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1、目的:本實(shí)驗(yàn)通過觀察雪旺細(xì)胞在不同孔徑的絲素蛋白支架上的生長(zhǎng)情況,初步評(píng)估絲素支架不同形貌對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。
材料與方法:
1.制備不同孔徑的多孔絲素材料。分別為:大孔材料(孔徑約56~60μm),小孔材料(孔徑10~20μm),每組3個(gè)樣本。
2.選用雪旺細(xì)胞永生化細(xì)胞R3[33-10ras3]為種子細(xì)胞,將雪旺細(xì)胞置于37℃、5%CO2孵育箱內(nèi)培養(yǎng),當(dāng)細(xì)胞在培養(yǎng)瓶底形成致密單層時(shí)即可消化細(xì)胞
2、并進(jìn)行接種實(shí)驗(yàn),使用5%FBS調(diào)節(jié)消化后的細(xì)胞濃度,將濃度為1×106/ml的雪旺細(xì)胞懸液種于不同形貌的多孔絲素材料表面。
3.雪旺細(xì)胞——絲素蛋白材料復(fù)合培養(yǎng)1周后,掃描電鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)、增殖等情況。
結(jié)果:不同孔徑材料的表面可見雪旺細(xì)胞生長(zhǎng)情況不一。小孔徑材料的支架上,細(xì)胞表現(xiàn)為特異的雙極性形態(tài),細(xì)胞與細(xì)胞之間或平行排列,或首尾相連成細(xì)胞鏈;大孔徑材料的支架上,細(xì)胞密度較高,但細(xì)胞多為球形,單個(gè)分散在多
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