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    • 簡(jiǎn)介:奧鵬17春16秋福師分子生物學(xué)在線作業(yè)二一、單選題(共15道試題,共30分。)1起始因子IF3的功能是A如果同40S亞基結(jié)合,將促進(jìn)40S與60S亞基的結(jié)合;B如果同30S亞基結(jié)合,將防止30S與50S亞基的結(jié)合;C如果同30S亞基結(jié)合,促使30S亞基的16SRRNA與MRNA的SD序列相互作用;D指導(dǎo)起始況NA進(jìn)入30S亞基中與MRNA結(jié)合的P位點(diǎn);E激活核糖體的GTP酶,以催化與亞基相連的GTP的水解正確答案2在O連接寡聚糖中,直接同多肽相連的糖基是A甘露糖;BN乙酰葡糖胺;CC半乳糖或N乙酰半乳糖胺;D半乳糖或N乙酰葡萄糖胺;E葡萄糖正確答案3下列哪個(gè)些情況能解釋為什么一些基因在它們的轉(zhuǎn)錄因子存在時(shí)并不總是處于活性狀態(tài)A轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)的鄰近序列;B有其他蛋白的結(jié)合;C轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)的染色質(zhì)結(jié)構(gòu)狀態(tài);D缺少共激活蛋白;E以上都是正確答案4選出所有有關(guān)SNRNA的正確敘述ASNRNA只位于細(xì)胞核中;B大多數(shù)SNRNA是高豐度的;CSNRNA在進(jìn)化的過(guò)程中是高度保守的;D某些SNRNA可以與內(nèi)含子中的保守序列進(jìn)行堿基配對(duì);E以上都正確正確答案5真核生物復(fù)制子有下列特征,它們A比原核生物復(fù)制子短得多,因?yàn)橛心┒诵蛄械拇嬖冢籅比原核生物復(fù)制子長(zhǎng)得多,因?yàn)橛休^大的基因組;C通常是雙向復(fù)制且能融合;D全部立即啟動(dòng),以確保染色體在S期完成復(fù)制;E不是全部立即啟動(dòng),在任何給定的時(shí)間只有大約15%是有活性的BTRNA離開(kāi)原核生物核糖體的位點(diǎn);C核糖體中受ECI限制的位點(diǎn);D電化學(xué)電勢(shì)驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)的位點(diǎn)正確答案13假基因是由于不均等交換后,其中一個(gè)拷貝失活導(dǎo)致的。選出下面關(guān)于此過(guò)程的正確敘述。A失活點(diǎn)可通過(guò)比較沉默位點(diǎn)變化的數(shù)量和置換位點(diǎn)變化的數(shù)量采確定;B如果假基因是在基因復(fù)制后立即失活,則它在置換位點(diǎn)比沉默位點(diǎn)有更多的變;C如果假基因是在基因復(fù)制后經(jīng)過(guò)相當(dāng)長(zhǎng)一段時(shí)間才失活,則它在置換位點(diǎn)與沉默位點(diǎn)有相同數(shù)量的變化正確答案14正常情況下,同乙?;鞍踪|(zhì)氨基末端的甘氨酸相連的脂肪酸是A軟脂酸;B油酸;C十四酸鹽肉豆蔻酸鹽;D乙?;?;E以上都對(duì)正確答案15TRNA參與的反應(yīng)有A轉(zhuǎn)錄;B反轉(zhuǎn)錄;C翻譯;D前體MRNA的剪接;E復(fù)制正確答案福師分子生物學(xué)在線作業(yè)二二、多選題(共20道試題,共40分。)1I型內(nèi)含子能利用多種形式的鳥(niǎo)嘌吟,如AGMP;BGDP;CGTP;DDGDP;EDDGMP2’,3’–雙脫氧GMP正確答案2HO基因是交配型轉(zhuǎn)換所必需的,它A編碼一個(gè)位點(diǎn)特異的DNA內(nèi)切核酸酶;
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    • 簡(jiǎn)介:09級(jí)生物工程專(zhuān)業(yè)級(jí)生物工程專(zhuān)業(yè)細(xì)胞生物學(xué)期中復(fù)習(xí)題細(xì)胞生物學(xué)期中復(fù)習(xí)題出題人唐業(yè)剛1、第一個(gè)發(fā)現(xiàn)活細(xì)胞的科學(xué)家是(、第一個(gè)發(fā)現(xiàn)活細(xì)胞的科學(xué)家是()A、ROBERTHOOKB、LEENWEENHOOKC、施萊登D、施2、原核細(xì)胞不具備下列哪種結(jié)構(gòu)(、原核細(xì)胞不具備下列哪種結(jié)構(gòu)()A環(huán)狀DNAB核糖體C核小體DRNA3、下列能觀察活細(xì)胞的顯微鏡是(、下列能觀察活細(xì)胞的顯微鏡是()A、電子顯微鏡B、熒光顯微鏡C、相差顯微鏡D、激光共聚焦掃描電鏡4、下面通過(guò)對(duì)觀察樣本的背景和樣本邊緣進(jìn)行染色,造成樣本與背景差異來(lái)觀察樣本的染、下面通過(guò)對(duì)觀察樣本的背景和樣本邊緣進(jìn)行染色,造成樣本與背景差異來(lái)觀察樣本的染色技術(shù)是(色技術(shù)是()A、蘇木精染色技術(shù)B、伊紅、美藍(lán)染色技術(shù)C、負(fù)染技術(shù)D、熒光染料染色技術(shù)5、下列曾經(jīng)證明過(guò)、下列曾經(jīng)證明過(guò)DNA半保留復(fù)制的實(shí)驗(yàn)技術(shù)是(半保留復(fù)制的實(shí)驗(yàn)技術(shù)是()A、流式細(xì)胞儀分離技術(shù)B、差速離心技術(shù)C、冷凍超薄切片技術(shù)D、等密度梯度離心技術(shù)6、下列可用于制作單克隆抗體技術(shù)的技術(shù)是(、下列可用于制作單克隆抗體技術(shù)的技術(shù)是()A、原位分子雜交技術(shù)B、細(xì)胞融合技術(shù)C、膠體金細(xì)胞化學(xué)技術(shù)D、PCR技術(shù)7、能特異顯示核酸分布的顯示劑是(、能特異顯示核酸分布的顯示劑是()A、SCHIFF試劑B、中性紅試劑C、詹姆斯綠BD、蘇丹黑試劑8、在簡(jiǎn)單擴(kuò)散的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)中,下列物質(zhì)按擴(kuò)散速度由快到慢依次應(yīng)為()A、乙醇、硝酸鈉、甘油、葡萄糖B、乙醇、甘油、葡萄糖、硝酸鈉C、乙醇、硝酸鈉、葡萄糖、甘油D、甘油、乙醇、硝酸鈉、葡萄糖9、下列在細(xì)胞進(jìn)化過(guò)程中一度成為毒性分子,形成進(jìn)化選擇壓力因素的氣體是(、下列在細(xì)胞進(jìn)化過(guò)程中一度成為毒性分子,形成進(jìn)化選擇壓力因素的氣體是()A、O2B、NH3C、CO2D、甲烷10、構(gòu)成膜脂雙分子層結(jié)構(gòu)的脂類(lèi)是(、構(gòu)成膜脂雙分子層結(jié)構(gòu)的脂類(lèi)是()。A、兼性分子B、疏水分子C、極性分子D、親水分子11、目前被廣泛接受的生物膜分子結(jié)構(gòu)模型是(、目前被廣泛接受的生物膜分子結(jié)構(gòu)模型是()。A、片層結(jié)構(gòu)模型B、單位膜模型C、液態(tài)鑲嵌模型D、晶格鑲嵌模型12、下列脂質(zhì)分子的主要運(yùn)動(dòng)方式是(、下列脂質(zhì)分子的主要運(yùn)動(dòng)方式是()A、旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)B、側(cè)向擴(kuò)散C、左右擺動(dòng)D、翻轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)13、細(xì)胞膜脂質(zhì)成分中膽固醇含量越高,細(xì)胞膜的穩(wěn)定性(、細(xì)胞膜脂質(zhì)成分中膽固醇含量越高,細(xì)胞膜的穩(wěn)定性()A、越強(qiáng)B、越弱C、不變D以上都不對(duì)14、生物膜中脂質(zhì)分子的翻轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)一般極少發(fā)生,但在(、生物膜中脂質(zhì)分子的翻轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)一般極少發(fā)生,但在()的生物膜上發(fā)生頻率較高。)的生物膜上發(fā)生頻率較高。A、線粒體B、光滑內(nèi)質(zhì)網(wǎng)C、細(xì)胞核D、溶酶體15、()是位于細(xì)胞外被的)是位于細(xì)胞外被的“天線天線”,負(fù)責(zé)接收和傳導(dǎo)細(xì)胞外來(lái)信號(hào)。,負(fù)責(zé)接收和傳導(dǎo)細(xì)胞外來(lái)信號(hào)。A、卵磷脂B、膽固醇C、膜蛋白的糖殘基D、膜蛋白16、不能通過(guò)簡(jiǎn)單擴(kuò)散進(jìn)出細(xì)胞膜的物質(zhì)是(、不能通過(guò)簡(jiǎn)單擴(kuò)散進(jìn)出細(xì)胞膜的物質(zhì)是()。A、O2B、N2C、乙醇DH17、腸腔中葡萄糖濃度低時(shí),腸上皮細(xì)胞吸收葡萄搪的方式是(、腸腔中葡萄糖濃度低時(shí),腸上皮細(xì)胞吸收葡萄搪的方式是()。A簡(jiǎn)單擴(kuò)散B易化擴(kuò)散C通道蛋白運(yùn)輸D協(xié)同運(yùn)輸18、低密度脂蛋白、低密度脂蛋白LDL進(jìn)入細(xì)胞的方式是(進(jìn)入細(xì)胞的方式是()。A、協(xié)同運(yùn)輸B、易化擴(kuò)散C、受體介導(dǎo)的胞吞作用D、離子驅(qū)動(dòng)的主動(dòng)運(yùn)輸19、下列物質(zhì)運(yùn)輸方式不屬于被動(dòng)運(yùn)輸?shù)氖牵?、下列物質(zhì)運(yùn)輸方式不屬于被動(dòng)運(yùn)輸?shù)氖牵ǎ〤、參與受精過(guò)程D、具有解毒的作用二、填空題二、填空題1、目前發(fā)現(xiàn)的最小最簡(jiǎn)單的細(xì)胞是,它所具有的細(xì)胞膜、遺傳物質(zhì)(DNA與RNA)、核糖體、酶是一個(gè)細(xì)胞生存與增殖所必備的結(jié)構(gòu)裝置。2、與真核細(xì)胞相比,原核細(xì)胞有在DNA轉(zhuǎn)錄與翻譯在時(shí)間和空間上是進(jìn)行的特點(diǎn)。3、是指顯微鏡能夠分辯兩個(gè)質(zhì)點(diǎn)之間的最小距離。4、電鏡主要分為和掃描電鏡兩類(lèi)。5、熒光顯微鏡技術(shù)中常用異硫氰酸熒光素標(biāo)記樣本,使樣本呈現(xiàn)色,便于觀察。6、細(xì)胞融合技術(shù)中常使用來(lái)促進(jìn)細(xì)胞融合。7、技術(shù)可用于刑事案件偵查檢測(cè)時(shí)擴(kuò)增煙頭中殘留唾液的微量DNA用于比對(duì)。8、生物膜的最大兩個(gè)特點(diǎn)是膜的和。9、膜蛋白可以分為和兩類(lèi)。10、從生物膜中提取出來(lái)的脂質(zhì)分子可自發(fā)地在水相中形成一種自我封閉的穩(wěn)定結(jié)構(gòu),稱(chēng)為,它可作為載體將一些不易進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部的脂溶性藥物分子轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)細(xì)胞內(nèi)。11、細(xì)胞膜上膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白分為和,其中僅僅只是介導(dǎo)被動(dòng)運(yùn)輸。12、小分子物質(zhì)通過(guò)脂雙層膜的速度主要取決于_________和_________。13、協(xié)助擴(kuò)散和主動(dòng)運(yùn)輸?shù)闹饕嗤幵谟赺________,主要差別在于_________。14、真核細(xì)胞中,質(zhì)子泵可以分為三種型子泵、型質(zhì)子泵和F型質(zhì)子泵。15、NAK泵每水解1個(gè)ATP,可將分子排出體外,將分子攝入細(xì)胞內(nèi)。16、細(xì)胞的分泌外吐活動(dòng)主要分為固有分泌和兩種。17、胞飲泡的形成需要和接合素蛋白質(zhì)的輔助。18、細(xì)胞呼吸過(guò)程中糖酵解發(fā)生于,三羧酸循環(huán)發(fā)生于,氧化磷酸化生成ATP在上進(jìn)行。19、溶酶體膜上有一些特定的膜蛋白,它們的主要功能是__________和________________。20、從核糖體是否與膜結(jié)合可以分為和。21、光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是合成____的主要場(chǎng)所,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是合成____的主要場(chǎng)所。22、具有將蛋白進(jìn)行修飾、分選并分泌到細(xì)胞外的細(xì)胞器是。23、蛋白質(zhì)的糖基化修飾中,N-連接糖基化一般發(fā)生在,而O-連接的糖基化則發(fā)生在中。24、高爾基體是多層扁囊的結(jié)構(gòu),是一個(gè)極性細(xì)胞器;近內(nèi)質(zhì)網(wǎng)依次____、____和____。25、細(xì)胞中的蛋白質(zhì)處于不斷更新過(guò)程中,決定蛋白質(zhì)壽命的信號(hào)位于通過(guò)____________途徑將不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)徹底降解。26、線粒體內(nèi)膜上的呼吸鏈之間有兩個(gè)移動(dòng)速度較快的電子載體,分別為和_______和______。27、幫助蛋白質(zhì)分子正確折疊或解折疊的是。28、細(xì)胞表面糖蛋白是在細(xì)胞的_________合成的,在_________糖基化,經(jīng)_________加工包裝后轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞表面。29、高爾基體靠近細(xì)胞中心而面向細(xì)胞核的為面,靠近細(xì)胞膜的為面。30、根據(jù)溶酶體所處的完成其生理功能的不同階段,大致可將溶酶體分為初級(jí)溶酶體、和。
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      上傳時(shí)間:2024-03-11
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    • 簡(jiǎn)介:1普通生物學(xué)試題二普通生物學(xué)試題二一選擇題一選擇題1在人體細(xì)胞有絲分裂末期,新的細(xì)胞核形成時(shí),最多可形成幾個(gè)小的核仁,然后再匯集成一個(gè)大的核仁A5個(gè)B10個(gè)C46個(gè)D23個(gè)2溶酶體中的水解酶的最適PH約為A180B48C70D803下列物質(zhì)與細(xì)胞松馳素B的作用相反的藥物是A長(zhǎng)春花堿B紫杉醇C秋水仙素D鬼筆環(huán)肽4下列與真核細(xì)胞有關(guān)的敘述,不正確的是A中心粒和中心體是同源的細(xì)胞器B粗面型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體合成的蛋白質(zhì)直接運(yùn)輸?shù)礁郀柣w進(jìn)行加工、包裝C微體在動(dòng)植物細(xì)胞中都有,但種類(lèi)有所不同,如乙醛酸循環(huán)體,在植物細(xì)胞中有,但動(dòng)物細(xì)胞中沒(méi)有D線粒體內(nèi)膜上蛋白質(zhì)的數(shù)量和種類(lèi)均高于其外膜5上皮細(xì)胞之間的牢固連接主要是依靠下列哪一種連接方式A橋粒B緊密連接C間隙連接D胞間連絲6青霉素的殺菌作用的原理是A抑制核糖體的50S亞基的活性B抑制肽鏈的延伸C抑制細(xì)菌轉(zhuǎn)肽酶的活性D抑制乙酰膽酯酶的活性7反應(yīng)1A──→BC,△G20920KJMOLL;反應(yīng)2CD──→D,△G-18320KJMOLL。試問(wèn)這兩個(gè)反應(yīng)的KEQ值A(chǔ)反應(yīng)1的KEQ值大于反應(yīng)2B反應(yīng)2的KEQ值大于反應(yīng)1C兩者相等D無(wú)法確定8過(guò)氧化物酶的顏色是棕色的,其原因是A含有血紅素B含有葉綠素C含有CYTD含有NAD9檸檬酸循環(huán)途徑中,通過(guò)下列哪一項(xiàng)與線粒體內(nèi)膜上的電子傳遞鏈連接起來(lái)A檸檬酸合成酶B異檸檬酸脫氫酶C琥珀酸脫氫酶D蘋(píng)果酸脫氫酶10在人的骨骼肌細(xì)胞中,利用肌糖原進(jìn)行無(wú)氧呼吸時(shí),將一個(gè)含有10個(gè)葡萄糖殘基的肝糖原片段,經(jīng)無(wú)氧呼吸后,可向肌纖維提供多少分子ATPA20個(gè)B30個(gè)C40個(gè)D360個(gè)11下列哪一種物質(zhì)是天冬氨酸脫氨后的產(chǎn)物A丙氨酸BΑ-酮戊二酸C草酰乙酸D蘋(píng)果酸12在光合作用中,合成一個(gè)葡萄糖分子需要ATP和NADPH的數(shù)量分別是A12、12B18、12C18、18D3、213下列與光合作用有關(guān)的說(shuō)法,不正確的是AC4植物光合作用效率而在于C3植物的原因之一是光呼吸弱BCO2對(duì)C4植物光合作用的限制作用遠(yuǎn)大于C3植物CC3植物的葉肉細(xì)胞常有明顯的柵欄組織和海綿組織之分,而C4植物通常不明顯D在強(qiáng)光下,C4植物對(duì)光能的利用率遠(yuǎn)大于C3植物14在植物細(xì)胞有絲分裂末期,在赤道板位置最先形成的結(jié)構(gòu)是A細(xì)胞板B成膜體C細(xì)胞膜D細(xì)胞壁15下列哪一種生物的細(xì)胞有絲分裂時(shí),核膜不解體,染色體不是靠微管的牽引,而是附著在核膜上,隨核膜的延伸而分開(kāi)A硅藻B綠藻C甲藻D苔蘚16在哺乳動(dòng)物體內(nèi),下列哪一種細(xì)胞的分裂周期最短3A同向B反向C沒(méi)有規(guī)律D垂直34蜻蜓的稚蟲(chóng)生活在水中,通過(guò)鰓進(jìn)行氣體交換,其直腸鰓在發(fā)育過(guò)程中起源于A外胚層B內(nèi)胚層C中胚層D無(wú)法確定35下列有關(guān)呼吸器官與動(dòng)物體型大小的說(shuō)法中,正確的是A凡是用鰓呼吸的動(dòng)物都是小型動(dòng)物B凡是用鰓呼吸的動(dòng)物都是大型動(dòng)物C凡是用氣管呼吸的動(dòng)物都是小型動(dòng)物D凡是用肺呼吸的動(dòng)物都是大型動(dòng)物36下列哪一類(lèi)動(dòng)物的呼吸方式存在正壓呼吸A鳥(niǎo)類(lèi)B哺乳類(lèi)C兩棲類(lèi)D爬行類(lèi)37下列哪一項(xiàng)不是深潛獸類(lèi)對(duì)長(zhǎng)時(shí)間潛水環(huán)境的適應(yīng)特征A血量比一般的獸類(lèi)大B肺較小,含氧量少,血液含氧量大C肌肉中肌紅蛋白含量高D肺特別大,貯存大量空氣供長(zhǎng)時(shí)間潛水之用38水生多細(xì)胞動(dòng)物的呼吸與其在自身周?chē)圃焖髅芮邢嚓P(guān),水綿是最低等的多細(xì)胞動(dòng)物,其自我制造的水流是通過(guò)A領(lǐng)細(xì)胞進(jìn)行的B纖毛細(xì)胞進(jìn)行的C偽足的運(yùn)動(dòng)進(jìn)行的D體腔的擴(kuò)大和縮小進(jìn)行的39血液中血管中能夠作定向流動(dòng)的最低等的動(dòng)物是A紐蟲(chóng)B蚯蚓C蝗蟲(chóng)D魚(yú)40蚯蚓的心臟實(shí)際上是能夠搏動(dòng)的血管,其管壁細(xì)胞與其功能適應(yīng)的是A具有發(fā)達(dá)的微絲系統(tǒng)B具有發(fā)達(dá)的微管系統(tǒng)C具有發(fā)達(dá)的中間纖維系統(tǒng)D具有發(fā)達(dá)的肌纖維系統(tǒng)41下列哪一種動(dòng)物的心臟分為四室且在同一循環(huán)路徑上A鯨B魚(yú)C蛙D蛇42左心房與左心室之間的瓣膜稱(chēng)為AAV瓣B三尖瓣C半月瓣D僧帽瓣43在心臟中,自律性最強(qiáng)的結(jié)構(gòu)是A房室結(jié)B竇房結(jié)C房室束D蒲肯野氏纖維44正常人的心電圖中,一個(gè)心動(dòng)周期共有5個(gè)波,分別用PQRST表示,其中QRS表示A心房收縮B心室收縮C心室舒張D心室開(kāi)始收縮45脈壓最大的血管是A主動(dòng)脈B小動(dòng)脈C毛細(xì)血管D肱動(dòng)脈46在脊椎動(dòng)物中,具有促進(jìn)血液凝固作用的細(xì)胞稱(chēng)為凝細(xì)胞,在哺乳動(dòng)物稱(chēng)為血小板。在下列動(dòng)物中,哪一種動(dòng)物的凝細(xì)胞有核A駱駝B狼C麻雀D大象47下列有關(guān)血液凝固反應(yīng)的敘述,不正確的是A是一個(gè)級(jí)聯(lián)放大反應(yīng)B肝素具有抑制凝固反應(yīng)的進(jìn)行C最終結(jié)果是使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白D是一個(gè)正反饋調(diào)節(jié)的反應(yīng)48下列有關(guān)免疫球蛋白的敘述中,不正確的是A免疫球蛋白有4條肽鏈構(gòu)成B每個(gè)免疫球蛋白分子上有兩個(gè)相同的抗原結(jié)合部位C五種免疫球蛋白的H鏈和L鏈都是不同的D在免疫球蛋白的H鏈和H鏈之間、L鏈和L鏈之間及H鏈與L鏈之間都是通過(guò)二硫鍵相連的49切除胸腺而失去細(xì)胞免疫功能的小鼠,體液免疫功能也常常降低,其主要原因是A缺少K細(xì)胞殺傷細(xì)胞B缺少助T細(xì)胞C缺少胞毒T細(xì)胞D缺少抑T細(xì)胞50下列哪一種免疫球蛋白與過(guò)敏反應(yīng)有關(guān)AIGABIGGCIGEDIGD51下列哪一種抗體很容易附著在肥大細(xì)胞或嗜堿性粒細(xì)胞的表面AIGABIGGCIGEDIGD
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    • 簡(jiǎn)介:一單項(xiàng)選擇題單項(xiàng)選擇題1、采用50~60℃的溫度處理產(chǎn)品30分鐘,以殺死有害微生物,該方法稱(chēng)為()。A低溫消毒法B巴斯德滅菌法C消毒法D滅菌法2、古菌是一類(lèi)存在于極端環(huán)境的微生物,但它是()。A以上答案都不正確B原核生物C真核生物D一類(lèi)特殊病毒3、聚Β羥基丁酸是原核生物中的()。A其它B碳貯存物C氮貯存物D磷貯存物4、根據(jù)AINSWTH的真菌分類(lèi)系統(tǒng),曲霉屬于真菌門(mén)的哪個(gè)亞門(mén)()。A擔(dān)子菌亞門(mén)B半知菌亞門(mén)C子囊菌亞門(mén)D接合菌亞門(mén)5、青霉素的發(fā)現(xiàn)者是()。AKOCHBLEEUWENHOEKCFLEMINGDPASTEUR6、下列()生物對(duì)青霉素最敏感。A病毒B魚(yú)類(lèi)C大腸桿菌D革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌7、病毒衣殼的主要組成成份是()。A多糖B蛋白質(zhì)C脂類(lèi)D核酸8、革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁中的特有成分是()。A磷壁酸B脂多糖C肽聚糖D脂蛋白二多項(xiàng)選擇題多項(xiàng)選擇題1、莢膜是存在于某些細(xì)菌細(xì)胞壁外的黏液狀結(jié)構(gòu),莢膜除與細(xì)菌的致病力有關(guān)外,還有如下作用()。A保護(hù)細(xì)胞壁不受機(jī)械損傷B主要成份是多糖、多肽,可作為貯存物質(zhì)再利用C含水量高,在干燥情況下可保護(hù)菌體避免失水而死亡D與細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)有關(guān),保護(hù)鞭毛不受損傷2、甾醇往往存在于細(xì)胞膜,但也有些生物的細(xì)胞膜不含甾醇,請(qǐng)指出下列()生物的細(xì)胞膜不含甾醇。A原生動(dòng)物B大腸桿菌C酵母菌D金黃色葡萄球菌3、真核微生物包括的種類(lèi)廣泛,請(qǐng)指出下列()生物屬于真核微生物。A單細(xì)胞藻類(lèi)B真菌C大腸桿菌D原生動(dòng)物E病毒4、真菌在長(zhǎng)期的進(jìn)化過(guò)程中,為更好地吸收營(yíng)養(yǎng),菌絲可發(fā)生變態(tài)形成()。A菌核和子座B菌環(huán)和菌網(wǎng)C吸器和吸胞D假根和匍匐絲5、酵母菌是真核微生物,它具有以下特點(diǎn)()。A多數(shù)以出芽繁殖,也有的為裂殖B沒(méi)有有性繁殖C細(xì)胞壁含有肽聚糖D能發(fā)酵糖類(lèi)產(chǎn)能E喜歡在含糖量較高、偏酸性的環(huán)境中生長(zhǎng)F在一定的條件下可以形成菌絲體三判斷題判斷題1、微生物都是個(gè)體微小的生物,蘑菇的個(gè)體很大,因此不屬于微生物的范疇。2、根據(jù)3原界學(xué)說(shuō),古菌是地球出現(xiàn)最早的生物,它即不屬于原核生物,也不屬于真核生物。3、病毒沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu),所以病毒即不屬原核生物,也不屬真核生物。4、17世紀(jì),列文虎克用他自己制造的顯微鏡看到了微生物,所以他被公認(rèn)為是微生物的發(fā)現(xiàn)者。5、肽聚糖是原核生物所特有的成份,所以肽聚糖存在于所有原核生物細(xì)胞壁中。6、革蘭氏染色是重要的微生物鑒別染色,所有微生物都可以通過(guò)革蘭氏染色區(qū)分為革蘭氏陽(yáng)性菌或革蘭氏陰性菌。一單項(xiàng)選擇題單項(xiàng)選擇題1、革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌細(xì)胞壁中的特有成分是()。A脂多糖B磷壁酸C肽聚糖D脂蛋白2、下列()微生物常被加入保健飲品中,以提高產(chǎn)品的保健效果。A雙歧桿菌B醋酸菌C乳酸桿菌D酵母菌3、衣原體與立克次氏體的主要區(qū)別在于()。A衣原體沒(méi)有細(xì)胞壁B立克次氏體沒(méi)有能量代謝系統(tǒng)C衣原體沒(méi)有能量代謝系統(tǒng)D立克次氏體沒(méi)有細(xì)胞壁4、下列微生物中能進(jìn)行光合作用的微生物是()。A綠色木霉B藍(lán)細(xì)菌C鏈霉菌D酵母菌5、酵母菌的菌落類(lèi)似于()。A以上都不對(duì)B霉菌菌落C細(xì)菌菌落D鏈霉菌菌落6、下列()微生物常被作為食品衛(wèi)生質(zhì)量評(píng)定的指示菌。A芽孢桿菌群B變形桿菌C金黃色葡萄球菌D大腸桿菌群7、能產(chǎn)生伴胞晶體的微生物是()。A大腸桿菌B藍(lán)細(xì)菌C根瘤菌D蘇云金芽孢桿菌8、在生活的微生物細(xì)胞內(nèi),含量最高的是()。A礦質(zhì)元素B氮元素C碳元素D水分二多項(xiàng)選擇題多項(xiàng)選擇題1、請(qǐng)指出下列()吸收營(yíng)養(yǎng)物的方式需要能量。A主動(dòng)運(yùn)輸B基團(tuán)轉(zhuǎn)位C助長(zhǎng)擴(kuò)散D擴(kuò)散2、請(qǐng)指出下列()吸收營(yíng)養(yǎng)物的方式需要酶。A基團(tuán)轉(zhuǎn)位B助長(zhǎng)擴(kuò)散C擴(kuò)散D主動(dòng)運(yùn)輸3、為了縮短微生物在培養(yǎng)過(guò)程中的延遲期,可采用()方法。A適當(dāng)提高接種量B選用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞接種C提高培養(yǎng)溫度D選用穩(wěn)定期的細(xì)胞接種4、在上世紀(jì)中葉,有3個(gè)著名的實(shí)驗(yàn)證明核酸是生物的遺產(chǎn)物質(zhì),這3個(gè)實(shí)驗(yàn)是()。A肺炎雙球菌是轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)B噬菌體的感染實(shí)驗(yàn)C細(xì)菌的接合實(shí)驗(yàn)D細(xì)菌的體外重組實(shí)驗(yàn)E細(xì)菌的轉(zhuǎn)導(dǎo)實(shí)驗(yàn)5、凡是指能提高微生物突變頻率的化學(xué)、物理和生物因子稱(chēng)為誘變劑,請(qǐng)指出下列()因子是誘變劑。AX射線B青霉素C結(jié)晶紫D苯甲酸E溶菌酶F亞硝酸三判斷題判斷題1、甾醇是真核生物細(xì)胞膜的成分,在所有原核生物的細(xì)胞膜中都沒(méi)有發(fā)現(xiàn)其存在。2、細(xì)胞膜對(duì)于細(xì)胞生物是非常重要的結(jié)構(gòu),一個(gè)細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞壁可以存活,但沒(méi)有細(xì)胞膜就不可能存活。3、原核生物由于沒(méi)有線粒體,所以原核生物能量轉(zhuǎn)化主要在細(xì)胞膜上完成。4、放線菌的形態(tài)是絲狀的,所以它是介于細(xì)菌與真菌之間的一類(lèi)微生物。5、根霉無(wú)性繁殖產(chǎn)生分生孢子,有性繁殖產(chǎn)生接合孢子。6、鞭毛或纖毛在真核微生物都具有運(yùn)動(dòng)的功能,纖毛比鞭毛短且數(shù)量眾多,在細(xì)胞表面周生,鞭毛一般只有12根。7、酵母菌是單細(xì)胞生物,所以酵母菌也是單倍體。
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    • 簡(jiǎn)介:細(xì)胞生物學(xué)考試題細(xì)胞生物學(xué)考試題A卷答案卷答案一名詞解釋一名詞解釋每小題2分,共20分1導(dǎo)肽線粒體和葉綠體蛋白前體N端的一段特殊序列,功能是引導(dǎo)蛋白進(jìn)入目的細(xì)胞器。2CYCLIN細(xì)胞周期蛋白,是細(xì)胞周期引擎的正調(diào)控因子。3細(xì)胞內(nèi)膜系統(tǒng)細(xì)胞內(nèi)膜系統(tǒng)由細(xì)胞內(nèi)膜構(gòu)成的各種細(xì)胞器的總稱(chēng),包括線粒體、葉綠體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、溶酶體、微體等等。4多聚核糖體在一個(gè)MRNA通常結(jié)合多個(gè)核糖體進(jìn)行蛋白質(zhì)的合成。5次級(jí)溶酶體在進(jìn)行消化作用的溶酶體。6受體是一種能夠識(shí)別和選擇性結(jié)合某種配基的大分子,與配基結(jié)合后,產(chǎn)生化學(xué)的或物理的信號(hào),以啟動(dòng)一系列過(guò)程,最終表現(xiàn)為生物學(xué)效應(yīng)。7原癌基因是細(xì)胞內(nèi)與細(xì)胞增殖有關(guān)的正?;?,其突變導(dǎo)致癌癥。8細(xì)胞全能性指由一個(gè)細(xì)胞發(fā)育為一個(gè)完整成體的發(fā)育潛能。9CHROMOSOME染色體,是染色質(zhì)在細(xì)胞周期分裂期的形態(tài)。10細(xì)胞周期指細(xì)胞由前一次分裂結(jié)束到下一次分裂結(jié)束的全過(guò)程。二填空二填空(每空1分,共30分)1光學(xué)顯微鏡的最大分辨力是02微米,因此對(duì)人目來(lái)說(shuō)其有效放大倍率是1000X。2CAMP途徑激活的是蛋白激酶A。3秋水仙素是微管的特異性藥物,而細(xì)胞松弛素是微絲的特異性藥物4氯霉素能阻斷細(xì)菌、線粒體和葉綠體的蛋白質(zhì)合成。放線菌酮能阻斷細(xì)胞質(zhì)中的蛋白質(zhì)合成中。5膠原肽鏈的一級(jí)結(jié)構(gòu)是由X-Y重復(fù)序列構(gòu)成的。6內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可分為粗面型和光滑型兩類(lèi)。7O-連接的糖基化主要發(fā)生在高爾基體,N-連接的糖基化發(fā)生在粗面型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。8線粒體的功能區(qū)隔主要有外膜、內(nèi)膜、膜間隙和基質(zhì)。9G1期的PCC呈單線狀,S期呈粉末狀,G2期的呈雙線狀。10癌細(xì)胞的三個(gè)主要特征是不死性、轉(zhuǎn)移性和失去細(xì)胞間的接觸抑制11電子顯微鏡主要由電子照明系統(tǒng)、電子成像系統(tǒng)、真空系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)和電源系統(tǒng)等五部分構(gòu)成。12微體可根據(jù)功能分為過(guò)氧化物酶體和乙醛酸循環(huán)體兩類(lèi)。三判斷正誤三判斷正誤(不必改正,你認(rèn)為正確的在□中打√,錯(cuò)誤的打X)1核糖體上的肽基轉(zhuǎn)移酶由蛋白質(zhì)和RNA共同構(gòu)成。□√2多細(xì)胞生物體內(nèi)并非所有的細(xì)胞都是二倍體的?!酢烫攸c(diǎn)①物質(zhì)由低濃度到高濃度一側(cè)的跨膜運(yùn)輸即逆濃度梯度逆化學(xué)梯度運(yùn)輸。②需細(xì)胞提供能量由ATP直接供能或與釋放能量的過(guò)程偶聯(lián)協(xié)同運(yùn)輸。③都有載體蛋白。根據(jù)主動(dòng)運(yùn)輸過(guò)程所需能量來(lái)源的不同可分為由ATP直接提供能量和間接提供能量的協(xié)同運(yùn)輸兩種基本類(lèi)型。A由ATP供能的主動(dòng)運(yùn)輸有①NA-K泵、②離子泵、③質(zhì)子泵。4大分子與顆粒物質(zhì)的跨膜運(yùn)輸真核細(xì)胞通過(guò)內(nèi)吞作用和外排作用完成大分子與顆粒性物質(zhì)的跨膜運(yùn)輸。2為什么說(shuō)線粒體的行為類(lèi)似于細(xì)菌1具有自己的DNA和轉(zhuǎn)錄翻譯體系。2DNA分子為環(huán)形。3核糖體為70S型。4蛋白質(zhì)合成的起始氨基酸是N甲酰甲硫氨酸。5RNA聚合酶對(duì)溴化乙錠敏感,但對(duì)放線菌素不敏感。6蛋白質(zhì)合成可被氯霉素抑制。3簡(jiǎn)述減數(shù)分裂前期I細(xì)胞核的變化。前期I分為細(xì)線期、合線期、粗線期、雙線期和終變期5個(gè)亞期。①細(xì)線期染色體呈細(xì)線狀,凝集于核的一側(cè)。②合線期同源染色體開(kāi)始配對(duì),SC開(kāi)始形成。并且合成剩余03的DNA。③粗線期染色體聯(lián)會(huì)完成,進(jìn)一步縮短成為清晰可見(jiàn)的粗線狀結(jié)構(gòu)。④雙線期配對(duì)的同源染色體相互排斥,開(kāi)始分離,交叉端化,部分位點(diǎn)還在相連。部分動(dòng)物的卵母細(xì)胞停留在這一時(shí)期,形成燈刷染色體。⑤終變期交叉幾乎完全端化,核膜破裂,核仁解體。是染色體計(jì)數(shù)的最佳時(shí)期。4細(xì)胞同步化培哪些類(lèi)型1自然同步化,自然界存在的細(xì)胞同步化現(xiàn)象。2人工同步化A選擇同步化①有絲分裂選擇法利用有絲分裂細(xì)胞貼壁能力差的原理而分離。②細(xì)胞沉降分離法,不同時(shí)相的細(xì)胞體積不同,在離心場(chǎng)沉降的速度不同而分離。B誘導(dǎo)同步化②TDR雙阻斷法,過(guò)量TDR阻斷有絲分裂于G1S處③中期阻斷法,利用秋水仙素抑制微管組裝,將細(xì)胞阻斷在分裂中期。
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    • 簡(jiǎn)介:實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目一總RNA的提取(必做)一、實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)6學(xué)時(shí)二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^(guò)本實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)總RNA的提取和分析方法。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容利用勻漿裂解細(xì)胞,采用TRILZOL試劑盒抽提RNA去除蛋白質(zhì)和DNA。四、實(shí)驗(yàn)要求學(xué)會(huì)提取基因組RNA的方法和操作過(guò)程提取RNA時(shí),要特別注意防止RNASE的污染,所用玻璃器皿均應(yīng)用01%的二乙基焦碳酸鹽DIETHYLPYROCARBONATE,DEPC處理。塑料器材均使用一次性用品,并高壓滅菌處理,必要時(shí),也可用01?PC處理。五、實(shí)驗(yàn)所需儀器設(shè)備與試劑儀器移液器及吸頭,電泳儀臺(tái)式高速離心機(jī)恒溫水浴鍋微量移液槍等試劑TRIZOL試劑、氯仿、異丙醇、75乙醇(DEPCH2O配制)、DEPCH2O六、實(shí)驗(yàn)原理TRIZOL試劑適用于從細(xì)胞和組織中快速分離RNA。最大特點(diǎn)是可同時(shí)分離一個(gè)樣品的RNADNA蛋白質(zhì)TRIZOL使樣品勻漿化,細(xì)14去上清夜,加入2030ULDEPC水,55℃10MIN,以完全溶解RNA。1570度保存提取的總RNA。八、注意事項(xiàng)1RNA酶是一類(lèi)生物活性非常穩(wěn)定的酶類(lèi),除了細(xì)胞內(nèi)源RNA酶外,外界環(huán)境中均存在RNA酶,所以操作時(shí)應(yīng)戴手套。2RNA提取用品準(zhǔn)備1)普通的玻璃器皿180℃烘干8小時(shí)(玻璃),研缽,小勺,試劑瓶若干個(gè)。2)一次性使用的塑料制品槍頭、EP管等先用DEPC水處理然后高壓滅菌,烘干。3)用烘烤過(guò)的藥勺稱(chēng)取試劑。4)用DEPC水配制試劑01?PC水37℃至少處理12小時(shí),高壓滅菌15MIN。實(shí)驗(yàn)結(jié)果成功從植物中分離得到總RNA
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    • 簡(jiǎn)介:細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),CELLULARSIGNALTRANSDUCTION,參考書(shū)目,細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞生物學(xué)在線教程WWWCELLACN/BOOK/細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)(第三版),孫大業(yè),科學(xué)出版社,第一章,細(xì)胞連接與細(xì)胞外基質(zhì)CELLJUNCTIONANDEXTRACELLULARMATRIX,,,【目的要求】1.掌握細(xì)胞連接的概念和種類(lèi);細(xì)胞外基質(zhì)的概念及種類(lèi)。2.熟悉各種細(xì)胞連接的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。3.了解各種細(xì)胞連接存在的部位及功能;細(xì)胞外基質(zhì)的生物學(xué)功能。,,【教學(xué)內(nèi)容】一、細(xì)胞連接的類(lèi)型和特點(diǎn)(一)封閉連接(二)錨定連接1.黏著帶與黏著斑2.橋粒與半橋粒(三)通訊連接1.間隙連接2.化學(xué)突觸二、細(xì)胞外基質(zhì)概述1.細(xì)胞外基質(zhì)概念2.細(xì)胞外基質(zhì)種類(lèi)3.細(xì)胞外基質(zhì)的生物學(xué)功能,一、細(xì)胞連接的類(lèi)型和特點(diǎn),細(xì)胞是機(jī)體結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。機(jī)體行使的每一項(xiàng)功能都是多個(gè)細(xì)胞之間甚至多種細(xì)胞之間協(xié)同作用的結(jié)果。細(xì)胞間聯(lián)系的基本形式,接觸型,非接觸型,,細(xì)胞連接的概念在相鄰細(xì)胞表面形成的連接結(jié)構(gòu),以加強(qiáng)細(xì)胞的機(jī)械聯(lián)系和組織的牢固性,同時(shí)協(xié)助細(xì)胞間的代謝活動(dòng),這些結(jié)構(gòu)稱(chēng)為細(xì)胞(間)連接。,,,細(xì)胞連接的種類(lèi),細(xì)胞連接的概況,,(一)封閉連接(OCCLUDINGJUNCTION),即緊密連接(TIGHTJUNCTION),又稱(chēng)閉鎖小帶(ZONULAOCCLUDENS)。存在部位各種上皮細(xì)胞管腔面細(xì)胞間隙頂端。分布消化道上皮、膀胱上皮、腦毛細(xì)血管內(nèi)皮以及睪丸支持細(xì)胞之間等。,緊密連接的電鏡圖,,,結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及形成相鄰細(xì)胞膜形成24個(gè)點(diǎn)狀融合,形成一條封閉帶,融合處細(xì)胞間隙消失。相鄰細(xì)胞由跨膜連接糖蛋白組成對(duì)合的封閉鏈稱(chēng)嵴線,嵴線相互交聯(lián)封閉了細(xì)胞之間的空隙。,,,緊密連接的模式圖,,功能封閉上皮細(xì)胞的間隙,防止可溶性物質(zhì)的反滲,保證機(jī)體內(nèi)環(huán)境的相對(duì)穩(wěn)定。隔開(kāi)細(xì)胞膜兩端不同功能的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,保證物質(zhì)運(yùn)轉(zhuǎn)的方向性。機(jī)械性細(xì)胞連接。,(二)錨定連接ANCHORINGJUNCTION,1黏著帶與黏著斑(1)黏著帶ADHESIONBELT,又稱(chēng)中間連接INTERMEDIATEJUNCTION。存在部位呈帶狀環(huán)繞細(xì)胞頂部,位于上皮細(xì)胞的緊密連接下方。分布在上皮細(xì)胞間和心肌細(xì)胞間多見(jiàn)。,黏著帶的電鏡圖,,,結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及形成相鄰細(xì)胞間有約1520NM的間隙,間隙中有一種稱(chēng)鈣黏素(CADHERIN)的跨膜連接糖蛋白,與質(zhì)膜內(nèi)側(cè)的幾種附著蛋白結(jié)合。相鄰細(xì)胞中的肌動(dòng)蛋白絲束通過(guò)鈣黏素和附著蛋白編織成了一個(gè)廣泛的網(wǎng)絡(luò),把相鄰細(xì)胞聯(lián)合在一起。,黏著帶的模式圖,,,功能有黏著作用;保持細(xì)胞形狀;傳遞細(xì)胞收縮力。,,(2)黏著斑(ADHESIONPLAQUE)位于細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)間,通過(guò)整合素(INTEGRIN)把細(xì)胞中的肌動(dòng)蛋白束和基質(zhì)連接起來(lái)。它與黏著斑的區(qū)別①是黏著斑結(jié)構(gòu)的一半;②穿膜連接蛋白為整合素。,,,,2橋粒與半橋粒(1)橋粒(DESMOSOME)存在部位在上皮細(xì)胞黏著帶的下方間隙頂端。分布易受摩擦的組織中,如皮膚、口腔、食管等處的復(fù)層鱗狀上皮細(xì)胞之間和心肌中。,橋粒的電鏡圖,,,結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及形成相鄰細(xì)胞間有30NM的間隙,形成一種紐扣狀的結(jié)構(gòu)。相鄰細(xì)胞中的中間纖維通過(guò)細(xì)胞質(zhì)斑和膜間隙內(nèi)的鈣粘素構(gòu)成了穿胞細(xì)胞骨架網(wǎng)絡(luò)。,橋粒的模式圖,,,功能橋粒是最牢固的一種細(xì)胞連接,起固定和支持作用。,,(2)半橋粒(HEMIDESMOSOME)在結(jié)構(gòu)上類(lèi)似橋粒,位于上皮細(xì)胞基面與基膜之間。它與橋粒的區(qū)別①是橋粒結(jié)構(gòu)的一半;②穿膜連接蛋白為整合素;③細(xì)胞內(nèi)的附著蛋白為角蛋白。,,,(三)通訊連接(COMMUNICATINGJUNCTION),1間隙連接(GAPJUNCTION)分布除骨骼肌細(xì)胞及循環(huán)血細(xì)胞外的細(xì)胞之間。,間隙連接的電鏡圖,,,結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及形成在連接處相鄰細(xì)胞間有2~4NM的縫隙,在間隙與兩層質(zhì)膜中有大量蛋白質(zhì)顆粒,是構(gòu)成間隙連接的基本單位,稱(chēng)連接子(CONNEXON),由6個(gè)相同或相似的跨膜蛋白亞單位環(huán)繞而成,直徑8NM,中心形成一個(gè)直徑約15NM的孔道。,間隙連接的模式圖,,,功能1代謝偶聯(lián)小分子代謝物和信號(hào)分子可通過(guò)連接子的通道,由一個(gè)細(xì)胞進(jìn)入相鄰的另一個(gè)細(xì)胞。2電偶聯(lián)無(wú)須依賴(lài)神經(jīng)遞質(zhì)或信息物質(zhì)即可將一些細(xì)胞的電興奮活動(dòng)傳遞到相鄰的細(xì)胞。3參與細(xì)胞分化胚胎發(fā)育的早期,細(xì)胞間通過(guò)間隙連接相互協(xié)調(diào)發(fā)育和分化。,,2化學(xué)突觸(SYNAPSE)存在部位可興奮細(xì)胞間。作用通過(guò)釋放神經(jīng)遞質(zhì)來(lái)傳導(dǎo)興奮。組成突觸前膜PRESYNAPTICMEMBRANE突觸后膜POSTSYNAPTICMEMBRANE突觸間隙SYNAPTICCLEFT,化學(xué)突觸的電鏡圖,,,結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及形成突觸小體內(nèi)有許多囊泡,稱(chēng)突觸小泡SYNAPTICVESICLE,內(nèi)含神經(jīng)遞質(zhì)。當(dāng)神經(jīng)沖動(dòng)傳到突觸前膜,突觸小泡釋放神經(jīng)遞質(zhì),為突觸后膜的受體接受(配體門(mén)通道),引起突觸后膜離子通透性改變,膜去極化或超極化。,化學(xué)突觸的模式圖,,二、細(xì)胞外基質(zhì),一)細(xì)胞外基質(zhì)概述,,1概念細(xì)胞外基質(zhì)(EXTRACELLULARMATRIX,ECM)是指由細(xì)胞分泌的,位于上皮或內(nèi)皮細(xì)胞下層和結(jié)締組織細(xì)胞周?chē)?,為組織、器官提供力學(xué)支持和物理強(qiáng)度,并對(duì)細(xì)胞的黏附、遷移、增殖和分化等活動(dòng)以及胚胎發(fā)生等產(chǎn)生影響的物質(zhì)。,,細(xì)胞外基質(zhì),,上皮組織的細(xì)胞外基質(zhì),,2細(xì)胞外基質(zhì)種類(lèi)(1)膠原(COLLAGEN)是由多種糖蛋白分子組成的家族。,,(2)蛋白多糖(PROTEOGLYCAN)由一個(gè)核心蛋白分子與多個(gè)糖氨多糖側(cè)鏈結(jié)合而成的大分子復(fù)合物。通過(guò)其分子篩形成基質(zhì)防御屏障。,,,,,1)硫酸軟骨素(CHONDROITINSULFATE,CS)由葡萄糖醛酸與N乙酰半乳糖胺通過(guò)?1,3連接構(gòu)成基本的重復(fù)單位。第4或6位硫酸化。,,,,,,,,2)硫酸皮膚素(DERMATANSULFATE)含有一個(gè)或多個(gè)艾杜糖酸殘基的硫酸軟骨素鏈。,,3)硫酸乙酰肝素(HEPARANSULFATE,HS)由葡萄糖醛酸與N乙酰葡糖胺通過(guò)?1,4連接,兩個(gè)殘基可在O或N位點(diǎn)上發(fā)生廣泛的硫酸化修飾。,,4)硫酸角質(zhì)素(KERATANSULFATE)半乳糖與N乙酰葡糖胺通過(guò)?1,4連接,每個(gè)殘基的第6位上發(fā)生硫酸化修飾。,,,5)透明質(zhì)酸(HYALURONAN,HA)數(shù)量不定的多聚體葡糖酸與N乙酰葡糖胺通過(guò)?1,3連接構(gòu)成。,,,,(3)糖蛋白(GLYCOPROTEIN)黏附性糖蛋白與細(xì)胞的黏附及遷移有關(guān)。骨相關(guān)基質(zhì)糖蛋白調(diào)節(jié)離子濃度。彈性蛋白相關(guān)糖蛋白在彈性蛋白的沉積過(guò)程中具有重要影響。,,3細(xì)胞外基質(zhì)的生物學(xué)功能(1)機(jī)械支持功能細(xì)胞外基質(zhì)是構(gòu)成基膜和結(jié)締組織及各種器官被膜的主要成分,具有維持機(jī)體結(jié)構(gòu)的完整性和為機(jī)體提供支架結(jié)構(gòu)的作用。,,(2)參與細(xì)胞黏附與遷移細(xì)胞外基質(zhì)分子中的細(xì)胞黏附位點(diǎn)與細(xì)胞膜上的相應(yīng)的受體特異性結(jié)合,觸發(fā)跨膜信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),對(duì)細(xì)胞的基因表達(dá)及細(xì)胞表型和功能產(chǎn)生影響。,,,整合素,,(3)參與細(xì)胞增殖與分化某些類(lèi)型的細(xì)胞外基質(zhì)如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子具有促有絲分裂原的功能,通過(guò)促進(jìn)層粘連蛋白的合成與釋放,進(jìn)一步刺激神經(jīng)細(xì)胞的增殖與分化。,,二)膠原(COLLAGEN)1膠原的分子生物學(xué),,,,2膠原生物合成的特殊性翻譯后加工和修飾PRO、LYS--羥基化羥賴(lài)氨酸--糖基化TYR--硫酸化二硫鍵的形成鏈間組合等,,3膠原的生物學(xué)功能主要是支持和抗拉力。,,三)纖連蛋白(FIBRONECTIN,F(xiàn)N)1纖連蛋白的分子生物學(xué),,,,2纖連蛋白的生物學(xué)功能(1)參與細(xì)胞的黏附與遷移細(xì)胞的黏附與遷移是細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)進(jìn)行特異性識(shí)別、結(jié)合與作用的結(jié)果,這在胚胎發(fā)育、組織形成、損傷修復(fù)和腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)中起重要作用。,,,,(2)纖連蛋白與心血管系統(tǒng)FN在心血管系統(tǒng)的正常發(fā)育、正常生理機(jī)能的維持中起重要作用,并且與心血管疾病的發(fā)生、發(fā)展之間也有極為密切的聯(lián)系。,,(3)纖連蛋白與結(jié)締組織衰老性疾病結(jié)締組織衰老性疾病以動(dòng)脈粥樣硬化、骨質(zhì)疏松以及骨關(guān)節(jié)炎等最為常見(jiàn)。這些結(jié)締組織的變化主要影響蛋白多糖和膠原網(wǎng)絡(luò),F(xiàn)N的質(zhì)和量的改變也與之有關(guān)。,,(4)纖連蛋白與腫瘤轉(zhuǎn)移,,四)層粘連蛋白(LAMININ,LN)1層粘連蛋白的分子生物學(xué),,2層粘連蛋白的生物學(xué)功能基底膜的主要組成成分;細(xì)胞黏附功能;促進(jìn)大多數(shù)類(lèi)型細(xì)胞的生長(zhǎng);在形態(tài)學(xué)發(fā)生中有重要作用;對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移有促進(jìn)作用。,,五)彈性蛋白(ELASTIN)1彈性蛋白的分子生物學(xué),,,,2彈性蛋白的生物學(xué)功能形成彈性纖維。借助其彈性回縮作用,在維持呼吸和血壓,保持持續(xù)的血液灌注以及皮膚的彈性等方面有重要意義;促進(jìn)細(xì)胞黏附。,,六)親玻粘連蛋白(VITRONECTIN)1親玻粘連蛋白的分子生物學(xué),,2親玻粘連蛋白的生物學(xué)功能通過(guò)與膜上相應(yīng)的受體結(jié)合,在細(xì)胞黏附、細(xì)胞遷移、補(bǔ)體結(jié)合、凝血鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、纖維溶解反應(yīng)、止血、腫瘤轉(zhuǎn)移、神經(jīng)元軸突生長(zhǎng)等過(guò)程中都具有十分重要的作用。,,七)粘結(jié)蛋白(ENTACTIN)1粘結(jié)蛋白的分子生物學(xué),,2粘結(jié)蛋白的生物學(xué)功能主要與基底膜各種蛋白分子結(jié)合,在基底膜的形成過(guò)程中具有十分重要的作用;對(duì)細(xì)胞功能進(jìn)行調(diào)節(jié),在血管形成、損傷的修復(fù)、肝纖維化的發(fā)生、細(xì)胞的黏附及遷移以及腫瘤細(xì)胞的外向侵襲等過(guò)程中有重要意義。,,,,八)串珠聚糖蛋白(PERLECAN)1串珠聚糖蛋白的分子生物學(xué),,2串珠聚糖蛋白的生物學(xué)功能與基膜中的膠原和層粘連蛋白作用,構(gòu)成基膜的基本結(jié)構(gòu);因其帶負(fù)電荷,使基膜具有電荷選擇性超濾功能;介導(dǎo)細(xì)胞間的黏附,參與細(xì)胞之間的相互作用。,,九)凝血酶應(yīng)答蛋白(THROMBOSPONDIN,TSP)是指血小板?顆粒受到凝血酶刺激后釋放的一種細(xì)胞外基質(zhì)蛋白。,,1凝血酶應(yīng)答蛋白的分子生物學(xué),,2凝血酶應(yīng)答蛋白的生物學(xué)意義介導(dǎo)細(xì)胞的黏附、擴(kuò)散與遷移;抑制體內(nèi)新血管形成;對(duì)細(xì)胞內(nèi)骨架重排有一定作用;在止血過(guò)程中具有十分重要的作用;參與損傷修復(fù)。,,十)馮威勒布蘭德因子(VONWILLEBRANDFACTOR,VWF)1馮威勒布蘭德因子的分子生物學(xué),,,,2馮威勒布蘭德因子的生物學(xué)功能在血管損傷處誘導(dǎo)血小板黏附和血栓形成,同時(shí)與凝血因子Ⅷ前體結(jié)合成ⅧVWF復(fù)合物,誘發(fā)止血過(guò)程;與腫瘤細(xì)胞的黏附以及腫瘤的轉(zhuǎn)移過(guò)程關(guān)系密切。,,十一)骨鈣蛋白、骨連蛋白與骨橋蛋白1骨鈣蛋白(OSTEOCALCIN),,,,骨鈣蛋白的作用在骨形成過(guò)程中,對(duì)骨的礦化有負(fù)調(diào)節(jié)作用;促進(jìn)骨的吸收。,,2骨連蛋白(OSTEONECTIN)又稱(chēng)BM40或43KD蛋白,是一種膠原結(jié)合型糖蛋白。,,骨連蛋白與各種類(lèi)型的膠原蛋白、血小板衍生生長(zhǎng)因子及其受體等相互作用,調(diào)節(jié)細(xì)胞的黏附、遷移、增殖等活動(dòng),與骨形成、組織分化與更新有關(guān)。,,3骨橋蛋白(OSTEOPONTIN),,,,骨橋蛋白在細(xì)胞黏附、細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、骨的重建、泌尿系統(tǒng)結(jié)石的形成、腫瘤的轉(zhuǎn)移及免疫調(diào)節(jié)等過(guò)程中都具有十分重要的作用。,
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    • 簡(jiǎn)介:細(xì)胞生物學(xué)題庫(kù)第七章細(xì)胞器一、單選題一、單選題1、下列哪個(gè)細(xì)胞器不屬于內(nèi)膜系統(tǒng)()A高爾基復(fù)合體B過(guò)氧化物酶體C線粒體D溶酶體E內(nèi)質(zhì)網(wǎng)2、對(duì)細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)描述錯(cuò)誤的是下面哪一項(xiàng)()A為細(xì)胞器正常結(jié)構(gòu)的維持提供所需要的離子環(huán)境B為細(xì)胞器完成其功能活動(dòng)供給所必需的一切底物C是進(jìn)行某些生化反應(yīng)的場(chǎng)所D是細(xì)胞所需能量合成的場(chǎng)所3、不屬于滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構(gòu)特征的是()A扁囊B小管C小泡D管網(wǎng)E與粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相連4、不屬于高爾基復(fù)合體結(jié)構(gòu)的是()A順面高爾基體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)B反面高爾基體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)C高爾基體中間膜囊D分泌泡E都不是5、高爾基體中間膜囊的標(biāo)志酶是()ANADP酶B葡萄糖6磷酸酶C酯酶D磷酸酶E羥化酶6、下列不屬于高爾基復(fù)合體功能的是()A濃縮溶酶體的酶,幫助初級(jí)溶酶體的形成B運(yùn)送膜定位蛋白至細(xì)胞膜上C將內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上所需的蛋白質(zhì)運(yùn)回D分泌糖蛋白E幫助線粒體內(nèi)外膜上的蛋白運(yùn)輸7、屬于高爾基體中間膜囊功能的是()A接受來(lái)自于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的運(yùn)輸小泡B將含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白駐留信號(hào)的蛋白再使其返還至內(nèi)質(zhì)網(wǎng)C對(duì)糖蛋白進(jìn)行O連接方式的糖基化修飾14、有關(guān)線粒體內(nèi)膜說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A膜厚度約67NMB嵴內(nèi)的空隙稱(chēng)為嵴內(nèi)腔C哺乳動(dòng)物細(xì)胞線粒體的嵴大多呈板層狀D需要能量多的細(xì)胞,不僅線粒體數(shù)目多,線粒體的嵴也較多E產(chǎn)生向內(nèi)的板狀突起E都不是15、葉綠體基質(zhì)中的主要化學(xué)組分是()A核酸和無(wú)機(jī)鹽BRNA和酶CDNA和蛋白質(zhì)D酶和其他可溶性蛋白16、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與下列那些功能無(wú)關(guān)()A蛋白質(zhì)的合成B脂質(zhì)的合成CO-連接的蛋白糖基化DN-連接的蛋白糖基化E新生的多肽的折疊與裝配17、下列選項(xiàng)屬于粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能的是()A脂蛋白的合成B分泌蛋白和膜蛋白的合成C糖原的合成與分解D骨骼肌的收縮18、下列關(guān)于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)在細(xì)胞中分布的說(shuō)法不正確的是()A細(xì)胞質(zhì)膜有時(shí)與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相連接B內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜常與外核連接C粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)常在高爾基體的反面D光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)在細(xì)胞中所占區(qū)域通常很小19、下列搭配正確的是()A順面運(yùn)輸小泡凹形B反面運(yùn)輸小泡凹形C順面分泌小泡凸形D反面分泌小泡凹形20、有關(guān)溶酶體說(shuō)法不正確的是()A是細(xì)胞內(nèi)的消化器官B所有動(dòng)物細(xì)胞(除成熟的紅細(xì)胞)均具有溶酶體C含60多種水解酶,最適合PH60D被稱(chēng)為異型細(xì)胞器21、下列有關(guān)核糖體的論述正確的是()
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簡(jiǎn)介:一、一、細(xì)胞概述細(xì)胞概述1胡克和列文虎克發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的動(dòng)機(jī)是不同的,胡克和列文虎克發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的動(dòng)機(jī)是不同的,你對(duì)此有何感想你對(duì)此有何感想(答案)答胡克當(dāng)時(shí)的目的只是想弄清楚為什么軟木塞吸水后能夠膨脹,并且能夠堵塞住暖水瓶中的氣體溢出而保溫。列文虎克是為了保證售出的布匹質(zhì)量,用顯微鏡檢查布匹是否發(fā)霉。正是由于他們的觀察力和對(duì)自然現(xiàn)象的好奇心,以及對(duì)事業(yè)的責(zé)任感才導(dǎo)致細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)。2為什么恩格斯對(duì)細(xì)胞學(xué)說(shuō)給予與此高的評(píng)價(jià)為什么恩格斯對(duì)細(xì)胞學(xué)說(shuō)給予與此高的評(píng)價(jià)(答案)答因?yàn)榧?xì)胞學(xué)說(shuō)的提出解決了生命的共同起源,即生命的同一性問(wèn)題。3如何理解人才、理論和技術(shù)在科技發(fā)展中的作用如何理解人才、理論和技術(shù)在科技發(fā)展中的作用(答案)答從細(xì)胞的發(fā)展史可看出人才是關(guān)鍵,是原動(dòng)力,理論是指導(dǎo),指引方向,技術(shù)是突破點(diǎn)。4證明最早的遺傳物質(zhì)是證明最早的遺傳物質(zhì)是RNA而不是而不是DNA的證據(jù)是什么的證據(jù)是什么(答案)答核酶的發(fā)現(xiàn)。所謂核酶就是具有催化活性的RNA分子。5舉例說(shuō)明細(xì)胞的形態(tài)與功能相適應(yīng)。舉例說(shuō)明細(xì)胞的形態(tài)與功能相適應(yīng)。(答案)答細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)與功能的相關(guān)性與一致性是很多細(xì)胞的共同特點(diǎn)。如紅細(xì)胞呈扁圓形的結(jié)構(gòu),有利于O2和CO2的交換高等動(dòng)物的卵細(xì)胞和精細(xì)胞不僅在形態(tài)、而且在大小方面都是截然不同的,這種不同與它們各自的功能相適應(yīng)。卵細(xì)胞之所以既大又圓,是因?yàn)槁鸭?xì)胞受精之后,要為受精卵提供早期發(fā)育所需的信息和相應(yīng)的物質(zhì),這樣,卵細(xì)胞除了帶有一套完整的基因組外,還有很多預(yù)先合成的MRNA和蛋白質(zhì),所以體積就大而圓形的表面是便于與精細(xì)胞結(jié)合。精細(xì)胞的形態(tài)是既細(xì)又長(zhǎng),這也是與它的功能相適應(yīng)的。精細(xì)胞對(duì)后代的責(zé)任僅是提供一套基因組,所以它顯得很輕裝至于精細(xì)胞的細(xì)尾巴則是為了運(yùn)動(dòng)尋靶,尖尖的頭部,是為了更容易將它攜帶的遺傳物質(zhì)注入卵細(xì)胞。6真核細(xì)胞的體積一般是原核細(xì)胞的真核細(xì)胞的體積一般是原核細(xì)胞的1000倍,真核細(xì)胞如何解決細(xì)胞內(nèi)重要分子的濃度倍,真核細(xì)胞如何解決細(xì)胞內(nèi)重要分子的濃度問(wèn)題問(wèn)題(答案)答出現(xiàn)了特化的內(nèi)膜系統(tǒng),這樣,體積增大了,表面積也大大增加,并使細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)區(qū)室化,一些重要分子的濃度并沒(méi)有被稀釋。7相鄰水分子間的關(guān)系是靠氫鍵維系的,相鄰水分子間的關(guān)系是靠氫鍵維系的,這種氫鍵賦予水分子哪些獨(dú)特的性質(zhì),這種氫鍵賦予水分子哪些獨(dú)特的性質(zhì),對(duì)于生對(duì)于生活細(xì)胞有什么重要性活細(xì)胞有什么重要性(答案)答首先,氫鍵能夠吸收較多的熱能,將氫鍵打斷需要較高的溫度,所以氫鍵可維持細(xì)胞溫度的相對(duì)穩(wěn)定。第二是相鄰水分子間形成的氫鍵使水分子具有一定的粘性,這樣使水具有較高的表面密度。第三,水分子間的氫鍵可以提高水的沸點(diǎn),這樣使它不易從細(xì)胞中揮發(fā)掉。8蛋白質(zhì)的糖基化對(duì)蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)有哪些影響蛋白質(zhì)的糖基化對(duì)蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)有哪些影響(答案)答①溶解度。糖基化往往使蛋白質(zhì)在水中的溶解度增大。但是,若糖鏈增長(zhǎng)到一定程度,由于相對(duì)分子質(zhì)量增大和形成高級(jí)結(jié)構(gòu),亦會(huì)出現(xiàn)憎水性增加的現(xiàn)象。②電荷。氨基糖解離后,應(yīng)帶正電荷。但是,天然存在的氨基糖的氨基都被N乙?;〈瑢?shí)際上相當(dāng)于中性糖。許多糖鏈上有唾液酸,或糖醛酸,解離后帶負(fù)電荷。所以,糖基化可能使蛋白質(zhì)增加許多負(fù)電荷。9組成蛋白質(zhì)的基本構(gòu)件只是組成蛋白質(zhì)的基本構(gòu)件只是20種氨基酸。為什么蛋白質(zhì)卻具有如此廣泛的功能種氨基酸。為什么蛋白質(zhì)卻具有如此廣泛的功能(答案)答根本原因是蛋白質(zhì)具有幾乎無(wú)限的形態(tài)結(jié)構(gòu),因此蛋白質(zhì)僅僅是一類(lèi)分子的總稱(chēng)。換句話說(shuō),蛋白質(zhì)之所以有如此廣泛的作用,是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)具有各種不同的結(jié)構(gòu),特別是在蛋白質(zhì)高級(jí)結(jié)構(gòu)中具有不同的結(jié)構(gòu)域,而這種不同的空間構(gòu)型使得蛋白質(zhì)能夠有選擇地同其它分子進(jìn)行相互作用,這就是蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)決定功能的特異性。正是由于蛋白質(zhì)具有如此100~200KV高壓,電子穿透厚度僅為1ΜM。通常把樣品制成50~100NM厚的薄片一個(gè)細(xì)胞切成100~200片,稱(chēng)超薄切片ULTRATHINSECTION。其次是要求很好地保持樣品的精細(xì)結(jié)構(gòu),特別是在組織固定時(shí)要求既要終止細(xì)胞生命,又不破壞細(xì)胞的結(jié)構(gòu)。第三是要求樣品要具有一定的反差。電子顯微鏡的樣品切片最后被放置在載網(wǎng)上而不是玻片上。5什么是細(xì)胞分選基本原理是什么什么是細(xì)胞分選基本原理是什么(答案)答用流式細(xì)胞計(jì)將特定的細(xì)胞分選分選出來(lái)的技術(shù),分選前,細(xì)胞要被戴上特殊的標(biāo)記。所用的標(biāo)記細(xì)胞的探針是能夠同待分選細(xì)胞表面特征性蛋白抗原結(jié)合的抗體,而這種抗體又能夠同某種熒光染料結(jié)合。當(dāng)結(jié)合有熒光染料的探針與細(xì)胞群溫育時(shí),探針就會(huì)同具有特異表面抗原的細(xì)胞緊緊結(jié)合,由于抗體的結(jié)合,被結(jié)合的細(xì)胞帶上了熒光標(biāo)記。細(xì)胞被標(biāo)記之后,除去游離的抗體,并將細(xì)胞進(jìn)行稀釋。當(dāng)稀釋的細(xì)胞進(jìn)入超聲波振蕩器時(shí),極稀的細(xì)胞懸浮液形成很小的液滴,一個(gè)液滴中只含有一個(gè)細(xì)胞。液滴一旦形成并通過(guò)激光束時(shí),激光束激發(fā)結(jié)合在細(xì)胞表面抗體分子成為一種標(biāo)簽。當(dāng)液滴逐個(gè)通過(guò)激光束時(shí),受到兩種檢測(cè)器的檢測(cè)如果液滴中含有細(xì)胞就會(huì)激活干涉檢測(cè)器INTERFERENCEDETECT,只有帶有熒光標(biāo)記細(xì)胞的液滴才會(huì)激活熒光檢測(cè)器FLUESCENCEDETECT。當(dāng)帶有熒光標(biāo)記的液滴通過(guò)激光束時(shí),將兩種檢測(cè)器同時(shí)激活,引起液滴充電信號(hào)使鞘液帶上負(fù)電荷。由于液滴帶有負(fù)電荷,移動(dòng)時(shí)就會(huì)向正極移動(dòng),進(jìn)入到熒光標(biāo)記細(xì)胞收集器中。如果是含有非熒光標(biāo)記細(xì)胞的液滴進(jìn)入激光束,只會(huì)被干涉檢測(cè)器檢測(cè)到,結(jié)果使充電信號(hào)將液滴的鞘液帶上正電荷,從而在移動(dòng)時(shí)偏向負(fù)極,被非熒光標(biāo)記細(xì)胞收集器所收集。如果是不含有細(xì)胞的液滴進(jìn)入激光束,則不會(huì)被任何檢測(cè)器所檢測(cè),因而不會(huì)產(chǎn)生充電信號(hào),液滴的鞘液不會(huì)帶上任何電荷,所以在移動(dòng)時(shí)不受任何影響直接進(jìn)入非檢測(cè)的收集器。6什么是細(xì)胞培養(yǎng),什么是細(xì)胞培養(yǎng),應(yīng)注意哪些問(wèn)題應(yīng)注意哪些問(wèn)題(答案)答在體外模擬體內(nèi)的生理環(huán)境,培養(yǎng)從機(jī)體中取出的細(xì)胞,并使之生存和生長(zhǎng)的技術(shù)為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中最有價(jià)值的技術(shù),通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)可以獲得大量的細(xì)胞,也可通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)研究細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)、細(xì)胞的信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞的合成代謝等。細(xì)胞培養(yǎng)的突出特點(diǎn)是在離體條件下觀察和研究細(xì)胞生命活動(dòng)的規(guī)律。培養(yǎng)中的細(xì)胞不受體內(nèi)復(fù)雜環(huán)境的影響,人為改變培養(yǎng)條件如物理、化學(xué)、生物等外界因素的變化即可進(jìn)一步觀察細(xì)胞在單因素或多因素的影響下的生理功能變化。然而,細(xì)胞在體外環(huán)境的局限性,又使細(xì)胞的形態(tài)與功能不能與體內(nèi)的同類(lèi)細(xì)胞完全等同。體外培養(yǎng)細(xì)胞必需注意三個(gè)環(huán)節(jié)∶物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)、生存環(huán)境和廢物的排除。體外培養(yǎng)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)是由培養(yǎng)基提供的。培養(yǎng)基通常含有細(xì)胞生長(zhǎng)所需的氨基酸、維生素和微量元素。一般培養(yǎng)細(xì)胞所用的培養(yǎng)基是合成培養(yǎng)基,它含有細(xì)胞生長(zhǎng)必需的營(yíng)養(yǎng)成分,但是在使用合成培養(yǎng)基時(shí)需要添加一些天然成分,其中最重要的是血清,以牛血清為主。這是因?yàn)檠逯泻卸喾N促細(xì)胞生長(zhǎng)因子和一些生物活性物質(zhì)。由于血清中含有一些不明成分,對(duì)于特殊目的細(xì)胞培養(yǎng)是不利的。為此,研究人員正在探索無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞的條件,并已經(jīng)取得一些進(jìn)展。由于機(jī)體內(nèi)的細(xì)胞生長(zhǎng)通常需要不同的細(xì)胞因子進(jìn)行調(diào)節(jié),所以在無(wú)血清培養(yǎng)時(shí)仍然需要添加必要的因子,包括促細(xì)胞生長(zhǎng)因子如EGF、促貼附物如層粘連蛋白和其它活性物質(zhì)如轉(zhuǎn)鐵蛋白。無(wú)血清培養(yǎng)排除了有血清培養(yǎng)時(shí)血清中不明因素的干擾,使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加可靠。體外細(xì)胞培養(yǎng)必需模擬體內(nèi)細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境。環(huán)境因素主要是指∶無(wú)菌環(huán)境、合適的溫度、一定的滲透壓和氣體環(huán)境。氣體主要有兩種∶O2和CO2。后者對(duì)于維持細(xì)胞培養(yǎng)液的酸堿度十分重要?;铙w內(nèi)生長(zhǎng)的細(xì)胞所產(chǎn)生的代謝物和廢物通過(guò)一定的系統(tǒng)進(jìn)行利用和排除。體外培養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)生的代謝物和廢物積累在培養(yǎng)液中,所以定期更換培養(yǎng)液,對(duì)于體外細(xì)胞培養(yǎng)也是至關(guān)重要的。
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    • 簡(jiǎn)介:實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)5血液基因組血液基因組DNA的純化分離的純化分離【實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康摹空莆談?dòng)物全血基因組DNA提取的方法【實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理】真核生物的DNA是以染色體的形式存在于細(xì)胞核內(nèi),而成熟的紅細(xì)胞除禽類(lèi)外沒(méi)有細(xì)胞核,因此,制備DNA的原則是先要分離白細(xì)胞。提取DNA的一般過(guò)程是將分散好的白細(xì)胞在含SDS(十二烷基硫酸鈉)和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白質(zhì),再用酚和氯仿異戊醇抽提分離蛋白質(zhì),得到的DNA溶液經(jīng)乙醇沉淀使DNA從溶液中析出。【器材與試劑器材與試劑】1器材制冰機(jī)、冰箱、冷凍低溫超速離心機(jī)、常溫高速離心機(jī)、移液器,旋轉(zhuǎn)搖床、恒溫箱、恒溫水浴箱、離心管架、真空干燥器、燒杯、試劑瓶、離心管和吸頭等。2試劑1PBS緩沖液取NACL8G,KCL02G,NA2HPO4144G,KH2PO4024G,定容至1000ML,高壓滅菌2提取液含10MMOLLTRISHCLPH80,01MOLLEDTA,05MVSDS。320MGML蛋白酶K溶液4平衡酚5氯仿610MOLL醋酸銨7無(wú)水乙醇870VV乙醇9TE緩沖液【操作步驟操作步驟】1冰凍的血樣在室溫水浴中融化。210ML全血轉(zhuǎn)入一個(gè)無(wú)菌的50ML離心管中。3加入1倍體積的PBS緩沖液并混勻稀釋。
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    • 簡(jiǎn)介:實(shí)驗(yàn)四實(shí)驗(yàn)四DNADNA的瓊脂糖凝膠電泳的瓊脂糖凝膠電泳帶電荷的物質(zhì)在電場(chǎng)中的趨向運(yùn)動(dòng)稱(chēng)為電泳。電泳的種類(lèi)多,應(yīng)用非常廣泛,它已成為分子生物學(xué)技術(shù)中分離生物大分子的重要手段。瓊脂糖凝膠電泳由于其操作簡(jiǎn)單、快速、靈敏等優(yōu)點(diǎn),已成為分離和鑒定核酸的常用方法。實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆窄傊悄z電泳的原理,學(xué)習(xí)瓊脂糖凝膠電泳的操作。熟練DNA電泳的點(diǎn)樣技術(shù)。實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料基因組DNA。實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理在PH值為80~83時(shí),核酸分子堿基幾乎不解離,磷酸全部解離,核酸分子帶負(fù)電,在電泳時(shí)向正極移動(dòng)。采用適當(dāng)濃度的凝膠介質(zhì)作為電泳支持物,在分子篩的作用下,使分子大小和構(gòu)象不同的核酸分子泳動(dòng)率出現(xiàn)較大的差異,從而達(dá)到分離核酸片段檢測(cè)其大小的目的。核酸分子中嵌入熒光染料(如EB)后,在紫外燈下可觀察到核酸片段所在的位置。實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟1用膠帶將洗凈、干燥的制膠板的兩端封好,水平放置在工作臺(tái)上;2調(diào)整好梳子的高度;3稱(chēng)取024G瓊脂糖于30ML05TBE中,在微波爐中使瓊脂糖顆粒完全溶解,冷卻至4550C時(shí)倒入制膠板中;4凝膠凝固后,小心拔去梳子,撕下膠帶;7電泳緩沖液(05TBE)的組成及其離子強(qiáng)度影響DNA的遷移率,無(wú)離子存在時(shí),核酸基本不泳動(dòng),離子強(qiáng)度過(guò)大產(chǎn)熱厲害,熔化凝膠并導(dǎo)致DNA變性,一般采用1TAE,1TBE,1TPE(均含EDTAPH80)。2溴化乙錠(EB)為致癌劑,操作時(shí)應(yīng)戴手套,盡量減少臺(tái)面污染。3電泳指示劑核酸電泳常用的指示劑有兩種,溴酚藍(lán)(BROMOPHENOLBLUEBB)呈藍(lán)紫色;二甲苯晴(XYLENECYANOLXC)呈藍(lán)色,它攜帶的電荷量比溴酚藍(lán)少,在凝膠中的的遷移率比溴酚藍(lán)慢。
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    • 簡(jiǎn)介:1知識(shí)與能力訓(xùn)練生物學(xué)七年級(jí)上冊(cè)第一單元生物和生物圈第一章認(rèn)識(shí)生物第一節(jié)第一節(jié)生物的特征生物的特征基礎(chǔ)練習(xí)基礎(chǔ)練習(xí)1D2B3C4A5B6D7A8B9B10B能力提高能力提高11C12C13(1)生長(zhǎng)與發(fā)育現(xiàn)象。(2)生殖現(xiàn)象。(3)遺傳現(xiàn)象。(4)變異現(xiàn)象。(5)對(duì)外界刺激作出反應(yīng)。14(1)生物能生長(zhǎng)和繁殖。(2)生物的生活需要營(yíng)養(yǎng)。(3)生物能對(duì)外界的刺激作出反應(yīng)。15生物有老樹(shù)、昏鴉、瘦馬、人;非生物有小橋、流水、人家、古道、西風(fēng)、夕陽(yáng)、天涯。拓展練習(xí)拓展練習(xí)16是生物。證據(jù)是能夠吸收人們排除的二氧化碳,利用陽(yáng)光,使自身產(chǎn)生大量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)并且排出氧氣,凈化太空飛船中的空氣。它還能利用一分為二的方式進(jìn)行繁殖,一晝夜產(chǎn)生2~3代。第二節(jié)第二節(jié)調(diào)查周邊環(huán)境中的生物調(diào)查周邊環(huán)境中的生物基礎(chǔ)練習(xí)基礎(chǔ)練習(xí)1A2A3B4B5C6D7A8B9A10A能力提高能力提高11D12C13AB,BC,CA14(1)植物銀杏樹(shù)、海帶、白菜;動(dòng)物鯽魚(yú)、奶牛、螞蟻;其他生物木耳、大腸桿菌。(2)水生生物海帶、鯽魚(yú);陸生生物銀杏樹(shù)、木耳、奶牛、螞蟻、白菜、大腸桿菌。15答案提示近視率近視人數(shù)班級(jí)人數(shù)100拓展練習(xí)拓展練習(xí)16(1)調(diào)查目的調(diào)查清楚寵物在人們生活中的作用及如何防止寵物向人類(lèi)傳播疾病。(2)調(diào)查方式采用訪談法、查閱資料等。(3)調(diào)查對(duì)象飼養(yǎng)的寵物。(4)調(diào)查范圍所有的寵物。(5)調(diào)查方案①制訂調(diào)查計(jì)劃;③設(shè)計(jì)合理的調(diào)查路線;⑤歸類(lèi)、整理分析。第二章了解生物圈第一節(jié)第一節(jié)生物與環(huán)境的關(guān)系生物與環(huán)境的關(guān)系基礎(chǔ)練習(xí)基礎(chǔ)練習(xí)3第一單元測(cè)驗(yàn)題答案第一單元測(cè)驗(yàn)題答案一、選擇題一、選擇題1D2B3D4D5B6D7D8C9D10C11D12A13B14D15D16B17B18B19C20A21D22B23C24B25B26B27C28A29A30B31C32A33D34A二、簡(jiǎn)答或填空題二、簡(jiǎn)答或填空題35(1)生長(zhǎng)發(fā)育(2)繁殖(3)應(yīng)激性36√√37(1)草莓(2)楊桃(3)楊梅38調(diào)查目的調(diào)查對(duì)象調(diào)查方案抽樣調(diào)查記錄整理分析391ABCDEKL2ACDEBKL401對(duì)照(對(duì)比)2A3遵循生物鐘,少熬夜,避免造成對(duì)身體不必要的傷害。41(1)中午(2)實(shí)驗(yàn)缺乏對(duì)照。42(1)1(2)水、空氣(3)根部不能進(jìn)行呼吸作用。(4)樣本或大蒜幼苗數(shù)量少。43①②√③④⑤44(1)生產(chǎn)者消費(fèi)者(2)調(diào)節(jié)45(1)3食物網(wǎng)2草→鼠→鷹3鷹4失去自我調(diào)節(jié)能力。第二單元生物體的結(jié)構(gòu)層次第一章細(xì)胞是生命活動(dòng)的基本單位第一節(jié)第一節(jié)練習(xí)使用顯微鏡練習(xí)使用顯微鏡基礎(chǔ)練習(xí)基礎(chǔ)練習(xí)1見(jiàn)課本37頁(yè)圖212C3C4D5D6C7C8A9A10C能力提高能力提高11(1)物鏡目鏡反光鏡光圈(2)粗準(zhǔn)焦螺旋細(xì)準(zhǔn)焦螺旋12(1)A(2)C(3)A13C14D15216拓展練習(xí)拓展練習(xí)16左上方右下方PBDQ17污點(diǎn)氣泡18順第二節(jié)第二節(jié)植物細(xì)胞植物細(xì)胞基礎(chǔ)練習(xí)基礎(chǔ)練習(xí)1D2B3B4B5B6D7C8C9C10B能力提高能力提高
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    • 簡(jiǎn)介:實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)8質(zhì)粒質(zhì)粒DNA的提取(的提?。▔A裂解法堿裂解法)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?、?shí)驗(yàn)?zāi)康牧私鈮A裂解法提取質(zhì)粒的基本原理和主要應(yīng)用,掌握堿裂解法提取質(zhì)粒的實(shí)驗(yàn)方法和各種試劑在提取過(guò)程中的作用。二、實(shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)原理堿裂解法是利用細(xì)菌染色體DNA與質(zhì)粒DNA結(jié)構(gòu)的大小差異來(lái)分離質(zhì)粒DNA的。堿性(PH120125)條件可以破壞堿基配對(duì),宿主和質(zhì)粒DNA的堿基之間的氫鍵被破壞。當(dāng)條件恢復(fù)正常時(shí)(加入酸性試劑中和),共價(jià)閉合環(huán)狀的質(zhì)粒DNA會(huì)迅速準(zhǔn)確地恢復(fù)配對(duì),重新形成完全天然的超螺旋分子;而較大的細(xì)菌染色體DNA分子則難以復(fù)性,會(huì)交聯(lián)形成不溶于水的線團(tuán)結(jié)構(gòu),纏繞附著在細(xì)胞壁碎片上,離心時(shí)易被沉淀下來(lái),而質(zhì)粒DNA則留在上清液中,用異丙醇沉淀、70乙醇洗滌即可獲得質(zhì)粒DNA。三、儀器設(shè)備三、儀器設(shè)備微量取液器(2ΜL;20ΜL;200ΜL;1000ΜL),TIP頭,手掌型離心機(jī),15ML離心管恒溫水浴,制冰機(jī),超凈工作臺(tái),恒溫培養(yǎng)箱。振蕩器,離心機(jī),金屬浴,電泳儀,凝膠成像儀。四、實(shí)驗(yàn)試劑四、實(shí)驗(yàn)試劑(1)溶液Ⅰ50MMOLL葡萄糖;20MMOLLTRISHCL(PH80);10MMOLLEDTA(PH80),高壓蒸汽滅菌(121℃,0105MPA)20MIN。4℃貯存。(2)溶液Ⅱ(現(xiàn)用現(xiàn)配)02MOLLNAOH;1GLSDS。(3)溶液Ⅲ(PH48)每100ML溶液中含5MOLL乙酸鉀60ML;冰乙酸115ML;H2O285ML。(4)RNASE(10MGML),LB液體培養(yǎng)基,氨芐青霉素,異丙醇,70(VV)乙醇,無(wú)菌水。五、五、實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)方法(1)分裝3MLLB液體培養(yǎng)基和3ΜL氨芐青霉素(50MGML)于15ML玻璃試管中。(2)用滅菌牙簽挑取一白色單克隆,放入玻璃管內(nèi),置37℃恒溫?fù)u床中以200轉(zhuǎn)MIN培養(yǎng),至OD60020。(3)取菌液10ML于15ML的EPPENDF管中,將離心管放入冷凍離心機(jī),調(diào)溫至4℃,轉(zhuǎn)速3500G,離心5MIN,收集細(xì)菌。棄上清,倒置于吸水紙上,瀝干殘液。(4)每離心管中加入冰上預(yù)冷的溶液Ⅰ200L,置振蕩器上劇烈震蕩,懸浮菌體。(5)加入新配制的溶液Ⅱ400L,翻轉(zhuǎn)10次。冰上放置。(6)冰浴3MIN內(nèi)迅速加入300L溶液Ⅲ,溫和翻轉(zhuǎn)10次,冰浴10MIN。超螺旋DNA比線性的DNA遷移率大,線性DNA比開(kāi)環(huán)DNA遷移率大。八、作業(yè)八、作業(yè)(1)按要求認(rèn)真撰寫(xiě)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)用品及藥品、實(shí)驗(yàn)步驟等,要詳細(xì)闡述質(zhì)粒提取的基本原理。(2)提取質(zhì)粒DNA過(guò)程中應(yīng)該注意的問(wèn)題是什么(3)質(zhì)粒DNA的三種構(gòu)型及在正常電泳條件下的遷移情況如何
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    • 簡(jiǎn)介:實(shí)驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)二瓊脂糖凝膠的制備瓊脂糖凝膠的制備一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?、?shí)驗(yàn)?zāi)康沫傊悄z電泳是常用的檢測(cè)核酸的方法,具有操作方便、經(jīng)濟(jì)快速等優(yōu)點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)瓊脂糖凝膠電泳是常用的檢測(cè)核酸的方法,具有操作方便、經(jīng)濟(jì)快速等優(yōu)點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)DNA瓊脂糖凝瓊脂糖凝膠的制備方法膠的制備方法二、實(shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)原理瓊脂糖凝膠電泳是常用的用于分離、鑒定瓊脂糖凝膠電泳是常用的用于分離、鑒定DNA、RNA分子混合物的方法,這種電泳方法以瓊脂凝膠分子混合物的方法,這種電泳方法以瓊脂凝膠作為支持物,利用作為支持物,利用DNA分子在泳動(dòng)時(shí)的電荷效應(yīng)和分子篩效應(yīng),達(dá)到分離混合物的目的。分子在泳動(dòng)時(shí)的電荷效應(yīng)和分子篩效應(yīng),達(dá)到分離混合物的目的。DNA分子在分子在高于其等電點(diǎn)的溶液中帶負(fù)電,在電場(chǎng)中向陽(yáng)極移動(dòng)。在一定的電場(chǎng)強(qiáng)度下,高于其等電點(diǎn)的溶液中帶負(fù)電,在電場(chǎng)中向陽(yáng)極移動(dòng)。在一定的電場(chǎng)強(qiáng)度下,DNA分子的遷移速度取決分子的遷移速度取決于分子篩效應(yīng),即分子本身的大小和構(gòu)型是主要的影響因素。于分子篩效應(yīng),即分子本身的大小和構(gòu)型是主要的影響因素。DNA分子的遷移速度與其相對(duì)分子量成反分子的遷移速度與其相對(duì)分子量成反比。不同構(gòu)型的比。不同構(gòu)型的DNA分子的遷移速度不同。如環(huán)形分子的遷移速度不同。如環(huán)形DNA分子樣品,其中有三種構(gòu)型的分子共價(jià)閉合分子樣品,其中有三種構(gòu)型的分子共價(jià)閉合環(huán)狀的超螺旋分子(環(huán)狀的超螺旋分子(CCCDNA)、開(kāi)環(huán)分子、開(kāi)環(huán)分子OCDNA、和線形、和線形DNA分子分子IDNA。這三種不同構(gòu)型分子進(jìn)行。這三種不同構(gòu)型分子進(jìn)行電泳時(shí)的遷移速度大小順序?yàn)殡娪緯r(shí)的遷移速度大小順序?yàn)镃CCDNA>IDNA>OCDNA核酸分子是兩性解離分子,核酸分子是兩性解離分子,PH35是堿基上的氨基解離,而三個(gè)磷酸基團(tuán)中只有一個(gè)磷酸解離,所以是堿基上的氨基解離,而三個(gè)磷酸基團(tuán)中只有一個(gè)磷酸解離,所以分子帶正電,在電場(chǎng)中向負(fù)極泳動(dòng);而分子帶正電,在電場(chǎng)中向負(fù)極泳動(dòng);而PH8083時(shí),堿基幾乎不解離,而磷酸基團(tuán)解離,所以核酸分子時(shí),堿基幾乎不解離,而磷酸基團(tuán)解離,所以核酸分子帶負(fù)電,在電場(chǎng)中向正極泳動(dòng)。不同的核酸分子的電荷密度大致相同,因此對(duì)泳動(dòng)速度影響不大。在中帶負(fù)電,在電場(chǎng)中向正極泳動(dòng)。不同的核酸分子的電荷密度大致相同,因此對(duì)泳動(dòng)速度影響不大。在中性或堿性時(shí),單鏈性或堿性時(shí),單鏈DNA與等長(zhǎng)的雙鏈與等長(zhǎng)的雙鏈DNA的泳動(dòng)率大致相同。的泳動(dòng)率大致相同。影響核酸分子泳動(dòng)率的因素主要是影響核酸分子泳動(dòng)率的因素主要是1、樣品的物理性狀、樣品的物理性狀即分子的大小、電荷數(shù)、顆粒形狀和空間構(gòu)型。一般而言,電荷密度愈大,泳動(dòng)率越大。但是不同核酸分子的電荷密度大致相同,所以對(duì)泳動(dòng)率的影響不明顯。對(duì)線形分子來(lái)說(shuō),分子量的常用對(duì)數(shù)與泳動(dòng)率成反比,用此標(biāo)準(zhǔn)樣品電泳并測(cè)定其泳動(dòng)率,然后進(jìn)行DNA分子長(zhǎng)度(BP)的負(fù)對(duì)數(shù)泳動(dòng)距離作標(biāo)準(zhǔn)曲線圖,可以用于測(cè)定未知分子的長(zhǎng)度大小。DNA分子的空間構(gòu)型對(duì)泳動(dòng)率的影響很大,比如質(zhì)粒分子,泳動(dòng)率的大小順序?yàn)镃DNA>IDNA>OCDNA但是由于瓊脂糖濃度、電場(chǎng)強(qiáng)度、離子強(qiáng)度和溴化乙錠等的影響,會(huì)出現(xiàn)相反的情況。2、支持物介質(zhì)、支持物介質(zhì)核酸電泳通常使用瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠兩種介質(zhì),瓊脂糖是一種聚合鏈線性分子。含有不同濃度的瓊脂糖的凝膠構(gòu)成的分子篩的網(wǎng)孔大小不同,是于分離不同濃度范圍的核酸分子。聚丙烯酰胺凝膠由丙烯酰胺(ACR)在NNN′四甲基乙四胺(TEMED)和過(guò)硫酸銨(AP)的催化下聚合形成長(zhǎng)鏈,并通過(guò)交聯(lián)劑NN′亞甲雙丙烯酰胺(BIS)交叉連接而成,其網(wǎng)孔的大小由ACR與BIS的相對(duì)比例決定。瓊脂糖凝膠適合分離長(zhǎng)度100至60的分子,而聚丙烯酰胺凝膠對(duì)于小片段(5BP500BP)的分離效果最好。加入適量的溴化乙錠至濃度為加入適量的溴化乙錠至濃度為05ΜGML。2、取有機(jī)玻璃制膠板槽,有透明膠帶沿膠槽四周封嚴(yán),并滴加少量的膠液封好膠帶與膠槽之間的縫隙。、取有機(jī)玻璃制膠板槽,有透明膠帶沿膠槽四周封嚴(yán),并滴加少量的膠液封好膠帶與膠槽之間的縫隙。3、水平放置膠槽,在一端插好梳子,在槽內(nèi)緩慢倒入已冷至、水平放置膠槽,在一端插好梳子,在槽內(nèi)緩慢倒入已冷至60℃左右的膠液,使之形成均勻水平的膠面。左右的膠液,使之形成均勻水平的膠面。4、待膠凝固后,小心拔起梳子,撕下透明膠帶,使加樣孔端置陰極段放進(jìn)電泳槽內(nèi)。待膠凝固后,小心拔起梳子,撕下透明膠帶,使加樣孔端置陰極段放進(jìn)電泳槽內(nèi)。5、在槽內(nèi)加入、在槽內(nèi)加入05TBE電泳緩沖液,至液面覆蓋過(guò)膠面電泳緩沖液,至液面覆蓋過(guò)膠面五、注意事項(xiàng)1、電泳中使用的溴化乙錠(EB)為中度毒性、強(qiáng)致癌性物質(zhì),務(wù)必小心,勿沾染于衣物、皮膚、眼睛、口鼻等。所有操作均只能在專(zhuān)門(mén)的電泳區(qū)域操作,戴一次性手套,并及時(shí)更換。2、預(yù)先加入EB時(shí)可能使DNA的泳動(dòng)速度下降15左右,而且對(duì)不同構(gòu)型的DNA的影響程度不同。所以為取得較真實(shí)的電泳結(jié)果可以在電泳結(jié)束后再用05ΜGML的EB溶液浸泡染色。若膠內(nèi)或樣品內(nèi)已加EB,染色步驟可省略;若凝膠放置一段時(shí)間后才觀察,即使原來(lái)膠內(nèi)或樣品已加EB,也建議增加此步。3、加樣進(jìn)膠時(shí)不要形成氣泡,需在凝膠液未凝固之前及時(shí)清除,否則,需重新制膠。4、以05TBE作為電泳緩沖液時(shí),溴酚蘭在05~14的瓊脂糖凝膠中的泳動(dòng)速度大約相當(dāng)于300BP的線性DNA的泳動(dòng)速度,而二甲苯青FF的泳動(dòng)速度相當(dāng)于4KB的雙鏈線形DNA的泳動(dòng)速度。六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果凝膠的狀態(tài)及膠孔的完整性七、實(shí)驗(yàn)報(bào)告八、思考題如何通過(guò)分析電泳圖譜評(píng)判基因組DNA、質(zhì)粒DNA等的提取物的質(zhì)量
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    • 簡(jiǎn)介:1實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)6LB培養(yǎng)基的配置培養(yǎng)基的配置一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康拿鞔_培養(yǎng)基配置原理通過(guò)對(duì)LB培養(yǎng)基的配置,掌握配置培養(yǎng)的一般方法二、實(shí)驗(yàn)原理LB培養(yǎng)基是一種應(yīng)用最廣泛和最普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基。它含有酵母提取物、蛋白胨和NACL。其中酵母提取物為微生物提供碳源和能源,磷酸鹽、蛋白胨主要提供氮源,而NACL提供無(wú)機(jī)鹽。在配制固體培養(yǎng)基時(shí)還要加入一定量瓊脂作凝固劑。瓊脂在常用濃度下96℃時(shí)溶化,一般實(shí)際應(yīng)用時(shí)在沸水浴中或下面墊以石棉網(wǎng)煮沸溶化,以免瓊脂燒焦。瓊脂在40℃時(shí)凝固,通常不被微生物分解利用。固體培養(yǎng)基中瓊脂的含量根據(jù)瓊脂的質(zhì)量和氣溫的不同而有所不同。由于這種培養(yǎng)基多用于培養(yǎng)細(xì)菌,因此,要用稀酸或稀堿將其PH調(diào)至中性或微堿性,以利于細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖。LB培養(yǎng)基的配方如下酵母提取物5G蛋白胨10GNACL5G瓊脂15~20G水1000MLPH74~76三、實(shí)驗(yàn)設(shè)備試管,三角燒瓶,燒杯,量筒,玻棒,培養(yǎng)基分裝器,天平,牛角匙,高壓蒸汽滅菌鍋,PH試紙(PH55~90),棉花,牛皮紙,記號(hào)筆,麻繩,紗布等。四、實(shí)驗(yàn)試劑酵母提取物,蛋白胨,NACL,瓊脂;1MOLLNAOH,1MOLLHCL;五、操作步驟1稱(chēng)量按培養(yǎng)基配方比例依次準(zhǔn)確地稱(chēng)取酵母提取物、蛋白胨、NACL放入燒杯中。蛋白胨很易吸潮,在稱(chēng)取時(shí)動(dòng)作要迅速。另外,稱(chēng)藥品時(shí)嚴(yán)防藥品混雜,一把牛角匙用于一種藥品,或稱(chēng)取一種藥品后,洗凈、擦干,再稱(chēng)取另一藥品,瓶蓋也不要蓋錯(cuò)。38擱置斜面將滅菌的試管培養(yǎng)基冷至50℃左右,將試管棉塞端擱在玻棒上,擱置的斜面長(zhǎng)度以不超過(guò)試管總長(zhǎng)的一半為宜。9無(wú)菌檢查將滅菌的培養(yǎng)基放入37℃的溫室中培養(yǎng)24~48小時(shí),以檢查滅菌是否徹底。
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