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    • 簡介:1醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)試題集及答案及答案第一章細(xì)胞生物學(xué)與醫(yī)學(xué)一、單選題1生命活動(dòng)的基本結(jié)構(gòu)單位和功能單位是()A細(xì)胞核B細(xì)胞膜C細(xì)胞器D細(xì)胞質(zhì)E細(xì)胞2DNA雙螺旋模型是美國人JDWATSON和英國人FHCCRICK哪一年提出的()A1951B1952C1953D1954E19553那兩位科學(xué)家最早提出了細(xì)胞學(xué)說()ASHLEIDEN、SCHWANNBBROWN、PKINJIECVIRCHOW、FLEMMINGDHERTWIG、HOOKEEWANSON、CLICK4最早觀察到活細(xì)胞的學(xué)者是()ABROWNRBFLEMMINGWCHOOKERDLEEUWENHOEKAEDARVINC5最早觀察到有絲分裂的學(xué)者是()ABROWNRBFLEMMINGWCHOOKERDLEEUWENHOEKAEDARVINC二、多選題1以下哪些是當(dāng)代細(xì)胞生物學(xué)研究的熱點(diǎn)A細(xì)胞器結(jié)構(gòu)B細(xì)胞凋亡C細(xì)胞周期調(diào)控D細(xì)胞通信E腫瘤細(xì)胞2現(xiàn)代的細(xì)胞生物學(xué)在哪些層次上研究細(xì)胞的生命活動(dòng)()A分子水平B亞細(xì)胞水平C組織水平D器官水平E細(xì)胞整體水平三、是非題1細(xì)胞最早于1665年由ROBERTHOOKE發(fā)現(xiàn)。()2在十八世紀(jì)HOOKE和FLEMMING提出了細(xì)胞學(xué)說。()3細(xì)胞生物學(xué)就是細(xì)胞學(xué)。()4醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)研究任務(wù)之一就是探索疾病的發(fā)病機(jī)制。()5醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)質(zhì)就是細(xì)胞生物學(xué)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用。()四、填空題1細(xì)胞是生物體和的基本單位。2細(xì)胞學(xué)說是由和提出的。3醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)研究的主要任務(wù)是和。4醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)研究的對(duì)象是五、名詞解釋1醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)MEDICALCELLBIOLOGY2細(xì)胞學(xué)說(CELLTHEY)參考答案一、單選題1E2C3A4D5B二、多選題1BCDE2ABE三、是非題1√234√5√四、填空題1結(jié)構(gòu)功能2SHLEIDENSCHWANN3探索疾病的發(fā)病機(jī)制疾病的診斷疾病的治療4人體細(xì)胞第二章細(xì)胞的起源與進(jìn)化一、單選題3一、單選題1以下有關(guān)蛋白質(zhì)的描述,哪項(xiàng)不正確()A蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)B蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)是指特異的氨基酸排列順序C蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)主要有兩種形式D蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)是指蛋白質(zhì)的三、四級(jí)結(jié)構(gòu)E按不同功能,蛋白質(zhì)可分為結(jié)構(gòu)蛋白和調(diào)節(jié)蛋白2蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的基本單位是()A脂肪酸B戊糖C核苷酸D磷酸E氨基酸3蛋白質(zhì)分子的一級(jí)結(jié)構(gòu)中,連接氨基酸殘基之間的化學(xué)鍵是()A共價(jià)鍵B肽鍵C二硫鍵D離子鍵E以上都不是4關(guān)于核苷酸,下列哪項(xiàng)敘述是錯(cuò)的A由堿基、戊糖、磷酸等三種分子構(gòu)成B是DNA和RNA的基本結(jié)構(gòu)單位CDNA、RNA分子中所含核苷酸種類相同D核苷酸分子中的堿基為含氮的雜環(huán)化合物E核苷酸之間以磷酸二酯鍵相連5核酸分子的基本結(jié)構(gòu)單位是()A氨基酸B核苷C堿基D戊糖E核苷酸6許多單核苷酸通過什么鍵相互連接成多核苷酸鏈()A酯鍵B糖苷鍵C氫鍵D磷酸二酯鍵E肽鍵7核酸結(jié)構(gòu)的基本單位是()A堿基B戊糖C核苷酸D核小體E脫氧核糖核酸8細(xì)胞中含量最高的RNA是ATRNABMRNACRRNADSNRNAE不確定二、多選題1細(xì)胞內(nèi)微量元素有()ACUBSCCADFEEI2蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)指氨基酸的()A種類B數(shù)目C排列順序D多肽鏈的數(shù)目E鏈內(nèi)及鏈間二硫鍵的數(shù)目和位置3下列哪些結(jié)構(gòu)屬于蛋白質(zhì)或分子的空間結(jié)構(gòu)()A一級(jí)結(jié)構(gòu)B二級(jí)結(jié)構(gòu)C三級(jí)結(jié)構(gòu)D四級(jí)結(jié)構(gòu)E都不是4組成細(xì)胞的有機(jī)小分子物質(zhì)有()A蛋白質(zhì)B脂肪酸C氨基酸D核苷酸E單糖5組成細(xì)胞的生物大分子物質(zhì)有()A蛋白質(zhì)BDNACRNAD磷脂E多糖6下列有關(guān)DNA與RNA的敘述,正確的是()A戊糖不同B堿基不完全相同C核苷酸不同D都含有磷酸E都是右手雙螺旋結(jié)構(gòu)三是非題()1DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的維持主要靠核苷酸間的磷酸二酯鍵。()2蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)是指蛋白質(zhì)中所含氨基酸數(shù)目、種類和排列順序。()3多核苷酸鏈線性結(jié)構(gòu)中連接相臨兩個(gè)單核苷酸之間的化學(xué)鍵是磷酸二酯鍵。()4駝鳥蛋的直徑約10CM,是現(xiàn)今發(fā)現(xiàn)最大的細(xì)胞。四、填空題
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    • 簡介:1分子生物學(xué)需要掌握的重點(diǎn)分子生物學(xué)需要掌握的重點(diǎn)、、DNA、RNA、蛋白質(zhì)、質(zhì)粒、基因、端粒、聚合酶、密碼子、突變、變性的概念或結(jié)構(gòu)、性質(zhì)及特點(diǎn);、、復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、逆轉(zhuǎn)錄、翻譯、加工修飾、靶向輸送的主要過程及特點(diǎn);、、癌基因的概念、原癌基因產(chǎn)物的類型及細(xì)胞定位、癌基因活化致癌的主要機(jī)制;、、常用分子生物學(xué)技術(shù)的原理、主要步驟、酶學(xué)及特點(diǎn);、、基因表及其調(diào)控的原理、主要過程或步驟,乳糖操縱子的正、負(fù)調(diào)節(jié)機(jī)制;、、常用的基因診斷及基因治療技術(shù);、、基因克隆、基因診斷、基因治療、管家基因、抑癌基因、KLENOW片段、核蛋白體、限制性內(nèi)切核酸酶、人類基因組計(jì)劃、原位雜交的概念;、、雙脫氧末端終止法DNA測序、重組DNA技術(shù)的主要步驟;、、結(jié)構(gòu)基因、順式作用元件、啟動(dòng)子、遺傳密碼、反式作用因子、氨基酰TRNA、基因組文庫、DNA多態(tài)性、轉(zhuǎn)位因子、探針、TM值、DNA微陣列、DNA甲基化的概念、性質(zhì);、、核酸分子雜交的主要類型、PCR的主要步驟及引物設(shè)計(jì);、、、DNA、RNA及多肽鏈的合成方向;、、、真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染的基本方法;、、、細(xì)胞周期的主要調(diào)控點(diǎn);、、、DNA損傷及修復(fù)的主要類型和機(jī)制;、、、基因文庫篩選的主要方法及原理。名詞解釋質(zhì)粒是細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)攜帶的染色體外的DNA分子,是共價(jià)閉合的環(huán)狀DNA分子,能獨(dú)立進(jìn)行復(fù)制。質(zhì)粒只有在宿主細(xì)胞內(nèi)才能夠完成自己的復(fù)制?;蚧蛑纲A存有功能的蛋白質(zhì)多肽鏈或RNA序列及表達(dá)這些信息所需的全部核苷酸序列,是核酸分子中貯存遺傳信息的遺傳單位。癌基因癌基因是細(xì)胞內(nèi)控制細(xì)胞生長和分化的基因,具有潛在的誘導(dǎo)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的特性,它的結(jié)構(gòu)異?;虮磉_(dá)異常,可以引起細(xì)胞癌變。基因克隆基因克隆是指把一個(gè)生物體的遺傳信息(基因片段)轉(zhuǎn)入另一個(gè)生物體3綜合內(nèi)容合內(nèi)容DNA的結(jié)構(gòu)、性構(gòu)、性質(zhì)及特點(diǎn)及特點(diǎn)①一級(jí)結(jié)構(gòu)是指DNA分子中核苷酸的排列順序,二級(jí)結(jié)構(gòu)是指兩條DNA單鏈形成的雙螺旋結(jié)構(gòu)、三股螺旋結(jié)構(gòu)和四股螺旋結(jié)構(gòu);三級(jí)結(jié)構(gòu)是指雙鏈DNA進(jìn)一步扭曲盤旋形成的超螺旋結(jié)構(gòu)。②DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)的基本特點(diǎn)4種脫氧核糖核苷酸以3′,5′磷酸二酯鍵相連,形成長鏈,鏈中的脫氧核糖和磷酸都是相同的。組成DNA的堿基有腺嘌呤(A)、鳥嘌呤(G)、胞嘧啶(C)和胸腺嘧啶(T)。③DNA是由兩條單鏈結(jié)合在一起形成的雙鏈分子,兩條單鏈都是由A、T、G、C以千變?nèi)f化的排列組合而形成的。大多數(shù)生物的遺傳信息都是儲(chǔ)存在DNA分子中。④DNA分子主要攜帶兩類遺傳信息,即有功能活性的DNA序列所攜帶的信息和調(diào)控信息。⑤DNA二級(jí)結(jié)構(gòu)是指DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu),其特點(diǎn)為脫氧核糖與磷酸交替排列構(gòu)成了DNA主鏈;兩條脫氧核苷酸鏈?zhǔn)欠聪蚱叫信帕?,一條是5′→3′方向,另一條為3′→5′方向;以右手方向盤繞成雙螺旋構(gòu)型;A配T,G配C。⑥生物體的閉環(huán)DNA都以超螺旋形式存在,如細(xì)菌質(zhì)粒、一些病毒、線粒體的DNA等。RNA的結(jié)構(gòu)、功能、特點(diǎn)構(gòu)、功能、特點(diǎn)①由4種基本的核苷酸以3′,5′磷酸二酯鍵連接而成的長鏈,堿基中沒有T,而為尿嘧啶(U)。②分為MRNA(信使RNA),TRNA(轉(zhuǎn)RNA,轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸)和核蛋白體RNA(RRNA)。MRNA結(jié)構(gòu)特點(diǎn)不穩(wěn)定、代謝活躍,更新迅速,壽命短。原核生物MRNA具有操縱子結(jié)構(gòu),主要是多順反子,MRNA5′端無帽子結(jié)構(gòu),3′端一般無多聚A尾巴,沒有修飾堿基;真核MRNA5′端有帽子結(jié)構(gòu)、3′端大多有多聚腺苷酸尾巴、分子中可能有修飾堿基,主要有甲基化、有編碼區(qū)和非編碼區(qū)。TRNA的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及作用作用在蛋白質(zhì)合成過程轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸,參與蛋白質(zhì)的翻譯。一級(jí)結(jié)構(gòu)含有稀有堿基如DHU,3′端為3個(gè)同樣的核苷酸序列(CCA)序列,此序列是TRNA結(jié)合和轉(zhuǎn)運(yùn)安基酸而生成氨酰TRNA所必需的。5′端為G、具有TΨC;二級(jí)結(jié)構(gòu)為三葉草形,三級(jí)結(jié)構(gòu)為倒L形;C、RRNA即核蛋白體RNA為細(xì)胞內(nèi)含量最豐富的RNA,約占細(xì)胞總RNA的80以上參與組成核蛋白體,作為蛋白質(zhì)生物合成的場所。原核生物核糖體的沉降系數(shù)為70S,由50S和30S兩個(gè)大小亞基組成,30S小亞基含16SRRNA和21種蛋白質(zhì)50S大亞基含23S和5SRRNA以及34種蛋白質(zhì);真核生物細(xì)胞核糖體的沉降系數(shù)為80S,由大小亞基組成,40S小亞基含18SRRNA及30多種蛋白質(zhì),60S大亞基含3種RRNA28S58S5S以及大約45種蛋白質(zhì)。④HNRNA即核內(nèi)不均RNA,為真核生物轉(zhuǎn)錄生成的MRNA前體。⑤SNRNA即小分子核內(nèi)RNA,不單獨(dú)存在,常與多種特異的蛋白質(zhì)結(jié)合在一起,形成小分子核內(nèi)核蛋白顆粒,在MRNA的剪接中起重要作用。⑥反義RNA,又稱調(diào)節(jié)RNA,主要封閉RNA。參與蛋白質(zhì)合成的氨基酸在特異的氨基酰TRNA合成酶催化下,與其相應(yīng)的TRNA結(jié)合成氨基酰TRNA。真核生物起始TRNA結(jié)合的氨基酸為蛋氨酸,結(jié)合形成METTRNAIMET,翻譯起始時(shí)首先與40S核糖體小亞基結(jié)合形成復(fù)合物。原核生物的起始氨基
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      上傳時(shí)間:2024-03-08
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    • 簡介:1分子生物學(xué)復(fù)習(xí)思考題分子生物學(xué)復(fù)習(xí)思考題2004102004101寫出分子生物學(xué)廣義的與狹義的定義,現(xiàn)代分子生物學(xué)研究的主要內(nèi)容,以及寫出分子生物學(xué)廣義的與狹義的定義,現(xiàn)代分子生物學(xué)研究的主要內(nèi)容,以及5個(gè)分子生物學(xué)發(fā)展的主要大事紀(jì)(年代、發(fā)明者、簡要內(nèi)容)分子生物學(xué)發(fā)展的主要大事紀(jì)(年代、發(fā)明者、簡要內(nèi)容)。廣義上分子生物學(xué)包括對(duì)蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子結(jié)構(gòu)與功能的研究、以及從分子水平上闡明生命的現(xiàn)象和生物學(xué)規(guī)律。狹義概念既將分子生物學(xué)的范疇偏重于核酸(基因)的分子生物學(xué),主要研究基因或DNA結(jié)構(gòu)與功能、復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、表達(dá)和調(diào)節(jié)控制等過程。其中也涉及到與這些過程相關(guān)的蛋白質(zhì)和酶的結(jié)構(gòu)與功能的研究。現(xiàn)代分子生物學(xué)研究的主要內(nèi)容有基因與基因組的結(jié)構(gòu)與功能,DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯,基因表達(dá)調(diào)控的研究,DNA重組技術(shù),結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)等。5個(gè)分子生物學(xué)發(fā)展的主要大事紀(jì)(年代、發(fā)明者、簡要內(nèi)容)111944年著名微生物學(xué)家AVERY等人在對(duì)肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中證實(shí)了DNA是生物的遺傳物質(zhì)。這一重大發(fā)現(xiàn)打破了長期以來,許多生物學(xué)家認(rèn)為的只有象蛋白質(zhì)那樣的大分子才能作為細(xì)胞遺傳物質(zhì)的觀點(diǎn),在遺傳學(xué)上樹立了DNA是遺傳信息載體的理論。2221953年,是開創(chuàng)生命科學(xué)新時(shí)代具有里程碑意義的一年,WATSON和CRICK發(fā)表了“脫氧核糖核酸的結(jié)構(gòu)”的著名論文,他們?cè)贔RANKLIN和WILKINSX射線衍射研究結(jié)果的基礎(chǔ)上,推導(dǎo)出DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型,為人類充分揭示遺傳信息的傳遞規(guī)律奠定了堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)。同年,SANGER歷經(jīng)8年,完成了第一個(gè)蛋白質(zhì)胰島素的氨基酸全序列分析。331954年GAMNOW從理論上研究了遺傳密碼的編碼規(guī)律CRICK在前人研究工作基礎(chǔ)上,提出了中心法則理論,對(duì)正在興起的分子生物學(xué)研究起了重要的推動(dòng)作用。441956年VOLKIN和ASTRACHAN發(fā)現(xiàn)了MRNA當(dāng)時(shí)尚未用此名。551985年SAIKI等發(fā)明了聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PCR;SINSHEIMER首先提出人類基因組圖譜制作計(jì)劃設(shè)想;SMITH等報(bào)導(dǎo)了DNA測序中應(yīng)用熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記的方法;MILLER等發(fā)現(xiàn)DNA結(jié)合蛋白的鋅指結(jié)構(gòu)。22作為主要遺傳物質(zhì)的作為主要遺傳物質(zhì)的DNADNA具有哪些特性,研究具有哪些特性,研究DNADNA一級(jí)結(jié)構(gòu)有什么重要意義,什么是一級(jí)結(jié)構(gòu)有什么重要意義,什么是DNADNA的超螺旋結(jié)構(gòu)有哪些類型解釋的超螺旋結(jié)構(gòu)有哪些類型解釋DNADNA拓?fù)洚悩?gòu)體,它們之間互變異構(gòu)依賴于拓?fù)洚悩?gòu)體,它們之間互變異構(gòu)依賴于什么簡述真核生物的染色體結(jié)構(gòu),它們是如何組裝的有幾種組蛋白參與核小體的什么簡述真核生物的染色體結(jié)構(gòu),它們是如何組裝的有幾種組蛋白參與核小體的形成形成作為遺傳物質(zhì)的DNA具有以下特性①貯存并表達(dá)遺傳信息;3引起DNA變性的主要因素有溫度、PH值、有機(jī)溶劑等。紫外吸收光譜的變化是檢測變性最簡單的定性和定量方法。DNA的復(fù)性必須滿足二個(gè)條件①一定的離子強(qiáng)度,用以削弱兩條鏈中磷酸基團(tuán)之間的排斥力。②較高的溫度,用以避免隨機(jī)形成的無規(guī)則氫鍵。影響DNA復(fù)性速度的因素包括(1)DNA分子的復(fù)雜程度。(2)DNA的濃度。(3)DNA片段的大小。(4)溫度的影響。(5)陽離子的濃度。規(guī)定復(fù)性實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)條件是400核苷酸長度,TM25℃的溫度,陽離子強(qiáng)度018MOLL,此時(shí)的復(fù)性速度常數(shù)К≈5105。通過下列3種方法可以測定DNA序列復(fù)性的程度(1)S1核酸酶水解的雙鏈DNA量。(2)減色效應(yīng),在復(fù)性過程中可跟蹤測定A260的光吸收值;(3)S1核酸酶只催化單鏈DNA的水解,不能作用于雙鏈DNA,因此將樣品限定水解后測定抗羥基磷灰石層析,羥基磷灰石是一種磷酸鈣鹽,經(jīng)過一定的處理后,具有吸附雙鏈DNA的能力,洗脫時(shí),只允許單鏈通過,從而可以計(jì)算出剩余雙鏈DNA的量。DNA的TM值大小一般與下列因素有關(guān)(1)DNA的均一性。2GC對(duì)含量。3介質(zhì)中離子強(qiáng)度。以CC0對(duì)COT作圖得到的復(fù)性對(duì)濃度的依賴關(guān)系的曲線稱為COT曲線。分子雜交有多種類型,將不同來源的DNA變性后,在溶液里進(jìn)行雜交,稱為溶液雜交(SOLUTIONHYBRIDIZATION);用硝酸纖維素制成的濾膜,可以吸附單鏈DNA或RNA,將變性DNA或RNA吸附到濾膜上,再進(jìn)行雜交,稱為濾膜雜交(FILTERHYBRIDIZATION)。濾膜雜交包括(1)SOUTHERN印跡法用于檢測DNA。(2)NTHERN印跡法用于檢測RNA。(3)WESTHERN印跡法用于檢測蛋白質(zhì)。44簡述基因的概念什么是反向生物學(xué)什么是順反子現(xiàn)代分子生物學(xué)中順反子與簡述基因的概念什么是反向生物學(xué)什么是順反子現(xiàn)代分子生物學(xué)中順反子與基因是什么關(guān)系基因是什么關(guān)系基因(GENE)是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遺傳效應(yīng)的核苷酸序列是遺傳的基本單位。反向生物學(xué)是指利用重組DNA技術(shù)和離體定向誘變的方法研究已知結(jié)構(gòu)的基因相應(yīng)的功能,在體外使基因突變,再導(dǎo)入體內(nèi),檢測突變的遺傳效應(yīng),即以表型來探索基因的結(jié)構(gòu)。一個(gè)順反子就是一段核苷酸序列,能編碼一條完整的多肽鏈?,F(xiàn)代分子生物學(xué)文獻(xiàn)中,順反子和基因這兩個(gè)術(shù)語是互相通用的。一般而言,一個(gè)順反子就是一個(gè)基因,大約1500個(gè)核苷酸。它是由一群突變單位和重組單位組成的線性結(jié)構(gòu)(因?yàn)槿魏我粋€(gè)基因都是突變體或重組體)。因此,順反子的概念表明了基因不是最小單位,它仍然是可分的,并非所有的DNA
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    • 簡介:第2章染色體與染色體與DNA名詞解釋名詞解釋原癌基因原癌基因細(xì)胞內(nèi)與細(xì)胞增殖相關(guān)的正?;?,是維持機(jī)體正常生命活動(dòng)所必須的,在進(jìn)化上高等保守。當(dāng)原癌基因的結(jié)構(gòu)或調(diào)控區(qū)發(fā)生變異,基因產(chǎn)物增多或活性增強(qiáng)時(shí),使細(xì)胞過度增殖,從而形成腫瘤。復(fù)制復(fù)制以親代DNA或RNA為模板,根據(jù)堿基配對(duì)的原則,在一系列酶的作用下,生成與親代相同的子代DNA或RNA的過程。轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座子TRANSPOSON或TRANSPOSABLEELEMENT位于染色體DNA上可自主復(fù)制和位移的基本單位。包括插入序列和復(fù)合轉(zhuǎn)座子。半保留復(fù)制半保留復(fù)制以親代DNA雙鏈為模板以堿基互補(bǔ)方式合成子代DNA,這樣新形成的子代DNA中,一條鏈來自親代DNA,而另一條鏈則是新合成的,這種復(fù)制方式叫半保留復(fù)制。染色體染色體染色體是遺傳信息的載體,由DNA、RNA和蛋白質(zhì)構(gòu)成,其形態(tài)和數(shù)目具有種系的特性。在細(xì)胞間期核中,以染色質(zhì)形式存在。在細(xì)胞分裂時(shí),染色質(zhì)絲經(jīng)過螺旋化、折疊、包裝成為染色體,為顯微鏡下可見的具不同形狀的小體。核小體是構(gòu)成真核生物染色體的基本單位,是DNA和蛋白質(zhì)構(gòu)成的緊密結(jié)構(gòu)形式,包括200BP左右的DNA和9個(gè)組蛋白分子構(gòu)成的致密結(jié)構(gòu)。填空題填空題1真核細(xì)胞核小體的組成是DNA和蛋白2天然染色體末端不能與其他染色體斷裂片段發(fā)生連接,這是因?yàn)樘烊蝗旧w末端存在端粒結(jié)構(gòu)。3在聚合酶鏈反應(yīng)中,除了需要模板DNA外,還需加入引物、DNA聚合酶、DNTP和鎂離子。4引起DNA損傷的因素有自發(fā)因素、物理因素、化學(xué)因素。5DNA復(fù)制時(shí)與DNA解鏈有關(guān)的酶和蛋白質(zhì)有拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ、解螺旋酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白。6參與DNA切除修復(fù)的酶有DNA聚合酶Ⅰ、DNA連接酶、特異的核酸內(nèi)切酶。7在真核生物中DNA復(fù)制的主要酶是DNA聚合酶Δ。在原核生物中是DNA聚合酶Ⅲ。8端粒酶是端粒酶是含一段RNA的逆轉(zhuǎn)錄酶。9DNA的修復(fù)方式有錯(cuò)配修復(fù)、堿基切除修復(fù)、核苷酸切除修復(fù)、DNA的直接修復(fù)。選擇題選擇題1真核生物復(fù)制起點(diǎn)的特征包括(B)A富含GC區(qū)B富含AT區(qū)CZDNAD無明顯特征2插入序列(IS)編碼(A)A轉(zhuǎn)座酶B逆轉(zhuǎn)錄酶CDNA合成酶D核糖核酸酶3紫外線照射對(duì)DNA分子的損傷主要是DA堿基替換B磷酸脂鍵斷裂C。堿基丟失D形成共價(jià)連接的嘧啶二聚體4自然界中以DNA為遺傳物質(zhì)的大多數(shù)生物DNA的復(fù)制方式(C)A環(huán)式BD環(huán)式C半保留D全保留5原核生物基因組中沒有(A)A內(nèi)含子B外顯子C轉(zhuǎn)錄因子D插入序列6關(guān)于組蛋白下列說法正確的是DA為中性蛋白B為酸性蛋白C進(jìn)化上不具保守性D染色體結(jié)合蛋白7DNA聚合酶Ⅰ(C)A是復(fù)制酶,但不是修復(fù)酶B沒有模板依賴性C有5′→3′外切酶活性6、PCR的基本原理PCR是在試管中進(jìn)行的DNA復(fù)制反應(yīng),基本原理是依據(jù)細(xì)胞內(nèi)DNA半保留復(fù)制的機(jī)理,以及體外DNA分子于不同溫度下雙鏈和單鏈可以互相轉(zhuǎn)變的性質(zhì),人為地控制體外合成系統(tǒng)的溫度,以促使雙鏈DNA變成單鏈,單鏈DNA與人工合成的引物退火,然后耐熱DNA聚合酶以DNTP為原料使引物沿著單鏈模板延伸為雙鏈DNA。PCR全過程每一步的轉(zhuǎn)換是通過溫度的改變來控制的。需要重復(fù)進(jìn)行DNA模板解鏈、引物與模板DNA結(jié)合、DNA聚合酶催化新生DNA的合成,即高溫變性、低溫退火、中溫延伸3個(gè)步驟構(gòu)成PCR反應(yīng)的一個(gè)循環(huán),此循環(huán)的反復(fù)進(jìn)行,就可使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。DNA模板變性模板雙鏈DNA單鏈DNA,94℃。退火引物+單鏈DNA雜交鏈,引物的TM值。引物的延伸溫度至70℃左右,TAQDNA聚合酶以4種DNTP為原料,以目的DNA為模板,催化以引物3’末端為起點(diǎn)的5’→3’DNA鏈延伸反應(yīng),形成新生DNA鏈。新合成的引物延伸鏈經(jīng)過變性后又可作為下一輪循環(huán)反應(yīng)的模板PCR,就是如此反復(fù)循環(huán),使目的DNA得到高效快速擴(kuò)增。第三章第三章啟動(dòng)子啟動(dòng)子是一段位于結(jié)構(gòu)基因5,端上游區(qū)的DNA序列,能活化RNA聚合酶,使之與模板DNA準(zhǔn)確地相結(jié)合并具有轉(zhuǎn)錄起始的特異性。指RNA聚合酶識(shí)別、結(jié)合和開始轉(zhuǎn)錄的一段特定的DNA序列。增強(qiáng)子增強(qiáng)子能強(qiáng)化轉(zhuǎn)錄起始的序列稱為增強(qiáng)子。轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄以DNA為模板,按照堿基配對(duì)原則合成RNA,即將DNA所含的遺傳信息傳給RNA,形成一條與DNA鏈互補(bǔ)的RNA的過程。RNA的編輯的編輯是某些RNA,特別是MRNA的一種加工方式,它導(dǎo)致了DNA所編碼的遺傳信息的改變。外顯子外顯子EXON真核細(xì)胞基因DNA中的編碼序列,這些序列被轉(zhuǎn)錄成RNA并進(jìn)而翻譯為蛋白質(zhì)。內(nèi)含子內(nèi)含子INTRON真核細(xì)胞基因DNA中的間插序列,這些序列被轉(zhuǎn)錄成RNA,但隨即被剪除而不翻譯。復(fù)制子生物體的復(fù)制單位稱為復(fù)制子(REPLICON,是在同一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)控制下的一段DNA序列。轉(zhuǎn)錄單元是一段啟動(dòng)子開始至終止子結(jié)束的DNA序列。轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)是與新生RNA鏈的第一個(gè)核苷酸相對(duì)應(yīng)的DNA鏈上的堿基,通常為一個(gè)嘌呤。轉(zhuǎn)錄開始時(shí)模板上的第一個(gè)堿基,在原核中常為A或G,而且位置固定。填空填空1轉(zhuǎn)錄的基本過程包括模板識(shí)別,轉(zhuǎn)錄起始,轉(zhuǎn)錄的延伸,轉(zhuǎn)錄的終止。2基因表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)階段。3RNA的編輯方式堿基突變,尿甘酸的缺失和添加。4在原核生物中,35區(qū)與10區(qū)之間的距離大約是1619BP5帽子結(jié)構(gòu)的功能〔1〕在翻譯中起識(shí)別作用〔2〕使MRNA免遭核苷酸的破壞6原核生物只有一種RNA聚合酶而真核生物有三種,每一種都有其特定的功能。聚合酶Ⅰ合成RRNA聚合酶Ⅱ合成MRNA,聚合酶Ⅲ合成TRNA和5SRRNA。三種聚合酶都是具有多亞基的大的蛋白復(fù)合體。7轉(zhuǎn)錄因子通常具有兩個(gè)獨(dú)立的結(jié)構(gòu)域一個(gè)結(jié)合DNA,一個(gè)激活轉(zhuǎn)錄。8在真核細(xì)胞MRNA的修飾中,“帽子”結(jié)構(gòu)由甲基組成,“尾”由多聚腺嘌呤組成。9原核生物的絕大部分起啟動(dòng)子都存在共同的序列,即位于10BP處的區(qū)和35BP處的區(qū),他們都是RNA聚合酶與啟動(dòng)子結(jié)合的位點(diǎn),能與Σ因子相互識(shí)別而具高度親和性。真核生物中,在轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游2535BP處有區(qū)和位于7080BP處
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    • 簡介:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)網(wǎng)絡(luò)教育學(xué)院東北農(nóng)業(yè)大學(xué)網(wǎng)絡(luò)教育學(xué)院獸醫(yī)微生物學(xué)作業(yè)題參考答案獸醫(yī)微生物學(xué)作業(yè)題參考答案第一套復(fù)習(xí)題參考答案第一套復(fù)習(xí)題參考答案一、填空題1球、桿、螺旋2微米(或ΜM),光學(xué),油鏡3薄,肽聚糖,類脂A,脂多糖(或LPS)4莢膜、鞭毛、纖毛(或菌毛、傘毛、柔毛)、芽孢5光滑型(或S),粗糙型(或R)6普通纖毛,性纖毛7水、碳素、氮素、無機(jī)鹽、生長因素8自養(yǎng)菌,異養(yǎng)菌,光能菌,化能菌9對(duì)數(shù),穩(wěn)定,二分裂10螺旋體、霉形體、立克次氏體、衣原體、放線菌二、填空題1D2B3A4C5B三、概念1微生物P12芽胞P133光能異養(yǎng)菌P174化能異養(yǎng)菌P175菌落與菌苔P156細(xì)菌的雙命名法P23四、問答1微生物的概念及微生物的類型參考P1,回答重點(diǎn)(1)微生物的概念;(2)微生物按核的類型和個(gè)體形態(tài),微生物界劃分為三大類型具體回答每一類型的特點(diǎn),及所包括的微生物的種類。2微生物學(xué)的概念,微生物學(xué)的發(fā)展階段,代表人物及其主要貢獻(xiàn)參考P2P4回答重點(diǎn)(1)微生物學(xué)的概念P2回答重點(diǎn)展開說明具體要就的營養(yǎng)、溫度、氧氣、濕度與滲透壓、PH的要求。8細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)外交換物質(zhì)的方式及其特點(diǎn)參考P18,(五)細(xì)菌對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的攝入回答重點(diǎn)四種轉(zhuǎn)運(yùn)方式的名稱,轉(zhuǎn)運(yùn)的動(dòng)力,轉(zhuǎn)運(yùn)的物質(zhì)等。第二套復(fù)習(xí)題參考答案第二套復(fù)習(xí)題參考答案二、填空題1細(xì)菌、真菌、抗生素2支原體、細(xì)菌,立克次氏體3細(xì)菌、病毒,二等分裂4雙命名,屬,種5伯吉氏系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊(cè)6無隔,有隔,營養(yǎng)、氣生、繁殖7芽孢子、節(jié)孢子、厚垣孢子、分生孢子、孢子囊孢子8小分生孢子,掃帚,大分生孢子,球9單核菌絲、雙核菌絲、結(jié)實(shí)性雙核菌絲,鎖狀聯(lián)合二、填空題1BFEDCA2C3D4C5D三、概念1大腸菌群P77,(六)水的微生物學(xué)檢驗(yàn)自然段第八行開始的一句話。2內(nèi)毒素P242倒數(shù)第二自然段,(2)內(nèi)毒素3外毒素P242倒數(shù)第四自然段,(1)外毒素4類毒素P242倒數(shù)第三自然段,第一句話5溫和性噬菌體P58圖片下面自然段,第三行從“有的噬菌體感染菌體后”至該句結(jié)束6病毒復(fù)制P52第四節(jié)第一段第一句話四、問答1為什么厭氧菌在有氧環(huán)境下不能生長所有微生物在有氧環(huán)境中O2可轉(zhuǎn)變極微量的氧的自由基(即超氧陰離子),超氧陰離子有很強(qiáng)的細(xì)胞毒作用,能直接破壞菌體的細(xì)胞膜。好氧和耐氧微生物中有超氧化物歧化酶和過氧化氫酶,在兩種酶的作用下可時(shí)毒害性很強(qiáng)的超氧陰離子轉(zhuǎn)變?yōu)闊o害的氧,保護(hù)細(xì)胞不受氧代謝的毒害作用。而厭氧微生物不具有上述酶類,不能分解超氧陰離子和過氧化氫的毒害作用,因此不能在有O2條件下生長。2細(xì)菌的生長曲線分哪幾期有何意義各期有何特點(diǎn)參考P20P21回答重點(diǎn)
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簡介:1分子生物學(xué)試題一、名詞解釋一、名詞解釋1CDNACDNA與CCCDNACCCDNACDNA是由MRNA通過反轉(zhuǎn)錄酶合成的雙鏈DNA;CCCDNA是游離于染色體之外的質(zhì)粒雙鏈閉合環(huán)形DNA。2標(biāo)準(zhǔn)折疊單位標(biāo)準(zhǔn)折疊單位蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)單元?。菪cΒ-折疊通過各種連接多肽可以組成特殊幾何排列的結(jié)構(gòu)塊,此種確定的折疊類型通常稱為超二級(jí)結(jié)構(gòu)。幾乎所有的三級(jí)結(jié)構(gòu)都可以用這些折疊類型,乃至他們的組合型來予以描述,因此又將其稱為標(biāo)準(zhǔn)折疊單位。3CAPCAP環(huán)腺苷酸(CAMP)受體蛋白CRP(CAMPRECEPTPROTEIN),CAMP與CRP結(jié)合后所形成的復(fù)合物稱激活蛋白CAP(CAMPACTIVATEDPROTEIN)4回文序列回文序列DNA片段上的一段所具有的反向互補(bǔ)序列,常是限制性酶切位點(diǎn)。5MICRNAMICRNA互補(bǔ)干擾RNA或稱反義RNA,與MRNA序列互補(bǔ),可抑制MRNA的翻譯。6核酶核酶具有催化活性的RNA,在RNA的剪接加工過程中起到自我催化的作用。7模體模體蛋白質(zhì)分子空間結(jié)構(gòu)中存在著某些立體形狀和拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)頗為類似的局部區(qū)域8信號(hào)肽信號(hào)肽在蛋白質(zhì)合成過程中N端有1536個(gè)氨基酸殘基的肽段,引導(dǎo)蛋白質(zhì)的跨膜。9弱化子弱化子在操縱區(qū)與結(jié)構(gòu)基因之間的一段可以終止轉(zhuǎn)錄作用的核苷酸序列。10魔斑魔斑當(dāng)細(xì)菌生長過程中,遇到氨基酸全面缺乏時(shí),細(xì)菌將會(huì)產(chǎn)生一個(gè)應(yīng)急反應(yīng),停止全部基因的表達(dá)。產(chǎn)生這一應(yīng)急反應(yīng)的信號(hào)是鳥苷四磷酸PPGPP和鳥苷五磷酸(PPPGPP)。PPGPP與PPPGPP的作用不只是一個(gè)或幾個(gè)操縱子,而是影響一大批,所以稱他們是超級(jí)調(diào)控子或稱為魔斑。11上游啟動(dòng)子元件上游啟動(dòng)子元件是指對(duì)啟動(dòng)子的活性起到一種調(diào)節(jié)作用的DNA序列,10區(qū)的TATA、35區(qū)的TGACA及增強(qiáng)子,弱化子等。12DNADNA探針探針是帶有標(biāo)記的一段已知序列DNA,用以檢測未知序列、篩選目的基因等方面廣泛應(yīng)用。13SDSD序列序列是核糖體與MRNA結(jié)合序列,對(duì)翻譯起到調(diào)控作用。14單克隆抗體單克隆抗體只針對(duì)單一抗原決定簇起作用的抗體。15考斯質(zhì)??妓官|(zhì)粒是經(jīng)過人工構(gòu)建的一種外源DNA載體,保留噬菌體兩端的COS區(qū),與質(zhì)粒連接構(gòu)成。16藍(lán)白斑篩選白斑篩選含LACZ基因(編碼Β半乳糖苷酶)該酶能分解生色底物XGAL5溴4氯3吲哚ΒD半乳糖苷產(chǎn)生藍(lán)色,從而使菌株變藍(lán)。當(dāng)外源DNA插入后,LACZ基因不能表達(dá),菌株呈白色,以此來篩選重組細(xì)菌。稱之為藍(lán)白斑篩選。17順式作用元件順式作用元件在DNA中一段特殊的堿基序列,對(duì)基因的表達(dá)起到調(diào)控作用的基因元件。18KLENOWKLENOW酶DNA聚合酶I大片段,只是從DNA聚合酶I全酶中去除了5’→3’外切酶活性19錨定錨定PCRPCR用于擴(kuò)增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚DG的尾巴,然后分別用多聚DC和已知的序列作為引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增。20融合蛋白融合蛋白真核蛋白的基因與外源基因連接,同時(shí)表達(dá)翻譯出的原基因蛋白與外源蛋白結(jié)合在一起所組成的蛋白質(zhì)。二、填二、填空1DNA的物理圖譜是DNA分子的(限制性內(nèi)切酶酶解限制性內(nèi)切酶酶解)片段的排列順序。2RNA酶的剪切分為(自體催化自體催化)、(異體催化異體催化)兩種類型。3原核生物中有三種起始因子分別是(IF1IF1)、(IF2IF2)和(IF3IF3)。4蛋白質(zhì)的跨膜需要(信號(hào)肽信號(hào)肽)的引導(dǎo),蛋白伴侶的作用是(輔助肽鏈折疊成天然構(gòu)象的蛋白質(zhì))。5啟動(dòng)子中的元件通??梢苑譃閮煞N(核心啟動(dòng)子元件核心啟動(dòng)子元件)和(上游啟動(dòng)子元件上游啟動(dòng)子元件)。6分子生物學(xué)的研究內(nèi)容主要包含(結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)結(jié)構(gòu)分子生物學(xué))、(基因表達(dá)與調(diào)控基因表達(dá)與調(diào)控)、(DNADNA重組技術(shù)重組技術(shù))三部分。7證明DNA是遺傳物質(zhì)的兩個(gè)關(guān)鍵性實(shí)驗(yàn)是(肺炎球菌感染小鼠肺炎球菌感染小鼠)、(T2T2噬菌體感染大腸桿菌噬菌體感染大腸桿菌)這兩個(gè)實(shí)驗(yàn)中主要的論點(diǎn)證據(jù)是(生物體吸收的外源生物體吸收的外源DNADNA改變了其遺傳潛能改變了其遺傳潛能)。8HNRNA與MRNA之間的差別主要有兩點(diǎn)(HNRNAHNRNA在轉(zhuǎn)變?yōu)樵谵D(zhuǎn)變?yōu)镸RNAMRNA的過程中經(jīng)過剪接的過程中經(jīng)過剪接,)、(MRNAMRNA的5′5′末端被加上一個(gè)末端被加上一個(gè)M7PGPPPM7PGPPP帽子,在帽子,在MRNA3′MRNA3′末端多了一個(gè)多聚腺苷酸末端多了一個(gè)多聚腺苷酸POLYAPOLYA尾巴尾巴)。9蛋白質(zhì)多亞基形式的優(yōu)點(diǎn)是(亞基對(duì)亞基對(duì)DNADNA的利用來說是一種經(jīng)濟(jì)的方法的利用來說是一種經(jīng)濟(jì)的方法)、(可以減少蛋白質(zhì)合成過程中隨機(jī)可以減少蛋白質(zhì)合成過程中隨機(jī)的錯(cuò)誤對(duì)蛋白質(zhì)活性的影響的錯(cuò)誤對(duì)蛋白質(zhì)活性的影響)、(活性能夠非常有效和迅速地被打開和被關(guān)閉活性能夠非常有效和迅速地被打開和被關(guān)閉)。10蛋白質(zhì)折疊機(jī)制首先成核理論的主要內(nèi)容包括(成核成核)、(結(jié)構(gòu)充實(shí)結(jié)構(gòu)充實(shí))、(最后重排最后重排)。11半乳糖對(duì)細(xì)菌有雙重作用;一方面(可以作為碳源供細(xì)胞生長可以作為碳源供細(xì)胞生長);另一方面(它又是細(xì)胞壁的成分它又是細(xì)胞壁的成分)。所以3增強(qiáng)子GCCAATTATAA5MGPP起始位點(diǎn)11070253對(duì)天然質(zhì)粒的人工構(gòu)建主要表現(xiàn)在哪些方面對(duì)天然質(zhì)粒的人工構(gòu)建主要表現(xiàn)在哪些方面天然質(zhì)粒往往存在著缺陷,因而不適合用作基因工程的載體,必須對(duì)之進(jìn)行改造構(gòu)建A、加入合適的選擇標(biāo)記基因,如兩個(gè)以上,易于用作選擇通常是抗生素基因。B、增加或減少合適的酶切位點(diǎn),便于重組。C、縮短長度,切去不必要的片段,提高導(dǎo)入效率,增加裝載量。D、改變復(fù)制子,變嚴(yán)緊為松弛,變少拷貝為多拷貝。E、根據(jù)基因工程的特殊要求加裝特殊的基因元件4舉例說明差示篩選組織特異舉例說明差示篩選組織特異CDNACDNA的方法的方法制備兩種細(xì)胞群體,目的基因在其中一種細(xì)胞中表達(dá)或高表達(dá),在另一種細(xì)胞中不表達(dá)或低表達(dá),然后通過雜交對(duì)比找到目的基因。例如在腫瘤發(fā)生和發(fā)展過程中,腫瘤細(xì)胞會(huì)呈現(xiàn)與正常細(xì)胞表達(dá)水平不同的MRNA,因此,可以通過差示雜交篩選出與腫瘤相關(guān)的基因。也可利用誘導(dǎo)的方法,篩選出誘導(dǎo)表達(dá)的基因。5雜交瘤細(xì)胞系的產(chǎn)生與篩選雜交瘤細(xì)胞系的產(chǎn)生與篩選脾B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞,加聚乙二醇(PEG)促進(jìn)細(xì)胞融合,HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)(內(nèi)含次黃嘌呤、氨基蝶呤、T)生長出來的脾B骨髓瘤融合細(xì)胞繼續(xù)擴(kuò)大培養(yǎng)。細(xì)胞融合物中包含脾脾融合細(xì)胞不能生長,脾細(xì)胞不能體外培養(yǎng)。骨骨融合細(xì)胞不能利用次黃嘌呤,但可通過第二途徑利用葉酸還原酶合成嘌呤。氨基蝶呤對(duì)葉酸還原酶有抑制作用,因此不能生長。骨脾融合細(xì)胞在HAT中能生長,脾細(xì)胞可以利用次黃嘌呤,骨細(xì)胞提供細(xì)胞分裂功能。6、利用雙脫氧末端終止法(、利用雙脫氧末端終止法(SANGERSANGER法)測定法)測定DNADNA一級(jí)結(jié)構(gòu)的原理與方法一級(jí)結(jié)構(gòu)的原理與方法原理是采用核苷酸鏈終止劑2,,3,雙脫氧核苷酸終止DNA的延長。由于它缺少形成35磷酸二脂鍵所需要的3OH,一旦參入到DNA鏈中,此DNA鏈就不能進(jìn)一步延長。根據(jù)堿基配對(duì)原則,每當(dāng)DNA聚合酶需要DNMP參入到正常延長的DNA鏈中時(shí),就有兩種可能性,一是參入DDNTP結(jié)果導(dǎo)致脫氧核苷酸鏈延長的終止;二是參入DNTP使DNA鏈仍可繼續(xù)延長,直至參入下一個(gè)DDNTP。根據(jù)這一方法,就可得到一組以DDNTP結(jié)尾的長短不一的DNA片段。方法是分成四組分別為DDAMP、DDGMP、DDCMP、DDTMP反應(yīng)后,聚丙烯酰胺凝膠電泳按泳帶可讀出DNA序列。7、激活蛋白(、激活蛋白(CAPCAP)對(duì)轉(zhuǎn)錄的正調(diào)控作用)對(duì)轉(zhuǎn)錄的正調(diào)控作用環(huán)腺苷酸(CAMP)受體蛋白CRP(CAMPRECEPTPROTEIN),CAMP與CRP結(jié)合后所形成的復(fù)合物稱激活蛋白CAP(CAMPACTIVATEDPROTEIN)。當(dāng)大腸桿菌生長在缺乏葡萄糖的培養(yǎng)基中時(shí),CAP合成量增加,CAP具有激活乳糖(LAC)等啟動(dòng)子的功能。一些依賴于CRP的啟動(dòng)子缺乏一般啟動(dòng)子所具有的典型的35區(qū)序列特征(TTGACA)。因此RNA聚合酶難以與其結(jié)合。CAP的存在(功能)能顯著提高酶與啟動(dòng)子結(jié)合常數(shù)。主要表現(xiàn)以下二方面①CAP通過改變啟動(dòng)子的構(gòu)象以及與酶的相互作用幫助酶分子正確定向以便與10區(qū)結(jié)合,起到取代35區(qū)功能的作用。②CAP還能抑制RNA聚合酶與DNA中其它位點(diǎn)的結(jié)合,從而提高與其特定啟動(dòng)子結(jié)合的概率。8、典型的、典型的DNADNA重組實(shí)驗(yàn)通常包括哪些步驟重組實(shí)驗(yàn)通常包括哪些步驟A、提取供體生物的目的基因(或稱外源基因),酶接連接到另一DNA分子上(克隆載體),形成一個(gè)新的重組DNA分子。B、將這個(gè)重組DNA分子轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞并在受體細(xì)胞中復(fù)制保存,這個(gè)過程稱為轉(zhuǎn)化。C、對(duì)那些吸收了重組DNA的受體細(xì)胞進(jìn)行篩選和鑒定。D、對(duì)含有重組DNA的細(xì)胞進(jìn)行大量培養(yǎng),檢測外援基因是否表達(dá)。9、基因文庫的構(gòu)建對(duì)重組子的篩選舉出、基因文庫的構(gòu)建對(duì)重組子的篩選舉出3種方法并簡述過程。種方法并簡述過程??股乜剐院Y選、抗性的插入失活、蘭白斑篩選或PCR篩選、差式篩選、DNA探針多數(shù)克隆載體均帶有抗生素抗性基因(抗氨芐青霉素、四環(huán)素)。當(dāng)質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌中后,該菌便獲得抗性,沒有轉(zhuǎn)入的不具有抗性。但不能區(qū)分是否已重組。在含有兩個(gè)抗性基因的載體中,如果外源DNA片段插入其中一個(gè)基因并導(dǎo)致該基因失活,就可用兩個(gè)分別含不同藥物的平板對(duì)照篩選陽性重組子。如PUC質(zhì)粒含LACZ基因(編碼Β半乳糖苷酶)該酶能分解生色底物XGAL5溴4氯3吲哚ΒD半乳糖苷產(chǎn)生藍(lán)色,從而使菌株變藍(lán)。當(dāng)外源DNA插入后,LACZ基因不能表達(dá),菌株呈白
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    • 簡介:1分子生物學(xué)復(fù)分子生物學(xué)復(fù)習(xí)思考思考題21寫出分子生物學(xué)廣義的與狹義的定義,現(xiàn)代分子生物學(xué)研究的主要內(nèi)容,寫出分子生物學(xué)廣義的與狹義的定義,現(xiàn)代分子生物學(xué)研究的主要內(nèi)容,以及以及5個(gè)分子生物學(xué)發(fā)展的主要大事紀(jì)(年代、發(fā)明者、簡要內(nèi)容)個(gè)分子生物學(xué)發(fā)展的主要大事紀(jì)(年代、發(fā)明者、簡要內(nèi)容)。廣義上分子生物學(xué)包括對(duì)蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子結(jié)構(gòu)與功能的研究、以及從分子水平上闡明生命的現(xiàn)象和生物學(xué)規(guī)律。狹義概念既將分子生物學(xué)的范疇偏重于核酸(基因)的分子生物學(xué),主要研究基因或DNA結(jié)構(gòu)與功能、復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、表達(dá)和調(diào)節(jié)控制等過程。其中也涉及到與這些過程相關(guān)的蛋白質(zhì)和酶的結(jié)構(gòu)與功能的研究。現(xiàn)代分子生物學(xué)研究的主要內(nèi)容有基因與基因組的結(jié)構(gòu)與功能,DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯,基因表達(dá)調(diào)控的研究,DNA重組技術(shù),結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)等。5個(gè)分子生物學(xué)發(fā)展的主要大事紀(jì)(年代、發(fā)明者、簡要內(nèi)容)111944年著名微生物學(xué)家AVERY等人在對(duì)肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中證實(shí)了DNA是生物的遺傳物質(zhì)。這一重大發(fā)現(xiàn)打破了長期以來,許多生物學(xué)家認(rèn)為的只有象蛋白質(zhì)那樣的大分子才能作為細(xì)胞遺傳物質(zhì)的觀點(diǎn),在遺傳學(xué)上樹立了DNA是遺傳信息載體的理論。2221953年,是開創(chuàng)生命科學(xué)新時(shí)代具有里程碑意義的一年,WATSON和CRICK發(fā)表了“脫氧核糖核酸的結(jié)構(gòu)”的著名論文,他們?cè)贔RANKLIN和WILKINSX射線衍射研究結(jié)果的基礎(chǔ)上,推導(dǎo)出DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型,為人類充分揭示遺傳信息的傳遞規(guī)律奠定了堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)。同年,SANGER歷經(jīng)8年,完成了第一個(gè)蛋白質(zhì)胰島素的氨基酸全序列分析。331954年GAMNOW從理論上研究了遺傳密碼的編碼規(guī)律CRICK在前人研究工作基礎(chǔ)上,提出了中心法則理論,對(duì)正在興起的分子生物學(xué)研究起了重要的推動(dòng)作用。441956年VOLKIN和ASTRACHAN發(fā)現(xiàn)了MRNA當(dāng)時(shí)尚未用此名。551985年SAIKI等發(fā)明了聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PCR;SINSHEIMER首先提出人類基因組圖譜制作計(jì)劃設(shè)想;SMITH等報(bào)導(dǎo)了DNA測序中應(yīng)用熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記的方法;MILLER等發(fā)現(xiàn)DNA結(jié)合蛋白的鋅指結(jié)構(gòu)。22作為主要遺傳物質(zhì)的作為主要遺傳物質(zhì)的DNADNA具有哪些特性,研究具有哪些特性,研究DNADNA一級(jí)結(jié)構(gòu)有什么重要意一級(jí)結(jié)構(gòu)有什么重要意義,什么是義,什么是DNADNA的超螺旋結(jié)構(gòu)有哪些類型解釋的超螺旋結(jié)構(gòu)有哪些類型解釋DNADNA拓?fù)洚悩?gòu)體,它拓?fù)洚悩?gòu)體,它們之間互變異構(gòu)依賴于什么簡述真核生物的染色體結(jié)構(gòu),它們是如何們之間互變異構(gòu)依賴于什么簡述真核生物的染色體結(jié)構(gòu),它們是如何組裝的有幾種組蛋白參與核小體的形成組裝的有幾種組蛋白參與核小體的形成作為遺傳物質(zhì)的DNA具有以下特性①貯存并表達(dá)遺傳信息;3堿滴定曲線改變;生物活性喪失等。引起DNA變性的主要因素有溫度、PH值、有機(jī)溶劑等。紫外吸收光譜的變化是檢測變性最簡單的定性和定量方法。DNA的復(fù)性必須滿足二個(gè)條件①一定的離子強(qiáng)度,用以削弱兩條鏈中磷酸基團(tuán)之間的排斥力。②較高的溫度,用以避免隨機(jī)形成的無規(guī)則氫鍵。影響DNA復(fù)性速度的因素包括(1)DNA分子的復(fù)雜程度。(2)DNA的濃度。(3)DNA片段的大小。(4)溫度的影響。(5)陽離子的濃度。規(guī)定復(fù)性實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)條件是400核苷酸長度,TM25℃的溫度,陽離子強(qiáng)度018MOLL,此時(shí)的復(fù)性速度常數(shù)К≈5105。通過下列3種方法可以測定DNA序列復(fù)性的程度(1)S1核酸酶水解的雙鏈DNA量。(2)減色效應(yīng),在復(fù)性過程中可跟蹤測定A260的光吸收值;(3)S1核酸酶只催化單鏈DNA的水解,不能作用于雙鏈DNA,因此將樣品限定水解后測定抗羥基磷灰石層析,羥基磷灰石是一種磷酸鈣鹽,經(jīng)過一定的處理后,具有吸附雙鏈DNA的能力,洗脫時(shí),只允許單鏈通過,從而可以計(jì)算出剩余雙鏈DNA的量。DNA的TM值大小一般與下列因素有關(guān)(1)DNA的均一性。2GC對(duì)含量。3介質(zhì)中離子強(qiáng)度。以CC0對(duì)COT作圖得到的復(fù)性對(duì)濃度的依賴關(guān)系的曲線稱為COT曲線。分子雜交有多種類型,將不同來源的DNA變性后,在溶液里進(jìn)行雜交,稱為溶液雜交(SOLUTIONHYBRIDIZATION);用硝酸纖維素制成的濾膜,可以吸附單鏈DNA或RNA,將變性DNA或RNA吸附到濾膜上,再進(jìn)行雜交,稱為濾膜雜交(FILTERHYBRIDIZATION)。濾膜雜交包括(1)SOUTHERN印跡法用于檢測DNA。(2)NTHERN印跡法用于檢測RNA。(3)WESTHERN印跡法用于檢測蛋白質(zhì)。44簡述基因的概念什么是反向生物學(xué)什么是順反子現(xiàn)代分子生物學(xué)中簡述基因的概念什么是反向生物學(xué)什么是順反子現(xiàn)代分子生物學(xué)中順反子與基因是什么關(guān)系順反子與基因是什么關(guān)系基因(GENE)是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遺傳效應(yīng)的核苷酸序列是遺傳的基本單位。反向生物學(xué)是指利用重組DNA技術(shù)和離體定向誘變的方法研究已知結(jié)構(gòu)的基因相應(yīng)的功能,在體外使基因突變,再導(dǎo)入體內(nèi),檢測突變的遺傳效應(yīng),即以表型來探索基因的結(jié)構(gòu)。一個(gè)順反子就是一段核苷酸序列,能編碼一條完整的多肽鏈?,F(xiàn)代分子生物學(xué)文獻(xiàn)中,順反子和基因這兩個(gè)術(shù)語是互相通用的。一般而言,一個(gè)順反子就是一個(gè)基因,大約1500個(gè)核苷酸。它是由一群突變單位和重組單位組成的線性結(jié)構(gòu)(因?yàn)槿魏我粋€(gè)基因都是突變體或重組體)。
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    • 簡介:緒論緒論思考題(P9)1從廣義和狹義上寫出分子生物學(xué)的定義廣義上講的分子生物學(xué)包括對(duì)蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子結(jié)構(gòu)與功能的研究,以及從分子水平上闡明生命的現(xiàn)象和生物學(xué)規(guī)律。狹義的概念,即將分子生物學(xué)的范疇偏重于核酸(基因)的分子生物學(xué),主要研究基因或DNA結(jié)構(gòu)與功能、復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、表達(dá)和調(diào)節(jié)控制等過程。其中也涉及與這些過程相關(guān)的蛋白質(zhì)和酶的結(jié)構(gòu)與功能的研究。2、現(xiàn)代分子生物學(xué)研究的主要內(nèi)容有哪幾個(gè)方面什么是反向生物學(xué)什么是后基因組時(shí)代研究內(nèi)容DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯;基因表達(dá)調(diào)控的研究;DNA重組技術(shù)和結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)。反向生物學(xué)是指利用重組DNA技術(shù)和離體定向誘變的方法研究已知結(jié)構(gòu)的基因相應(yīng)的功能,在體外使基因突變,再導(dǎo)入體內(nèi),檢測突變的遺傳效應(yīng),即以表型來探索基因結(jié)構(gòu)。后基因組時(shí)代研究細(xì)胞全部基因的表達(dá)圖式和全部蛋白質(zhì)圖式,人類基因組研究由結(jié)構(gòu)向功能轉(zhuǎn)移。3、寫出三個(gè)分子生物寫學(xué)展的主要大事件(年代、發(fā)明者、簡要內(nèi)容)1953年WATSON和CLICK發(fā)表了“脫氧核糖核苷酸的結(jié)構(gòu)”的著名論文,提出了DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)模型。19721973年,重組DNA時(shí)代的到來。HBOYER和PBERG等發(fā)展了重組DNA技術(shù),并完成了第一個(gè)細(xì)菌基因的克隆,開創(chuàng)了基因工程新紀(jì)元。19902003年美、日、英、法、俄、中六國完成人類基因組計(jì)劃。解讀人類遺傳密碼。4、21世紀(jì)分子生物學(xué)的發(fā)展趨勢是怎樣的隨著基因組計(jì)劃的完成,人類已經(jīng)掌握了模式生物的所有遺傳密碼。又迎來了后基因組時(shí)代,人類基因組的研究重點(diǎn)由結(jié)構(gòu)向功能轉(zhuǎn)移。相關(guān)學(xué)說理論相應(yīng)誕生,如功能基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)和生物信息學(xué)。生命科學(xué)又進(jìn)入了一個(gè)全新的時(shí)代。第四章思考題(P130)1、基因的概念如何基因的研究分為幾個(gè)發(fā)展階段概念基因是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遺傳效應(yīng)的核苷酸序列,是遺傳的基本單位和突變單位以及控制形狀的功能單位。發(fā)展階段20世紀(jì)50年代以前,主要從細(xì)胞的染色體水平上進(jìn)行研究,屬○1于基因的染色體遺傳學(xué)階段。20世紀(jì)50年代以后,主要從DNA大分子水平上進(jìn)行研究,屬于○2分子的生物學(xué)階段。編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因?yàn)閱慰截惖?,但RRNA基因一般為多拷貝的。○4非編碼DNA所占比例很少,類似于病毒基因?!?基因組DNA具有多種調(diào)控區(qū)。如復(fù)制起始區(qū)、復(fù)制終止區(qū)、轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)○6子、轉(zhuǎn)錄終止區(qū)等特殊序列,以及還有重復(fù)序列,比病毒基因組復(fù)雜。與真核生物基因類似,也具有可移動(dòng)的DNA序列組分?!?真核生物基因組真核生物的單倍染色體組、細(xì)胞器中所含的一整套基因。特點(diǎn)真核基因組的分子質(zhì)量大。相當(dāng)?shù)膹?fù)雜度。○1線狀染色體,每條染色體多個(gè)復(fù)制起點(diǎn)?!?細(xì)胞核DNA與蛋白質(zhì)穩(wěn)定的結(jié)合,形成染色質(zhì)的復(fù)雜高級(jí)結(jié)構(gòu)。○3基因表達(dá)中,轉(zhuǎn)錄和翻譯在時(shí)間和空間上被分隔,不偶聯(lián)。○4大量重復(fù)序列,且單位長度不一,重復(fù)程度各異?!?基因一般以點(diǎn)拷貝形式存在,轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子MRNA?!?存在著可移動(dòng)的DNA序列。○7絕大多數(shù)真核生物基因都含有內(nèi)含子,基因編碼區(qū)是不連續(xù)排列的?!?異同紅色標(biāo)記相同點(diǎn);綠色為不同點(diǎn)9、簡要敘述真核生物的DNA序列的幾種類型。單拷貝的DNA序列○1低度重復(fù)的DNA序列,有210個(gè)拷貝數(shù);○2中度重復(fù)的DNA序列,有幾十至數(shù)十萬個(gè)拷貝數(shù)○3高度重復(fù)DNA,重復(fù)次數(shù)上萬至數(shù)百次?!?10、內(nèi)含子有什么功能其存在有何意義促進(jìn)重組?!?增加基因組的復(fù)雜性?!?含有可讀框○3基因組中外顯子和內(nèi)含子是相對(duì)的,有些內(nèi)含子具有編碼序列,能產(chǎn)生○4蛋白質(zhì)或功能RNA含有部分剪接信號(hào)○5產(chǎn)生核仁小RNA○6內(nèi)含子對(duì)基因表達(dá)有影響?!?存在意義有利于變異與進(jìn)化,增加重組機(jī)率,提高進(jìn)化率。14、人類基因組研究哪些內(nèi)容研究人類基因組有何重大意義研究內(nèi)容對(duì)人類全基因組作圖,或染色體作圖(包括遺傳連鎖作圖和○1物理作圖),也就是對(duì)基因組進(jìn)行標(biāo)記和劃分,為基因或特定DNA序列在染色體上的位置提供標(biāo)志。進(jìn)一步還包括繪制轉(zhuǎn)錄圖譜。對(duì)基因組DNA進(jìn)行裂解切割和基因克隆。把幾百甚至幾千堿○2基長度的DNA片段按已知的標(biāo)識(shí)進(jìn)行有序的排列。測定基因組的全部DNA序列。對(duì)全部DNA進(jìn)行序列分析,按其○3在染色體上的位置進(jìn)行排列,得到在染色體上DNA序列的全部。基因的鑒定,即確定每個(gè)基因的結(jié)構(gòu),分離和鑒定具有重要功○4能以及與重大疾病相關(guān)的基因。建立基因的信息系統(tǒng)、基因信息的儲(chǔ)存、處理以及開發(fā)相應(yīng)的○5軟件。
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    • 簡介:分子生物學(xué)試題及答案分子生物學(xué)試題及答案一、名一、名詞解釋1CDNA與CCCDNACDNA是由是由MRNA通過反轉(zhuǎn)錄酶轉(zhuǎn)錄酶合成的雙合成的雙鏈DNA;CCCDNA是游離于染色體之外的是游離于染色體之外的質(zhì)粒雙粒雙鏈閉鏈閉合環(huán)形DNA。2標(biāo)準(zhǔn)折疊準(zhǔn)折疊單位蛋白位蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)級(jí)結(jié)構(gòu)單元?。菪c-螺旋與Β-折疊通-折疊通過各種各種連接多接多肽可以可以組成特殊幾何排列的成特殊幾何排列的結(jié)構(gòu)塊,此種確定的折疊,此種確定的折疊類型通常型通常稱為超二超二級(jí)結(jié)級(jí)結(jié)構(gòu)。幾乎所有的三構(gòu)。幾乎所有的三級(jí)結(jié)級(jí)結(jié)構(gòu)都可以用構(gòu)都可以用這些折疊些折疊類型,乃至型,乃至他們的組合型來予以描述,因此又將其稱合型來予以描述,因此又將其稱為標(biāo)為標(biāo)準(zhǔn)折疊準(zhǔn)折疊單位。位。3CAP環(huán)腺苷酸(腺苷酸(CAMP)受體蛋白)受體蛋白CRP(CAMPRECEPTPROTEIN),),CAMP與CRP結(jié)合后所形成的復(fù)合物稱激活蛋白合后所形成的復(fù)合物稱激活蛋白CAP(CAMPACTIVATEDPROTEIN)4回文序列回文序列DNA片段上的一段所具有的反向互片段上的一段所具有的反向互補(bǔ)序列,常是限制序列,常是限制性酶切位點(diǎn)。切位點(diǎn)。5MICRNA互互補(bǔ)干擾RNA或稱反或稱反義RNA,與,與MRNA序列互序列互補(bǔ),可,可抑制抑制MRNA的翻的翻譯。6核核酶具有催化活性的具有催化活性的RNA,在,在RNA的剪接加工的剪接加工過程中起到自我程中起到自我催化的作用。催化的作用。7模體蛋白模體蛋白質(zhì)分子空分子空間結(jié)間結(jié)構(gòu)中存在著某些立體形狀和拓?fù)錁?gòu)中存在著某些立體形狀和拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)頗為頗為類似的局部區(qū)域似的局部區(qū)域8信號(hào)信號(hào)肽在蛋白在蛋白質(zhì)合成合成過程中程中N端有端有1536個(gè)氨基酸殘基的個(gè)氨基酸殘基的肽段,段,引導(dǎo)蛋白蛋白質(zhì)的跨膜。的跨膜。去除了去除了5’3’外切外切酶活性活性19錨定PCR用于用于擴(kuò)增已知一端序列的目的增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端。在未知序列一端加上一段多聚加上一段多聚DG的尾巴,然后分的尾巴,然后分別用多聚用多聚DC和已知的序列作和已知的序列作為引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增。增。20融合蛋白真核蛋白的基因與外源基因融合蛋白真核蛋白的基因與外源基因連接,同接,同時(shí)表達(dá)翻表達(dá)翻譯出的出的原基因蛋白與外源蛋白原基因蛋白與外源蛋白結(jié)合在一起所合在一起所組成的蛋白成的蛋白質(zhì)。二、填二、填空1DNA的物理的物理圖譜圖譜是DNA分子的(限制性內(nèi)切分子的(限制性內(nèi)切酶酶酶酶解)片段的排)片段的排列順序。序。2RNA酶的剪切分的剪切分為(自體催化(自體催化)、)、(異體催化(異體催化)兩種)兩種類型。型。3原核生物中有三種起始因子分原核生物中有三種起始因子分別是(是(IF1)、)、(IF2)和()和(IF3)。)。4蛋白蛋白質(zhì)的跨膜需要(的跨膜需要(信號(hào)信號(hào)肽)的引)的引導(dǎo),蛋白伴,蛋白伴侶的作用是(的作用是(輔助肽鏈折疊成天然構(gòu)象的蛋白折疊成天然構(gòu)象的蛋白質(zhì))。)。5啟啟動(dòng)子中的元件通??梢苑肿又械脑ǔ?梢苑譃閮煞N(核心啟兩種(核心啟動(dòng)子元件子元件)和(上游啟)和(上游啟動(dòng)子元件子元件)。)。6分子生物學(xué)的研究內(nèi)容主要包含(分子生物學(xué)的研究內(nèi)容主要包含(結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)構(gòu)分子生物學(xué))、)、(基因表達(dá)與(基因表達(dá)與調(diào)控)、)、(DNA重組技術(shù))三部分。)三部分。7證明DNA是遺傳遺傳物質(zhì)的兩個(gè)關(guān)的兩個(gè)關(guān)鍵性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)是(肺炎球菌感染小鼠是(肺炎球菌感染小鼠)、)、(T2噬菌體感染大噬菌體感染大腸桿菌桿菌)這兩個(gè)兩個(gè)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)中主要的中主要的論點(diǎn)證據(jù)是(生物據(jù)是(生物體吸收的外源體吸收的外源DNA改變了其了其遺傳遺傳潛能潛能)。)。8HNRNA與MRNA之間的差的差別主要有兩點(diǎn)(主要有兩點(diǎn)(HNRNA在轉(zhuǎn)變?yōu)檗D(zhuǎn)變?yōu)镸RNA的過程中程中經(jīng)過經(jīng)過剪接,剪接,)、)、
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    • 簡介:1原核生物原核生物DNA具有哪些不同于真核生物具有哪些不同于真核生物DNA的特征的特征真核生物①真核基因組龐大。②存在大量的重復(fù)序列。③大部分為非編碼序列90%。④轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子。⑤是斷裂基因,有內(nèi)含子結(jié)構(gòu)。⑥存在大量的順式作用元件啟動(dòng)子、增強(qiáng)子、沉默子。⑦存在大量的DNA多態(tài)性。⑧具有端粒TELOMERE結(jié)構(gòu)原核生物①基因組很小,大多只有一條染色體,且DNA含量少。②主要是單拷貝基因,只有很少數(shù)基因〔如RRNA基因〕以多拷貝形式存在。③整個(gè)染色體DNA幾乎全部由功能基因與調(diào)控序列所組成;④幾乎每個(gè)基因序列都與它所編碼的蛋白質(zhì)序列呈線性對(duì)應(yīng)狀態(tài)1試述基因克隆載體進(jìn)化過程。試述基因克隆載體進(jìn)化過程。①PSC101質(zhì)粒載體,第一個(gè)基因克隆載體②COLE1質(zhì)粒載體,松弛型復(fù)制控制的多拷貝質(zhì)粒③PBR322質(zhì)粒載體,具有較小的分子量(4363BP)。能攜帶68KB的外源DNA片段,操作較為便利④PUC質(zhì)粒載體,具有更小的分子量和更高的拷貝數(shù)⑤PGEM3Z質(zhì)粒,編碼有一個(gè)氨芐青霉素抗性基因和一個(gè)LACZ基因⑥穿梭質(zhì)粒載體,由人工構(gòu)建的具有原核和真核兩種不同復(fù)制起點(diǎn)和選擇標(biāo)記,可在不同的寄主細(xì)胞內(nèi)存活和復(fù)制的質(zhì)粒載體⑦PBLUE噬菌粒載體,一類從PUC載體派生而來的噬菌粒載體2試述試述PCR擴(kuò)增的原理和步驟。對(duì)比擴(kuò)增的原理和步驟。對(duì)比DNA體內(nèi)復(fù)制的差異。體內(nèi)復(fù)制的差異。原理首先將雙鏈DNA分子在臨近沸點(diǎn)的溫度下加熱分離成兩條單鏈DNA分子,DNA聚合酶以單鏈DNA為模板并利用反應(yīng)混合物中的四種脫氧核苷三磷酸、合適的MG2濃度和實(shí)驗(yàn)中提供的引物序列合成新生的DNA分子。步驟①將含有待擴(kuò)增DNA樣品的反應(yīng)混合物放置在高溫(94℃)環(huán)境下加熱1分鐘,使雙鏈DNA變性,形成單鏈模板DNA②降低反應(yīng)溫度(退火,約50℃),約1分鐘,使寡核苷酸引物與兩條單鏈模板DNA結(jié)合在靶DNA區(qū)段兩端的互補(bǔ)序列位置上③將反應(yīng)混合物的溫度上升到72℃左右保溫1數(shù)分鐘,在DNA聚合酶的作用下,從引物的3端加入脫氧核苷三磷酸,并沿著模板分子按5→3方向延伸,合成新生DNA互補(bǔ)鏈與體內(nèi)復(fù)制的差別①PCR不產(chǎn)生岡崎片段②在高溫條件下反應(yīng),不需要DNA解旋酶③PCR可經(jīng)過多個(gè)循環(huán)④在體外進(jìn)行,可調(diào)控第六章1基因敲除基因敲除原理又稱基因打靶,通過外源DNA與染色體DNA之間的同源重組,進(jìn)行精確的定點(diǎn)修飾和基因改造,具有專一性強(qiáng)、染色體DNA可與目的片段共同穩(wěn)定遺傳等特點(diǎn)方法高等動(dòng)物基因敲除技術(shù),植物基因敲除技術(shù)2完全基因敲除和條件型基因敲除完全基因敲除和條件型基因敲除完全基因敲除是指通過同源重組法完全消除細(xì)胞或者動(dòng)植物個(gè)體中的靶基因活性,條件型基因敲除是指通過定位重組系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)特定時(shí)間和空間的基因敲除3基因定點(diǎn)突變基因定點(diǎn)突變?cè)硗ㄟ^改變基因特定位點(diǎn)核苷酸序列來改變所編碼的氨基酸序列,用于研究某個(gè)(些)氨基酸殘基對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、催化活性以及結(jié)合配體能力的影響,也可用于改造DNA調(diào)控元件特征序列、修飾表達(dá)載體、引入新的酶切位點(diǎn)等3、原核生物的細(xì)胞中除了主染色體以外,還含有各種質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子。質(zhì)粒常為雙鏈環(huán)狀DNA,可獨(dú)立復(fù)制,有的既可以游離于細(xì)胞質(zhì)中,也可以整合到染色體上。轉(zhuǎn)座因子一般都是整合在基因組中。真核生物除了核染色體以外,還存在細(xì)胞器DNA,如線粒體和葉綠體的DNA,為雙鏈環(huán)狀,可自主復(fù)制。有的真核細(xì)胞中也存在質(zhì)粒,如酵母和植物。4、原核生物的DNA位于細(xì)胞的中央,稱為類核(NUCLEOID)。真核生物有細(xì)胞核,DNA序列壓縮為染色體存在于細(xì)胞核中。5、真核基因組都是由DNA序列組成,原核基因組還有可能由RNA組成,如RNA病毒。第七章第七章1簡述代謝物對(duì)基因表達(dá)調(diào)控的兩種方式。簡述代謝物對(duì)基因表達(dá)調(diào)控的兩種方式。答①轉(zhuǎn)錄水平上的調(diào)控;②轉(zhuǎn)錄水平上的調(diào)控,包括MRNA加工成熟水平上的調(diào)控和翻譯水平上的調(diào)控3簡述乳糖操縱子的調(diào)控模型。簡述乳糖操縱子的調(diào)控模型。答A、乳糖操縱子的組成大腸桿菌乳糖操縱子含Z、Y、A三個(gè)結(jié)構(gòu)基因,分別編碼半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰轉(zhuǎn)移酶,此外還有一個(gè)操縱序列O,一個(gè)啟動(dòng)子P和一個(gè)調(diào)節(jié)基因I。B、阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié)沒有乳糖存在時(shí),I基因編碼的阻遏蛋白結(jié)合于操縱序列O處,乳糖操縱子處于阻遏狀態(tài),不能合成分解乳糖的三種酶;有乳糖存在時(shí),乳糖作為誘導(dǎo)物誘導(dǎo)阻遏蛋白變構(gòu),不能結(jié)合于操縱序列,乳糖操縱子被誘導(dǎo)開放合成分解乳糖的三種酶。所以,乳糖操縱子的這種調(diào)控機(jī)制為可誘導(dǎo)的負(fù)調(diào)控。C、CAP的正性調(diào)節(jié)在啟動(dòng)子上游有CAP結(jié)合位點(diǎn),當(dāng)大腸桿菌從以葡萄糖為碳源的環(huán)境轉(zhuǎn)變?yōu)橐匀樘菫樘荚吹沫h(huán)境時(shí),CAMP濃度升高,與CAP結(jié)合,使CAP發(fā)生變構(gòu),CAP結(jié)合于乳糖操縱子啟動(dòng)序列附近的CAP結(jié)合位點(diǎn),激活RNA聚合酶活性,促進(jìn)結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄,調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合于操縱子后促進(jìn)結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄,對(duì)乳糖操縱子實(shí)行正調(diào)控,加速合成分解乳糖的三種酶。D、協(xié)調(diào)調(diào)節(jié)乳糖操縱子中的I基因編碼的阻遏蛋白的負(fù)調(diào)控與
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    • 簡介:第2章染色體與染色體與DNADNA名詞解釋名詞解釋原癌基因原癌基因細(xì)胞內(nèi)與細(xì)胞增殖相關(guān)的正?;?,是維持機(jī)體正常生命活動(dòng)所必須的,在進(jìn)化上高等保守。當(dāng)原癌基因的結(jié)構(gòu)或調(diào)控區(qū)發(fā)生變異,基因產(chǎn)物增多或活性增強(qiáng)時(shí),使細(xì)胞過度增殖,從而形成腫瘤。復(fù)制復(fù)制以親代DNA或RNA為模板,根據(jù)堿基配對(duì)的原則,在一系列酶的作用下,生成與親代相同的子代DNA或RNA的過程。轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座子TRANSPOSON或TRANSPOSABLEELEMENT位于染色體DNA上可自主復(fù)制和位移的基本單位。包括插入序列和復(fù)合轉(zhuǎn)座子。半保留復(fù)制半保留復(fù)制以親代DNA雙鏈為模板以堿基互補(bǔ)方式合成子代DNA,這樣新形成的子代DNA中,一條鏈來自親代DNA,而另一條鏈則是新合成的,這種復(fù)制方式叫半保留復(fù)制。染色體染色體染色體是遺傳信息的載體,由DNA、RNA和蛋白質(zhì)構(gòu)成,其形態(tài)和數(shù)目具有種系的特性。在細(xì)胞間期核中,以染色質(zhì)形式存在。在細(xì)胞分裂時(shí),染色質(zhì)絲經(jīng)過螺旋化、折疊、包裝成為染色體,為顯微鏡下可見的具不同形狀的小體。核小體是構(gòu)成真核生物染色體的基本單位,是DNA和蛋白質(zhì)構(gòu)成的緊密結(jié)構(gòu)形式,包括200BP左右的DNA和9個(gè)組蛋白分子構(gòu)成的致密結(jié)構(gòu)。填空題填空題1真核細(xì)胞核小體的組成是DNA和蛋白2天然染色體末端不能與其他染色體斷裂片段發(fā)生連接,這是因?yàn)樘烊蝗旧w末端存在端粒結(jié)構(gòu)。3在聚合酶鏈反應(yīng)中,除了需要模板DNA外,還需加入引物、DNA聚合酶、DNTP和鎂離子。4引起DNA損傷的因素有自發(fā)因素、物理因素、化學(xué)因素。5DNA復(fù)制時(shí)與DNA解鏈有關(guān)的酶和蛋白質(zhì)有拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ、解螺旋酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白。6參與DNA切除修復(fù)的酶有DNA聚合酶Ⅰ、DNA連接酶、特異的核酸內(nèi)切酶。7在真核生物中DNA復(fù)制的主要酶是DNA聚合酶Δ。在原核生物中是DNA聚合酶Ⅲ。8端粒酶是端粒酶是含一段RNA的逆轉(zhuǎn)錄酶。9DNA的修復(fù)方式有錯(cuò)配修復(fù)、堿基切除修復(fù)、核苷酸切除修復(fù)、DNA的直接修復(fù)。選擇題選擇題1真核生物復(fù)制起點(diǎn)的特征包括(B)A富含GC區(qū)B富含AT區(qū)CZDNAD無明顯特征2插入序列(IS)編碼(A)A轉(zhuǎn)座酶B逆轉(zhuǎn)錄酶CDNA合成酶D核糖核酸酶3紫外線照射對(duì)DNA分子的損傷主要是DA堿基替換B磷酸脂鍵斷裂C。堿基丟失D形成共價(jià)連接的嘧啶二聚體4自然界中以DNA為遺傳物質(zhì)的大多數(shù)生物DNA的復(fù)制方式(C)A環(huán)式BD環(huán)式C半保留D全保留5原核生物基因組中沒有(A)(3)、在類組蛋白(HU、ATP參與下DANA蛋白變性13個(gè)BP的重復(fù)序列形成開鏈復(fù)合物。(4)、DNAB借助于水解ATP產(chǎn)生的能量在DNAC的幫助下沿5’→3’方向移動(dòng),解開DNA雙鏈,形成前引發(fā)復(fù)合物。(5)、單鏈結(jié)合蛋白結(jié)合于單鏈。(6)、引物合成酶(DNAG蛋白)開始合成RNA引物。鏈的延長(岡崎片段的合成)在DNA聚合酶Ш的催化下,以四種5’脫氧核苷三磷酸為底物,在RNA引物的3’端以磷酸二酯鍵連接上脫氧核糖核苷酸并釋放出焦磷酸。DNA鏈的延伸同時(shí)進(jìn)行前導(dǎo)鏈和滯后鏈的合成。兩條鏈方向相反。6、PCR的基本原理PCR是在試管中進(jìn)行的DNA復(fù)制反應(yīng),基本原理是依據(jù)細(xì)胞內(nèi)DNA半保留復(fù)制的機(jī)理,以及體外DNA分子于不同溫度下雙鏈和單鏈可以互相轉(zhuǎn)變的性質(zhì),人為地控制體外合成系統(tǒng)的溫度,以促使雙鏈DNA變成單鏈,單鏈DNA與人工合成的引物退火,然后耐熱DNA聚合酶以DNTP為原料使引物沿著單鏈模板延伸為雙鏈DNA。PCR全過程每一步的轉(zhuǎn)換是通過溫度的改變來控制的。需要重復(fù)進(jìn)行DNA模板解鏈、引物與模板DNA結(jié)合、DNA聚合酶催化新生DNA的合成,即高溫變性、低溫退火、中溫延伸3個(gè)步驟構(gòu)成PCR反應(yīng)的一個(gè)循環(huán),此循環(huán)的反復(fù)進(jìn)行,就可使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。DNA模板變性模板雙鏈DNA單鏈DNA,94℃。退火引物+單鏈DNA雜交鏈,引物的TM值。引物的延伸溫度至70℃左右,TAQDNA聚合酶以4種DNTP為原料,以目的DNA為模板,催化以引物3’末端為起點(diǎn)的5’→3’DNA鏈延伸反應(yīng),形成新生DNA鏈。新合成的引物延伸鏈經(jīng)過變性后又可作為下一輪循環(huán)反應(yīng)的模板PCR,就是如此反復(fù)循環(huán),使目的DNA得到高效快速擴(kuò)增。第三章第三章啟動(dòng)子啟動(dòng)子是一段位于結(jié)構(gòu)基因5,端上游區(qū)的DNA序列,能活化RNA聚合酶,使之與模板DNA準(zhǔn)確地相結(jié)合并具有轉(zhuǎn)錄起始的特異性。指RNA聚合酶識(shí)別、結(jié)合和開始轉(zhuǎn)錄的一段特定的DNA序列。增強(qiáng)子增強(qiáng)子能強(qiáng)化轉(zhuǎn)錄起始的序列稱為增強(qiáng)子。轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄以DNA為模板,按照堿基配對(duì)原則合成RNA,即將DNA所含的遺傳信息傳給RNA,形成一條與DNA鏈互補(bǔ)的RNA的過程。RNARNA的編輯的編輯是某些RNA,特別是MRNA的一種加工方式,它導(dǎo)致了DNA所編碼的遺傳信息的改變。外顯子外顯子EXONEXON真核細(xì)胞基因DNA中的編碼序列,這些序列被轉(zhuǎn)錄成RNA并進(jìn)而翻譯為蛋白質(zhì)。內(nèi)含子內(nèi)含子INTRONINTRON真核細(xì)胞基因DNA中的間插序列,這些序列被轉(zhuǎn)錄成RNA,但隨即被剪除而不翻譯。復(fù)制子生物體的復(fù)制單位稱為復(fù)制子(REPLICON,是在同一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)控制下的一段DNA序列。轉(zhuǎn)錄單元是一段啟動(dòng)子開始至終止子結(jié)束的DNA序列。轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)是與新生RNA鏈的第一個(gè)核苷酸相對(duì)應(yīng)的DNA鏈上的堿基,通常為一個(gè)嘌呤。
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    • 簡介:FPERSONALUSEONLYINSTUDYRESEARCHNOTFCOMMERCIALUSE蚅農(nóng)業(yè)微生物學(xué)作業(yè)題參考答案莃作業(yè)題一參考答案薃一、名詞解釋(20分)艿生長曲線在分批培養(yǎng)中,以細(xì)胞數(shù)目的對(duì)數(shù)值作縱坐標(biāo),以培養(yǎng)時(shí)間作橫坐標(biāo),就可以畫出一條有規(guī)律的曲線,這就是微生物的典型生長曲線。莈氨化作用就是微生物將有機(jī)氮化物轉(zhuǎn)化成氨的過程。膃培養(yǎng)基培養(yǎng)基是一種人工配制的、適合微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)莀拮抗作用由某種微生物的生長而引起的其他條件改變抑制或殺死他種生物的現(xiàn)象。莈菌落微生物在固體培養(yǎng)基上局限一處大量繁殖,形成肉眼可見的群體,即稱為菌落。袈朊病毒朊病毒在電子顯微鏡下呈桿狀顆粒、直徑26NM,長100~200NM一般為125~150NM。袃生物固氮生物固氮是指分子氮通過固氮微生物固氮酶系的催化而形成氨的過程。莂衣原體衣原體是一類在真核細(xì)胞內(nèi)營專性能量寄生的小型革蘭氏陰性原核生物。螀根瘤是根瘤細(xì)菌與豆科植物的共生在植物根部共生發(fā)育形成的特殊結(jié)構(gòu)。芇互生作用一種微生物的生命活動(dòng)可以創(chuàng)造或改善另一種微生物生活條件,彼此促進(jìn)生長。薄二、填空(20分)蒃1細(xì)菌的基本形態(tài)有球狀、桿狀、螺旋狀衿2放線菌的菌絲有營養(yǎng)菌絲、氣生菌絲、孢子絲蚆3霉菌的無性孢子有節(jié)孢子、胞囊孢子、分生孢子、厚垣孢子莄4微生物的呼吸類型有有氧呼吸、無氧呼吸、兼性呼吸芀5地衣是藍(lán)細(xì)菌和真菌的共生體。膁6常用的微生物殺蟲劑包括細(xì)菌、真菌、病毒肆7根據(jù)固氮微生物與高等植物間關(guān)系,可以把固氮作用分為自生、共生、聯(lián)合芃⑸空氣中的分子態(tài)氮經(jīng)固氮微生物的作用轉(zhuǎn)化成氨,在合成有機(jī)氮化物,即生物固氮。芁2論述微生物與綠色農(nóng)業(yè)的關(guān)系蕆微生物學(xué)促進(jìn)了農(nóng)業(yè)的進(jìn)步,微生物在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中有多方面的應(yīng)用,從而促進(jìn)了大農(nóng)業(yè)農(nóng)、林、牧、副、漁的發(fā)展,如以菌治蟲,以菌治病,以菌治草(微生物治草劑);以菌增肥,以菌促長(如赤霉素等促進(jìn)植物生長);以菌當(dāng)飼料;以菌當(dāng)藥物(藥用真菌);以菌當(dāng)蔬菜(食用菌);以及以菌產(chǎn)沼氣等。薂作業(yè)題二參考答案肁一、名詞解釋(10分)荿氨化作用就是微生物將有機(jī)氮化物轉(zhuǎn)化成氨的過程。羆滅菌是將所有的微生物殺死的方法,包括細(xì)菌的芽孢。芃互生作用一種微生物的生命活動(dòng)可以創(chuàng)造或改善另一種微生物的生活條件,彼此促進(jìn)生長。膂生長曲線在分批培養(yǎng)中,以細(xì)胞數(shù)目的對(duì)數(shù)值作縱坐標(biāo),以培養(yǎng)時(shí)間作橫坐標(biāo),就可以畫出一條有規(guī)律的曲線,這就是微生物的典型生長曲線。蒈培養(yǎng)基培養(yǎng)基是一種人工配制的、適合微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。蒞二、填空(30分)肅1噬菌體侵染過程包括吸附、侵入、增殖、成熱、釋放;膃2微生物殺蟲劑包括細(xì)菌、真菌、病毒;袀3微生物數(shù)量測定常用的方法顯微鏡鏡檢、稀釋倒皿法;螅4霉菌的無性孢子厚垣孢子、節(jié)孢子、孢囊孢子、分生孢子;螄5微生物固氮作用有自生固氮作用、共生固氮作用、聯(lián)合固氮作用類型。;羈6土壤微生物主要有好氣性、有機(jī)營養(yǎng)型、中溫型羈三、簡答題(30分)蒈1試分析微生物的五大共性與人類的關(guān)系薄五個(gè)共性對(duì)人類來說是既有利又有弊的。我們學(xué)習(xí)微生物學(xué)的目的在于能興利除弊、趨利避害。人類利用微生物還可包括單細(xì)胞化的動(dòng)、植物的潛力是無窮的。通過本課程的學(xué)習(xí),要使自己努力達(dá)到能在細(xì)胞、分子和群體水平上認(rèn)識(shí)微生物的生命活動(dòng)規(guī)律,并設(shè)法聯(lián)系生產(chǎn)實(shí)際,為進(jìn)一步開發(fā)、利用或改善有益微生物,控制、消滅或改造有害微生物打好堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
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    • 簡介:_目錄第一章免疫學(xué)緒論31免疫學(xué)概述32免疫器官與組織3第二章抗原31抗原的概念和性能32影響抗原免疫原性的因素43抗原的分類44非特異性免疫細(xì)胞激活物4第三章免疫分子41免疫球蛋白42補(bǔ)體系統(tǒng)53MHC及其編碼分子64其他免疫分子6第四章免疫細(xì)胞71固有免疫細(xì)胞72抗原提呈細(xì)胞及其抗原提呈作用73適應(yīng)性免疫細(xì)胞7第五章免疫應(yīng)答81固有免疫應(yīng)答82適應(yīng)性免疫應(yīng)答8第六章免疫病理81超敏反應(yīng)8Ⅰ型超敏反應(yīng)9Ⅱ型超敏反應(yīng)9Ⅲ型超敏反應(yīng)9Ⅳ型超敏反應(yīng)9第七章免疫學(xué)應(yīng)用102免疫預(yù)防10第八章病原生物學(xué)緒論101病原生物與病原生物學(xué)102醫(yī)學(xué)微生態(tài)104病原生物控制與生物安全11第九章細(xì)菌學(xué)總論111細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)112細(xì)菌的生理124細(xì)菌感染與免疫12第十章常見致病細(xì)菌131球菌133厭氧性細(xì)菌144分枝桿菌145其他原核細(xì)胞型微生物14第十一章病毒學(xué)總論151病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)152病毒的增殖、遺傳和變異153病毒感染與免疫15_第一章免疫學(xué)第一章免疫學(xué)緒論緒論1免疫學(xué)概述免疫學(xué)概述免疫是生物在生存、發(fā)展過程中所形成的識(shí)別“自我”與“非己”,以及通過排斥“非己”而保護(hù)“自我”的過程。免疫的三個(gè)功能防御、自穩(wěn)、監(jiān)視免疫類型固有性免疫又稱天然性免疫、非特異性免疫特點(diǎn)先天具有、無特異性、無免疫記憶適應(yīng)性免疫又稱獲得性免疫特點(diǎn)后天獲得、有特異性、有免疫記憶2免疫器官與免疫器官與組織組織中樞免疫器官包括骨髓和胸腺骨髓功能1骨髓是成人各類血細(xì)胞(包括免疫細(xì)胞)的發(fā)源地2骨髓是B淋巴細(xì)胞發(fā)育成熟的場所3骨髓是再次體液免疫應(yīng)答的場所胸腺功能1胸腺是T淋巴細(xì)胞分化、發(fā)育和成熟的主要器官2胸腺是自身免疫耐受和維持的重要器官3免疫調(diào)節(jié)作用外周免疫器官包括淋巴結(jié)、脾和黏膜相關(guān)淋巴組織MALT(黏膜相關(guān)淋巴組織)功能1執(zhí)行黏膜局部免疫功能2分泌SIGA
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    • 簡介:LPC2013051第一章第一章緒論緒論一簡述分子生物學(xué)的主要內(nèi)容。一簡述分子生物學(xué)的主要內(nèi)容。1DNA重組技術(shù)(又稱基因工程)2基因表達(dá)調(diào)控研究3生物大分子的結(jié)構(gòu)功能的研究結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)4基因組、功能基因組與生物信息學(xué)研究二什么是遺傳學(xué)的中心法則和反中心法則二什么是遺傳學(xué)的中心法則和反中心法則遺傳學(xué)中心法則描述從一個(gè)基因到相應(yīng)蛋白質(zhì)的信息流的途徑。遺傳信息貯存在DNA中,DNA被復(fù)制傳給子代細(xì)胞,信息被拷貝或由DNA轉(zhuǎn)錄成RNA,然后RNA翻譯成多肽。反中心法則由RNA逆轉(zhuǎn)錄到DNA,再由DNA轉(zhuǎn)錄到RNA,然后RNA翻譯成多肽、蛋白質(zhì)。第二章第二章染色體與染色體與DNADNA一、名詞解釋一、名詞解釋半保留復(fù)制半保留復(fù)制DNA復(fù)制時(shí),以親代DNA的每一條鏈作為模版,合成完全相同的兩個(gè)雙鏈自帶DNA分子,每個(gè)子代DNA分子中都含有一條親代DNA鏈的復(fù)制方式。岡崎片段岡崎片段在DNA復(fù)制過程中,前導(dǎo)鏈能連續(xù)合成,而滯后鏈只能是斷續(xù)的合成53的多個(gè)短片段,這些不連續(xù)的小片段稱為岡崎片段。復(fù)制子復(fù)制子從復(fù)制原點(diǎn)到終點(diǎn),組成一個(gè)復(fù)制單位,叫復(fù)制子。插入序列插入序列最簡單的轉(zhuǎn)座子,不含有任何宿主基因,它們是細(xì)菌染色體或質(zhì)粒DNA的正常組成部分。DNADNA的變性和復(fù)性變性的變性和復(fù)性變性指DNA雙鏈的氫鍵斷裂,完全變成單鏈。復(fù)性復(fù)性指熱變性的DNA緩慢冷卻,單鏈恢復(fù)成雙鏈。雙向復(fù)制雙向復(fù)制復(fù)制從一個(gè)固定的起始點(diǎn)開始,同時(shí)向兩個(gè)方向等速進(jìn)行。引物酶引物酶一種特殊的RNA聚合酶,在DNA模版上合成一段RNA鏈,這段RNA鏈?zhǔn)荄NA復(fù)制起始時(shí)必需的引物。轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座子存在與染色體DNA上可自主復(fù)制和位移的基本單位。堿基切除修復(fù)堿基切除修復(fù)首先由糖苷水解酶識(shí)別特定受損核苷酸上的NΒ糖苷鍵,在DNA上形成AP位點(diǎn),由AP核酸內(nèi)切酶把受損的核苷酸的糖苷磷酸鍵切開,移去包括AP位點(diǎn)在內(nèi)的小片段DNA,由聚合酶Ⅰ合成新片段,DNA連接酶最終把兩者連接成新的DNA鏈。DNADNA重組修復(fù)重組修復(fù)即“復(fù)制后修復(fù)”。機(jī)體細(xì)胞對(duì)在復(fù)制起始時(shí)尚未修復(fù)的DNA部位可先復(fù)制再修復(fù)。在復(fù)制時(shí),先跳過損傷部位,在和成鏈中留下一個(gè)缺口。對(duì)該缺口的修復(fù)即“DNA重組修復(fù)”先從同源DNA母鏈上將相應(yīng)核苷酸序列片段移至子鏈缺口處,然后再用新合成的序列補(bǔ)上母鏈空缺。解旋酶解旋酶通過水解ATP獲得能量來解開雙鏈DNA的酶。單鏈結(jié)合蛋白單鏈結(jié)合蛋白與解開的DNA單鏈緊密結(jié)合,防止重新形成雙鏈,并免受核酸酶降解。在復(fù)制中維持模板處于單鏈狀態(tài)。DNADNA連接酶連接酶連接DNA鏈3OH末端和相鄰DNA鏈5P末端,形成磷酸二酯鍵,從而把兩段相鄰的DNA鏈連接成完整的鏈。轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座子一段DNA順序可以從原位上單獨(dú)復(fù)制或斷裂下來,環(huán)化后插入另一位點(diǎn),并對(duì)其后的基因起調(diào)控作用。P轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座子是一種能夠誘發(fā)雜種不育的果蠅轉(zhuǎn)座子,果蠅中幾乎所有的雜種不育都由P轉(zhuǎn)座子引起。二、理解題二、理解題1DNADNA和RNARNA分子的基本組成成分。分子的基本組成成分。1、DNA由4種主要的脫氧核苷酸DAMP、DGMP、DCMT和DTMP通過3′,5′磷酸二酯鍵連接而成。2、RNA是由核糖核苷酸經(jīng)磷酯鍵縮合而成長鏈狀分子。一個(gè)核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和堿基構(gòu)成。RNA的堿基主要有4種,即A腺嘌呤,G鳥嘌呤,C胞嘧啶,U尿嘧啶。2DNA2DNA分子的一級(jí)結(jié)構(gòu)定義、組成和表示方法。分子的一級(jí)結(jié)構(gòu)定義、組成和表示方法。LPC2013053原核生物DNA聚合酶種類的比較POLIPOLIPOLIIPOLIIPOLIIIPOLIII5→35→3聚合酶活性聚合酶活性3→53→5外切酶活性外切酶活性5→35→3外切酶活性外切酶活性–構(gòu)成亞基數(shù)單體不詳多亞基體外鏈延長速度核苷酸分600309000分子數(shù)細(xì)胞400不詳10~20功能修復(fù)合成去除引物填補(bǔ)空隙校對(duì)不詳復(fù)制校對(duì)6DNA6DNA復(fù)制的基本過程和終止機(jī)理復(fù)制的基本過程和終止機(jī)理1、DNA雙螺旋的解旋DNA在復(fù)制時(shí),其雙鏈?zhǔn)紫冉忾_,形成復(fù)制叉,這是一個(gè)有多種蛋白質(zhì)以及酶參與復(fù)制的過程。2DNA復(fù)制的引發(fā)所有的DNA聚合酶都從3’羥基端起始DNA合成。DNA復(fù)制時(shí),往往先由引發(fā)每在DNA復(fù)制時(shí),往往先由引發(fā)酶在DNA模版上合成一段RNA鏈,它提供引發(fā)末端(即引物),接著由DNA聚合酶從RNA聚合酶從RNA引物3’端開始合成新的DNA鏈。3、在DNA聚合酶的作用下,水解切除RNA引物,填補(bǔ)空缺。4、在DNA連接酶的作用下,連接相鄰DNA片段。5、終止機(jī)理當(dāng)復(fù)制叉前移遇到22個(gè)堿基的重復(fù)性終止序列(TER)時(shí),TERTUS復(fù)合物能使DNAB不再將DNA解鏈,阻擋復(fù)制叉的繼續(xù)遷移,等到相反方向的復(fù)制叉到達(dá)后,停止復(fù)制。期間,人后50100BP未被復(fù)制,由修復(fù)方式填補(bǔ)空缺,而后兩條鏈解開。7DNA7DNA復(fù)制保真信的原理復(fù)制保真信的原理至少依賴三種機(jī)制1遵守嚴(yán)格的堿基配對(duì)規(guī)律;2聚合酶在復(fù)制延長中對(duì)堿基的選擇功能;3復(fù)制中的即時(shí)校讀功能。88什么是什么是RNARNA反轉(zhuǎn)錄,以及他的生物學(xué)意義反轉(zhuǎn)錄,以及他的生物學(xué)意義定義以RNA為模版以四種DNTP為原料,在PBA指導(dǎo)的DNA聚合酶的催化下,按照堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則合成DNA的過程。意義對(duì)分子生物學(xué)的中心法則進(jìn)行了修正和補(bǔ)充;在實(shí)際工作中,有助于基因工作的實(shí)施,可用于目的基因的制備。99什么是什么是DNADNA自發(fā)性損傷自發(fā)性損傷復(fù)制過程中堿基配對(duì)時(shí)產(chǎn)生的誤差,經(jīng)DNA聚合酶校正和SSB等綜合校對(duì),任未被校正的DNA損傷。包括DNA復(fù)制中的錯(cuò)誤;DNA的自發(fā)性化學(xué)變化(堿基的異構(gòu)互變、堿基的脫氨基作用、脫嘌呤與嘧啶、堿基修飾與鏈斷裂);10DNA10DNA修復(fù)包括哪些類型修復(fù)包括哪些類型
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    • 簡介:1目錄第一章免疫學(xué)緒論31免疫學(xué)概述32免疫器官與組織3第二章抗原31抗原的概念和性能32影響抗原免疫原性的因素43抗原的分類44非特異性免疫細(xì)胞激活物4第三章免疫分子41免疫球蛋白42補(bǔ)體系統(tǒng)53MHC及其編碼分子64其他免疫分子6第四章免疫細(xì)胞71固有免疫細(xì)胞72抗原提呈細(xì)胞及其抗原提呈作用73適應(yīng)性免疫細(xì)胞7第五章免疫應(yīng)答81固有免疫應(yīng)答82適應(yīng)性免疫應(yīng)答8第六章免疫病理81超敏反應(yīng)8Ⅰ型超敏反應(yīng)9Ⅱ型超敏反應(yīng)9Ⅲ型超敏反應(yīng)9Ⅳ型超敏反應(yīng)9第七章免疫學(xué)應(yīng)用102免疫預(yù)防10第八章病原生物學(xué)緒論101病原生物與病原生物學(xué)102醫(yī)學(xué)微生態(tài)104病原生物控制與生物安全11第九章細(xì)菌學(xué)總論111細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)112細(xì)菌的生理124細(xì)菌感染與免疫12第十章常見致病細(xì)菌131球菌133厭氧性細(xì)菌144分枝桿菌145其他原核細(xì)胞型微生物14第十一章病毒學(xué)總論151病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)152病毒的增殖、遺傳和變異153病毒感染與免疫153第一章免疫學(xué)第一章免疫學(xué)緒論緒論1免疫學(xué)概述免疫學(xué)概述免疫是生物在生存、發(fā)展過程中所形成的識(shí)別“自我”與“非己”,以及通過排斥“非己”而保護(hù)“自我”的過程。免疫的三個(gè)功能防御、自穩(wěn)、監(jiān)視免疫類型固有性免疫又稱天然性免疫、非特異性免疫特點(diǎn)先天具有、無特異性、無免疫記憶適應(yīng)性免疫又稱獲得性免疫特點(diǎn)后天獲得、有特異性、有免疫記憶2免疫器官與免疫器官與組織組織中樞免疫器官包括骨髓和胸腺骨髓功能1骨髓是成人各類血細(xì)胞(包括免疫細(xì)胞)的發(fā)源地2骨髓是B淋巴細(xì)胞發(fā)育成熟的場所3骨髓是再次體液免疫應(yīng)答的場所胸腺功能1胸腺是T淋巴細(xì)胞分化、發(fā)育和成熟的主要器官2胸腺是自身免疫耐受和維持的重要器官3免疫調(diào)節(jié)作用外周免疫器官包括淋巴結(jié)、脾和黏膜相關(guān)淋巴組織MALT(黏膜相關(guān)淋巴組織)功能1執(zhí)行黏膜局部免疫功能2分泌SIGA
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      上傳時(shí)間:2024-03-08
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