；②遺傳信息量與遺傳裝置的擴(kuò)增與復(fù)雜化。由于上述的根本差異，真核細(xì)胞的體積也相應(yīng)擴(kuò)增，細(xì)胞內(nèi)部出現(xiàn)精密的網(wǎng)架結(jié)構(gòu)細(xì)胞骨架。二者的區(qū)別可分為兩部分進(jìn)行比較①結(jié)構(gòu)與功能比較真核細(xì)胞的生物膜將細(xì)胞分化為核與質(zhì)兩部分，細(xì)胞質(zhì)又分化出各種細(xì)胞器，細(xì)胞骨架又保證了細(xì)胞形態(tài)的合理排布與執(zhí)行功能的有序性②細(xì)胞遺傳裝置與基因表達(dá)方式的比較核膜使擴(kuò)增了的遺傳信息與復(fù)雜的遺傳裝置相對(duì)獨(dú)立，使基因表達(dá)的程序有嚴(yán)格的階段性與區(qū)域性。,古細(xì)菌（又稱原細(xì)菌）是一些生長(zhǎng)在極端特殊環(huán)境中（高溫或高鹽）的細(xì)菌。最早發(fā)現(xiàn)的是產(chǎn)甲烷細(xì)菌類(lèi)。古核細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)、遺傳裝置雖與原核細(xì)胞相似，但一些基本分子生物學(xué)特點(diǎn)又與真核細(xì)胞接近?，F(xiàn)已有更多的論據(jù)說(shuō)明真核生物可能起源于古核生物，論據(jù)如下（1）古細(xì)菌的細(xì)胞壁成分與真核細(xì)胞一樣；（2）古核細(xì)胞DNA中有重復(fù)序列的存在；（3）具有組蛋白；（4）古核細(xì)胞的核糖體與真細(xì)菌的差異很大，從對(duì)抗生素的反應(yīng)看，應(yīng)更類(lèi)似真核細(xì)胞的核糖體（5）根據(jù)對(duì)5SRRNA的分子進(jìn)化分析和二級(jí)結(jié)構(gòu)的研究，認(rèn)為古細(xì)菌與真核生物同屬一類(lèi)。而真細(xì)菌卻與之差別甚遠(yuǎn)。,3、古核細(xì)胞（古細(xì)菌）,4、真核細(xì)胞,1）、真核細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)體系①生物膜系統(tǒng)細(xì)胞表面是一種多功能結(jié)構(gòu)；核膜又把細(xì)胞分為細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞核。以生物膜系統(tǒng)為基礎(chǔ)形成了各種細(xì)胞器。線粒體、葉綠體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體及溶酶體等。②遺傳信息表達(dá)結(jié)構(gòu)系統(tǒng)由DNA蛋白質(zhì)與RNA蛋白質(zhì)復(fù)合體形成的遺傳信息載體與表達(dá)系統(tǒng)，一般以顆?；蚶w維狀的基礎(chǔ)結(jié)構(gòu)存在。包括染色質(zhì)，核仁、核糖體等。③細(xì)胞骨架系統(tǒng)細(xì)胞骨架由特異的結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)構(gòu)成網(wǎng)架系統(tǒng)，可分為胞質(zhì)骨架與核骨架。,2）、細(xì)胞大小及其分析細(xì)胞體積的守恒規(guī)律。3）、細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系細(xì)胞的形態(tài)與功能具有相關(guān)性與一致性。4）、植物細(xì)胞與動(dòng)物細(xì)胞的比較植物細(xì)胞特有的細(xì)胞結(jié)構(gòu)細(xì)胞壁（主要成分是纖維素）、液泡、葉綠體等；而動(dòng)物細(xì)胞的中心粒在植物細(xì)胞中不常見(jiàn)到。,（1）病毒的基本知識(shí)病毒是由一個(gè)核酸分子DNA或RNA與蛋白質(zhì)構(gòu)成的非細(xì)胞形態(tài)的生命體。類(lèi)病毒僅由一個(gè)有感染性的RNA構(gòu)成。朊病毒僅由有感染性的蛋白質(zhì)構(gòu)成。病毒是完整的寄生物。根據(jù)核酸類(lèi)型不同，病毒可分為DNA病毒與RNA病毒。依據(jù)宿主可分為動(dòng)物病毒、植物病毒和細(xì)菌病毒（噬菌體）等。,5、非細(xì)胞形態(tài)的生命體病毒及其與細(xì)胞的關(guān)系,（2）病毒在細(xì)胞內(nèi)的增殖（復(fù)制）病毒的增殖又稱病毒的復(fù)制，病毒的增殖必須在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行。病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)分別復(fù)制病毒核酸與翻譯病毒蛋白，然后將核酸與蛋白裝配成病毒的基本結(jié)構(gòu)。其復(fù)制過(guò)程大到可分為侵染，脫去衣殼，早基因的復(fù)制與表達(dá)，晚基因的復(fù)制、結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的合成，裝配、成熟與釋放等過(guò)程。,（3）、病毒與細(xì)胞在起源和進(jìn)化中的關(guān)系病毒可能是細(xì)胞在特定條件下“扔出”的一個(gè)基因組，或者是具有復(fù)制與轉(zhuǎn)錄能力的MRNA。這些游離的基因組只有回到它們?cè)瓉?lái)的細(xì)胞內(nèi)環(huán)境中才能進(jìn)行復(fù)制與轉(zhuǎn)錄。,第三講細(xì)胞生物學(xué)研究方法,一、光學(xué)顯微鏡技術(shù)1、普通復(fù)式光學(xué)顯微鏡技術(shù)普通光學(xué)顯微鏡（最大分辨率為02ΜM），主要由三部分組成①光學(xué)放大系統(tǒng)，即目鏡和物鏡；②照明系統(tǒng)；③機(jī)械和支架系統(tǒng)。顯微鏡的性能優(yōu)劣決定于它的分辨率D。分辨率是指顯微鏡區(qū)分開(kāi)相近兩點(diǎn)的能力。,Λ為光源波長(zhǎng)，Α為物鏡鏡口角。N物鏡和標(biāo)本之間介質(zhì)的折射率。,在可見(jiàn)光中，亮度最大時(shí)Ｄ近似為02ΜM。即，使用普通光學(xué)顯微鏡，在中心照明的情況下，分辨距離的極限為02ΜM。也就是說(shuō)，小于02ΜM的兩物體，普通光學(xué)顯微鏡無(wú)法區(qū)分。使用紫外線，可以減小照明光線的波長(zhǎng)，能使分辨距離達(dá)到01ΜM。但因紫外線不能為人眼所見(jiàn)。只能拍成照片后再觀察。電子流的波長(zhǎng)只有000387NM。利用“電子透鏡”或磁透鏡來(lái)控制電子流，所制成的電子顯微鏡的分辨距離達(dá)零點(diǎn)幾NM?？梢杂盟ビ^察原子的結(jié)構(gòu)。,2、熒光顯微鏡技術(shù)在紫外光顯微鏡基礎(chǔ)上發(fā)展而來(lái)，利用樣品自發(fā)熒光和誘發(fā)熒光，可以對(duì)某些生物大分子進(jìn)行定性和定位研究。不僅可以觀察固定切片標(biāo)本，還可以在活體染色后對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行研究。3、激光共焦點(diǎn)掃描顯微鏡技術(shù)共焦點(diǎn)是指物鏡和聚光鏡同時(shí)聚焦到同一小點(diǎn)。它在某一瞬間只用一束通過(guò)檢測(cè)器前的小孔的光成像，可顯著提高分辨率?？梢杂^察較厚樣品的內(nèi)部結(jié)構(gòu)。,4、相差顯微鏡技術(shù)和微分干涉顯微鏡技術(shù)光線在通過(guò)密度不同的介質(zhì)時(shí)，其滯留程度不同，即產(chǎn)生了光程差和相位差。相差顯微鏡的基本原理把光程差變成振幅差即明暗。從而提高樣品反差，故樣品不需染色，適合觀察活細(xì)胞。甚至研究細(xì)胞核、線粒體等細(xì)胞器的動(dòng)態(tài)。它在結(jié)構(gòu)上與普通顯微鏡最大的不同是在物鏡后裝有相差板。微分干涉顯微鏡用的是偏振光，增加了樣品反差，并具有立體感，可作于研究活體細(xì)胞中較大的細(xì)胞器。錄像增差顯微鏡技術(shù)在一定程度上可以填補(bǔ)光鏡與電鏡之間分辨率上的間隙。,,二、電了顯微鏡技術(shù)（一）電了顯微鏡基本知識(shí)分辨率最終決定于光的波長(zhǎng)，由于使用電子束作光源，電鏡的分辨率大大提高。電鏡的分辨率常常是超薄切片厚度的1/10，它的分辨率可達(dá)02NM，其放大倍數(shù)為106倍。電鏡的基本構(gòu)造包括①電子束照明系統(tǒng)；②電磁透鏡成像系統(tǒng)；③真空系統(tǒng)；④記錄系統(tǒng)；⑤電源系統(tǒng)。（二）主要電鏡制樣技術(shù)介紹樣品制備技術(shù)的特殊要求①樣品要??；②更好地保持樣品的精細(xì)結(jié)構(gòu)；③樣品具有一定的反差。,,主要的用于觀察生物樣品的電鏡技術(shù)有①超薄切片技術(shù)；是觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)。②負(fù)染色技術(shù)；③冷凍斷裂和冷凍蝕刻電鏡技術(shù)；④電鏡三維重構(gòu)技術(shù)；⑤掃描電鏡技術(shù)（SEM）是觀察細(xì)胞表面形的有力工具。（三）掃描隧道顯微鏡STM是一種探測(cè)微觀世界物質(zhì)表面形貌的儀器，在納米生物學(xué)的研究領(lǐng)域具有獨(dú)特的優(yōu)越性。STM的特點(diǎn)①具有原子尺度的高分辨本領(lǐng)；②可在真空、大氣、液體等條件下工作；③非破壞性測(cè)量。,三、離心技術(shù)細(xì)胞組分的分析方法,細(xì)胞成分分析和形態(tài)學(xué)觀察相結(jié)合，可揭示生物大分子在細(xì)胞內(nèi)的構(gòu)建及功能。（一）用差速離心技術(shù)分離細(xì)胞器與生物大分子及其復(fù)合物利用多種方法使細(xì)胞崩解，形成細(xì)胞器和細(xì)胞組分的混合勻漿，再通過(guò)差速離心，即利用不同的離心速度所產(chǎn)生的不同離心力，將各種亞細(xì)胞組分和各種顆粒分開(kāi)。（二）用平衡密度梯度離心技術(shù)分離精確分離細(xì)胞不同組分沉降率不同，主要依賴于它們的形狀和大小，通常以沉降系數(shù)S來(lái)表示沉降系數(shù)是指懸浮在密度較低的溶劑中的一種溶質(zhì)大分子，在每單位離心場(chǎng)作用下的沉降速率。,原位成分分析常利用一些顯色劑與所檢物質(zhì)的特殊基團(tuán)特異性結(jié)合的特征，通過(guò)染色反應(yīng)的部位和顏色的深淺來(lái)斷某種物質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布與含量。福爾根FEULGEN反應(yīng)可特異顯示DNA的存在部位。PAS反應(yīng)可確定多糖的存在。四氧化鋨可證明脂肪滴的存在。蘇丹Ⅲ和蘇丹黑也常用于脂肪的鑒定。米倫反應(yīng)及重氮反應(yīng)等用來(lái)測(cè)定蛋白質(zhì)。,四、顯色方法細(xì)胞內(nèi)核酸、蛋白質(zhì)、酶、糖類(lèi)、脂質(zhì)等測(cè)定,五、熒光技術(shù)特異蛋白質(zhì)抗原的定位與定性免疫熒光和免疫電鏡是最常用的細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)定位技術(shù)。1、熒光染色技術(shù)和免疫熒光技術(shù)熒光染色技術(shù)是用熒光素（如核黃素、脂褐素）直接標(biāo)記物質(zhì)，在激發(fā)光的激發(fā)下，看到標(biāo)記物所發(fā)熒光。免疫熒光技術(shù)就是將免疫學(xué)方法與熒光標(biāo)記技術(shù)相結(jié)合研究特異蛋白質(zhì)抗原在細(xì)胞內(nèi)分布的方法。2、免疫電鏡技術(shù)免疫電鏡技術(shù)使特異蛋白的定位與超微結(jié)構(gòu)結(jié)合起來(lái)，使抗原定位更準(zhǔn)確。如蛋白分泌的研究、胞內(nèi)酶的研究、一些結(jié)構(gòu)蛋白的研究。,六、原位雜交技術(shù)細(xì)胞內(nèi)特異核酸的定位與定性用標(biāo)記的核酸探針通過(guò)分子雜交確定特殊核苷酸序列在染色體上或細(xì)胞中的位置的方法。七、放射自顯影技術(shù)研究生物大分子在細(xì)胞內(nèi)的合成動(dòng)態(tài)放射自顯影技術(shù)是利用放射性同位素的電離輻射對(duì)乳膠的感光作用，對(duì)樣品中放射性標(biāo)記物進(jìn)行定性與定位測(cè)定。放射自顯影技術(shù)包括兩個(gè)主要步驟即同位素標(biāo)記的大分子前體的摻入和細(xì)胞內(nèi)同位素所在位置的顯示。基本步驟為摻入、制片、敷膠、曝光、顯影、鏡檢。,第四講細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞工程與顯微操作技術(shù),（一）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)從機(jī)體取出立即培養(yǎng)的細(xì)胞叫原代細(xì)胞（10代）。將原代細(xì)胞分離、稀釋接種到新的培養(yǎng)中繼續(xù)培養(yǎng)的細(xì)胞為傳代細(xì)胞。從原代培養(yǎng)細(xì)胞中分離出來(lái)的可繼續(xù)傳代繁殖到4050的細(xì)胞群體叫細(xì)胞株，細(xì)胞具有接觸抑制的行為，有些具有貼壁生長(zhǎng)的行為，具有正常的遺傳物質(zhì)。從原代細(xì)胞或細(xì)胞株中獲得的可無(wú)限傳代的細(xì)胞叫細(xì)胞系。細(xì)胞無(wú)接觸抑制行為，且具有遺傳突變，帶有癌細(xì)胞的特征。,一、細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)就是將動(dòng)植物組織或細(xì)胞從機(jī)體取出，分散成單個(gè)細(xì)胞或直接以單細(xì)胞生物，給予必要的生長(zhǎng)條件，讓其在培養(yǎng)瓶中或培養(yǎng)基上繼續(xù)生長(zhǎng)與增殖。,（二）動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)即單克隆抗體技術(shù)1975年英國(guó)學(xué)者M(jìn)ILESTEIN等開(kāi)創(chuàng)了將產(chǎn)生抗體的單個(gè)細(xì)胞同瘤細(xì)胞雜交的技術(shù)。他們的設(shè)計(jì)是經(jīng)綿羊紅細(xì)胞免疫過(guò)的小鼠脾細(xì)胞B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，融合的雜交瘤具有兩種親本細(xì)胞的特性即可分泌抗綿羊紅細(xì)胞的抗體，又可無(wú)限增殖。學(xué)者們紛紛利用這一技術(shù)來(lái)制備針對(duì)不同抗原的高度純一的單克隆抗體。單克隆抗體就是單個(gè)雜交瘤細(xì)胞增殖產(chǎn)生的克隆細(xì)胞群分泌的高度純一的抗體。,動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)即單克隆抗體技術(shù),,,,,,,,,,骨髓瘤細(xì)胞,體外培養(yǎng),從培養(yǎng)液中獲取,抗原,淋巴細(xì)胞,體內(nèi)培養(yǎng),從腹水中提取,單克隆抗體,,,細(xì)胞融合、篩選,雜交瘤細(xì)胞,細(xì)胞培養(yǎng),（三）植物細(xì)胞培養(yǎng)1、單倍體細(xì)胞培養(yǎng)花藥離體培養(yǎng)。（秋水仙素）2、原生質(zhì)體培養(yǎng)去壁的植物細(xì)胞叫原生質(zhì)體。可培養(yǎng)成植株或體細(xì)胞雜交植株。,植物組織培養(yǎng),植物體細(xì)胞雜交,,過(guò)程,離體的植物器官、組織或細(xì)胞,,愈傷組織,根、芽,,植物體,外植體,脫分化,植物激素細(xì)胞分裂素、生長(zhǎng)素,再分化,,植物組織培養(yǎng),,植物組織培養(yǎng)條件,含有全部營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基、一定的溫度、空氣、無(wú)菌環(huán)境、適合的PH、適時(shí)光照等。,融合體,雜種細(xì)胞,去壁的常用方法,原生質(zhì)體融合方法,植物體細(xì)胞雜交過(guò)程示意圖,三、非細(xì)胞體系在細(xì)胞生物學(xué)研究中的作用來(lái)源于細(xì)胞，而不具有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，但包含了正常生物學(xué)反應(yīng)所需的物質(zhì)（供能系統(tǒng)和酶反應(yīng)體系等）組成的體系即為非細(xì)胞體系。四、細(xì)胞工程應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)方法，按照預(yù)先的設(shè)計(jì)，有計(jì)劃地改變或創(chuàng)造細(xì)胞遺傳物質(zhì)的技術(shù)以及發(fā)展這種技術(shù)的領(lǐng)域?yàn)榧?xì)胞工程。細(xì)胞工程所使用的技術(shù)主要是細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞分化的定向誘導(dǎo)、細(xì)胞融合和顯微注射等。,（一）細(xì)胞融合與細(xì)胞雜交技術(shù)真核生物的體細(xì)胞經(jīng)過(guò)培養(yǎng)，兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞融合成一個(gè)雙核或多核細(xì)胞的過(guò)程叫細(xì)胞融合。動(dòng)物細(xì)胞融合一般要用滅活的病毒如仙臺(tái)病毒或化學(xué)物質(zhì)如聚乙二醇，即PEG）介導(dǎo)；植物細(xì)胞事例時(shí)，要用纖維素酶去掉纖維素壁。20世紀(jì)80年代又發(fā)明了電融合技術(shù)。細(xì)胞融合可以在基因型相同的細(xì)胞間進(jìn)行，也可以在基因型不同的種內(nèi)細(xì)胞間甚至種間細(xì)胞間進(jìn)行。,（二）細(xì)胞折合與顯微操作技術(shù)細(xì)胞拆合就是用物理方法（機(jī)械法和短波光）、化學(xué)法（用細(xì)胞松弛素）把細(xì)胞核與質(zhì)分離開(kāi)后將不同來(lái)源的細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞核相互配合，形成核質(zhì)雜交細(xì)胞。顯微操作技術(shù)即在顯微鏡下用顯微操作裝置對(duì)細(xì)胞進(jìn)行解剖和微量注射的技術(shù)。,

簡(jiǎn)介：遼寧師范大學(xué)博士研究生培養(yǎng)方案修訂工作審批表學(xué)院蓋章處專業(yè)名稱細(xì)胞生物學(xué)所屬學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院導(dǎo)師組長(zhǎng)李慶偉聯(lián)系人及聯(lián)系電話尚德靜85827071序號(hào)序號(hào)姓名姓名工作單位工作單位職務(wù)職稱職務(wù)職稱本人簽名本人簽名1李慶偉遼寧師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院副校長(zhǎng)教授2尚德靜遼寧師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院院長(zhǎng)教授3侯和勝遼寧師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院教授4楊紅遼寧師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院教授培養(yǎng)方案制定工作組成員5侯林遼寧師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院教授導(dǎo)師組長(zhǎng)意見(jiàn)根據(jù)學(xué)校的要求，本專業(yè)導(dǎo)師組及教學(xué)骨干教師制定了本培養(yǎng)方案。該培養(yǎng)方案符合遼寧師范大學(xué)博士研究生培養(yǎng)要求，符合細(xì)胞生物學(xué)學(xué)科發(fā)展趨勢(shì)，符合我院的實(shí)際情況，體現(xiàn)了博士研究生培養(yǎng)的創(chuàng)新性。簽名年月日學(xué)術(shù)委員會(huì)意見(jiàn)培養(yǎng)方案可行，同意實(shí)施。學(xué)術(shù)委員會(huì)主席簽字年月日注培養(yǎng)方案上報(bào)研究生院前請(qǐng)完整填報(bào)本表，并簽字蓋章。注培養(yǎng)方案上報(bào)研究生院前請(qǐng)完整填報(bào)本表，并簽字蓋章。和專業(yè)知識(shí)的基礎(chǔ)上，追蹤學(xué)科前沿動(dòng)態(tài)，掌握進(jìn)行創(chuàng)造性研究工作的方法，培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)作風(fēng)。五、課程設(shè)置與學(xué)分1公共學(xué)位課中國(guó)馬克思主義與當(dāng)代，2學(xué)分，36學(xué)時(shí)，第一學(xué)期開(kāi)設(shè)。馬克思主義經(jīng)典著作選讀，1學(xué)分，18學(xué)時(shí)，第二學(xué)期開(kāi)設(shè)。第一外國(guó)語(yǔ)，8學(xué)分，144學(xué)時(shí)，第一、二學(xué)期開(kāi)設(shè)。2專業(yè)學(xué)位課，3門(mén)，3學(xué)分（合計(jì)9學(xué)分），54學(xué)時(shí)，第一、二學(xué)期開(kāi)設(shè)。3專業(yè)方向課，一門(mén)，2學(xué)分，36學(xué)時(shí)，第二學(xué)期開(kāi)設(shè)。4任意選修課，24學(xué)分，博士生根據(jù)自己的實(shí)際情況選修12門(mén)課程，其學(xué)分記入總學(xué)分。六、學(xué)術(shù)研討和學(xué)術(shù)報(bào)告博士研究生在學(xué)期間參加學(xué)術(shù)活動(dòng)是培養(yǎng)過(guò)程中鞏固基礎(chǔ)、提高質(zhì)量的必要環(huán)節(jié)。為培養(yǎng)研究生的學(xué)術(shù)研究能力和語(yǔ)言表達(dá)能力，營(yíng)造良好的學(xué)術(shù)氛圍，提高研究生培養(yǎng)質(zhì)量，豐富學(xué)院學(xué)術(shù)文化生活，研究生在校期間參加各種類(lèi)型的學(xué)術(shù)活動(dòng)不得少于10次。研究生學(xué)術(shù)報(bào)告包括自己作專題學(xué)術(shù)報(bào)告、參加學(xué)術(shù)報(bào)告會(huì)、前沿講座以及各種專題研討班等。七、中期考核為確保博士研究生的培養(yǎng)質(zhì)量，博士生在入學(xué)后第三學(xué)期末，進(jìn)行一次中期考核，學(xué)院學(xué)位評(píng)定分委員會(huì)對(duì)博士研究生進(jìn)行一次全面考核，內(nèi)容包括思想品德和治學(xué)態(tài)度、課程學(xué)習(xí)、科研和工作能力等。經(jīng)考核通過(guò)才能取得規(guī)定的學(xué)分。八、學(xué)位（畢業(yè)）論文（一）論文開(kāi)題學(xué)位論文開(kāi)題是研究生寫(xiě)作論文的必經(jīng)過(guò)程，寫(xiě)作學(xué)位論文之前都必須參加開(kāi)題報(bào)告會(huì)。無(wú)特殊情況，博士生應(yīng)在入學(xué)后第三學(xué)期第五周至第四學(xué)期第十周期間完成學(xué)位論文開(kāi)題報(bào)告并參加博士論文開(kāi)題報(bào)告會(huì)。二學(xué)位論文學(xué)位論文導(dǎo)師指導(dǎo)，團(tuán)隊(duì)協(xié)助。一般在入學(xué)后第三學(xué)期提出論文題目，經(jīng)導(dǎo)師同意可開(kāi)始收集材料和撰寫(xiě)。博士學(xué)位論文可以是基礎(chǔ)研究、應(yīng)用研究，