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簡(jiǎn)介:第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文肺炎克雷伯菌噬菌體的分離和生物學(xué)特性分析及體外殺菌實(shí)驗(yàn)姓名張紅明申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)指導(dǎo)教師府偉靈20080501第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文4絲裂酶素C誘導(dǎo)法和紫外線誘導(dǎo)法處理可疑溶原性細(xì)菌后均不能形成噬斑,說明L1NPL為非溶原性噬菌體,而是裂解性噬菌體。5KPNPL的宿主譜比較窄,僅對(duì)少量1/30肺炎克雷伯菌肺炎亞種敏感,對(duì)部分大腸埃希菌也敏感。6體外殺菌試驗(yàn)表明KPNPL對(duì)KPN懸液的殺菌作用明顯,噬菌體濃度在181010PFU/ML時(shí),反應(yīng)達(dá)100分鐘時(shí)的殺滅有效率為811%,噬菌體濃度在18109PFU/ML時(shí),反應(yīng)達(dá)100分鐘時(shí)的殺滅有效率為823%,而低濃度噬菌體液隨著時(shí)間的延長(zhǎng)也能達(dá)到相同的殺菌效果。7以泌尿管外科常用硅橡膠導(dǎo)尿管為材料,成功構(gòu)建出耐藥LI悄的生物膜,并對(duì)形成的生物膜用KPNPL處理2小時(shí),結(jié)果表明Ⅺ,NPL對(duì)導(dǎo)尿管ⅪN生物膜的殺菌作用較明顯,殺菌有效率為718%,電鏡觀察也顯示KPNPL作用前導(dǎo)尿管上KPN細(xì)菌生長(zhǎng)旺盛,細(xì)菌聚團(tuán)生長(zhǎng)現(xiàn)象明顯;ⅪPNPL作用2小時(shí)后可見細(xì)菌顯著減少,細(xì)菌生長(zhǎng)稀少,少見聚團(tuán)生長(zhǎng)。關(guān)鍵詞肺炎克雷伯菌,噬菌體,分離,殺菌,生物膜
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簡(jiǎn)介:浙江師范大學(xué)碩士學(xué)位論文紫莖澤蘭(EUPATIUMADENOPHUM)的生殖生物學(xué)研究及其離體快繁體系的建立姓名沈錦波申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)植物學(xué)指導(dǎo)教師呂洪飛20080602紫莖澤蘭的生殖生物學(xué)研究及其離體快繁體系的建立近合點(diǎn)端的6個(gè)核發(fā)育成胚乳狀細(xì)胞,靠近珠孔端的2個(gè)核,其中一個(gè)核退化,另一個(gè)核發(fā)育形成胚。胚的發(fā)育過程中未見有受精過程,胚和胚乳的發(fā)育都是自發(fā)形成的。這些結(jié)果都為紫莖澤蘭為無融合生殖的先前論斷提供了新的證據(jù)。并且,紫莖澤蘭的生殖方式為無融合生殖的二倍體孢子生殖。2實(shí)驗(yàn)研究了不同環(huán)境因子對(duì)紫莖澤蘭種子萌發(fā)的影響。用不同濃度的NACL溶液及5GM不同鹽分NACL、NA2C03、NA2S04及不同LTF【J組合的混合溶液處理紫莖澤蘭種子進(jìn)行萌發(fā)試驗(yàn)。鹽脅迫對(duì)紫莖澤蘭種子萌發(fā)、胚根和胚軸的生長(zhǎng)都具有抑制作用,其中NA2C03的抑制作用最顯著。對(duì)胚根生長(zhǎng)的抑制程度大于對(duì)胚軸生長(zhǎng)的抑制。在低于50MMOL/LNACL條件下,其萌發(fā)率約80%;在200MMOL/L條件下,其發(fā)芽率仍能達(dá)到18O%。說明紫莖澤蘭種子在高土壤鹽度條件下也能萌發(fā)。在PH60時(shí),紫莖澤蘭種子萌發(fā)率達(dá)到最高843%。其種子能夠萌發(fā)的PH范圍為5O一70,從336%到20O%。在中性到弱酸性條件下萌發(fā)的較好。紫莖澤蘭種子的萌發(fā)率隨著水勢(shì)的增加而逐漸降低,在蒸餾水中萌發(fā)率達(dá)到802%,在一07MPA的水勢(shì)條件下,萌發(fā)率只有3O%,而在一08MPA下萌發(fā)完全受到抑制。表明紫莖澤蘭種子在中等水勢(shì)條件下也還能萌發(fā)。紫莖澤蘭種子萌發(fā)的溫度范圍是LO一35℃,最適宜的萌發(fā)溫度約20℃,高溫顯著抑制其萌發(fā),35℃下只有196%的種子萌發(fā)。在溫度和鹽度的交互作用下,紫莖澤蘭在很大的區(qū)域內(nèi)能萌發(fā)。在高溫、高鹽和低溫、高鹽脅迫下如30℃,200MMOL/L;10℃,200MMOL/L,
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簡(jiǎn)介:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文北極微藻在不同UVB輻射強(qiáng)度下的生物學(xué)效應(yīng)變化研究姓名彭小偉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)遺傳學(xué)指導(dǎo)教師柳俊何劍鋒20090601北極微藻在不同UVB輻射強(qiáng)度下的生物學(xué)效應(yīng)變化研究現(xiàn)了與小球藻類似的生理生化反應(yīng)。輻射12H后,小球藻脂肪酸組成發(fā)生了顯著的改變,小球藻總多不飽和脂肪酸含量降低,總飽和脂肪酸含量增加。在輻射后,小球藻增加了C160和C183兩種脂肪酸。綜上所述,施加一定輻射強(qiáng)度的UVB后,北極微藻在形態(tài)結(jié)構(gòu)、生化組成及生長(zhǎng)特征上發(fā)生了變化,這也在某種程度上反映了其對(duì)北極UVB強(qiáng)輻射極端環(huán)境的適應(yīng)性。關(guān)鍵詞UVB輻射;北極;小球藻;脆桿藻;生理生化反應(yīng)U
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簡(jiǎn)介:蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文體外培養(yǎng)細(xì)胞間納米管通道及其生物學(xué)意義的研究姓名李培強(qiáng)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)理學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師郭光沁20070601蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文THEBIOLOGICALSIGNIFICANCEOFTUNNELINGNANOTUBESBETWEENCELLS/NVITROABSTRACTOBJECFIVEMSIGNALTRANSDUCTIONANDCELLULARJN僦ACLJONARENECESSARYINVARIOUSMULTICELLULARORGANISMSRECENTLYANOVELCELLULARCOMMUNICATIONSUUETURE,NAMEDTUNNELINGNANOMBESTNTS,HASBEENFOUND/NVITROWITHADIAMETEROF50TO200NM,WHICHISSIMILARTOINTERCELLULARBRIDGESMSL加VIVORECENTLYRESEARCHERSHAVEFOCUSEDTHEIRATTENTIONONTHEROLESOFCELLCOMMUNICATIONBETWEELATUMORCELLSINTHETREATMENTOFCANCERTHISEXPERIMENTWASCARRIEDOUTTOUNDERSTANDTHEFORMATIONANDROLESOFTNTSBETWEENCULTUREDTUMORANDNORMALCELLSMETHODSTHEMORPHOLOGICALFEATURESANDTHETRENDOFFORMATIONOFTNTSWEREOBSERVEDUNDERINVERTEDPHASECONTRASTMICROSCOPYTHEHEP62CELLSORCHANGLIVERCEHSWELESTAINEDWITHDIIORDIORESPECTIVELYANDMOVEMENTOFTHEVESICLESVIATNTSWASANALYZEDBYINVERTEDFLUORESCENCEMICROSCOPYINORDERTOFINDOUTWHETHERTHETNTSCOULDBEFORMEDBETWEENHEPG2CELLSANDCHANGLIVERCELLS,THETWOCELLLINESWE托MARKEDWITHDIFFERENTLIPOPHLLIESTAINSCOCULTUREDANDANALYZEDBYCONFOCALMICROSCOPYRESULTSTHEFORMATIONOFTNTSHASBEENFOUNDBETWEENHEPG2CELBORCHANGLIVERCELLSANDTHENUMBERSOFTNTSGETINCREASEDWITHTHEPROGRESSIONOFCULTURINGTHETRANSFEROFDILLABELEDORGANDIESALONGTNTSWASFOUNDTOBEUNIDIRECTIONALANDDISCONTINUOUSTHEFORMATIONOFTNTSBEBVEENHEP02CELLSANDCHANGLIVERCELLSHASALSOBEENOBSERVED11塢TNTSCAMEFROMTHELATTERANDTHEMARKEDVESICLESFROMCHANGLIVERCELLSCOULDBETRANSFERREDINTOHEPG2CELLSVIATNTSCONCLUSIONSTUNNELINGNANOMBESALEONEOFTHEUNIVERSALSTRUCTURESINVOLVEDINTHECELLCOMMUNICATION加VITROTHEVESICLESCANBETRANSFERREDUNIDIRECTIONALLYVIATNTSTHEVESICLESOFCHANGLIVERCELLSCANMOVEINTOHEPG2CELLSVIATNTSWHICHWEREFORMEDFROMCHANGLIVERCELLSKEYWORDSCELLCOMMUNICATION;TNTS;HEPG2;CHANGLIVER;TUMORIGENESISⅡ
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簡(jiǎn)介:無根萍屬WOLFFIA隸屬于浮萍科天南星目,是世界上最小的被子植物。該屬植物繁殖速度快;易于培養(yǎng);結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,只具有一個(gè)雄蕊和一個(gè)雌蕊;自然狀態(tài)下通常為克隆繁殖,遺傳結(jié)構(gòu)高度一致,具備特定研究目的模式植物的特點(diǎn),正在或已經(jīng)成為一些實(shí)驗(yàn)室研究光合作用、生物反應(yīng)器、毒理學(xué)、生態(tài)修復(fù)和環(huán)境監(jiān)測(cè)等的重要模式生物材料;同時(shí)還被作為建造航天生活倉和地外生命支撐系統(tǒng)的首選植物。該屬植物蛋白含量高且氨基酸組分平衡,營(yíng)養(yǎng)價(jià)值可與大豆相媲美。但該屬植物一直是分類學(xué)界的疑難類群,不同的學(xué)者對(duì)該屬的分類處理比較混亂其次,對(duì)該屬的生物地理研究也很不夠,尤其是對(duì)國(guó)產(chǎn)類群的研究;另外,WGLOBOSA作為該屬中國(guó)分布的物種,其生理學(xué)特性和形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)育還缺乏研究。為此,本文通過MATK基因測(cè)序、RAPD標(biāo)記等手段,結(jié)合野外和室內(nèi)的長(zhǎng)期觀測(cè),對(duì)其分類和中國(guó)的地理分布以及生理學(xué)特性進(jìn)行了研究。針對(duì)浮萍科植物作為水生植物,其對(duì)重金屬和芳香烴衍生物的耐受逆境能力大小,和對(duì)淡水水體環(huán)境生態(tài)的指示作用。本文研究了WGLOBOSA具解毒功能的谷胱甘肽轉(zhuǎn)硫酶的活性;最后,探索了從黃鱔MONPTERUSALBUSZUIEW中分離純化GSTS的技術(shù)與方法并對(duì)MAGST的部分特性進(jìn)行了研究。主要研究結(jié)果如下1WOLFFIA系統(tǒng)分類學(xué)研究前人認(rèn)為,WOLFFIA柱頭的顏色是重要的分組、分種檢索性狀。我們對(duì)其長(zhǎng)期、活體、原位、實(shí)時(shí)跟蹤觀測(cè)結(jié)果表明,柱頭顏色是WOLFFIA個(gè)體發(fā)育上的變化過程,不是一個(gè)穩(wěn)定性狀,用作WOLFFIASUBGROUP內(nèi)組的劃分特征和種的鑒別特征是不適合的。在此基礎(chǔ)上我們重新修定了該屬的分種檢索表。利用形態(tài)分類學(xué)性狀氣孔、長(zhǎng)寬、高寬以及最大寬度在水面上還是水面下等性狀,認(rèn)為中國(guó)分布的類群應(yīng)是WGLOBOSA,但亦有WNEGLECTA存在的證據(jù)。MATK基因片段結(jié)果支持形態(tài)學(xué)的結(jié)論。通過廣泛的野外采集,在我國(guó)北京、河北和吉林發(fā)現(xiàn)WOLFFIA的新分布。2中國(guó)WOLFFIA居群遺傳學(xué)研究以RAPD分子標(biāo)記對(duì)廣泛分布的居群遺傳多樣性研究表明,無根萍屬植物主要以無性繁殖方式繁育,居群主要由單一克隆后代組成,如海河流域以及松花江流域居群;但一些居群亦兼有性繁殖方式,并具較高的遺傳多樣性,如武漢、海南居群。利用MVSPPOPGENE和NTSYS等分析方法探討了中國(guó)產(chǎn)WOLFFIA居群遺傳多樣性和地理分布格局間關(guān)系。3WGLOBOSA的生理學(xué)研究建立了較為完善的WGLOBOSA的無菌培養(yǎng)和保存體系。WGLOBOSA在逆境中,會(huì)形成休眠體;同時(shí),發(fā)現(xiàn)不同居群甚至不同克隆系之間其抗逆性和生長(zhǎng)速度存在著顯著差異,差異最大的如海南文昌居群的生長(zhǎng)速率,是長(zhǎng)春居群的419倍;不同的時(shí)間統(tǒng)計(jì)生長(zhǎng)周期存在著不同結(jié)果,生長(zhǎng)節(jié)律每天有兩個(gè)生長(zhǎng)高峰呈雙“S”型;WGLOBOSA的耐受溫度范圍和PH范圍廣;低濃度的IAA,GA,6BA,EDDHAFE以及EDTA等物質(zhì)具有促進(jìn)WGLOBOSA生長(zhǎng)的特性;但是,所有這些處理均沒能促使WGLOBOSA從營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)轉(zhuǎn)入生殖生長(zhǎng)。4WGLOBOSA的解剖學(xué)研究WGLOBOSA通常是進(jìn)行克隆繁殖,通過組織切片發(fā)現(xiàn)無性分枝子體還未伸出母株之前就已經(jīng)完成分化,與此同時(shí)分枝子體中又分化出新的子體,分枝呈聚傘狀,子體生長(zhǎng)方向彼此相對(duì);另外,生殖生長(zhǎng)結(jié)構(gòu)的分化也是在母體中完成的;生殖生長(zhǎng)點(diǎn)與營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)點(diǎn)不是同一生長(zhǎng)點(diǎn)。5浮萍科植物的毒理學(xué)研究以重金屬CR3和芳香烴衍生物CDNB溶液處理WOLFFIA,SPIRODELA和LEMNA,三種水生生物,結(jié)果表明WOLFFIA比SPIRODELA,LEMNA對(duì)重金屬和芳香烴衍生物有更強(qiáng)的抗逆能力,如在同等條件下對(duì)于CR3WOLFFIA的半致死劑量800GB≈80MGL,而SPIRODELA和LEMNA則分別為10MGL;20MGL表明WGLOBOSA是一個(gè)優(yōu)良的生態(tài)環(huán)境修復(fù)植物。與此同時(shí),研究了WGLOBOSA中具有解毒功能的GSTS粗酶液活力在不同濃度的重金屬離子CU2和CD2以及芳香烴衍生物CDNB和NBDCL隨處理時(shí)間的變化情況。6從水生生物黃鱔MONPTERUSALBUSZUIEW中分離純化GSTS的研究GSTS活性的變化是環(huán)境監(jiān)測(cè)的一個(gè)BIOMARKER,為此研究從MALBUS中分離純化GSTS的技術(shù)與方法。經(jīng)GSH親和層析純化的酶活力為粗酶液的207倍,進(jìn)而鑒定了MAGST的部分特性。SDSPAGE電泳和MALDITOFMS表明MAGST為同源二聚體,分子量約為52KDA,單亞基分子量約為26KDA。MAGST酶動(dòng)力學(xué)表明對(duì)CDNB為1307±037微摩爾每分鐘每毫克蛋白;對(duì)NBDCL為554±013微摩爾每分鐘每毫克蛋白;對(duì)ECA、4NPA幾乎沒有活性。在GSH底物飽和,CDNB的KM值和VMAX分別為032MM和1619微摩爾每分鐘每毫克蛋白;CDNB底物飽和,GSH的KM值和VMAX分別為044MM和2883微摩爾每分鐘每毫克蛋白。MAGST的酶活性PH值較寬,溫度范圍廣在PH7075具有最大速度,在PH65和PH85時(shí)分別具有65%和72%的酶活力;在45℃時(shí)具有最大活性,30℃和55℃時(shí)為最大活力的80%,60℃幾乎完全喪失酶活力。
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簡(jiǎn)介:南開大學(xué)博士學(xué)位論文DKK調(diào)節(jié)WNT信號(hào)通路的結(jié)構(gòu)生物學(xué)基礎(chǔ)姓名陳立君申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)生物物理學(xué)指導(dǎo)教師楊文修鄭翓20080401摘要并具有最大親和力;另外,DLK2C中的殘基H198及其質(zhì)子化狀態(tài)對(duì)于DKK2C和LI沖5一PD3的結(jié)合十分關(guān)鍵,提示PH在調(diào)節(jié)DKK2C結(jié)合LRP5/6胞外D螺旋槳結(jié)構(gòu)域從而抑制WNT信號(hào)通路中發(fā)揮重要作用。最后,我們利用核磁共振譜學(xué)方法解析了DKK2N的溶液三維結(jié)構(gòu),發(fā)現(xiàn)DKK2N與DKK2C的結(jié)構(gòu)具有明顯的相似性。對(duì)全長(zhǎng)DKK2的研究表明,DKK2C與DKK2N在全長(zhǎng)DKK2分子中是相互獨(dú)立的,彼此間不存在相互作用。這些研究結(jié)果不僅增加了我們對(duì)DKK調(diào)節(jié)規(guī)范型WNT信號(hào)通路的理解而且擴(kuò)展了尋找新型治療靶點(diǎn)的范圍,對(duì)于基礎(chǔ)科學(xué)研究和醫(yī)學(xué)治療都具有重要意義。此外,我們還研究了蘆薈大黃素對(duì)正常和細(xì)菌脂多糖LPS刺激的大鼠腹腔巨噬細(xì)胞PMTP釋放耵盯A和【CA2】I動(dòng)力學(xué)的影響。其效應(yīng)表現(xiàn)出雙向調(diào)節(jié)作用,低濃度時(shí)對(duì)【CALI升高有明確的抑制作用,對(duì)TNF僅釋放的抑制呈隨濃度升高而減弱的趨勢(shì)。蘆薈大黃素對(duì)【CA2】I動(dòng)力學(xué)的調(diào)制是其調(diào)節(jié)PM9釋放TNFA信號(hào)傳導(dǎo)通路中的重要環(huán)節(jié)。關(guān)鍵詞規(guī)范型WRIT信號(hào)通路蛋白一蛋白對(duì)接模擬核磁共振DKK2溶液結(jié)構(gòu)DKKLRP5/6復(fù)合物II
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簡(jiǎn)介:中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)博士學(xué)位論文血紅素和西羅血紅素分支合成關(guān)鍵酶的結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究姓名范軍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師牛立文滕脈坤20070201中圖科技大學(xué)博士論文摘要2枯草桿菌尿卟啉原脫羧酶的結(jié)構(gòu)研究尿卟啉原脫羧酶UROPORPHYRINOGENDEEARBOXYLASE,UROD是血紅素和葉綠素分支合成的第一個(gè)酶,控制著生物體內(nèi)不同卟啉化合物代謝的流向。它催化尿卟啉原Ⅲ或異構(gòu)體尿卟啉原I四次脫羧產(chǎn)生糞卟啉原Ⅲ或I,和一般的脫羧酶不同,UROD不含有輔因子。利用PCR技術(shù)從枯草桿菌BACILLUSSUBTILIS基因組DNA擴(kuò)增了編碼UROD的基因HEINE,測(cè)序顯示編碼的UROD有兩個(gè)氨基酸殘基發(fā)生改變,分別是ILEL55被THRL55取代,GLUL98被LYSL98取代,擴(kuò)增產(chǎn)物酶切后插入PET15B中,表達(dá)的枯草桿菌UROD最SUBTILISUROD,BSURODN端含有組氨酸標(biāo)簽,將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21DE3,NINTA一步純化,蛋白純度在90%以上。酶的比活為560U/MG蛋白。純化的BSUROD亞基分子量在SDSPAGE上測(cè)定約41KD,動(dòng)態(tài)光散射測(cè)定全酶分子量約81KD,表明BSUROD是同亞基二聚體。利用懸滴法獲得BSUROD的晶體,收集到分辨率為23A的晶體衍射數(shù)據(jù),以人UROD的結(jié)構(gòu)作為模型,利用分子置換法解析了BSUROD的晶體結(jié)構(gòu),晶體空間群為P1,在BSUROD的模型中,一個(gè)晶胞中有四個(gè)UROD單體,晶胞參數(shù)A58612A,B80410A,C90940A,A68681O,P896380,丫808170,BSUROD的最終模型的自由R因子和晶體學(xué)R因子分別為1974%和2513%,鍵長(zhǎng)和鍵角的RMSD分別為0012A和12900。BSUROD的結(jié)構(gòu)已經(jīng)投入PDBPDBCODE2孫珂。解析的BSUROD單體結(jié)構(gòu)包括688和101349氨基酸殘基,單體只有一個(gè)結(jié)構(gòu)域,由P旭8桶折疊組成,酶活中心呈現(xiàn)凹穴結(jié)構(gòu),利用HUROD和產(chǎn)物糞卟啉Ⅲ的復(fù)合物結(jié)構(gòu),將糞卟啉Ⅲ的結(jié)構(gòu)和BSUROD進(jìn)行空間疊合,結(jié)果顯示,BSUROD酶活中心有18個(gè)氨基酸殘基和糞卟啉Ⅲ有接觸,根據(jù)對(duì)底物的識(shí)別和脫羧的功能將它們分為3類。第一類是ASP殘基;第二類包含數(shù)個(gè)極性氨基酸殘基;第三類包括數(shù)個(gè)疏水氨基酸殘基。在18個(gè)氨基酸殘基中,只有觚29,AR933,ASP78,ILE79,PHEL04,TYRL54,PHE207和HIS322在30個(gè)物種的UROD中是不變的。對(duì)它們可能的功能作了討論。BSUROD和真核生物UROD結(jié)構(gòu)比較發(fā)現(xiàn)有兩個(gè)LOOP差別很大,這兩個(gè)LOOP的構(gòu)象變化可能涉及底物的結(jié)合和產(chǎn)物的釋放。由于ILILOD和SUMT催化相同III
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簡(jiǎn)介:分類號(hào)密級(jí)UDC1注學(xué)位論文草魚TNF和IFN2的克隆鑒定、重組表達(dá)及生物學(xué)功能的研究(題名和副題名)陳丹燕(作者姓名)指導(dǎo)教師姓名張安英副教授電子科技大學(xué)成都(職務(wù)、職稱、學(xué)位、單位名稱及地址)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)名稱生物物理學(xué)論文提交日期20124論文答辯日期20125學(xué)位授予單位和日期電子科技大學(xué)答辯委員會(huì)主席評(píng)閱人年月日注1注明國(guó)際十進(jìn)分類法UDC的類號(hào)摘要Ⅰ摘要細(xì)胞因子是一類由免疫細(xì)胞及其它類型細(xì)胞合成或分泌的高活性、多功能的小分子蛋白質(zhì)物質(zhì),能調(diào)節(jié)多種細(xì)胞的生理功能。腫瘤壞死因子TUMNECROSISFACTTNF和干擾素INTERFERONIFN在免疫功能和炎癥反應(yīng)中起關(guān)鍵調(diào)節(jié)作用,均為多效應(yīng)的細(xì)胞因子。為了研究草魚TNF和IFN的分子結(jié)構(gòu)和功能性質(zhì),本課題克隆獲得草魚TNF和IFN2的CDNA全長(zhǎng)序列,然后分別將其成熟肽克隆至PET30A載體,構(gòu)建BL21DE3PET30ATNF和BL21DE3PET30AIFN2原核表達(dá)系統(tǒng)。通過優(yōu)化誘導(dǎo)表達(dá)條件,獲得較高產(chǎn)量的可溶性重組蛋白,經(jīng)過鎳螯合柱親和層析后進(jìn)行分子篩層析,得到高純度的重組草魚TNF蛋白R(shí)GCTNF和重組草魚IFN2蛋白R(shí)GCIFN2。利用重組蛋白純品刺激草魚頭腎白細(xì)胞,REALTIMEPCR分析顯示RGCTNF能明顯誘導(dǎo)NFB信號(hào)通路中相關(guān)因子的MRNA表達(dá)水平,且WESTERNBLOT分析顯示RGCTNF能調(diào)節(jié)IB磷酸化狀態(tài),而RGCIFN2則能有效促進(jìn)LPS誘導(dǎo)的IL1MRNA表達(dá)水平,從而對(duì)此兩種重組蛋白功能活性進(jìn)行初步探討。本課題從分子克隆、序列分析、重組表達(dá)、蛋白純化及活性鑒定等不同層面研究草魚TNF和IFN的分子結(jié)構(gòu)和功能性質(zhì),比較系統(tǒng)地闡明它們?cè)隰~類免疫系統(tǒng)中的功能地位,不僅為深入研究它們?cè)诿庖哌M(jìn)化過程中的結(jié)構(gòu)和功能演變提供了思路,同時(shí)也增強(qiáng)了對(duì)草魚免疫系統(tǒng)的認(rèn)識(shí),為進(jìn)一步加強(qiáng)魚病防治和研究硬骨魚的免疫系統(tǒng)提供理論依據(jù)。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞TNF,IFN,CDNA克隆,重組蛋白,生物學(xué)功能
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簡(jiǎn)介:分類號(hào)VDC密級(jí)博士學(xué)位論文AF一1與UG結(jié)合蛋白相互作用及生物學(xué)意義的初步研究INTERACTIONOFANTIFLAMMIN一1WITHUTEROGLOBIN一BINDINGPROTEINANDFUNETIONALCORRELATES作者姓名學(xué)科專業(yè)學(xué)院系、所指導(dǎo)教師李晨生理學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院羅自強(qiáng)教授論文答辯日期韌8鄉(xiāng),種答辯委員會(huì)主席中南大學(xué)二00八年五月本課題受如下基金資助國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目CLARA細(xì)胞在肺纖維化中的調(diào)控作用及細(xì)胞分子機(jī)制研究批準(zhǔn)號(hào)30400190NATIONALNATURALSCIENCEFOUNDATIONOFCHINA,THEREGULATORYROLEOFCLARAEELLSINLUNGFIBROSISANDITSMOLECULARMECHANISMN030400190國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目UGBP在ANTIFLAMMIN一1抗成纖維細(xì)胞增殖中的作用及機(jī)制探討批準(zhǔn)號(hào)30670770NATIONALNATURALSCIENCEFOUNDATIONOFCHIN禮MEDIATIONOFUTEROGLOBIN一BINDINGPROTEININANTIFLAMMIN一1REGULATEDFLBROBLASTPROLIFERATION困030670770
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簡(jiǎn)介:黑龍江大學(xué)碩士學(xué)位論文蠋蝽(ARMACHINENSISFALLOU)生物學(xué)特性及其控制技術(shù)研究姓名高卓申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)農(nóng)業(yè)昆蟲與害蟲防治指導(dǎo)教師王貴強(qiáng)宋麗文20100507黑龍江大學(xué)碩士學(xué)位論文ABSTRACTARMACHINENMSFALLOUISANIMPORTANTPREDATORYINSECTFORCONTROLOFLEPIDOPTERA、COLEOPTERAANDHOMOPTERAINSECTPESTSINAGRICULTUREANDFORESTRYANDITIS勰AGREATPOTENTIALCONTROLAGENTOFINSECTPESTSFORAPPLICATIONOFBIOLOGICALCONTROLINFUTURETHERESEARCHEMPHASESONTHEMO印H010西CFEATURE,BIOLOGICALCHARACTERISTIC,REARINGCONDITIONANDARTIFICIALRELEASINGTECHNIQUESOFANNACHINENSISTHEEXPERIMENTALRESULTSINDICATEDTHATARMA如MENSISOCCURREDTWOGENERATIONSATTHEWESTHARBINAREAINAYEAR,ANDOVERWINTEREDATTHEADULTSTAGETHE1啦INSTARNYMPHONLYSUCKSABITWATERBUTTHEPREDATORFROMTHE2STINSTARNYMPHTOADULTSTAGECANPREYDIFFERENTSPECIESOFINSECTPESTS,ANDPREDATIONNUMBERISINCREASEDWITHGROWINGNYMPHTOADULTSTAGETHEOVIPOSITINGEGGSOFAFEMALEADULTALEABOUT400,ANDEGGHATCHABILITYISABOUT90PERCENTTHEREAREABOUT40TO50DAYSFORONEGENERATIONFROMEGGTOADULTSTAGETHEREWERESIGNIFICANTDIFFERENCESINARMACHINER坫I8GROWTHDEVELOPMENTANDREPRODUCTIONUNDERDIFFERENTTEMPERATURESTHEDEVELOPMENTALDAYSOFTHENYMPHSTAGEWEREADOUT423ATATEMPERATUREOF20。C,WHEREAS,THEDEVELOPMENTALDAYSWEREONLY29ATATEMPERATUREOF30℃MOREOVERTHEADULTLONGEVITYWAS43DAYSAT20“2,BUTONLY284DAYSAT30℃DIFFERENTHABITATPLANTSFORARMACHINENSISSHOWEDASIGNIFICANTDIFFERENCEONSURVIVALRATEANDFERTILITYTHESURVIVALRATEFROMTHEELMSTREE,POPLARSEEDLINGANDSOYBEANSEEDLING舔AHABITATWAS829%,613%AND346%,RESPECTIVELYFURTHERMORE,THEOVIPOSITINGEGGSWEREINFLUENCEDSIGNIFICANTLYBYTHEHABITATPLANTS,ANDTHEEGGSOLLTHEELMSTREE,POPLARSEEDLINGANDSOYBEANSEEDLINGWEREABOUT3309,2557AND2254,RESPECTIVELYTHEFIELDEXPERIMENTSOFRELEASINGARMACHINENSISWEREUNDERTAKENTOINVESTIGATEⅡ
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簡(jiǎn)介:浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文利用低值魚制備魚蛋白液肥及其生物學(xué)效應(yīng)的研究姓名鄭偉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)植物營(yíng)養(yǎng)學(xué)指導(dǎo)教師石偉勇20060501關(guān)鍵詞低值魚降解;魚蛋白液肥研制;液肥的生物學(xué)效應(yīng)
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簡(jiǎn)介:貴州大學(xué)碩士學(xué)位論文產(chǎn)喜樹堿內(nèi)生真菌的分離、鑒定及生物學(xué)活性研究姓名張根申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)微生物學(xué)指導(dǎo)教師王嘉福冉雪琴20070501貴州大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要在貴州省喀斯特地區(qū)生長(zhǎng)的喜樹組織中篩選了80多株內(nèi)生真菌,包括根,莖,葉和果實(shí)。其中地上組織的內(nèi)生真菌較豐富,種類較多。80多株內(nèi)生真菌經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng),分別將菌絲和發(fā)酵液用薄層層析、高效液相色譜、質(zhì)譜分析,證明內(nèi)生真菌株菌株S19產(chǎn)喜樹堿。對(duì)S19進(jìn)行了形態(tài)學(xué)研究,S19的產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)、菌落形態(tài)符合鐮刀屬的分類特征。進(jìn)一步提取S19菌株的基因組,對(duì)其核糖體基因居間序列ITS進(jìn)行了分析,經(jīng)聚類分析表明,S19屬于鐮刀屬的腐皮鐮刀菌種。對(duì)S19發(fā)酵液所產(chǎn)喜樹堿的產(chǎn)率進(jìn)行了分析,結(jié)果表明,培養(yǎng)第四天S19產(chǎn)喜樹堿的得率最高,喜樹堿的產(chǎn)量為74048TTG喜樹堿/G干菌絲,四天后每升菌液中喜樹堿的含量為896士O34毫克喜樹堿。對(duì)S19所產(chǎn)喜樹堿的生物學(xué)活性進(jìn)行了研究。經(jīng)觀察,從S19菌株中提純的喜樹堿作用24小時(shí)可使非洲綠猴腎細(xì)胞VERO皺縮,細(xì)胞膜呈泡狀,細(xì)胞從瓶壁大量脫落;采用熒光染色法AO/EB,對(duì)S19所產(chǎn)喜樹堿引起VETO細(xì)胞的凋亡率分析證明,作用72小時(shí),細(xì)胞的凋亡率為13%,并且S19喜樹堿的作用劑量和時(shí)間與細(xì)胞的凋亡率呈線性增加關(guān)系。因此S19菌株提取的喜樹堿具有使非洲綠猴腎細(xì)胞調(diào)亡的作用。進(jìn)一步對(duì)S19喜樹堿致前列腺癌細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制進(jìn)行了研究。采用CASPASE3抗體經(jīng)WESTERNBLOT分析,表明S19感染前列腺癌細(xì)胞48小時(shí),細(xì)胞總蛋白提取物中呈現(xiàn)CASPASE3陽性顯色條帶,分子量35KD。表明S19喜樹堿致前列腺癌細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制是通過CASPASE3途徑實(shí)現(xiàn)的。關(guān)鍵詞喜樹堿;內(nèi)生真菌;核糖體內(nèi)部轉(zhuǎn)錄序列;細(xì)胞凋亡2
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簡(jiǎn)介:石河子大學(xué)碩士學(xué)位論文黃瓜芽黃突變的分子細(xì)胞生物學(xué)特性初步研究姓名李娟娟申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師高劍峰20090601THEPRELIMINARYRESEARCHONTHEMOLECULARANDCELLBIOLOGYOFTHECUCUMBERMUTANTOFVIRESCENTPOSTGRADUATELIJUANJUANBIOCHEMISTRYANDMOLECULARBIOLOGYSUPERVISORPROGAOJIANFENGABSTRACTOBJECTIVE1BASEDONSIXNORMALVARIETIESOFCUCUMBERSANDONEMUTANTOFVIRESCENT,WECOUNTEDTHECELLCHROMOSOMENUMBERSANDSTUDIEDTHEKARYOTYPEANALYSISOFCUCUMBERWHICHPROVIDEDAREFERENCEONTHEGENELOCATIONRELATEDTHECUCUMBERMUTANTOFVIRESCENT2DISCUSSIONABOUTTHEDIFFERENTIALLYEXPRESSEDGENESBETWEENTHEMUTANTOFVIRESCENTANDWILDTYPELEAFTISSUEMETHOD1WEANALYZEDTHERESETSWHICHWEPREPAREDCHROMOSOMESUSINGCUCUMBERROOTSBYCONVENTIONALCOMPRESSIONMETHOD,ANDTHENMADETHEMICROSCOPICALEXAMINATIONSANDMICROGRAPHY2THESUBTRACTIVEHYBRIDIZATIONLIBRARYOFTHEVIRESCENTMUTANTCUCUMBERWASCONSTRUCTEDBYSSHIDENTIFICATIONTHECLONESOFSUPPRESSIONSUBTRACTIVEHYBRIDIZATIONLIBRARYBYRESTRICTIONENZYMEDIGESTIONANDSEQUENCEDTHECLONESWHOSEFRAGMENTSAREBETWEEN200~900BPBYRESTRICTIONENZYMEDIGESTIONNESEQUENCESWEREBLASTEDINTHEGENBANKNUCLEICACIDDATABASEWHICHWEREREMOVEDRESTRICTIONSITESRESULTANDCONCLUSION1INACCORDANCEWITHTHENORMALANDTHEMUTANTCUCUMBERKARYOTYPEANALYSIS,THERESULTSSHOWEDTHATTHENORMALANDTHECUCUMBERMUTANTOFYELLOWVIRESCENT’SCHROMOSOMESAREBOTH2N14THATBELONGTODIPLOIDPLANTANDTHEBASICNUMBEROFCHROMOSOMEIS7KARYOTYPESBELONGTO1AANDTHEYARESYMMETRICALKARYOTYPETHEVARIANCEANALYSISOFDIFFERENTOFCUCUMBERVARIETIESOFCHROMOSOMES’LENGTHMOWEDTHATPO05ITSHOWEDTHATTHEREWASNODIFFERENCEBETWEENNORMALANDTHECUCUMBERMUTANTOFYELLOWVIRESCENTATTHELEVELOFCHROMO∞MES2WEIDENTIFIEDATOTALOF240POSITIVECLONES,INCLUDING152FORWARDSUBTRACTIVELIBRARYPOSITIVECLONESAND88REVERSESUBTRACTIVELIBRARYCLONES206SEQUENCESHAVEBEENSEQUENCEDSUCCESSFULLYAFTERMASTEDANALYSISOF159SEQUENCESWHICHWERETRANSFORMEDTOTHEF’ASL’AFORMATANDSUBMITTEDTOTHEGENBANK,ATLASTWEGOTASERIALSOFNUMBERSFROMGH270133TOGH270291KEYWORDSCUCUMBERMUTANTOFYELLOWVIRESCENTSUPPRESSIONSUBTRACTIVEHYBRIDIZATIONSSH,DIFFERENTIALLYEXPRESSIONGENEN
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簡(jiǎn)介:汕頭大學(xué)碩士學(xué)位論文人胚胎肌肉組織來源的隨機(jī)惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞系的生物學(xué)特性THEBIOLOGICALACTERISTICSOFSPONTANEOUSLYMALIGNANTTRANSFMEDCELLLINESFROMHUMANEMBRYONICMUSCULARTISSUE專業(yè)兒科學(xué)研究生張松導(dǎo)師楊立業(yè)副主任醫(yī)師中國(guó)汕頭20085汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)碩士學(xué)位論文I目錄目錄I前言1第一部分聚乙二醇介導(dǎo)的細(xì)胞融合導(dǎo)致非整倍體細(xì)胞的產(chǎn)生3中文摘要3ABSTRACT4英文縮寫表5前言6材料8方法10結(jié)果13討論19第二部分人類胚胎肌肉組織來源的隨機(jī)惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞系染色體分析23中文摘要23ABSTRACT24前言25材料26方法26結(jié)果27討論34第三部分苦參堿抑制人突變?nèi)饬黾?xì)胞系MS0812增殖和誘導(dǎo)凋亡的體外實(shí)驗(yàn)研究37中文摘要37ABSTRACT38前言39材料41方法41結(jié)果43討論47
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簡(jiǎn)介:湖南師范大學(xué)博士學(xué)位論文雌核發(fā)育二倍體鯽鯉克隆體系的建立及其衍生后代生物學(xué)特性的研究姓名王靜申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)發(fā)育生物學(xué)指導(dǎo)教師劉筠劉少軍20100401染色體檢測(cè)表明AG染色體數(shù)為2N100,染色體核型公式為22M34SM22ST22T。通過對(duì)AG性腺的顯微結(jié)構(gòu)和超微結(jié)構(gòu)觀察,發(fā)現(xiàn)它們具有正常的精巢和卵巢結(jié)構(gòu),兩性個(gè)體一年性成熟,分別能產(chǎn)生成熟的單倍體精子和卵子。3在AG分子遺傳特性研究中,首先對(duì)NG、AG、RCC和CC的SOX基因進(jìn)行檢測(cè)。AG與RCC的SOX基因擴(kuò)增條帶一致,同為200、“OO和~1900BP的擴(kuò)增帶,而在NG中只存在200和一600BP的條帶,CC中只存在200和~900BP的擴(kuò)增帶。另外,對(duì)這四種魚的5SRDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,結(jié)果表明NG與AG具有相同的擴(kuò)增帶,它們以具有獨(dú)特的168BP條帶而異于RCC和CC。同時(shí)在對(duì)5SRDNA進(jìn)行染色體定位研究中,發(fā)現(xiàn)NG、AG和RCC的原位雜交結(jié)果一致,它們都具有兩個(gè)較強(qiáng)的雜交信號(hào),而在CC染色體中沒有檢測(cè)到相關(guān)信號(hào)。對(duì)AG線粒體DNA全長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)序。AG粒體基因組全序列長(zhǎng)為16579BP,其結(jié)構(gòu)和基因排列與其他鯉科魚一致。對(duì)線粒體全序列進(jìn)行比對(duì),AG與原始親本RCC和CC的相似比分別為995%和894%,符合線粒體母性遺傳規(guī)律;AG與NG的相似比高達(dá)994%,表明兩者可能具有相同的起源。從鯉魚和鳙魚的微衛(wèi)星引物中篩選出7對(duì)引物對(duì)NG、AG、RCC和CC群體進(jìn)行微衛(wèi)星檢測(cè)。結(jié)果表明,在AG群體中各等位基因數(shù)為1~8個(gè),大小在140一300BP,群體呈現(xiàn)了高度的遺傳多態(tài)性,遺傳異質(zhì)性較大,表明基因組來源復(fù)雜,基因高度雜合。4對(duì)高背型鯽魚相關(guān)生物學(xué)特征進(jìn)行研究,結(jié)果表明它們是一種二倍體魚,兩性可育,一年性成熟;它們?cè)谕庑紊暇哂畜w背高、尾柄短、頭部小的優(yōu)良特性。用雌性高背型鯽魚與雄性改良四倍體鯽鯉交配,獲得了改良三倍體鯽魚。這種改良三倍體鯽魚不僅在外形上繼U
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