簡介：博士學(xué)位論文學(xué)校代碼學(xué)號10023B2008070云南曲靖婦女生殖道人乳頭瘤病毒感染和宮頸細胞學(xué)異常的現(xiàn)狀調(diào)查及相關(guān)基因甲基化研究PREVALENCEOFHUMANPAPILLOMAVIRUSINFECTION，CERVICALCYTOLOGYABNORMALITYANDGENEMETHYLATIONSTATUSINQUJINGOFYUNNANPROVINCE所院北京協(xié)姓名孫璐璐指導(dǎo)教師沈鏗導(dǎo)師小組楊佳欣曹冬焱和醫(yī)院學(xué)科專業(yè)婦產(chǎn)科學(xué)研究方向婦科腫瘤完成日期2011年5月教授教授副教授北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文摘要研究背景宮頸癌CERVICALCANCER是女性第二大常見惡性腫瘤，現(xiàn)己明確人乳頭瘤病毒HUMANPAPILLOMAVIRUS，耶V感染是宮頸癌發(fā)生的根本原因。本研究的目的是調(diào)查云南曲靖普通婦女耶V感染率及相關(guān)危險因素、宮頸細胞學(xué)異常率及相關(guān)危險因素，以及相關(guān)基因在各級細胞學(xué)中的甲基化狀態(tài)。研究方法采用橫斷面研究方法對曲靖市5936名女性常住人口進行調(diào)查。對目標(biāo)人群進行包括人口信息、行為信息和婚育狀況等內(nèi)容的流行病學(xué)問卷調(diào)查，采集宮頸脫落細胞標(biāo)本應(yīng)用快速導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)進行HPVDNA分型檢測，并對宮頸液基細胞進行細胞病理診斷。采用病例對照研究方法，應(yīng)用甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)法聯(lián)合變性高效液相色譜分析法對細胞學(xué)異常和正常婦女的細胞學(xué)樣本進行MGMT、RARE2、DAPKL基因啟動子區(qū)的甲基化檢測。定量資料的比較采用卡方檢驗，影響因素分析采用單因素和多因素非條件LOGISTIC回歸分析。研究結(jié)果在5936名被調(diào)查婦女中，高危型HPVDNA陽性率為83％，高危型HPV感染率有兩個高峰，分別為1824歲115％和50～55歲112％。在412例高危型HPV分型檢測陽性婦女中，最常見感染亞型為HPV1634％，其次為IIPV5617％、HPV5814％、HPV3312％和HPV52088％。高危型HPV復(fù)合感染率在整個被調(diào)查人群中為35％，最常見的復(fù)合感染類型為HPV16和HPV56。多因素非條件LOGISTIC回歸分析顯示5065歲、已婚是腫V感染的保護因素。在被調(diào)查婦女中，細胞學(xué)異常的總體患病率為58％，細胞學(xué)異常率在3539歲年齡段最高，為73％。婦女患HSIL和LSIL的風(fēng)險在HPV33感染時最高OR6064，CI184019987；OR38106，CI6888210802，其次為HPV58感染。M，V復(fù)合感染使婦女患HSIL的風(fēng)險較單一感染時升高OR69911，CI19030256832VSOR19635。CI590065333。多因素非條件LOGISTIC回歸分析顯示，HPV感染、吸煙、滴蟲感染、50～54歲是宮頸細胞學(xué)異常的危險因素，而3539歲是宮頸細胞學(xué)異常的保護因素。在相關(guān)基因啟動子區(qū)甲基化的病例對照研究中，細胞學(xué)正常婦女MGMT、RARE2、DAPKL各基因甲基化率分別為369％、42O％和467％，任一基因甲基化頻率隨年齡增長有上升趨勢22107345，P00133。MGMT、RARB2基因甲基化頻率在各級細胞學(xué)之間有顯著差異廬68976，P000861廬332477，PO0001，隨細胞學(xué)病變程度加重，基因甲基化的數(shù)量增加產(chǎn)01178，P00026。

簡介：目的應(yīng)用基因芯片技術(shù)，研究慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虛證和脾胃濕熱證患者差異基因表達譜變化P＜005，篩選出與證型相關(guān)的差異基因，找到差異基因所表達的基因功能，為慢性乙型病毒性肝炎中醫(yī)證型客觀化研究和辨證治療提供一定的依據(jù)。方法本研究在前期課題組臨床調(diào)研及文獻研究結(jié)果基礎(chǔ)上，選取慢性乙型病毒性肝炎臨床常見證候肝郁脾虛證和脾胃濕熱證進行轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究。以成都市傳染病醫(yī)院、四川大學(xué)華西醫(yī)院、成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院收集的慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虛證和脾胃濕熱證患者及健康人為研究對象。將慢性乙型病毒性肝炎患者分為肝郁脾虛證組、脾胃濕熱證組，同時設(shè)立正常人群對照組。提取每例患者外周血液6ML加入已涂布EDTA的50ML離心管中，加入紅細胞裂解液，離心，洗滌，加入TRIZOL，將分離出的白細胞轉(zhuǎn)入15MLEP管中，得到要研究的樣品，將樣品用編號編好后放置于80℃冰箱中保存。及時將樣本包裝后埋入含有干冰的泡沫箱中，嚴(yán)格密封后，通過快遞公司空運至上海伯豪生物技術(shù)有限公司。由上海伯豪生物技術(shù)有限公司技術(shù)人員完成樣品質(zhì)檢，全部合格后進入實驗階段，提取RNA，逆轉(zhuǎn)錄為CDNA，運用基因芯片進行芯片雜交及掃描，完成基因芯片的制備。最后在SAS軟件中完成肝郁脾虛證和脾胃濕熱證差異基因的篩選，并對差異基因進行功能顯著性分析。結(jié)果1按照PVALUE＜005的標(biāo)準(zhǔn)篩選出肝郁脾虛證相關(guān)的1401個差異表達探針，其中包括592個上調(diào)及809個下調(diào)。有功能注釋的差異基因939條。2照PVALUE＜005的標(biāo)準(zhǔn)篩選出脾胃濕熱證相關(guān)的2011個差異表達探針，其中包括807個上調(diào)及1204個下調(diào)。有功能注釋的差異基因1376條。3對與肝郁脾虛證相關(guān)差異基因功能顯著性分析發(fā)現(xiàn)差異基因所表達的功能主要為對外界刺激的反應(yīng)、碳水化合物的結(jié)合、多細胞機體應(yīng)激反應(yīng)）、細胞發(fā)育、生長發(fā)育等。4對與脾胃濕熱證相關(guān)的差異基因功能顯著性分析發(fā)現(xiàn)差異基因所表達的基因功能主要為解剖學(xué)形態(tài)結(jié)構(gòu)的形成、運動調(diào)節(jié)、細胞遷移、細胞粘附、定位調(diào)節(jié)、調(diào)節(jié)穩(wěn)態(tài)過程等。結(jié)論慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虛證與脾胃濕熱證存在與證型相關(guān)的差異基因。差異基因參與多種基因功能的表達，在兩大證型中差異基因所表達的基因功能存在差異。對中醫(yī)證候的客觀化研究具有參考價值。

簡介：第四軍醫(yī)大學(xué)第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文重組人重組人NDRG2腺病毒抗膠質(zhì)瘤體外藥效學(xué)評價腺病毒抗膠質(zhì)瘤體外藥效學(xué)評價專業(yè)名稱專業(yè)名稱神經(jīng)內(nèi)科神經(jīng)內(nèi)科作者姓名李明霞作者姓名李明霞指導(dǎo)老師鄧艷春指導(dǎo)老師鄧艷春重組人重組人NDRG2腺病毒抗膠質(zhì)瘤體外藥效學(xué)評價腺病毒抗膠質(zhì)瘤體外藥效學(xué)評價研究生學(xué)科專業(yè)內(nèi)科學(xué)神經(jīng)病學(xué)所在單位導(dǎo)師關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞NDRG2；膠質(zhì)瘤；腺病毒；細胞增殖；細胞凋亡二O一二年四月

簡介：▲乍睡犬碩士學(xué)位論文MICRORNA199A慢病毒載體的構(gòu)建及其對激素非依賴前列腺癌細胞腫瘤生物學(xué)特性的作用研究CONSTRUCTIONOFMICRORNA199ALENTIVIRALVECTORANDITSEFFECTSONTHEBIOLOGICALFUNCTIONSOFANDROGENINDEPENDENTPROSTATECANCERCELLS研究生姓名張東旭專業(yè)名稱研究方向?qū)熜彰笇?dǎo)小組外科學(xué)泌尿外科泌尿系腫瘤及腔內(nèi)泌尿外科學(xué)徐丹楓教授崔心剛副教授洪誼助理研究員培養(yǎng)單位第二軍醫(yī)大學(xué)附屬第二附屬醫(yī)院論文提交日期2013年5月21號獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作。除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。學(xué)位論文作者簽名掀悉、旭簽字日期加L弓年F月1日學(xué)位論文使用授權(quán)書聲明本人完全了解第二軍醫(yī)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)第二軍醫(yī)大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書學(xué)位論文儲張孤森他鋤鮐觚簽字日期加I’年月1日簽字日期年月日

簡介：點擊查看更多2010～2011北京冬春季成人急性腹瀉相關(guān)病毒及新發(fā)病原體分子流行病學(xué)研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：本文主要從以下幾個部分展開論述第一部分20092010年上海地區(qū)人副流感病毒流行病學(xué)研究及HPIV3基因特征分析目的研究上海地區(qū)上呼吸道感染患兒中人副流感病毒（HUMANPARAINFLUENZAVIRUSE，HPIVS）的流行病學(xué)規(guī)律，以及人3型副流感病毒HPIV3的基因特征，為中國大陸地區(qū)人副流感病毒的分子流行病學(xué)研究積累數(shù)據(jù)。方法1收集2009年6月7日至2010年6月5日在上海交通大學(xué)附屬新華醫(yī)院發(fā)熱門診就診的有發(fā)熱、咳嗽、流涕和咽痛等散發(fā)上呼吸道感染癥狀的患兒咽拭子標(biāo)本164例。2采用多重RTPCR方法檢測其包括HPIV14在內(nèi)的多種常見呼吸道病原，并對HPIVS在嬰幼兒呼吸道感染中所占的比例、性別、年齡和季節(jié)分布進行分析。3選擇檢測出的HPIV3陽性樣本，用兩對引物擴增出HPIV3HN基因的全長并測序，根據(jù)序列測定結(jié)果進行核苷酸和氨基酸的同源性分析，應(yīng)用比鄰法（NEIGHBJOININGTREE）建立HPIV3HN基因的系統(tǒng)進化樹。結(jié)果1164例患兒咽拭子標(biāo)本均用SEEPLEXRV15ACE方法檢測，共檢測出病毒感染陽性病例129例，總檢出率達787％，其中HPIVS檢測總陽性率為427％70164，是檢出率最高的呼吸道病毒。70例HPIVS陽性標(biāo)本中，HPIV1檢出14例，陽性率為85％14164HPIV2檢出30例，陽性率為183％30164HPIV3檢出23例，陽性率為140％23164HPIV4檢出3例，陽性率為18％3164。270例HPIVS陽性標(biāo)本中，457％3270存在混合感染。HPIVS感染在1224月組患兒檢出人數(shù)最多為741％4054，在012月組檢出人數(shù)最低為97％662，HPIVS在各年齡組間檢出率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（X250408，P0000）。HPLVS感染患兒男女間檢出率差異無統(tǒng)計學(xué)意義X21844，P0204。3本地區(qū)HPIVS感染具有明顯的季節(jié)性分布，春季765％和夏季472％的檢出率高于秋季323％和冬季222％，四個季節(jié)總檢出率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義X214594，P0002。4基因同源性分析表明，5株HPIV3上海株之間核苷酸和氨基酸的同源性分別為990995％和997100％，與11株國內(nèi)代表株系的HPIV3之間核苷酸和氨基酸的同源性分別為971998％和990100％與日本（除去GP株）、印度和沙特阿拉伯這三個亞洲國家的HPIV3之間核苷酸和氨基酸的同源性分別為960987％和970995％與美國（除去俄克拉何馬州）、加拿大和澳大利亞的HPIV3之間核苷酸和氨基酸的同源性分別為944954％和967977％，同源性最低。5系統(tǒng)進化樹把5株HPIV3上海株和36株代表株系共41株分為了A、B、C三個進化群，C群又進一步分為4個亞群C1C4。C群主要由20022011年期間在亞洲國家發(fā)現(xiàn)的HPIV3構(gòu)成，傳播范圍較廣，涉及日本、印度、沙特阿拉伯和中國，可能是現(xiàn)今亞洲地區(qū)HPIV3流行的主要基因型。5株上海株和中國北京20082009年間的多個HPIV3分離株都屬于C3A株系，其中SHANGHAI210與BJ00108、SHANGHAI1261與BJ00108、SHANGHAI1431與BJ00508、SHANGHAI1431與BJ27009之間核苷酸的同源性分別為996％、994％、994％和991％，但是其氨基酸的同源性都為100％。結(jié)論1HPIVS在上海地區(qū)嬰幼兒呼吸道感染中占有重要地位，427％的患兒HPIVS檢測陽性，其中HPIV2感染人數(shù)最多，HPIV1和HPIV3次之。2HPIVS感染有明顯的年齡分布特征，而無性別分布差異，在1224月年齡組患兒檢出人數(shù)最多。HPIVS感染也具有明顯的季節(jié)性分布，流行高峰在春夏季。3系統(tǒng)進化樹把41株HPIV3株系分為了A、B、C三個進化群，C群是現(xiàn)今亞洲地區(qū)流行的主要基因型。5株上海株和中國北京20082009年間的多個HPIV3分離株都屬于C3A株系，提示上海株可能是由北京株C3A亞群衍化而來。5株上海株與亞洲國家的多個HPIV3株系均在同一亞群內(nèi)，同源性也比較高，提示不同HPIV3分離株之間的進化很可能具有地域相關(guān)性。第二部分19962013年中國人群中副流感病毒感染流行病學(xué)的META分析目的綜合分析中國人群副流感病毒感染的流行狀況，為PIVS感染的診斷和相關(guān)疾病的防治提供數(shù)據(jù)基礎(chǔ)和科學(xué)根據(jù)。方法在PUBMED、中國期刊全文數(shù)據(jù)庫CNKI、維普中文科技期刊全文數(shù)據(jù)庫、萬方數(shù)據(jù)庫中檢索所有有關(guān)副流感病毒流行情況的文獻，按照納入及排除標(biāo)準(zhǔn)篩選出質(zhì)量合格的文獻，整理并制作成數(shù)據(jù)庫進行META分析。結(jié)果初選獲得493篇文獻，最終納入文獻52篇，總樣本量為186，053例。我國急性呼吸道感染ARI患者中副流感病毒PIVS的綜合感染率為68％03歲組（≤1歲組77％和13歲組89％）PIVS綜合感染率高于＞3歲組68％，PIVS綜合感染率在男女性別間差異無顯著性不同季節(jié)ARI患者PIVS的綜合感染率分別為春季82％、夏季80％、秋季66％和冬季51％上、下呼吸道感染中PIVS的綜合感染率分別為72％和89％，PIVS感染較易引起支氣管炎93％、肺炎82％和支氣管肺炎87％，毛細支氣管炎的綜合感染率稍低71％。結(jié)論不同地區(qū)ARI患者PIVS的感染率各不相同PIVS感染與患兒年齡呈負相關(guān)，與男女性別無關(guān)PIVS的綜合感染率春夏季偏高PIVS感染以急性下呼吸道感染為主，主要為支氣管炎、肺炎和支氣管肺炎等。

簡介：目的了解20112012年荊州市兒童急性呼吸道感染（ACUTERESPIRATYINFECTION，ARI）病毒感染病原譜，指導(dǎo)臨床進行診斷與治療。方法對荊州市20112012年544例確診為急性呼吸道感染的07歲住院患兒進行咽拭子采集，采用實時熒光定量PCR法檢測8種病毒，即呼吸道合胞病毒RSV，流感病毒IFVB，H1N1，副流感病毒Ⅰ，Ⅱ，ⅢPIV1，2，3，腺病毒ADE，偏肺病毒HMPV。結(jié)果荊州市20112012年兒童急性呼吸道感染病毒病原的總陽性率與季節(jié)、年齡有關(guān)，與性別無關(guān)。冬季、23歲兒童病毒檢出率最高，春季、01歲嬰幼兒病毒檢出率最低。在8種感染病毒中，以腺病毒占首位，陽性率為1654％，其次遞減為呼吸道合胞病毒、流感病毒B、副流感病毒Ⅰ型。其中腺病毒在12歲年齡組患兒中檢出率最高，47歲年齡組患兒中檢出率最低呼吸道合胞病毒常見于秋季、12歲兒童流感病毒B則多見于春季、23歲兒童。結(jié)論通過檢測20112012年荊州市兒童呼吸道感染疾病的病毒病原，可為臨床提供快速、準(zhǔn)確的診斷依據(jù)，防止濫用抗生素。

簡介：液基細胞學(xué)檢查與人乳頭瘤病毒檢測在宮頸液基細胞學(xué)檢查與人乳頭瘤病毒檢測在宮頸癌及癌前病變篩查中的應(yīng)用價值比較癌及癌前病變篩查中的應(yīng)用價值比較研究生研究生黃修菊黃修菊指導(dǎo)教師指導(dǎo)教師丁巖教授教授學(xué)科專業(yè)名稱學(xué)科專業(yè)名稱婦產(chǎn)科學(xué)婦產(chǎn)科學(xué)研究方向研究方向?qū)m頸病變宮頸病變2012年04月論文獨創(chuàng)性說明論文獨創(chuàng)性說明本人申明所呈交的學(xué)位論文是在我個人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。學(xué)位論文作者簽名簽字日期導(dǎo)師簽名簽字日期關(guān)于論文關(guān)于論文使用授權(quán)的說明使用授權(quán)的說明本人完全了解學(xué)校關(guān)于保留、使用學(xué)位論文的各項規(guī)定，（選擇“同意同意/不同意不同意”）以下事項1學(xué)校有權(quán)保留本論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文；2學(xué)校有權(quán)將本人的學(xué)位論文提交至清華大學(xué)“中國學(xué)術(shù)期刊光盤版電子雜志社”用于出版和編入CNKI中國知識資源總庫或其他同類數(shù)據(jù)庫，傳播本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。學(xué)位論文作者簽名簽字日期導(dǎo)師簽名簽字日期

簡介：研究背景乙型肝炎病毒HEPATITISBVIRUSHBV感染呈世界件流行全球約20億人曾感染過HBV其中35億人為慢性HBV感染者每年約有100萬人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和原發(fā)性肝細胞癌HCC。我國HBV感染率較高159歲人群的HBSAG陽性率為718％慢性HBV感染嚴(yán)重危害著我國人民的健康?？笻BV治療是慢性乙型病毒性肝炎CHRONICHEPATITISBCHB治療的關(guān)鍵拉米夫定LAMIVUDINELAM是最常用的抗HBV藥物之一它能有效抑制HBV復(fù)制減少肝臟的炎癥活動延緩或阻止肝臟疾病的進展減少肝癌的發(fā)生率。然而長期的LAM治療會篩選出YMDD變異株RTM204VIS從而產(chǎn)生了LAM的耐藥。阿德福韋酯ADEFOVIRDIPVOXILADV是阿德福韋的前體口服藥物除了可以有效地抑制HBV野生毒株復(fù)制體內(nèi)和體外研究都證實阿德福韋可以有效地抑制YMDD變異株的復(fù)制因而被廣泛應(yīng)用于LAM耐藥患者的救援治療。聚乙二醇干擾素Α2Α派羅欣PEGASYS是一種長效干擾素它的半衰期長一周一次的給藥可以提高治療末應(yīng)答和持久應(yīng)答率優(yōu)于傳統(tǒng)干擾素是LAM耐藥患者救援治療的一個可能選擇。研究表明使用ADV單藥治療后LAM耐藥患者體內(nèi)的YMDD變異株會逐漸消失野生株逐漸取代YMDD變異株成為HBV準(zhǔn)種中的優(yōu)勢株。使用派羅欣治療后LAM耐藥患者體內(nèi)的YMDD變異株將如何變化目前尚無相關(guān)報道。研究目的1、探討派羅欣治療后YMDD變異株的動態(tài)變化比較派羅欣及ADV作用下YMDD變異株動態(tài)變化之間的差異。2、探索停止LAM治療后YMDD變異株的演化情況及YMDD變異株的演化與抗HBV療效之間的關(guān)系。3、比較ADV單藥和聯(lián)合LAM治療LAM耐藥患者的臨床療效為選擇合適的抗HBV方案對LAM耐藥患者進行救援治療提供線索。研究方法1停止LAM治療后YMDD變異的逆轉(zhuǎn)11樣本來源所有患者均來自2005年到2008年間我科參加的ML18376臨床試驗LAM耐藥HBEAG陽性CHB患者以21的比例隨機分配到APEG組、BADV組兩組我科兩組入組患者分別為25例、15例。A組患者給予PEGASYS180ΜG1周治療48周停藥后隨防24周；B組患者給予ADV10MGD治療72周；所有患者在頭12周內(nèi)均聯(lián)合使用LAM100MGD治療。12HBVDNA抽提收集患者12周、16周、24周、48周、72周等時間點的系列血清用DNA抽提試劑盒QIAAMPDNABLOODMINIKIT從血清每個血清樣本使用量為200ΜL中提取HBVDNA。13HBVRT區(qū)的PCR擴增使用巢式PCR擴增HBVRT區(qū)第二輪PCR產(chǎn)物直接送上海英駿公司測序。14測序結(jié)果分析測序結(jié)果與GENBANK報道的AG基因型別的HBV序列進行同源件比對用HBVS區(qū)做進化樹來進行基因分型。序列比對用MEGA4軟件進行測序峰圖用CHROMAS軟件分析。15統(tǒng)計分析所有數(shù)據(jù)均使用SPSS130統(tǒng)計軟件進行分析率的比較用X2檢驗分析。所有結(jié)果均采用雙側(cè)檢驗P2停止LAM治療后YMDD變異株的克隆演化21樣本來源所有4位患者均來自ML18376臨床試驗。22HBVDNA抽提、HBVRT區(qū)的擴增同前擴增產(chǎn)物用膠回收試劑盒進行回收回收產(chǎn)物一部分送上海英駿公司測序一部分用于下一步實驗。23HBVRT區(qū)的克隆分析將PCR純化產(chǎn)物與PMDTM19TVECT連接后轉(zhuǎn)化JM109感受態(tài)細胞轉(zhuǎn)化產(chǎn)物在含有AMPICILLIN、IPTG、XGAL的LB平板上進行藍白斑篩選。每個血清樣品隨機挑選30個白色克降在LB培養(yǎng)基中37℃225RPM振蕩培養(yǎng)6至8小時。經(jīng)PCR鑒定后將所有陽性菌液送上海英駿公司測序最終有來自18個血清樣本的370個克隆成功測序。3、阿德福韋酯單藥和聯(lián)合LAM治療LAM耐藥HBEAG陽性慢性乙型肝炎的療效比較對24例ADV單藥及28例ADV聯(lián)合LAM治療的LAM耐藥HBEAG陽性慢性乙型肝炎進行回顧性分析比較兩組患者在HBVDNA、ALT水平及HBVDNA檢測不到率、ALT復(fù)常率上的差異。結(jié)論1、停止LAM治療后野生株在HBV準(zhǔn)種中的比例會逐漸增加并最終取代YMDD變異株成為HBV準(zhǔn)種中的優(yōu)勢株。2、大多數(shù)患者體內(nèi)的YMDD變異株在停止LAM治療4周后發(fā)生逆轉(zhuǎn)RTL80VI、RTL180M等補償變異能減慢YMDD變異逆轉(zhuǎn)的發(fā)生。3、RTL80VI、RTL180M、RTM204VI三者通常連鎖發(fā)生于同一HBV毒株上且會在停止LAM治療后同步逆轉(zhuǎn)。4、ADV單藥或聯(lián)合LAM均是治療LAM耐藥HBEAG陽性CHB的有效方法總體來說聯(lián)合治療的療效要優(yōu)于單藥治療。5、即使出現(xiàn)了LAM耐藥在后續(xù)的治療中依然有必要聯(lián)合使用LAM來抗HBV治療值得進一步探討PEGASYS聯(lián)合LAM治療LAM耐藥患者的療效和安全性。

簡介：目的從河北省急性弛緩性麻痹AFP病例的糞便標(biāo)本中分離病毒，結(jié)合個案調(diào)查資料，綜合分析非脊髓灰質(zhì)炎腸道病毒NPEV在AFP病例中感染的流行病學(xué)特征，并對NPEV毒株進行血清型別鑒定，明確AFP病例中的優(yōu)勢毒株，為AFP病例的防治和疫苗研制提供科學(xué)依據(jù)。方法1、對河北省AFP病例糞便標(biāo)本利用人橫紋肌肉瘤細胞RD和轉(zhuǎn)人脊髓灰質(zhì)炎病毒受體的小鼠肺細胞L20B進行病毒分離。2、細胞出現(xiàn)病變后利用脊髓灰質(zhì)炎病毒PV標(biāo)準(zhǔn)血清，通過中和實驗篩檢NPEV。3、篩檢出NPEV后，采用不同的特異性引物擴增目的基因片段，根據(jù)VP1區(qū)序列結(jié)果，確定NPEV血清型別，并分析核苷酸和氨基酸同源性，同時生成系統(tǒng)進化樹，對毒株基因特征進行分析。4、對既不能被PV標(biāo)準(zhǔn)血清中和，又不能被引物擴增的病毒分離株，使用REALTIMEPCR熒光定量檢測試劑盒篩檢腺病毒。5、應(yīng)用軟件進行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析。結(jié)果1、河北省2008～2012年AFP病例報告及標(biāo)本病毒檢出情況2008～2012年河北省AFP病例監(jiān)測系統(tǒng)共報告AFP病例1998例，其中1974例采集了糞便標(biāo)本并完成了病毒分離，共篩檢到374例病毒陽性病例，其中PV陽性73例，NEPV陽性301例，陽性分離率分別為370％、1525％。2、NPEV陽性病例分布及殘留麻痹情況從地區(qū)分布看，NPEV陽性病例位列前三的是邯鄲、邢臺和保定，NPEV分離率最高的是邯鄲、邢臺和承德，各地區(qū)NPEV分離率差異有統(tǒng)計學(xué)意義。從時間分布看，NPEV陽性病例檢出數(shù)量及分離率較高的時段均集中在5～11月，存在明顯的夏秋季分布高峰。病例中男性多于女性，性別間檢出率差異無統(tǒng)計學(xué)意義。從年齡分布看，0～2歲嬰幼兒組NPEV分離率最高，隨年齡段的遞增呈降低趨勢。殘留麻痹率PV陽性組＞NPEV陽性組＞陰性組，三者差異有統(tǒng)計學(xué)意義。3、NPEV毒株的分子定型本研究共獲得176株NPEV毒株完整的VP1序列，和基因庫比對后，共有28種血清型。包括HEVA組7種，HEVB組21種，沒有HEVC和HEVD組病毒。CVA10和EVA71連續(xù)5年均有檢出，其余血清型5年中間斷出現(xiàn)。NPEV血清型別分布有如下特點邯鄲種類最多，其次是邢臺和保定5～11月份最為集中5歲以下兒童血清型別最為復(fù)雜。從單一NPEV血清型來看，EVA71數(shù)量最多，占定型總數(shù)的3977％。在全省有10個設(shè)區(qū)市以EVA71為主，而且在全年有10個月份以EVA71為主，可見EVA71為全省AFP病例中的優(yōu)勢毒株，感染人群以0～2歲嬰幼兒為主。HEVA組AFP病例預(yù)后要比HEVB組差，有殘留麻痹的可能性更大。4、NPEV優(yōu)勢毒株EVA71VP1區(qū)基因特征分析在每個地區(qū)隨機選擇一條序列進行比較后顯示，核苷酸同源性在941％～994％、氨基酸同源性在983％～100％之間。與國內(nèi)外的參考株VP1區(qū)進行核昔酸和氨基酸同源性比較發(fā)現(xiàn)，70株EVA71病毒VP1區(qū)核苷酸序列與A、B基因型VP1區(qū)核苷酸、氨基酸同源性均較低，而與C基因型接近進一步比較，病毒株與C4亞型代表株核苷酸、氨基酸同源性最高?？烧J(rèn)為2008～2012年河北省70株從AFP病例中分離到的EVA71病毒株均屬于C4亞型。與全國多個省市的C4亞型相比，病毒株VP1區(qū)核苷酸、氨基酸同源性C4A高于C4B分支。VP1區(qū)系統(tǒng)進化樹分析顯示，2008～2012年河北省AFP病例中EVA71分離株全部處于C4亞型C4A分支。EVA71在河北省和中國大陸的其他省份進化情況一致，基因型穩(wěn)定，沒有發(fā)生變化。結(jié)論1、NPEV感染在河北省廣泛分布，血清型別多樣。感染高發(fā)時段主要集中在5～11月，感染人群以嬰幼兒為主。2、NPEV陽性組AFP病例殘留麻痹率顯著高于陰性組，繼PV之后，NPEV已成為AFP的重要病原。3、HEVA組殘留麻痹率顯著高于HEVB組，HEVA組預(yù)后比HEVB組差，有殘留麻痹的可能性更大。4、EVA71為近年來河北省AFP病例中NPEV優(yōu)勢毒株，分離株全部處于C4亞型C4A分支，近幾年來其基因型穩(wěn)定，未發(fā)生變化。5、首次采用分子生物學(xué)的方法系統(tǒng)對AFP病例中分離到的NPEV進行血清定型，填補了河北省此項研究的空白。

簡介：中圖分類號UDC學(xué)校代碼10055密級公開高蕊犬濠博士學(xué)位論文基于生物信息學(xué)方法研究流感病毒及療法THEBIOINFOMATICALMETHODOLOGYFORINFLUENZAAVIRUSESANDTHETHERAPIES評閱人鯉童麴萱太至夏撾蓬呈墾塞渣蹇貿(mào)南開大學(xué)研究生院二。一四年五月萬方數(shù)據(jù)南開大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)書根據(jù)南開大學(xué)關(guān)于研究生學(xué)位論文收藏和利用管理辦法，我校的博士、碩士學(xué)位獲得者均須向南開大學(xué)提交本人的學(xué)位論文紙質(zhì)本及相應(yīng)電子版。本人完全了解南開大學(xué)有關(guān)研究生學(xué)位論文收藏和利用的管理規(guī)定。南開大學(xué)擁有在著作權(quán)法規(guī)定范圍內(nèi)的學(xué)位論文使用權(quán)，即1學(xué)位獲得者必須按規(guī)定提交學(xué)位論文包括紙質(zhì)印刷本及電子版，學(xué)?？梢圆捎糜坝　⒖s印或其他復(fù)制手段保存研究生學(xué)位論文，并編入南開大學(xué)博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫；2為教學(xué)和科研目的，學(xué)?？梢詫⒐_的學(xué)位論文作為資料在圖書館等場所提供校內(nèi)師生閱讀，在校園網(wǎng)上提供論文目錄檢索、文摘以及論文全文瀏覽、下載等免費信息服務(wù)；3根據(jù)教育部有關(guān)規(guī)定，南開大學(xué)向教育部指定單位提交公開的學(xué)位論文；4學(xué)位論文作者授權(quán)學(xué)校向中國科技信息研究所及其萬方數(shù)據(jù)電子出版社和中國學(xué)術(shù)期刊光盤電子出版社提交規(guī)定范圍的學(xué)位論文及其電子版并收入相應(yīng)學(xué)位論文數(shù)據(jù)庫，通過其相關(guān)網(wǎng)站對外進行信息服務(wù)。同時本人保留在其他媒體發(fā)表論文的權(quán)利。非公開學(xué)位論文，保密期限內(nèi)不向外提交和提供服務(wù)，解密后提交和服務(wù)同公開論文。論文電子版提交至校圖書館網(wǎng)站HTTP／／202．113．20．1638001／INDEX．HTM。本人承諾本人的學(xué)位論文是在南開大學(xué)學(xué)習(xí)期間創(chuàng)作完成的作品，并已通過論文答辯；提交的學(xué)位論文電子版與紙質(zhì)本論文的內(nèi)容一致，如因不同造成不良后果由本人自負。本人同意遵守上述規(guī)定。本授權(quán)書簽署一式兩份，由研究生院和圖書館留存。作者暨授權(quán)人簽字崔巍2014年5月28日南開大學(xué)研究生學(xué)位論文作者信息論文題目基于生物信息學(xué)方法研究流感病毒及療法姓名崔巍學(xué)號1120090034答辯日期2014年5月27日論文類別博士一學(xué)歷碩士口碩士專業(yè)學(xué)位口高校教師口同等學(xué)力碩士口院／系／所數(shù)學(xué)科學(xué)學(xué)院專業(yè)生物信息學(xué)聯(lián)系電話18622728843EMAIL0210023MAIL．NANKAI．EDU．CA通信地址郵編天津市南開區(qū)衛(wèi)津路94號南開大學(xué)數(shù)學(xué)科學(xué)學(xué)院備注是否批準(zhǔn)為非公開論文注本授權(quán)書適用我校授予的所有博士、碩士的學(xué)位論文。由作者填寫一式兩份簽字后交校圖書館，非公開學(xué)位論文須附南開大學(xué)研究生申請非公開學(xué)位論文審批表。萬方數(shù)據(jù)

簡介：廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文，是個人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)特別加以注明引用的內(nèi)容外，本論文不含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明并致謝。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。言案篙籌Z髫即日期矽，產(chǎn)年J月叩日’關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解廣州中醫(yī)藥大學(xué)有關(guān)保留使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留或向國家有關(guān)部門機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許被查閱和借閱。本人授權(quán)廣州中醫(yī)藥大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)印手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定論文作日期Y論文導(dǎo)師簽名到THESTUDYOFOIWEIBAIZHUPOWDERTREATMENTOFHRVDIARRHEAFROMINTESTINAIMETAGENOMICSSPECIAIITYCIINICBASISOFTCMAUTHORYEQINATUTORPROFCHENXIAOGANGABSTRACTOBJECTIVETOOBERVETHECHANGESOFINTESTINALMETAGENOMEINROTAVIRUSENTERITISINANIMALANDCLINICALEXPERIMENTS，F(xiàn)OREXPLORINGTHEROLEOFGUTFLORAINQIWEIBAIZHUPOWERTREATINGROTAVIRUSENTERITISMETHODSTHEREARETWOSTAGESINTHEEXPERIMENTINTHEANIMALEXPERIMENT，5DAYSOFAGESPFHEALTHYKUNMINGNEONATALMICEWERERANDOMLYDIVIDEDINTO3GROUPS，THEQIWEIBAIZHUPOWERGROUP，THEMODELCONTROLGROUPANDTHEHEALTHYGROUPTHEMICEOFTHEOIWEIBAIZHUPOWERGROUPANDTHECONTROLGROUPWEREINFECTEDWITHROTAVIRUSSOLUTIONBYGAVAGE，THENTHEROTAVIRUSENTERITISMODELSWERESUCCESSFULLYESTABLISHEDAFTERTHAT，THEMICEINOIWEIBAIZHUPOWERGROUPWEREGIVENQIWEIBAIZHUPOWERELIXATION，THEMICEINTHEOTHERGROUPSGIVENSALINESOLUTION，A11BYGAVAGEAFTER3DAYS，THECONTENTSOFCOLONSOFA11SURVIVALMICEWERECOLLECTEDTODETECTMETAGENOMES，ANDTHEDATAOBTAINEDWERECOMPAREDAMONG3GROUPSINTHECLINICALTRIAL，THEINTESTINALMETAGENOMESOFA12MONTH’OLDINFANTINFECTEDWITHROTAVIRUSWERECOMPAREDBEFOREANDAFTERTHETHERAPYOFQIWEIBAIZHUPOWERRESUITSACCORDINGTOTHERESUTSOFANIMALANDCLINICALEXPERIMENTS，THEINTERNALSTRUCTURESOFGUTFLORABETWEENMICEANDINFANTINFECTEDWITHROTAVIRUSISSIGNIFICANTDIFFERENTFOREXAMPLE，THEDOMINANTBACTERIAINGUTOFMICEAREPROTEOBACTERIA，WHILETHEDOMINANTBACTERIAINGUTOFMICEAREACTINOBACTERIATHEINTERNALSTRUCTURESOFGUTFLORAARESIGNIFICANTLYDIFFERENTAMONGTHREEGROUPSOFMICE，ANDBETWEENTHEBEFOREANDAFTERTHETHERAPYOFTHEINFANTASTOTHECHOSENKEYBACTERIA，THEQUANTITYOFINTESTINALBIFIDOBACTERIUMOFTHEQIWEIBAIZHUPOWERGROUPISMORETHANTHATOFTHEMODELCONTROLGROUP，WHILETHEQUANTITYOFINTESTINALLACTOBACILLUSOFTHEQIWEIBAIZHUPOWERGROUPISLESSTHANTHATOFTHEMODELCONTROLGROUPONTHEOTHERHAND，AFTERTHERAPY，

簡介：結(jié)核病（TUBERCULOSIS，TB）是由結(jié)核分枝桿菌（MYCOBACTERIUMTUBERCULOSIS，MTB）感染引起的慢性致死性人獸共患性傳染病。該病傳染性強，潛伏期長，致死率高，是嚴(yán)重危害人類健康的三大傳染性疾病之一。牛分枝桿菌減毒株BCG（MYCOBACTERIUMBOVISBACILLUSCALMETTEGUERIN，BCG）作為目前唯一的抗結(jié)核疫苗，在全世界范圍內(nèi)廣泛使用，對人類預(yù)防結(jié)核病發(fā)揮了巨大的作用，但其所能提供的免疫保護力有限。雖然目前已經(jīng)有很多新型抗結(jié)核疫苗處于實驗研究階段，但是仍然沒有新疫苗可取代BCG。鑒于目前抗結(jié)核病疫苗的研究現(xiàn)狀，為了能誘導(dǎo)機體產(chǎn)生更有效的免疫應(yīng)答，近年來，國內(nèi)外學(xué)者開展了病毒載體疫苗的研究，其中腺病毒載體是頗受關(guān)注的研究熱點之一。本論文的目的在于采用人5型腺病毒（HUMANADENOVIRUSSEROTYPE5，AD5）構(gòu)建共表達結(jié)核分枝桿菌優(yōu)勢抗原基因CFP10、ESAT6、AG85A和AG85B的重組腺病毒載體AD5CEAB，并以小鼠為動物模型研究重組腺病毒AD5CEAB的免疫原性，這不僅具有重要的科學(xué)意義，研究結(jié)果也將為抗結(jié)核新型疫苗的研制提供理論依據(jù)。首先，我們選取了4種結(jié)核分枝桿菌優(yōu)勢抗原CFP10、ESAT6、AG85A和AG85B基因，構(gòu)建了一種可同時表達這4種抗原的真核多基因共表達載體PCDNACMVCFP10LINKERESAT6RSVAG85AIRESAG85B（PCDNACEAB）。測序驗證后再用限制性內(nèi)切酶將CFP10LINKERESAT6RSVAG85AIRESAG85B片段整體從質(zhì)粒PCDNACEAB中切下，插入到腺病毒穿梭質(zhì)粒PACAD5CMVKNPAVECT中，與腺病毒骨架質(zhì)粒PACAD592100ADBACKBONEVECT共轉(zhuǎn)染HEK293T細胞進行病毒包裝，獲得重組腺病毒AD5CEAB。重組腺病毒AD5CEAB經(jīng)WESTERNBLOTTING驗證后進行大量擴增，并用氯化銫密度梯度離心法進行病毒純化，獲得了高滴度的重組病毒AD5CEAB。然后，我們以小鼠為動物模型對重組腺病毒AD5CEAB的免疫原性進行了評價。實驗以PBS和BCG作為對照，用AD5CEAB免疫小鼠3次，末免2周后處死小鼠進行免疫學(xué)評價。結(jié)果表明，AD5CEAB可以刺激小鼠產(chǎn)生較強的抗原特異性免疫應(yīng)答反應(yīng)，尤其是TH1型細胞免疫應(yīng)答反應(yīng)。表現(xiàn)在，AD5CEAB免疫小鼠后，淋巴細胞抗原刺激液中的IFNΓ、TNFΑ、IL2和IL12濃度顯著高于PBS組和BCG組。另外，AD5CEAB組小鼠血清抗體IGG和IGG2AIGG1顯著高于對照組。實驗還測定了小鼠呼吸道黏膜分泌型IGA（SECRETARYIGA，SIGA）的濃度，結(jié)果顯示，AD5CEAB組小鼠肺盥洗液中SIGA的濃度顯著高于對照組?？傊?，AD5CEAB免疫小鼠后，能夠刺激小鼠產(chǎn)生較強的呼吸道黏膜免疫、細胞免疫和體液免疫應(yīng)答，這些指標(biāo)和對照組相比，均有顯著的變化。最后，我們以小鼠為動物模型，采用BCG初免AD5CEAB加強的異源初免加強的免疫策略，評價AD5CEAB作為BCG的加強型候選疫苗，是否具有加強BCG免疫效果的作用。結(jié)果表明，AD5CEAB可以顯著的加強BCG的免疫效果。主要表現(xiàn)在，BCG初免AD5CEAB加強免疫后，小鼠淋巴細胞經(jīng)抗原刺激后，會分泌高水平的IL2、IFNΓ和TNFΑ，這三種細胞因子的濃度均顯著高于PBS組和BCG組。BCG初免AD5CEAB加強后，還可以有效的刺激小鼠分泌IGG抗體，血清IGG抗體濃度顯著高于對照組。另外，小鼠肺盥洗液中SIGA濃度也顯著高于對照組。說明采用BCG初免AD5CEAB加強的異源初免加強的免疫策略能夠有效的刺激小鼠產(chǎn)生呼吸道黏膜免疫、細胞免疫和體液免疫應(yīng)答。此外，我們還比較了BCG初免后，用AD5CEAB加強1次和加強2次的免疫效果。結(jié)果表明，AD5CEAB加強1次也能刺激小鼠產(chǎn)生較強的免疫應(yīng)答反應(yīng)，尤其是黏膜免疫應(yīng)答和細胞免疫應(yīng)答。綜上所述，本論文成功的構(gòu)建了重組腺病毒載體AD5CEAB，該病毒采用了雙啟動子表達的策略，利用CMV啟動子和GLY4SER3蛋白LINKER實現(xiàn)了CFP10和ESAT6的融合表達，利用RSV啟動子和IRES序列實現(xiàn)了AG85A和AG85B蛋白的獨立表達。最終，在同一個病毒載體中共表達了4種結(jié)核分枝桿菌優(yōu)勢抗原基因。通過動物實驗證明我們構(gòu)建的重組腺病毒AD5CEAB具有很強的刺激機體產(chǎn)生局部黏膜免疫、細胞免疫和體液免疫應(yīng)答反應(yīng)的能力。另外，AD5CEAB還可以加強BCG的免疫效果。本研究制備的重組腺病毒載體AD5CEAB被實驗證明具有很好的免疫原性。我們將在以后的研究中繼續(xù)對AD5CEAB開展深入的研究，主要包括在其他動物模型中繼續(xù)驗證，條件成熟后進行強毒株攻毒保護實驗等。AD5CEAB有望成為一種新型的抗結(jié)核候選疫苗，BCG初免AD5CEAB加強的異源初免加強的免疫策略也有望成為一種新型的抗結(jié)核免疫策略，值得更進一步的研究。

簡介：分類號密級公開國際十進分類號（UDC）第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)位論文NDRG2兩亞型重組腺病毒抑制人腦膠質(zhì)瘤的體內(nèi)藥效學(xué)研究兩亞型重組腺病毒抑制人腦膠質(zhì)瘤的體內(nèi)藥效學(xué)研究及左乙拉西坦添加治療難治性癲癇的療效和安全性分析及左乙拉西坦添加治療難治性癲癇的療效和安全性分析（題名和副題名）丁伯君（作者姓名）指導(dǎo)教師姓名鄧艷春教授（主任醫(yī)師）指導(dǎo)教師單位第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科申請學(xué)位級別碩士專業(yè)名稱神經(jīng)病學(xué)論文提交日期201104答辯日期201105論文起止時間2008年10月至2011年4月學(xué)位授予單位第四軍醫(yī)大學(xué)NDRG2兩亞型重組腺病毒抑制人腦膠質(zhì)瘤的體內(nèi)藥效學(xué)研究及左乙拉西坦添加治療難治性癲癇的療效和安全性分析兩亞型重組腺病毒抑制人腦膠質(zhì)瘤的體內(nèi)藥效學(xué)研究及左乙拉西坦添加治療難治性癲癇的療效和安全性分析研究生丁伯君學(xué)科專業(yè)神經(jīng)病學(xué)所在單位第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科導(dǎo)師鄧艷春教授（主任醫(yī)師）資助基金項目資助基金項目國家重大新藥創(chuàng)制關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞NDRG2；基因治療；腺病毒；膠質(zhì)瘤；左乙拉西坦；難治性癲癇中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)2011年4月

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